白花蛇舌草提取物诱导人肾癌GRC-1细胞凋亡及抑制血管生成的实验研究

目的通过体外实验研究白花蛇舌草提取物对人肾癌GRC-1细胞凋亡抑制血管生成的可能机制,探讨其抗肿瘤的作用机制。方法体外培养人肾癌GRC-1细胞,以12.5、25、50、100 mg/ml白花蛇舌草提取物处理48 h后,采用流式细胞技术观察GRC-1细胞凋亡率。用Western blot法研究不同浓度白花蛇舌草提取物对GRC-1细胞的基质金属蛋白酶（MMPs）表达影响。结果随着白花蛇舌草提取物浓度的增大,人肾癌GRC-1细胞凋亡率逐渐增加,MMP-2和MMP-9条带的灰度逐渐降低。结论白花蛇舌草提取物可以诱导人肾癌GRC-1细胞的凋亡,并通过下调MMP-2和MMP-9的蛋白表达抑制血管生成。     

白花蛇舌草对膀胱癌EJ细胞株的增殖抑制作用及其机制

目的 研究白花蛇舌草的提取物体外抑制膀胱癌EJ细胞株增殖的作用及其机制.方法 体外培养膀胱癌EJ细胞株,不同浓度的白花蛇舌草提取物作用12～72 h,通过MTT法检测细胞生长的抑制作用,采用荧光标记的方法检测端粒酶含量.结果 随着实验组白花蛇舌草提取物浓度的增加和作用时间的延长EJ细胞的生长抑制率也逐渐增加,且在一定的剂量范围内呈浓度、时间依赖性.流式细胞仪分析表明,在培养72 h后和对照组相比,实验组端粒酶的数目随着药物浓度的增高而明显减少并且呈现浓度依赖性.结论 白花蛇舌草对膀胱癌EJ细胞的增殖有显著的抑制作用,且在一定的剂量范围内呈浓度、时间依赖性.端粒酶在药物作用后数量的变化很可能成为白花蛇舌草抑制膀胱癌EJ细胞生长的机制.     

白花蛇舌草诱导白血病CEM细胞凋亡的分子机制

目的探讨白花蛇舌草通过调控细胞凋亡信号通络-死亡受体途径相关信号分子的表达诱导白血病CEM细胞凋亡的研究。方法分光光度法测定CEM细胞内凋亡酶半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(caspase)3、caspase8、caspase9的活性;免疫印迹实验测定caspase3、caspase8凋亡酶蛋白的表达。结果白花蛇舌草水提物浓度为6.64、33.20、166.0μg/ml分别作用于CEM细胞12、24、36 h,细胞内凋亡酶caspase3、8的活性表达高于对照组(P0.05),细胞内凋亡酶caspase9的活性表达与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。白花蛇舌草水提物不同浓度(6.64、 33.20、 166.00μg/ml)分别作用于CEM细胞不同时间(6、12、24 h),凋亡酶蛋白caspase3、8的表达随白花蛇舌草作用浓度的增加和时间的延长呈上升趋势,且与对照组比较差异有显著意义(P0.05)。结论白花蛇舌草水提物可通过上调细胞凋亡信号通路-死亡受体途径信号分子中caspase3、8的表达而达到诱导白血病CEM细胞凋亡。     

