砷汞对小鼠生殖毒性的研究

用小鼠卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究了 Hg Cl2 、As2 O3 对小鼠卵母细胞成熟和体外受精等的影响。结果 :Hg Cl2 、As2 O3 对生发泡破裂没有影响 ,但可以抑制卵母细胞第一极体的释放 ,影响卵母细胞的存活率并可降低体外受精的频率 ,对体内卵母细胞生发泡破裂无影响 ,但是可以显著抑制体外培养卵母细胞的生发泡破裂。结论 :本实验结果提示 ,育龄妇女吸收了 Hg Cl2 、As2 O3 后 ,可以损伤卵母细胞的成熟过程 ,降低其生育力和生殖能力 ,甚至导致不孕。     

6种金属元素对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响

为研究镉、铅、镍、锰、铬、铝元素的生殖毒性,采用卵母细胞体外培养、体外受精的方法,观察它们以卵母细胞成熟和受精能力的影响。结果显示除了铝外,其它各个金属元素均可以明显降低小鼠超排卵数;６个剂量组均可以抑制卵母细胞的成就,显著降低卵母细胞第一极体释放率、体外受精率和细胞存活率,对体内卵母细胞的生发泡破裂没有影响,但对体外培养卵母细胞的生发泡破裂有明显的抑制作用（铝组除外）。结果提示,这些金属元素被人     

锰对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响

目的　研究锰的生殖毒性。方法　采用小鼠卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究了硫酸锰对小鼠卵母细胞成熟和受精能力的影响。结果　硫酸锰可以抑制卵母细胞第一极体的释放 ,降低小鼠平均超排卵的卵母细胞数和卵母细胞的存活率和体外受精率。对小鼠体内生发泡破裂 (GVBD)没有影响 ,但可以抑制体外培养卵母细胞的GVBD ;硫酸锰还可以抑制受精卵的卵裂。结论　本实验结果提示 ,硫酸锰可以破坏卵母细胞的成熟 ,降低卵母细胞的受精能力 ,具有明显的生殖毒性     

巯基乙酸对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响

目的 探讨巯基乙酸（TGA）对小鼠生殖作用的影响。方法 采用小鼠卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究TGA对卵母细胞成熟和体外受精的影响。结果 TGA可抑制体培养卵细胞的生发泡破裂（GVBD），但对小鼠体内卵母细胞生发泡破裂没有影响，TGA可抑制卵母细胞这一极本的释放，降低小鼠卵母细胞存活率和体外受精率以及小鼠平均超促排儿的卵母细胞数。结论 TGA可以破坏卵母细胞的成熟，降低卵母细胞的受精，说明其对雌性小鼠生死细胞有一定的毒性作用。     

香烟烟雾水溶物对小鼠卵母细胞成熟和IVF的影响

采用小鼠卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究不同产地３种香烟的烟雾水溶物对小鼠卵母细胞成熟和受精能力的影响。结果显示３种香烟烟雾水溶质对卵母细胞生发泡破裂都没有影响,但可以显著地抑制卵母细胞第一极体的释放、降低卵母细胞的体外受精率和体外存活率。结果提示,香烟烟雾中影响生殖作用的主要成分是其中的水溶性成分,它们可以破坏卵母细胞的成熟、降低卵细胞的受精能力,对生殖细胞和生育能力有一定的毒性作用;不同产     

锰 铬对体外培养小鼠卵母细胞减数分裂的影响

采用卵母细胞体外培养的方法 ,研究了硫酸锰、氯化铬对小鼠卵母细胞的成熟和减数分裂的影响。结果表明 ,二者均能抑制体外培养卵母细胞的第一极体释放 ,降低体外培养卵母细胞的存活率 ,在培养 8h时都能够抑制卵母细胞的生发泡破裂。实验结果还显示 ,氯化铬比硫酸锰对卵母细胞的损伤作用更大。提示 ,硫酸锰和氯化铬都可以破坏卵母细胞的成熟和减数分裂 ,有明显的生殖毒性。     

砷对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响

目的　探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３） 对小鼠生殖作用的影响。方法　采用小鼠卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究Ａｓ２Ｏ３ 对卵母细胞成熟和体外受精的影响。结果　Ａｓ２Ｏ３ 对小鼠卵母细胞生发泡破裂、超排卵的卵母细胞数目没有影响, 但可以抑制卵母细胞第一极体的释放, 降低体外受精率和卵母细胞的存活率。结论　Ａｓ２Ｏ３ 可以破坏卵母细胞的成熟、降低卵母细胞的受精能力, 对生殖细胞和生育能力有一定的毒性作用。     

