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1.
张爱华 《国际生物制品学杂志》2003,(2)
为了研究特异信号序列对乙型脑炎病毒( JEV)包膜 ( E)蛋白在小鼠脑内病毒攻击模型中的保护效力 ,作者分别构建了全长 E蛋白 ( E)和仅含 N末端 398年氨基酸 ( ΔE)的质粒 DNA p CMVE和 p CMVΔE;在此基础上 ,又构建了含来源于组织纤溶酶原激活物( TPA)的分泌型信号序列的质粒 p CMVTE和 p CMVTΔ E。将以上 4种质粒体外瞬时转染 Cos7细胞 ,检测 E蛋白表达量和亚细胞定位。分别于 0、 1 4天将 1 0 0 μg的不同质粒DNA肌肉或 1 0 0 μl的 BIKEN JEV疫苗皮下接种 4～ 6周龄的远交瑞士雄性小鼠。末针接种后 1周 ,用 1 0 L D50… 相似文献
2.
唐建蓉 《国际生物制品学杂志》2003,(2)
乙型脑炎病毒 ( JEV)包膜 ( E)蛋白能刺激机体产生抗病毒中和抗体。作者用聚合酶链反应法扩增 JEV GP78株的前膜 ( pr M)和 E蛋白区基因并克隆于 p CEP4真核表达载体 ,得到 p MEa(能合成 pr M和膜锚定 E蛋白 ,Ea)和 p MEs(能合成 pr M和分泌性蛋白 ,Es)两种质粒 DNA。为研究其免疫原性并与市售JEV灭活疫苗作比较 ,作者对 BALB/c小鼠进行了免疫和加强免疫 ( 50 μg质粒 DNA或空白载体肌注、1μg质粒 DNA基因枪皮肤注射、1 /1 0人用剂量的 JEV灭活疫苗接种 )。免疫后 7周用致死量 JEV( 2 0 L D50 )进行脑内攻击。攻击前用 … 相似文献
3.
大肠杆菌不耐热肠毒素 ( LT)是良好的粘膜佐剂。作者以人类免疫缺陷病毒 ( HIV)gp1 6 0及 E7为抗原与 LT突变体 R1 92 G联合投递 ,测定了对相关抗原的免疫应答及佐剂的效力。 2 0 μg gp1 6 0加或不加 R1 92 G5 μg,间隔1周鼻腔接种雌性 BAL B/c小鼠 ,共 3次。末次免疫后 1周采集小鼠支气管肺泡灌洗液及阴道洗液 ,以 EL ISA测定抗原特异性抗体应答。心脏穿刺采血并收集脾脏进行体外抗原再刺激试验。免疫 E7的小鼠 ,间隔 1周鼻腔接种 1 0 0 μg E7(加或不加 R1 92 G5 μg) ,共 4次。于末次免疫后 9天或 82天收获脾细胞进行铬释… 相似文献
4.
日本血吸虫脂肪酸结合蛋白DNA联合白细胞介素-12的免疫保护作用 总被引：2，自引：0，他引：2
目的探讨白细胞介素-12(IL-12)对日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(Sj14FABP)DNA疫苗的辅佐作用。方法大量制备pVIVO2、pVIVO2 IL-12、pVIVO2-Sj14FABP质粒DNA。48只雄性Balb/c小鼠随机分为A、B、C、D组，每组各12只，每只小鼠于免疫前1 d在右后腿股四头肌肌内注射075%盐酸布比卡因30 μL。A组给予0.9%氯化钠注射液100 μL，im；B组给予pVIVO2质粒DNA 100 μg，im； C组给予pVIVO2-Sj14FABP质粒DNA 100 μg，im；D组给予pVIVO2-Sj14FABP质粒DNA 50 μg 和pVIVO2-IL-12质粒DNA 50 μg，im。免疫30 d后，每只小鼠以(40±2)条尾蚴感染，感染45 d后，计数成虫及肝内虫卵；用ELISA法检测小鼠血清中IgG抗体水平。结果C、D组的减虫率分别为24.11%和38.83%,减卵率为27.20%和40.27%，差异有显著性（P＜0.05）；免疫30 d后小鼠血清IgG水平无明显升高，各组间差异无显著性 (P＞005)。结论pVIVO2-Sj14FABP能够诱导小鼠产生部分抗血吸虫感染的保护力，IL-12是一种有效的血吸虫病DNA疫苗佐剂。 相似文献
5.
