磷脂酶A2抑制剂对内毒素诱导巨噬细胞释放肿瘤坏死因子的影响

磷脂酶Ａ２抑制剂对内毒素诱导巨噬细胞释放肿瘤坏死因子的影响崔忻１郝秀华２颜光涛２关键词磷脂酶Ａ类；巨噬细胞；内毒素；肿瘤坏死因子中国图书资料分类法分类号Ｒ３９２．１１材料和方法１．１材料巨噬细胞由小白鼠腹腔渗出液中分离获得。实验动物：小白鼠２６只，雌...     

磷脂酶A2抑制剂对急性胰腺炎肠黏膜损伤的保护研究

目的探讨应用磷脂酶A2（PLA2）抑制剂对大鼠重症急性胰腺炎（SAP）埘肠黏膜损伤的保护作用及其机制。方法雄性Wistar大鼠36只,随机分为3组（n=12）：假手术组（SO组）、SAP组、PLA2抑制剂治疗组（抑制剂组）。胰胆管逆行注射5％牛磺胆酸钠诱导SAP模型,治疗组在造模后30rain腹腔注射PLA2抑制剂s5920／LY315920Na（0．5mg／100g）。各组于术后12h点处死大鼠,观察胰腺和肠黏膜组织病理学变化,检测血清淀粉酶（AMY）、血清和肠黏膜组织中sPLa22活性的变化,RT-PCR法检测肠黏膜组织sPLA2 mRNA表达。结果SAP组胰腺和肠黏膜组织病理改变明显,血清AMY水平、IL-1β含量、血清和肠组织sPLA2活性、sPLA2 mRNA表达水平均明显高于SO组（P〈0．05）。PLA2抑制剂治疗组胰腺和肠黏膜组织病理损害程度较轻,上述指标均明显低于SAP组（P〈0．05）,但仍高于SO组（P〈0．05）。结论PLA2抑制剂可通过降低血清IL-1B、抑制sPLA2mRNA表达和下调血清及肠组织PLA2的活性等减轻SAP大鼠肠黏膜损伤。     

丝氨酸蛋白酶抑制剂对新生血管抑制作用的研究进展

血管增生（neovascularization）是指由已存在的微血管床产生新的毛细血管芽的过程,主要是在毛细血管和细静脉的基础上发生发展.这种新生血管对机体的创伤修复具有积极的作用,但同时也是肿瘤、糖尿病合并症、血管增生性眼病等疾病等疾病的共同病理特征,因此抑制新生血管的增生成为治疗这些疾病的共同点.血管的生成     

NTF2对视网膜新生血管的抑制作用

目的 体外实验研究核转运因子2(NTF2)对视网膜新生血管的抑制作用.方法 以血管内皮生长因子(VEGF)刺激体外培养人视网膜血管内皮细胞,并分为转染重组腺相关病毒2-NTF2(rAAV2-NTF2)的实验组和转染等量空白rAAV2的对照组,利用流式细胞仪和Boyden小室观察NTF2对激活状态的人视网膜血管内皮细胞增殖和迁徙的作用.结果 流式细胞仪检测结果显示实验组在G1期的细胞比例为(49.57±0.43)%,对照组为(27.21±0.86)%,两者差异有统计学意义(P<0.05)./30yden小室实验检测迁徙细胞数,实验组和对照组分别为(13.85±1.5)和(34.6±2.5)(n=6,P<0.05),说明NTF2能抑制人视网膜血管内皮细胞的增殖和迁徙.结论 NTF2对视网膜新生血管具有抑制作用.     