白花蛇舌草对宫颈癌细胞增殖、凋亡及Ki-67表达的影响

目的探讨白花蛇舌草对Hela细胞增殖、凋亡及Ki-67表达的影响。方法运用动物血清学方法制备白花蛇舌草药物血清,MTT检测白花蛇舌草血清浓度为10%、20%、40%,作用时间为24、48、72 h后的Hela细胞的存活率,并计算药物的抑制率。原位末端标记法(TUNEL)检测白花蛇舌草血清浓度为10%、20%、40%,作用时间为24、48、72 h后的Hela细胞的凋亡率,进一步验证白花蛇舌草抑制宫颈癌细胞增殖是否与促进细胞凋亡有关。RT-PCR检测白花蛇舌草血清浓度为10%、20%、40%,作用时间为24、48、72 h后的Hela细胞中Ki-67 mRNA水平。免疫组化检测白花蛇舌草血清浓度为10%、20%、40%,作用时间为24、48、72 h后的Hela细胞中抗原Ki-67的表达情况。结果白花蛇舌草药物血清作用后的Hela细胞与对照组相比细胞生长增殖明显受到抑制,随着药物作用浓度和药物作用时间的增加,Hela细胞抑制率也明显增加。TUNEL检测结果显示,白花蛇舌草药物血清作用后的Hela细胞凋亡率比对照组增多,药物作用浓度越高,凋亡率也越高;药物作用时间越长,凋亡率越高。RT-PCR结果显示,与对照组相比,白花蛇舌草药物血清作用后的Hela细胞中Ki-67 mRNA的表达量随着作用时间和作用浓度的增加而减小。免疫组化结果显示,白花蛇舌草药物血清作用后的Hela细胞中抗原Ki-67的表达量与对照组相比明显降低。白花蛇舌草药物血清可以明显降低Hela细胞中Ki-67的表达。结论白花蛇舌草对宫颈癌细胞Hela的增殖具有抑制作用,可以促进细胞凋亡,抑制Ki-67基因表达。     

白花蛇舌草总黄酮抑制人肝癌细胞的靶基因调控

目的:研究白花蛇舌草总黄酮(flavonoids fromHedyotis diffusa willd.,FHD)中制人肝癌细胞SMMC-7721的靶基因调控.方法:分别提取人正常肝细胞、人肝癌SMMC-7721细胞和FHD作用后的SMMC-7721细胞的总RNA,逆转录合成单链、双链cDNA后,体外转录合成生物素标记的cRNA与人HO4基因表达谱芯片杂交,扫描杂交芯片图像,利用软件获得FHD抗肝癌的靶基因,对靶基因进行生物信息学分析.结果:共找到20条FHD抑制肝癌细胞的有效靶基因,即给予FHD后,通过上调或下调,这些显著异常表达的基因被恢复至正常水平.其中,癌基因pim-1(Hs.81170)、rel(Hs.858)、ras(Hs.204354)、fos(Hs.25647)、myc(Hs.79070)、met(Hs.285754)以及编码Bcl-2相关蛋白的基因(Hs.227817)被显著下调;成纤维细胞生长因子(Hs.284244)、胰岛素样生长因子1受体(Hs.239176)、胰岛素样生长因子结合蛋白(Hs.1516)、G蛋白偶联受体(Hs.23016)、酪氨酸蛋白磷酸化酶(Hs.227777)、转录因子12(Hs.21704)、转录因子CP2(Hs.54970)等与细胞生长相关的信号转导分子被显著下调;细胞因子IL-1(Hs.1722)被显著下调;丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号传导通路成员MAP2K6(Hs.118825)和MAP3K12(Hs.21601)被显著上调;抑癌基因NF-2(Hs.902)被显著上调;编码T细胞活化共刺激信号分子的TNFSF9(Hs.1524)、TNFSF7(Hs.99899)基因被显著上调.这些基因均与肝癌的发生、发展密切相关.结论:FHD抑制SMMC-7721细胞的作用由多条靶基因协同,并通过胞内、胞外信号转导途径协调完成.     