作者用含有表达 2型单纯疱疹病毒( HSV- 2 )全长糖蛋白 D基因的质粒 ( p HSV-g D2 ) DNA与促进 DNA体内转染的局部麻醉剂丁哌卡因制成 DNA疫苗 ,通过不同途径接种小鼠以确定免疫刺激的最适送递途径。 取 6～ 8周龄雌性 Balb/c小鼠 ,每组 5只 ,分别经肌肉 ( im)、腹腔内 ( ip)、经口 ( po)、皮内 ( id)、阴道内 ( ivag)、鼻内 ( in)接种 2 0 μg疫苗 ,1个月时再加强 1次。末次接种后两周收集血清、阴道灌洗液和新鲜屎丸悬液 ,并取小肠碎片和淋巴集结 ( PP)作器官培养 ,收集培养 7天的上清液。用 EL ISA检测血清、粘膜分泌液和器… 相似文献
6.
何菊 《国际生物制品学杂志》2001,(3)
到目前为止 DNA疫苗接种的两条主要途径为 DNA溶液的肌肉注射 ( im)和 DNA包被金颗粒的表皮基因枪轰击 ( gg)。作者在BALB/ c和 C5 7BL 两个品系小鼠中对 im和gg接种编码结核杆菌 Ag85 A的 DNA疫苗的免疫原性和保护效力进行了比较。 6～ 8周龄雌性 BALB/ c或 C5 7BL 小鼠间隔 3周 im或 gg接种结核病 DNA疫苗 3次 ,并于最后一次接种后 3周采血。用ELISA测定抗 Ag85 A抗体 ,并取脾细胞进行细胞毒性 T淋巴细胞 ( CTL )应答测定。结果显示 ,在 BALB/ c小鼠中 ,gg免疫诱生抗体和 CTL应答所需的 DNA质粒量比 im免疫低 5 … 相似文献
7.
作者研究了 BALB/ c鼠免疫接种含麻风杆菌 6 5k Da热休克蛋白 ( hsp6 5)抗原的不同疫苗后的免疫应答。 小鼠分别接种 ( 1 )经弗氏佐剂乳化的重组 hsp6 5( rhsp6 5- FIA) ,每剂含抗原 2 5μg,间隔 1周先皮下注射 ( sc) 2次 ,然后再静脉注射 ( iv) 1次 ;( 2 )能产生 hsp6 5的巨噬细胞样肿瘤细胞 ( J774 - hsp6 5) ,每周 iv1 0 5 个细胞 ,共接种 4周 ;( 3)包被 hsp6 5的脂质体( hsp6 5-脂质体 ) ,每剂 5μg,间隔 2周 iv4次 ;或 ( 4 )表达 hsp6 5的质粒 DNA( hsp6 5- DNA)每剂含 DNA 50μg,间隔 3周肌肉注射 ( im) 4次。分别于完成免… 相似文献
8.
任丽虹 《国际生物制品学杂志》2001,(3)
作者在 BALB/c小鼠中比较了基因枪接种与肌肉注射编码单个细胞毒性 T淋巴细胞 ( CTL )表位或卵白蛋白 ( OVA)的质粒DNA诱导的免疫应答重复性的异同。 李斯特菌溶血素 O( L LO)的 91 - 99寡核苷酸残基是一个 H- 2 Kd 限制性显性 T细胞表位。含 LL O 91 - 99寡核苷酸的质粒p91 mam可表达 L LO91 - 99多肽。质粒 p CI-OVA是将 OVA的 c DNA插入到表达质粒p CICMV增强子 /启动子区域的 Eco RI酶切位点构建而成的。将 6～ 1 2周龄的 BALB/c小鼠分成两组 ,肌肉注射组小鼠免疫前先注射 5 0 μl0 .2 5 %布比卡因以增强细胞对… 相似文献
9.