肿瘤新生血管生成抑制剂-肿瘤抑素的研究进展

肿瘤的生长和转移都离不开新生血管的生成，肿瘤抑素是一种来源于基膜胶原Ⅳ（ColⅣ）的蛋白片断，具有抗肿瘤新生血管生成和抑制肿瘤细胞增殖的双重活性，能特异性地抑制肿瘤血管内皮细胞蛋白的合成。对其进一步的研究证实肿瘤抑素是一种内源性的病理血管生成的抑制剂，具有潜在的药用价值。本文主要概述肿瘤抑素的来源、结构和分布，活性研究，作用机制及其与基质金属蛋白酶（MMP）的关系等最新研究进展和应用前景。     

磷脂酶A2抑制剂对肝脏缺血再灌注的保护作用

为研究一氧化氮／内皮素（NO／ET）失衡与肝缺血再灌注（I／R）损伤的关系以及磷脂酶A2抑制剂消炎痛（INDO）和NO／ET的调节作用,采用肝I／R模型,比较I／R组和INDO组NO／ET的变化情况及其与肝I／R损伤的关系,再灌注急性期血NO代谢产物（NO2^-/NO3^-)降低,ET升高致NO／ET比值降低,血TNF－α,肝丙二醛（MDA）,及酶的漏出增加,肝ATP含量降低,肝损伤加重,INDO可阻止再灌注后NO2^-/NO^3-下降,改善NO／ET平衡,减轻肝损伤,认为肝I／R损伤与NO／ET失衡有关,INDO对肝I／R急性期的保护作用与其对NO／ET调节作用有关。     

环氧合酶2反义寡核苷酸对胰腺癌新生血管生成的抑制作用

目的 研究环氧合酶-2反义寡核苷酸（COX-2 AS-ODN）对胰腺癌新生血管生成的抑制作用,探讨前列腺素E2（PGE2）在胰腺癌新生血管生成中的调节作用。方法 设计、合成特异性靶向COX-2 AS-ODN。人胰腺癌PC-3细胞进行体外培养,转染COX-2 AS-ODN后0、12、24、40和72h以荧光显微镜观察细胞情况。第二批PC-3细胞用于研究量-效关系,分为5组：对照组、Lipo组（接种Lopofectin脂质体）、C1组（1μg COX-2 AS-ODN Lipo/孔）。第三批PC-3细胞用于研究时-效关系,接种3μg COX-2 AS-ODN Lipo/孔后观察0、12、24、48和72h。用RT-PCR观察COX-2 mRNA的表达。以Western印迹观察分别加入3μg和9μg COX-2 AS-ODN/瓶后PC-3细胞COX-2蛋白质的表达。18只鸡胚分3组,其绒毛尿囊（CAM）分别接种PC-3细胞以及Lipo、Lipo COX-2 AS-ODN、Lipo COX-2 AS-ODN 前列腺素E2（PGE2）,另6只鸡胚仅接种PC3细胞用作对照。用Leica体视显微镜观察新生血管生成情况。结果 RT-PCR示随转染COX-2 AS-ODN浓度的增加,PC3细胞的COX-2 mRNA表达逐渐下调（直到COX-2 AS-ODN浓度为0.2μmol/L时）。COX-2 AS-ODN的作用于12h后最强,以后渐弱,48h后基本消失。Western印迹表明COX-2 AS-ODN转染组的COX-2蛋白质表达受抑制,9μg COX-2 AS-ODN/瓶组的抑制强于3μg COX-2 AS-ODN/瓶组。Lipo COX-2 AS-ODN组鸡胚CAM移植肿瘤中的新生血管生成密度明显低于Lipo组;Lipo COX-2 AS-ODN PGE2组的新生血管密度介于以上两组之间。结论 COX-2 AS-ODN显著抑制胰腺癌新生血管的生成。内源性COX-2参与对胰腺癌新生血管生成的调节,PGE2在该过程中起重要的介导作用。     

多脏器衰竭患儿血清磷脂酶A2及肿瘤坏死因子水平的研究

采用ＥＬＩＳＡ法检测了脏器衰竭患儿３６例，健康儿２０例血清磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）含量，并监测病儿脏器功能及动脑海因气，探讨血清ＰＬＡ２及ＴＮＦ－α在多脏器衰竭（ＭＯＦ）发生、发展中的作用及意义。结果：血清ＰＬＡ２及ＴＮＦ－α含量在ＭＯＦ组明显高于单衰组，死亡组显著高于治愈组；ＰＬＡ２与ＴＦＮ－α、动脉血氧分压呈要关关系。提示：ＰＬＡ２及ＴＮＦ－α参与了ＭＯＦ病理过程，动     