白花蛇舌草对病毒肺炎小鼠免疫细胞因子表达的影响

目的： 研究白花蛇舌草对病毒肺炎小鼠免疫细胞因子表达的影响。方法：选取48只昆明种小鼠,分为正常组、模型组、白花蛇舌草组、病毒唑组,每组12只。模型组、白花蛇舌草组和病毒唑组均以25μL（流感病毒新鲜尿囊液10倍系列稀释成1×10-4 ）流感病毒滴鼻感染小鼠,构建肺炎小鼠模型。构模后,白花蛇舌草组以3.0825g/kg白花蛇舌草灌胃;病毒唑组以10mg/kg病毒唑灌胃,均每天灌胃1次,连续7d。正常组小鼠以等量的生理盐水灌胃处理。7d后,称取体质量和肺组织质量,计算肺指数。收集血液和肺组织,用酶联免疫吸附法（ELISA）测定TNF-α、IL-6含量。收集肺泡灌洗液,计数白细胞数及分类。用Western blot方法测定肺组织中Toll样受体4（TLR4）、核因子-κBp65（NF-κB p65）、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)蛋白水平。结果： 与正常组比较,模型组小鼠肺指数升高,血和肺组织中TNF-α、IL-6含量升高,肺泡灌洗液中白细胞总数、单个核细胞数、中性粒细胞数目均增多,肺组织中TLR4、NF-κB p65、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达水平升高（均P<0.05）。与模型组比较,白花蛇舌草组和病毒唑组小鼠肺指数降低,血清和肺组织中TNF-α、IL-6含量降低,肺泡灌洗液中白细胞总数、单个核细胞数、中性粒细胞数目均减少,肺组织中TLR4、NF-κB p65、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达水平降低（均P<0.05）。结论： 白花蛇舌草可以降低肺炎小鼠免疫细胞因子表达,其机制可能与TLR4/NF-κB信号轴和粘附分子表达有关。     

白花蛇舌草多糖对Bel7402细胞基因表达的影响

目的探讨白花蛇舌草多糖（HDP）对体外培养的人肝癌Bel7402细胞诱导凋亡的作用及可能的作用机制。方法人肝癌Bel7402细胞常规体外培养，设空白对照组、5-氟尿嘧啶（5-FU）凋亡对照组、HDP组。观察细胞形态变化，采用MTT法检测抑制率。RT—PCR法检测bel-xl、p53基因mRNA表达的变化。结果HDP抑制人肝癌Bel7402细胞生长、促进细胞凋亡，与空白对照组相比有显著差异（P〈0．01）；上调p53基因mRNA表达，降低bcl-xl基因mRNA表达，与空白对照组相比有显著差异（均P〈0．01）。结论HDP抑制人肝癌Bel7402细胞增长，诱导细胞凋亡，其分子机制可能与激活抑癌基因p53、抑制原癌基因bcl-xl表达有关。     

白花蛇舌草的传说与应用

一、从名医吟诗追溯白花蛇舌草的传说从前,有位名医对白花蛇舌草有感而吟诗"白花蛇舌草纤纤,伏地盘桓农舍边,自古好心多善报,灵虫感德流传。"这诗是名医对白花蛇舌草的赞美,从而说明蛇舌草具有极高的药用价值,且至今流传着以下的传说:从前,有位名医,出诊为一重病人治病,病人胸背憋痛,低热羁缠,咳吐秽脓,众医无效。名医诊病阅方,一时找不到恰当的治疗方法。疲     

雷帕霉素对肺癌SPC-A-1细胞增殖和凋亡的影响

目的 分析不同浓度的雷帕霉素体外处理人肺癌SPC-A-1细胞后,对细胞的增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 采用CCK-8法测定雷帕霉素(5 ng/mL,10 ng/mL,15 ng/mL)处理人肺癌SPC-A-1细胞48 h后对细胞增殖的影响。运用FITC-Annexin V/PI双染色法,测定雷帕霉素处理SPC-A-1细胞48 h后对细胞凋亡的影响。使用Western Blot技术测定雷帕霉素作用SPC-A-1细胞48h后的p53、Bcl-2和Bax等凋亡蛋白表达情况。结果 雷帕霉素可以抑制SPC-A-1细胞增殖并可诱导其发生凋亡,其增殖抑制率与凋亡率变化存在剂量依赖性关系(P<0.05)。与对照组(雷帕霉素,0 ng/mL)比较,各浓度(5 ng/mL,10ng/mL,15 ng/mL)雷帕霉素处理对SPC-A-1细胞的凋亡率上升(P<0.05),且p53与Bax蛋白水平增加(P<0.05),而Bcl-2蛋白水平下降(P<0.05)。15 ng/mL雷帕霉素处理组细胞p53、Bax蛋白表达水平均与细胞凋亡率呈正相关(r=0.906,P<0...     