氟化钠对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响

目的：探讨氟化钠对小鼠生殖功能的影响。方法：采用小鼠卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究了氟化钠对小鼠卵母细胞成熟和受精的影响。结果：20．0mg/kg组氟化钠可以显降低小鼠超排卵数,10．0mg/kg组和20．0mg/kg组均可以显抑制卵母细胞第一极体的释放,降低体外受精率,但对小鼠生发泡破裂没有影响,对卵母细胞的体外存活率也无显影响;本实验结果还显示,2个染毒组均可以抑制 外受精24h时的受精卵的卵裂,但是随着在正常培养液中培养时间的延长,这种抑制作用逐渐解除。结论：氟化钠可以破坏卵母细胞的成熟、降低卵母细胞的受精能力,具有明显的生殖毒性。     

汞对雌性小鼠生殖功能及脏器的影响

为探讨汞化合物对脏器及生殖的毒性,采用卵母细胞体外培养,体外受精的方法研究了汞对小鼠脏器系数,卵母细胞成熟和受精能力的影响。结果表明,０．５和１．５ｍｇ／ｋｇ ＢＷ汞对小鼠的肝脏,肾脏有明显的毒性作用１．０ｍｇ／ｋｇ ＢＷ组还对卵巢有明显的毒性作用,并能显著降低超排卵的细胞数;汞对体内抑母细胞生发泡破裂没有影响,但可以抑制卵母细胞第一极体的释放,影响卵母细胞的存活率并降低体外受精率。     

巯基乙酸对小鼠MⅠ／MⅡ期卵母细胞进程及结构的影响

目的 探讨巯基乙酸(TGA)对卵母细胞体外成熟的影响.方法 采用小鼠卵母细胞体外成熟和免疫荧光染色法,观察巯基乙酸处理后小鼠MⅠ/MⅡ期卵母细胞的成熟进程和形态结构.结果 对照组、0.005 mg/ml TGA组和0.020 mg/ml TGA组生发泡破裂率分别为48.67%、62.67%和56.00%,第一极体排出率分别为26.47%、65.96%和45.24%,0.005 mg/ml处理组第一极体排出率高于对照组和0.020 mg/ml组,差异有统计学意义(P＜0.05).随着TGA处理剂量的增加,卵母细胞纺锤体和染色体形态结构异常的细胞比例和异常程度增加,0.020 mg/ml TGA处理组与对照组有显著性差异.结论 巯基乙酸可促进卵母细胞体外减数分裂的重启和成熟,但中期卵母细胞的纺锤体及染色体有结构缺陷,对后续胚胎发育可能会产生潜在影响.     

BDNF对小鼠卵母细胞体外成熟及发育能力的影响

目的:观察脑源性神经营养因子(BDNF)对小鼠未成熟卵的体外成熟及发育能力的影响。方法:以α-MEM为基础培养液,添加不同浓度(0、1、5、10 ng/ml)的BDNF以及FSH、FBS培养小鼠未成熟卵,并进行体外受精,观察卵母细胞成熟率、受精率和胚胎发育至囊胚的能力,了解不同培养条件下BDNF对卵母细胞发育能力的影响。结果:当体外成熟培养液中含有FSH和10%的FBS时,与体外成熟对照组比较,BDNF虽然不影响卵母细胞的成熟率和受精率,但BDNF 5 ng/ml组的囊胚形成率(75.00%)显著高于体外成熟对照组(56.63%),而接近体内成熟组(76.92%);当培养液中仅含FBS时,各组间卵母细胞成熟率和受精率没有差异,但与对照组比较,BDNF显著提高囊胚形成率;当培养液中不含FBS、FSH时,虽然无囊胚形成,但BDNF显著提高了卵母细胞的受精率。结论:BDNF能促进小鼠未成熟卵胞质的发育,提高卵母细胞的发育能力。     