心钠素对小鼠肿瘤生长和血管新生的抑制作用

目的研究心钠素（ANP）的抗肿瘤作用及其在血管新生中的作用。方法通过微量泵将ANP输入带瘤小鼠，测量肿瘤体积，并用苏木素和靛红染色检验肿瘤中的血管新生。在基膜基质Matrigel上加入人脐静脉内皮细胞（HUVEC），使之形成毛细血管样结构，检测ANP对血管内皮细胞生长因子（VEGF165）刺激的HUVEC生长的影响。结果与对照组相比，ANP能抑制小鼠体内的黑色素瘤和肥大细胞瘤生长和血管新生（P〈0．01，P〈0．001），并抑制VEGF165诱导的HUVEC在基膜基质上形成毛细血管样结构（P〈0．001）。结论ANP可能作为一种内源性血管抑制剂，抑制肿瘤生长及血管形成。     

心钠素对小鼠肿瘤生长和血管新生的抑制作用

目的 研究心钠素(ANP)的抗肿瘤作用及其在血管新生中的作用.方法 通过微最泵将ANP输入带瘤小鼠,测量肿瘤体积,并用苏木素和靛红染色检验肿瘤中的血管新生.在基膜基质Matrigel上加入人脐静脉内皮细胞(HUVEC),使之形成毛细血管样结构,检测ANP对血管内皮细胞生长因子(VEGF165)刺激的HUVEC生长的影响.结果 与对照组相比,ANP能抑制小鼠体内的黑色素瘤和肥大细胞瘤生长和血管新生(P<0.01,P<0.001),并抑制VEGF<,165>诱导的HUVEC在基膜基质上形成毛细血管样结构(P<0.001).结论 ANP可能作为一种内源性血管抑制剂,抑制肿瘤生长及血管形成.     

脂蛋白相关磷脂酶A2及其抑制剂的研究进展

脂蛋白相关磷脂A₂（Lp-PLA₂）也称血浆血小板激活因子乙酰水解酶，是介导氧化低密度脂蛋白引起炎症和动脉粥样硬化的一个关键性酶。Lp-PLA₂作为一个动脉粥样硬化药物发现的新靶点，已发现了许多化合物对其具有选择性抑制作用。本文综述了Lp-PLA₂的生物学性质、与动脉粥样硬化的关系及其抑制剂用于治疗动脉粥样硬化的研究进展。     

磷脂酶A2研究新进展

磷脂酶AZ（PhosphohPaseAZEC3．豆．14,简称PL入）是一类热稳定、亲脂而依赖钙的蛋白酶,因其特异的化学结构和复杂的生理功能,使其成为研究脂代谢、生物膜磷脂结构和酶系、脂蛋白间的相互作用,以及凝血和溶血机制等方面的重要工具酶卜1。PL人存在动物各组织的细胞膜和线粒体膜上。它除了能使甘油磷脂第二位脂酸键水解,生成溶血磷脂和脂肪酸（大多为花生四烯酸）,且在激素信号传递、生物膜的稳衡过程、脂质介体（如血小板激活因子）的产生等生物学过程中发挥着重要作用卜］。因此,pL人业已成为生物界和医学界令人瞩目的研究热点…     

哮喘豚鼠磷脂酶A2的变化及其抑制剂的作用

目的：探讨磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）在哮喘和气道高反应发生中的作用及机理。方法：采用卵蛋白致敏豚鼠哮模型，观察支气管泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＰＬＡ２活性变化及气管平滑肌条最大收缩反应性（Ｅ－ｍａｘ）的关系，以及ＢＡＬＦ中细胞数、ＬＰＯ、蛋白质含量的变化及ＰＬＡ２抑制剂的防治作用，结果：哮组ＢＡＬＦ中ＰＬＡ２活性及Ｅｍａｘ显著增高，ＢＡＬＦ中细胞计娄航ＬＰＯ、蛋白质含量也显著升高；ＢＡＬＦ中ＰＬＡ２活性与     