人宫颈癌基因小干扰RNA抑制HepG2细胞生长的作用及其机制

目的 利用RNA干扰技术探讨人宫颈癌基因(HCCR)对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制. 方法 构建表达HCCR小干扰RNA的真核表达质粒pRIV2-siHCCR,将其转染肝癌细胞株HepG2细胞,定量PCR、Westem blot检测HCCR及其相关基因的表达,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖状态,流式细胞术观察细胞凋亡与细胞周期变化. 结果 成功构建真核表达质粒pRIV2-siHCCR,其表达的HCCR siRNA可有效抑制HepG2细胞内HCCR的表达,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡增加.Western blot结果显示HCCR小干扰RNA作用HepG2细胞后,细胞内P53蛋白的表达降低,P15蛋白的表达明显升高,而PTEN、P16、P27蛋白水平没有明显改变. 结论 HepG2细胞中HCCR蛋白下调后,细胞增殖受到抑制,凋亡细胞增多,其作用机制可能与蛋白质P53、P15有关.     

三氧化二砷对人体胃肠癌细胞凋亡及P53、Bcl-2表达的影响

目的研究三氧化二砷（As2O3）在人体内诱导胃癌、结肠癌细胞凋亡及对凋亡相关基因P53、Bel-2表达的影响,探讨其抗肿瘤作用机制。方法采用原位末端转移酶标记技术和免疫组化法分别检测As2O3用药前后胃癌和结肠癌细胞凋亡指数和凋亡相关基因P53、Bcl-2的表达变化情况。结果As2O3用药后胃癌、结肠癌细胞凋亡率分别为15．53％和16．76％,与用药前比较均有显著性差异（P〈0．05）;用药后胃癌、结肠癌细胞P53蛋白阳性表达率分别为35．42％和30．83％,与用药前的38．08％和31．58％比较无显著性差异（P〉0．05）;用药后胃癌、结肠癌细胞Bcl-2蛋白阳性表达率分别为23．80％和16．90％,与用药前比较显著下调,二者均具有显著性（P〈0．05）。结论As2O3在人体内可诱导胃癌和结肠癌细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,其机制可能是通过调节bcl-2基因的表达来实现。     

血管生成素-1对人胃癌细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的:探讨人血管生成素-1(angiopoietin-1,Angl)对体外培养的人胃癌细胞MGC-803所产生的凋亡抑制作用的可能机制.方法:以适当感染复数(MOI=20)的重组腺病毒Ad-Angl和对照病毒Ad-GFP感染人胃癌细胞,对照组用无血清培养基培养,并分别通过RT-PCR、Western blot方法检测Bcl-2及Bax mRNA和蛋白的表达.结果:Bcl-2 mRNA和蛋白的表达量在AdAngl组中明显高于Ad-GFP组及对照组(0.609±0.01 VS 0.462±0.02,0.609±0.01 VS 0.475±0.02,均P＜0.05),Ad-GFP组与对照组相比无显著性差异;而Ad-Angl组的Bax mRNA和蛋白的表达量则低于Ad-GFP组及对照组(0.313±0.04 VS 0.413±0.02,0.313±0.04 VS 0.407±0.03,均P＜0.05),后两组相比无显著性差异;Bcl-2/Bax比值在Ad-Angl组中也明显增高.结论:Angl基因转染体外培养的人胃癌细胞后,不论是在转录水平还是在翻译水平均上调了细胞Bcl-2的表达,同时使Bax表达下调,Bcl-2/Bax比值增大,此途径可能为Angl抑制血浆饥饿所诱导的肿瘤细胞凋亡的机制之一.     

Arsenic trioxide induces apoptosis of human gastrointestinal cancer cells

AIM:To investigate the changes in apoptosis in gastrointestinal cancer cells from patients with gastrointestinal cancers treated with arsenic trioxide(As2O3);and to study the possible molecular mechanisms of such changes by detecting the expression levels of p53and Bcl-2.METHODS:Twenty patients with gastrointestinal adenocarcinoma based on endoscopic and biopsy findings(ten patients with gastric cancer and ten patients with colorectal cancer)who received treatment in our hospital between August 2007 and December 2008were included in this study.None of the patients had received anti-tumour agents prior to As2O3 treatment.As2O3 was administered intravenously at a dose of 0.01g/d diluted with 5%glucose in normal saline for 2-3h for 3 consecutive days before surgery.Morphological changes associated with apoptosis of gastrointestinal cancer cells were observed by light microscopy.Changes in the apoptotic index induced by As2O3 were investigated using the terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labelling method.Expression levels of p53 and Bcl-2 proteins in gastrointestinal cancer tissues were determined by immunohistochemistry.RESULTS:The apoptotic index of human gastrointestinal cancer cells was higher in cells from patients treated with As2O3 than in those not treated(P<0.05).p53 protein expression in gastrointestinal tissues was unchanged by As2O3(P>0.05).However,Bcl-2 protein expression in gastrointestinal tissues was downregulated by As2O3(P<0.01).CONCLUSION:These results demonstrate that As2O3treatment in patients with gastrointestinal cancers can induce apoptosis in gastrointestinal cancer cells and down-regulate Bcl-2 protein expression.     