李平忠 《国际生物制品学杂志》2004,(6)
作者首先构建了炭疽杆菌保护性抗原( PA)、Ebola病毒 ( EBOV)、Marburg病毒( MARV)和委内瑞拉马脑炎病毒 ( VEEV)DNA疫苗。并用基因枪在 0、4、8和 2 1周对新西兰白兔免疫 2 0 μg炭疽 PA DNA疫苗 ;而对照动物则在 0、4、8和 1 2周肌肉注射0 .5ml人用吸附炭疽疫苗 ( AVA)或同剂量非重组质粒 ;在 2 4周时皮下注射有毒力的热激活炭疽芽孢进行攻击。用 EBOV包膜糖蛋白 ( GP)或核壳蛋白 ( NP) DNA疫苗对 6～ 8周的 BAL B/c小鼠进行接种 ,再用 EBOV的小鼠适应株攻击。在 MARV的研究中 ,使用钴辐射过的纯化 MARV Ravn或 Mu… 相似文献
10.
杨蓉 《国际生物制品学杂志》2001,(5)
从麻风杆菌和鸟分枝杆菌中提取的35k Da蛋白是预防麻风病的亚单位疫苗的一种理想抗原。作者从质粒 p LJ3中扩增麻风杆菌 35k Da蛋白编码基因 ,将此基因克隆至p JW430 3( DNA- Neg)中 ,用标准分子生物学技术和 35k Da特定引物构建质粒 p ILM35( DNA- 35)。用 1 0 0 μg DNA- 35、DNA- Neg或磷酸盐缓冲盐水 ( PBS)间隔两周肌肉注射远交系瑞士白化病小鼠 3次 ,以 1× 1 0 5CPUBCG皮内接种小鼠为阳性对照。用 ELISA法测定抗体水平 ;收集免疫小鼠腹股沟和腋窝淋巴结及脾脏制成细胞悬液 ,测定淋巴细胞增殖 ;用捕获 EL ISA测定γ… 相似文献
11.
黄升海 《国际生物制品学杂志》2003,26(6)
编码呼吸道合胞病毒 ( RSV)全长 G蛋白的 DNA- G疫苗并不能完全防御 RSV感染 ,作者切去 G质粒 DNA 5′端编码 56个氨基酸的跨膜区序列 ,构建了编码 2 4 8个氨基酸的质粒载体 RSV G蛋白 DNA,简称 p ND-G。用质粒 Mega试剂盒纯化后 ,免疫 6周龄BALB/c雌鼠 ,分四组 ,每组 8～ 1 6只 ,尾根部皮内注射。试验组每只 p ND- G50 μg,2和4周后再用同剂量的 p ND- G加强免疫。三个对照组为未免疫鼠、p ND载体骨架、福马林灭活的 RSV( FI- RSV,1 0 7PFU)。同上免疫后4周 ,各组均用 1 0 6PFU A2亚型 RSV鼻内攻击 ,攻击后 4天杀死… 相似文献
12.
HSV-2全长gD DNA疫苗肌内途径的优越性和共同接种GM-CSF基因的增强作用 总被引：1，自引：0，他引：1
郭丽 《国际生物制品学杂志》2001,(3)
本文报道了分别用表达 2型单纯疱疹病毒 ( HSV- 2 )全长 g D或截短 g D( Δg D)的质粒p CDNAg D或 p CDNAΔ g D通过不同途径免疫小鼠 ,比较其诱导的体液和细胞免疫应答 ,并证明与粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子(GM- CSF)基因表达盒共同接种可增强HSV DNA疫苗的保护作用。 每组 1 0只小鼠 ,在 0、1 5和 30天分别肌内 ( i.m.)或皮内 ( i.d.)接种 p CDNAg D或p CDNAΔg D 5 0μg,有些组还将 GM- CSF表达盒 30 μg与 p CDNAg D共同接种 ,末次接种后 1 5天 ,取血清、阴道洗液 ,用间接ELISA测定 Ig G,并分析亚型。通过测… 相似文献
13.