胰磷脂酶A2对血脑屏障作用的实验研究

研究了胰磷脂酶Ａ２对大鼠血脑屏障通透性的影响，同时用蛇毒ＰＬＡ２作比较；用伊文氏蓝示踪，肉眼和切片观察脑组织ＥＢ蓝染情况，作为ＢＢＢ通透性增高的一般指示剂。结果表明，当血中ＰＬＡ２达一定浓度、作用一定时间后动物脑组织出现ＥＢ颗粒，且其密度和范围随该酶浓度的增加而不断扩大、加深，对照组动物脑组织则未见蓝染；同样浓度的蛇毒ＰＬＡ２作用强于胰ＰＬＡ２。     

选择性COX-2抑制剂对角膜移植术后新生血管形成的抑制作用

目的：探讨选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂在角膜移植术后新生血管形成中的抑制作用。方法：SD大鼠及Wistar大鼠各20只,在SD大鼠与Wistar大鼠之间建立角膜移植动物模型,分为选择性环氧化酶-1（COX-1）抑制剂小剂量阿司匹林给药组、选择性COX-2抑制剂西乐葆给药组、非选择性COX抑制剂消炎痛给药组及生理盐水阴性对照组。对角膜移植术后角膜混浊、水肿、新生血管形成情况评分得出角膜排斥反应指数（RV）,对角膜移植术后新生血管形态计算得出新生血管反应区域。并进行角膜病理切片检查。结果：选择性COX-1抑制剂组及阴性对照组大鼠在7 d时RV值＞5,排斥反应已经发生,选择性COX-2抑制剂组及非选择性COX抑制剂组未发生排斥反应。裂隙灯检查及角膜病理切片检查可见选择性COX-2抑制剂组及非选择性COX抑制剂组术后7d出现植床周围少许新生血管。选择性COX-1抑制剂组及阴性对照组术后7 d时新生血管接近创口。选择性COX-2抑制剂组及非选择COX抑制剂组角膜新生血管反应区域及RV值均少于选择性COX-1抑制剂组及阴性对照组。结论：COX-2选择性抑制剂可抑制角膜移植术后新生血管的产生。     

罗格列酮对1型糖尿病大鼠血管结构及磷脂酶A2表达的影响

目的 探讨过氧化物酶增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)配体罗格列酮对糖尿病大鼠血管病变的影响及可能机制.方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组和糖尿病罗格列酮治疗组.糖尿病组和糖尿病罗格列酮治疗组大鼠以链脲佐菌素(STZ)腹腔注射(60 mg/kg)诱导建立1型糖尿病大鼠模型,后者于血糖稳定第2周开始每日给予罗格列酮灌胃(1 mg/kg),连续8周.第8周末,各组大鼠在2.5%戊巴比妥腹腔注射麻醉下,心脏取血经ELISA法检测血清经典炎症通路上游炎症因子磷脂酶A2(PLA2)水平;取胸腹主动脉,观察血管壁组织形态学及超微结构改变,免疫组织化学法检测血管壁PLA2蛋白表达.结果 与正常对照组比较,糖尿病组大鼠血管结构破坏严重;局部PLA2蛋白表达增加,血清PLA2水平上升.糖尿病罗格列酮治疗组大鼠血管病变明显轻于糖尿病组;血管壁组织PLA2蛋白表达和血清PLA2水平明显高于对照组,但显著低于糖尿病组(P<0.05).结论 罗格列酮对糖尿病大鼠血管结构具有保护作用,其机制可能与抑制外周和局部炎症因子PLA2表达而减轻炎症反应有关.     