白花丹醌对人肝星状细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的:研究白花丹醌对瘦素(Leptin)刺激体外培养人肝星状细胞株HSC-LX2凋亡及相关蛋白表达的影响,以探讨其抗肝纤维化作用的机制.方法:体外培养HSC-LX2,将其分为以下几组:空白对照组、Leptin对照组、秋水仙碱组、2、8、16μmol/L白花丹醌组.瘦素刺激24h,药物与细胞共孵育24h后,应用流式细胞仪Annexin/PI双染方法检测细胞凋亡,透射电镜观察HSC-LX2凋亡形态学变化,免疫组织化学法检测HSC-LX2凋亡基因p53、Bax、Bcl-2的蛋白表达.结果:细胞流式术结果显示,白花丹醌作用HSC-LX224h,HSC凋亡率明显增加,白花丹醌8、16μmol/L组和秋水仙碱组HSC凋亡率均显著高于空白对照组和Leptin对照组(5.21±0.41,8.10±0.63,10.1±1.08vs1.40±0.13,2.85±0.21,均P<0.01).透射电镜结果,空白对照组细胞形态清晰,细胞膜、核膜完整,胞质内细胞器清晰,染色质均匀,细胞表面微绒毛;药物组可见少量坏死细胞和许多不同程度的凋亡细胞,体积变小,核膜消失,胞质浓缩,胞质内出现大量空泡,细胞核染色质固缩,可见核碎裂,细胞表面微绒毛...     

The inhibition effect and its molecular mechanism of human cervical cancer oncogene siRNA on hepatocarcinoma cells

OBJECTIVE: To evaluate the effect and the possible mechanism of HCCR siRNA on cell proliferation and apoptosis of hepatocarcinoma cells. METHODS: pRIV2-siHCCR plasmids, which express small interfering RNA of HCCR were constructed and transfected into HepG2 cells. The mRNA and protein expressions of HCCR were detected by real time PCR and Western blot. The proteins p15, p16, p27, p53, and PTEN were detected by Western blot. The cell proliferation and apoptosis were observed by MTT and FACS. RESULTS: The plasmid pRIV2-siHCCR was constructed successfully. Real time PCR and Western blot analysis showed that the HCCR siRNA effectively inhibited HCCR expression in HepG2 cells after pRIV2-siHCCR transfection. MTT method confirmed that HepG2 cell proliferation was suspended, while the cell apoptosis was increased much more than that in the control group. After the transfection with the plasmid of pRIV2-siHCCR into HepG2 cells, the expression of p53 protein was decreased, and P15 increased; and levels of PTEN, p16, and p27 were evidently not changed. CONCLUSION: After being transfected with HCCR siRNA expression plasmid, the cell proliferation of HepG2 was arrested, while the apoptosis of HepG2 cells increased. Our results demonstrate the potential role of p53 and p15 in HCCR signaling.     