王剑虹 《国际生物制品学杂志》2003,(2)
迫切需要开发一种安全有效而又廉价的抗人类免疫缺陷病毒 ( HIV)感染的疫苗 ,已经证实开发粘膜投递性疫苗是一良好的选择。作者探讨了用吸附于聚丙交酯 -乙交酯( PLG)微粒表面的 HIV- 1 gag DNA( PLG-DNA)疫苗鼻腔免疫小鼠后所诱导的局部与全身免疫应答的潜力。 以 1 0 0 μg PL G- DNA或裸 DNA疫苗按2～ 3周间隔 4次鼻腔接种雌性 CB6 F1小鼠 ,于末次免疫后 1周处死小鼠。于处死前 1日采集小鼠血清并以 ELISA检测抗体水平 ;经鼻孔冲洗获得 30 0 μl鼻洗液 ;从每组 5只小鼠收集并混合颈淋巴结和脾脏 ,并将相应器官组织制备… 相似文献
14.
蒋国润 《国际生物制品学杂志》2003,(1)
DNA疫苗局部接种于皮肤是一种有用的接种方法 ,但其诱导的免疫应答水平较低。为了克服这一难题 ,作者采用了一种新的局部接种技术 ,即先用快速作用粘合剂去除小鼠皮肤角质细胞 ,然后再将表达细胞因子〔白细胞介素 1 2 ( IL- 1 2 )和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 ( GM- CSF)〕的质粒 ( p IL- 1 2和p GM- CSF)和 1型人类免疫缺陷病毒 ( HIV-1 ) DNA质粒 ( p CMV1 6 0 B/pc REV)涂于皮肤进行局部接种。 作者分别在 0、7和 1 4天将 1 0～ 1 0 0 μgDNA表达质粒涂于去除角质层的雌性BALB/c小鼠皮肤 ,于末次加强后 7天和 3个月… 相似文献
15.
马尔瞻 《国际生物制品学杂志》2001,(3)
作者应用 BALB/ c小鼠 ,评估了鼻腔接种 BCG的保护作用及 Pst S- 1蛋白接种抵御结核杆菌鼻腔攻击的能力。 6～ 8周龄雌性 BALB/ c小鼠间隔 2周鼻腔接种 2剂 BCG或 3剂 Pst S- 1 +霍乱毒素 ( CT) ,接种后用结核杆菌 H37Rv株攻击 ,攻击后取小鼠肺和脾进行细菌计数 ,并对肺部进行组织病理学检测 ,用酶联免疫斑点测定检测 B细胞应答。结果显示 ,攻击后 2周BCG免疫小鼠肺部细菌数比对照小鼠低 1 0倍 ,8周时低 1 0 0倍。攻击后 2～ 8周对照小鼠肺部细菌数逐渐增加 ,而 BCG免疫小鼠却逐渐减少 ,表明由 BCG所诱生的保护作用在肺部… 相似文献
16.
史百芬 《国际生物制品学杂志》1995,(3)
本文用霍乱毒素B链(CTB)作为佐剂在小鼠体内评价了呼吸道合胞病毒(RSV)融合(F)蛋白局部免疫作用.免疫4周龄CD1小鼠、每组4～6只,亚单位疫苗鼻内接种(inl)10μl(含F蛋白2μg和CTB5～10μg),肌肉接种(im)100μl(只含F蛋白2μg),在0和4周各免疫1次,活病毒疫苗inl 50μl[含5×10~5蚀斑形成单位(pfu)],只免疫1次.最后一次免疫后4周用RSV10~6pfu inl攻击,取攻击前的血清检测抗体,攻击后5天的鼻洗液(NW)和支气管肺泡灌洗液(BAL)滴定病毒效价和抗体. 相似文献
17.