OPS法玻璃化冷冻未成熟卵母细胞的效果观察

目的:探讨OPS(open pu lled straw,开放式拉细麦管)法玻璃化冷冻技术冻存未成熟卵母细胞的效果。方法:小鼠GV期卵母细胞用OPS法玻璃化冷冻复苏后行体外成熟培养(in-vitro m aturation,IVM)或直接行IVM,所获成熟卵行体外受精(IVF)和胚胎的体外培养(IVC)。以体内成熟卵行IVF/IVC作为in-vivo对照组。结果:GV期卵冻融后65.11%存活,IVM后成熟率为52.86%,其成熟率显著低于IVM对照组。冻融卵成熟后受精、卵裂率(33.78%、76.00%)低于IVM对照组和in-vivo对照组,培养后未见囊胚形成。结论:OPS法玻璃化冷冻技术可有效冻存GV期卵母细胞,复苏后可发育成熟,但卵的受精和继续发育能力欠佳。     

人未成熟卵玻璃化冷冻初步实验探讨

目的:对人未成熟卵母细胞玻璃化冷存保存技术进行初步实验探讨。方法:采用OPS玻璃化冷冻方法,对未成熟的卵子进行冷冻,解冻后体外成熟培养,ICSI受精,观察胚胎培养情况,并对某些影响因素进行探讨。结果:冷冻了GV期卵62个,M I期卵40个。两期卵细胞复苏后存活率、成熟率、受精率和卵裂率分别为:80.65%、77.50%,52.00%、41.94%,57.69%、61.54%,60.00%、62.50%,两组间比较无统计学差异(P>0.05);采用HTF或G-Mops两种缓冲液配制玻璃化冷冻液冷冻解冻未成熟卵效果无统计学差异(P>0.05);未成熟卵解冻后置于含性激素的TCM199与单纯IVF30中成熟培养效果无统计学差异(P>0.05)。结论:应用OPS玻璃化冷冻方法能够有效冻存未成熟卵母细胞。     

体外培养成熟技术对未成熟卵母细胞冻融的影响

目的:探索影响未成熟卵母细胞冻融技术的关键因素。方法:A组:来源于体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中自愿捐献的多余的成熟卵母细胞(MⅡ期),共56个;B组:来源于手术切除的卵巢组织中的未成熟卵母细胞(GV或MⅠ),共67个。不同成熟时期卵母细胞经慢冻快融后培养和体外受精,观察其体外成熟、受精及胚胎发育情况。结果:A组与B组相比,两组冻融后的存活率有显著性差异(60.71%vs 77.61%,P<0.05);A组受精率高于B组,但两组比较无显著性差异(61.76%vs 50.00%,P>0.05);A组与B组相比,两组冻融后的卵裂率和优质胚胎率有显著性差异(76.19%vs 37.50%,47.62%vs 12.50%,P<0.05)。A组获2枚囊胚,而B组没有囊胚培养成功。结论:体外成熟培养技术可能是影响冻融后未成熟卵母细胞发育的关键因素。     

未成熟卵母细胞体外培养成熟治疗多囊卵巢综合征不孕症

目的:观察应用卵母细胞体外成熟(IVM)技术治疗多囊卵巢综合征不孕症的效果。方法:在自然周期中取出未成熟卵母细胞进行体外培养成熟后行单精子胞浆注射,受精后取优质胚胎移植入宫腔。结果:7例患者进行细胞7个IVM治疗周期,共获得未成熟卵细胞51个,平均每个周期7.29个。共培养成熟37个卵子成熟率72.55%,受精率86.49%,卵裂率68.75%。7个移植周期,3例妊娠,总周期妊娠率42.86%,总种植率26.67%。2例已分娩,出生2个正常男婴。结论:在自然周期中获得未成熟卵母细胞体外培养成熟后治疗多囊卵巢综合征不孕症有效。     

人卵颗粒细胞凋亡对卵母细胞发育潜能的影响

目的:研究人卵母细胞发育潜能与颗粒细胞凋亡之间的关系。方法:将卵子在体外经过28～30 h培养后,取其颗粒细胞,用TUNEL法进行凋亡率的分析,并与卵子的成熟情况和卵子的评分及形成胚胎结果进行对照。结果:培养后,随着卵母细胞成熟度的降低,凋亡率升高;而且随着卵母细胞评分和发育潜能的降低,颗粒细胞凋亡率逐渐升高。结论:卵子发育潜能与颗粒细胞凋亡之间关系密切,通过测定颗粒细胞的凋亡率可预测未成熟卵母细胞的发育潜能。     