斑蝥素诱导人胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨斑蝥素（Cantharidin）对人胰腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法采用MTT法观察斑蝥素对人胰腺癌细胞株SW1990细胞增殖的抑制作用。采用Hoechst33258染色、TUNNEL染色、流式细胞术检测细胞凋亡改变，并以RT—PCR和Westernblot检测凋亡调节基因p53和Bcl-2、Bax的表达。结果 5mol／L斑蝥素能明显抑制人胰腺癌SW1990细胞的生长，呈现凋亡特征。RT—PCR和Westernblot检测可见Bax、p53基因表达显著增加，而Bcl—2基因表达减少。结论 斑蝥素能诱导人胰腺癌细胞凋亡，其作用可能与上调p53、Bax基因和下调Bcl-2基因有关。     

P53和Bcl-2家族蛋白在胰腺癌中的表达

目的:探讨胰腺癌组织(pancreatic carcinoma,PC)中P53和Bcl-2家族(Bcl-2,Bax,Bcl-xL,BclxS)蛋白表达及与细胞凋亡的关系.方法:免疫组化法检测35例PC中P53蛋白表达,将PC分为P53阴性表达组(第1组,n = 18)和P53阳性表达组(第2组,n = 17);Western blot检测两组PC中P53,Bcl-2,Bax,Bcl-xL和BclxS蛋白表达,TUNEL法检测第1组中凋亡指数(AI).结果:Bcl-2蛋白在P53阳性PC表达上调,而在P53阴性PC表达下调( P = 0.047);Bax和Bcl-xL蛋白在两组PC中表达都明显上调( P = 0.274,0.334);Bcl-xS在P53阳性表达PC明显下调,在P53阴性表达组明显上调( P = 0.01);在P53阴性和阳性表达PC,AI分别为12.1±2.47和9.1±1.48( P = 0.023);Bcl-2家族各成员表达与AI无相关性,而Bcl-2/Bax比率与AI有明显的相关性( P<0.01).结论:Bcl-2是依赖P53调节的抗凋亡蛋白,BclxS是依赖P53调节的促凋亡蛋白,而P53主要通过调节Bcl-2/Bax比率发挥凋亡调节作用.     

E2F1在胃癌中的表达及其与Survivin、P53的相关性

目的探讨转录因子E2F1基因的表达与胃癌生物学行为及生存素（Survivin）和P53表达的相关性。方法应用免疫组织化学（sP法）检测61例胃癌组织中E2F1、Survivin和P53的表达，并以20例胃低级别上皮内瘤变为对照。结果①E2F1、Sur—vivin和P53在胃癌组织中的阳性率分别为75．4％、85．2％和68．9％，显著高于低级别上皮内瘤变组织中的30．0％、40．0％和15．0％，有显著差异（P＜0．05）。②E2F1的表达在胃癌组织分化程度、浸润深度、TNM分期淋巴结转移、远处转移中差异无显著性（P＞0．05）。Survivin和P53在胃癌有无远处转移和TMN分期之间差异有显著性（P＜0．05），且Survivin在有无淋巴结转移间差异有显著性（P＜0．05）。③在胃癌中E2F1的表达强度分别与Survivin和P53的表达强度呈等级正相关（rs1=0．519，P1＜0．01；rs2=0．602，P2＜0．01）。结论E2F1可能作用于胃癌发生的早期阶段，Survivin和P53可能作用于胃癌发生的晚期阶段，三者在胃癌的发生、发展中可能起协同作用。     

人参皂甙Rh2对人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的影响及机制探讨

目的观察人参皂甙Rh2（GS-Rh2）对人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的影响,并探讨其机制。方法人脑胶质瘤细胞株U251经GS-Rh2处理后,采用MTT法测算细胞抑制率,用流式细胞术测算细胞凋亡率,用RT-PCR检测U251中Bcl-2、Caspase-3 mRNA,用Western blot法检测U251中Bcl-2、Caspase-3蛋白。结果 GS-Rh2对U251具有抑制作用,并呈剂量依赖性;根据细胞增殖抑制曲线计算出GS-Rh2作用于细胞的抑制浓度（IC）,求得IC30、IC50、IC70值分别为10.6、22.3、70.2μg/ml;GS-Rh2可诱导U251凋亡,并呈剂量依赖性。在GS-Rh2作用下,U251中Bcl-2 mRNA、蛋白呈明显低表达,随着GS-Rh2作用时间延长,Caspase-3 mRNA、蛋白表达逐渐增高。结论 GS-Rh2可明显抑制U251增殖,诱导其凋亡,其机制与GS-Rh2下调U251中Bcl-2 mRNA及蛋白表达、上调Caspase-3 mRNA及蛋白表达有关。