为了研究大肠杆菌肠毒素 (L T)作为粘膜佐剂加强水痘 -带状疱疹病毒 (VZV)疫苗的免疫效果 ,作者构建了含 L T基因及其突变体的质粒 ,将质粒转化大肠杆菌 ,纯化表达产物 ,得到了正常的 L T、只含有重组 B亚单位的 L T(r LTB)及 N端 1 1 2位由精氨酸突变为赖氨酸的无毒性 L T(E1 1 2 K)。分别将三种毒素各 1 0μg与 VZV减毒活疫苗 (Oka株 ) 2 0 0 PFU混匀后 ,2 0 μl滴鼻免疫小鼠。分一次免疫组和三次免疫组 (间隔 2周、2月或6月 )。末次免疫后 4周取血 ,用中和试验检测小鼠血清中的抗 VZV抗体滴度。纯化小鼠抗体 ,并用十二烷基硫… 相似文献
18.
作者以破伤风毒素 C片段 (Fr C)和流感病毒核蛋白 (NP)为模型 ,构建有或无前导序列的质粒 p.L Fr C、p.L NP或 p.L -Fr C、p.L- NP,比较 Fr C和 NP送递至不同胞内位点对免疫应答的影响。将质粒体外瞬时转染 COS- 7细胞 ,检测蛋白的表达水平。5 0 μg质粒 DNA于 0、2 1和 42天分两点注射于 6～ 1 0周龄 C5 7BL /6小鼠的股四头肌 ,并于 0、2 1、42、5 6或 6 3天取鼠尾血测抗体 ,于35或 5 6天取脾细胞检测细胞毒性 T淋巴细胞 (CTL)应答。同时于 0、2 1、2 8天以 5 μg重组 Fr C或 5 0μg半纯化的 NP与弗氏完全佐剂混合后皮… 相似文献
19.
分子量为 5 0 k Da的破伤风毒素 (TT)羧基末端—— TTC片段 (TTFC)能结合神经节苷脂 ,它没有毒性但却具有免疫原性 ,能够诱生使小鼠免于致死性攻击的中和抗体。因为在小鼠模型中能很好地建立 TT攻击 ,所以 TTFC的表达常用来评价疫苗载体诱生保护性抗体的能力。 作者将 TTFC编码基因插入质粒p SMB5 5构建新的重组质粒 p SMB15 8,然后再用重组质粒转化戈登链球菌 GP12 2 1株成重组株 GP12 5 3。用 10 9CFU的重组株GP12 5 3和对照株 GP12 5 2 (表达牛白蛋白 )10 0μl间隔 3周分别皮下注射 6周龄雌性BAL B/ c和 C5 7BL / 6… 相似文献
20.
王剑霓 《国际生物制品学杂志》2004,(3)
当今世界面临的最大公共卫生挑战之一就是控制疟疾,因此迫切需要开发能够抵抗恶性疟疾感染的疫苗。小鼠疟疾模型研究已经显示DNA疫苗接种后再用改良痘苗病毒Ankara( MVA)免疫能够诱导强T细胞免疫应答,作者报告了人类志愿者以DNA初免再以MVA加强免疫的安全性与耐受性结果。 4 3名志愿者(男33人,女1 0人)分成9组,按设定程序及剂量,单独免疫或联合免疫表达多表位血小板反应蛋白相关粘附蛋白的质粒DNA ME- TRAP疫苗及MVA ME-TRAP疫苗,DNA疫苗采用肌注或基因枪接种,MVA疫苗经皮内接种,间隔3周,免疫3或4剂。每剂免疫后观察受试… 相似文献