过氧化氢对胰岛微血管内皮细胞钙非依赖型磷脂酶A2表达的影响

目的：研究过氧化氛（H2O2）对胰岛内皮细胞钙非依赖型磷脂酶A2（iPLA2）mRNA表达的影响。方法：用0,30,100和300μmol／L H2O2诱导IMECs8h后进行RT-PCR检测;用300μmol／L H2O2分别诱导0,4,8和12h后应用RT-PCR技术进行iPLA2基因表达的检测。采用Annexin V-FITC／PI双染色检测细胞的凋亡率;采用DIOC6（3）染色检测细胞线粒体膜电位.结果：①300μmol／L H2O2作用12h的电泳条带亮度与其他组（0,30,100μmol／L）相比明显减弱,300μmol／L H2O2作用8h及12h的电泳条带亮度与0,4h相比明显减弱。②各浓度H2O2处理组（0,30,100和300μmol／L）IMECs凋亡率差异具有统计学意义[分别为（2.0±0.5）％,（19.1±5.8）％,（28.4±4.9）％,（40.1±5.1）％,P〈0.01];300μmol／L H2O2处理0,4,8,12h后,各时间点IMECs凋亡率差异具有统计学意义（P〈0.01）;③各浓度及各时间点H2O2处理组IMECs细胞内DIOC6（3）的荧光强度差异具有统计学意义（P〈0.01）.结论：H2O2对IMECs iPLA2的表达具有抑制作用,其抑制作用呈量效及时效关系。     

罗格列酮对1型糖尿病大鼠血管结构及磷脂酶A2表达的影响

目的探讨过氧化物酶增殖物激活受体-γ（PPARγ-）配体罗格列酮对糖尿病大鼠血管病变的影响及可能机制。方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组和糖尿病罗格列酮治疗组。糖尿病组和糖尿病罗格列酮治疗组大鼠以链脲佐菌素（STZ）腹腔注射（60 mg/kg）诱导建立1型糖尿病大鼠模型,后者于血糖稳定第2周开始每日给予罗格列酮灌胃（1 mg/kg）,连续8周。第8周末,各组大鼠在2.5%戊巴比妥腹腔注射麻醉下,心脏取血经ELISA法检测血清经典炎症通路上游炎症因子磷脂酶A2（PLA2）水平;取胸腹主动脉,观察血管壁组织形态学及超微结构改变,免疫组织化学法检测血管壁PLA2蛋白表达。结果与正常对照组比较,糖尿病组大鼠血管结构破坏严重;局部PLA2蛋白表达增加,血清PLA2水平上升。糖尿病罗格列酮治疗组大鼠血管病变明显轻于糖尿病组;血管壁组织PLA2蛋白表达和血清PLA2水平明显高于对照组,但显著低于糖尿病组（P〈0.05）。结论罗格列酮对糖尿病大鼠血管结构具有保护作用,其机制可能与抑制外周和局部炎症因子PLA2表达而减轻炎症反应有关。     

重组海葵溶细胞素及平颏海蛇磷脂酶A2对血管外膜成纤维细胞增殖的影响

OBJECTIVE: To observe the effects of recombinant Sagartia rosea cytolysin (rSrc) and Lapemis hardwickii phospholipase A2(rPLA2) on adventitial fibroblasts proliferation. METHODS: NIH-3T3 cells were cultured and treated with rSrc and rPLA2 at different concentrations for observation of cell proliferation using non-radioactive MTS/PES assay in comparison with the control group. RESULTS: The ratio of cell proliferation was 0.840+/-0.061 in the control group, and was 0.263+/-0.044, 0.418+/-0.054, 0.605+/-0.063, 0.772+/-0.054 and 0.906+/-0.072 in rSrc groups corresponding to rSrc concentrations of 100, 10, 1 microg/ml and 100, 10 ng/ml respectively. rSrc was found to significantly inhibit fibroblast proliferation in a dose-dependent manner when the concentration used was above 1 microg/ml (P<0.05), as compared with the control group (P<0.05). The ratio of cell proliferation was 0.498+/-0.076, 0.937+/-0.112 and 0.978+/-0.145 in rPLA2 groups corresponding to rPLA2 concentrations of 100, 10, 1 microg/ml respectively, indicating that rPLA2 also significantly inhibited fibroblast proliferation at the concentration of 100 microg/ml (P<0.05). CONCLUSION: rSrc and rPLA2 can both significantly inhibit adventitial fibroblast proliferation.