添加两种不同培养成分对人未成熟卵体外成熟培养的影响

目的:研究添加两种不同培养成分对人未成熟卵母细胞体外成熟培养(IVM)的效果。方法:选择接受ICSI治疗的77名不孕患者共收集未成熟卵177枚,随机分A组(激素组)33例,添加0.075 IU/ml FSH及0.075 IU/ml LH至基础IVM培养液中;B组(成熟卵泡液组)44例,50%基础IVM培养液与50%人成熟卵泡液配成。将两组收集的未成熟卵母细胞放入不同培养液中培养48 h,每24 h倒置显微镜下观察卵母细胞的形态;对MII卵进行ICSI,ICSI操作后继续培养,ICSI后16～20 h进行受精观察,24及48 h分别进行卵裂观察及胚胎评分。结果:①B组未成熟卵母细胞48 h成熟率和MI期卵母细胞48 h成熟率显著高于A组,差异有统计学意义(P<0.05),两组培养液GV期卵母细胞24和48 h成熟率比较差异无统计学意义(P>0.05)。②B组2PN卵裂率显著高于A组,差异有统计学意义(P<0.05),两组2PN受精率及可利用胚胎率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:人成熟卵泡液内可能含有一些未知的有利于卵母细胞成熟的因子,深入研究卵泡液的成分,进一步明确其促卵母细胞成熟机制对开发新的IVM培养液、改善IVM的临床结局有重要意义。     

未成熟卵母细胞体外成熟在多囊卵巢综合征的临床应用

目的:探讨未成熟卵母细胞体外成熟在多囊卵巢综合症的应用。方法:自然或小剂量FSH刺激至卵泡直径达到10mm注射hCG,36h后经阴道穿刺获取未成熟卵母细胞,体外培养24～48h,成熟卵母细胞进行ICSI。结果:11例PCOS患者共获卵141个,平均12.8个,培养24～48h后共96个达到MⅡ期,成熟率68%,ICSI后受精共59个,自然受精6个,ICSI受精率68%,自然受精率67%,46个发生卵裂(其中6个为自然受精),ICSI卵裂率68%,优质胚胎(Ⅰ～Ⅲ级)37个,自然受精6个均为优质胚胎。移植后14天,2例血hCG阳性,移植后28天探及子宫内单个孕囊并见原始心管搏动。IVM失败后4例原克罗米芬抵抗者,3例诱导排卵成功,其中1例妊娠,另1例经HMG两个周期妊娠。结论:①IVM是PCOS不孕治疗的新选择;②体外成熟卵母细胞可以自然受精;③经阴道卵巢穿刺可以作为PCOS手术治疗的一种方式。     

Cytogenetic analysis of in vivo and in vitro matured oocytes derived from naturally cycling and stimulated mice

The objective of the study was to analyze the potential role of follicle stimulating hormone (FSH) in cytogenetic changes of in vivo and in vitro matured mouse oocytes and to determine whether the lower developmental potential of immature oocytes is due to a higher incidence of abnormalities in meiotic spindle organization and chromosome alignment as well as aneuploidy. In vivo matured oocytes were collected from naturally ovulated and superovulated (5.0 I U of recombinant follicle-stimulating hormone [rec-FSH] + recombinant human chorionic gonadotropin [rec-HCG]) mice. Immature oocytes were retrieved from naturally cycling mice and from mice primed with rec-FSH for 48 h. The immature oocytes were cultured 18 h for in vitro maturation (IVM). In vivo and in vitro matured oocytes were assessed for the meiotic spindle organization and chromosome alignment as well as aneuploidy. There was no significant difference of meiotic spindle organization, chromosomal alignment and aneuploidy between in vivo and in vitro matured oocytes derived from naturally cycling and stimulated mice. Therefore, the lower developmental potential of immature oocytes does not appear to be directly related to the incidence of abnormal meiotic spindle organization and chromosome alignment or to aneuploidy.     

卵母细胞体外成熟治疗多囊卵巢综合征不孕症

[目的]应用卵母细胞体外成熟（IVM）技术治疗多囊卵巢综合征不孕症。[方法]23例患者中的152个未成熟卯母细胞进行体外培养,成熟后行单精子卵胞浆内注射。受精后取优质胚胎移植宫腔,同时对其影响因素进行探讨。[结果]共培养成熟105个卵子,成熟率69．1％。受精率92．0％,卵裂率79．4％。5例妊娠,周期妊娠率27．8％,1例已出生1个正常男婴。IVM结局与末成熟卵子的形态及体外培养系统有关。[结论]IVM对卵泡发育和成熟障碍,特别是难治性多囊卵巢综合征患者助孕有效。