内源性生物素对免痰组化染色的影响及消除方法

免疫组织化学技术因其结果定位明显，操作简单，实验条件及设备要求不高，又能将形态、代谢和机能密切结合起来，使纯形态的病理学发展成了形态与免疫信号相结合的现代病理学，已被广泛应用于临床病理诊断及各种科研工作。然而在免疫组化的实际应用过程中常会遇到的非特异性染色，从而对实验结果的判定造成严重影响。     

卵白过敏反应—抗原特异性IgE免疫复合物的检测

过敏性皮炎(AD)循环血中出现IgE免疫复合物(IgE-IC),其意义尚未明确。婴幼儿AD病人常常合并卵白过敏。本文应用生物素-亲和素ELISA测定法检测患者血清中卵白特异性IgE-IC。     

生物素改性的植入胶原用作药物载体

本文通过牛皮胶原与生物素-N-羟基琥珀酰亚胺(BNHS)共价键结合使胶原生物素化,再通过生物素-卵白素之间的生化反应使药理活性分子专一性地结合在胶原上。生物素化的胶原与卵白素的结合活性用一种体外的斑点试验定性分析,并用光学数字显示仪可实现定量数据处理。这里采用了两种结合程序:(1)用辣根过氧化物酶标记的卵白素与生物素化的胶原反应(LAB法)。通过辣根过氧化酶的显色作用检测卵白素与生物素胶原的结合率。(2)用游离的卵白素与两种生物素化的基     

生物素—亲和素系统在免疫学检测中的应用

<正> 早些年前,学者们发现给动物喂食大量卵白蛋白可引起维生素 H(即生物素,biotin)缺乏症,此后证明其原因是卵白蛋白中存在一种对生物素有异常强亲和力的碱性糖蛋白,称之为 avidin,译名有抗生物素蛋白、卵白素和亲和素等。前二者易与抗体或卵白蛋白混淆,本文采用亲和素。自七十年代中期起,亲和素与生物素之     

用McAb 2G2对石蜡切片中卡氏肺囊虫的免疫过氧化物酶定位

本文作者介绍了一种可用于鉴定经福尔马林固定、石蜡包埋组织中卡氏肺囊虫的免疫过氧化物酶定位法。其优点是采用了市售的抗卡氏肺囊虫的单克隆抗体2G2和生物素-亲和素检测系统,不仅取材方便,而且可使检测的特异性及敏感性均较传统染色法明显提高,甚至可将已在福尔马林固定2年多组织中的囊壁、囊外原纤维性物质及滋养体     

更敏感的免疫细胞化学方法—免疫金—银染色

Holgate等(1983)报告的一种更敏感的免疫细胞化学技术——免疫金—银染色方法(Immunogbld-Silver Staining Method,IGSS),此法具有PAP(过氧化物酶和抗过氧化物酶复合物)和ABC(卵白素——生物素——过氧化物酶复合物)技术的优点,又克服了它们的某些缺点,是目前比较理想的方法。现将此法的原理,材料和方法,结果及与PAP法的比较的优缺点等介绍如下: 一、免疫金—银染色方法的原理免疫球蛋白(抗体)分子吸附在胶体     

用免疫组化ABC法的漂片法做好脑片实验的体会

ABC法是将亲和素作为桥，把生物素化的抗体与生物素结合的酶连接起来。首先，以Ⅰ抗与组织切片共孵育，使特异性Ⅰ抗与组织中的相应抗原结合，之后加上生物素标记的Ⅱ抗，Ⅱ抗与Ⅰ抗通过抗原一抗体反应结合，最后加人ABC复合物，Ⅱ抗上的生物素则与ABC复合物中的亲和素上空下的位点结合。用ABC法中的漂片法做脊髓冰冻切片的染色比较容易做出结果，但如果是用此法做大鼠脑的冰冻切片染色则较难做出结果，特别是做出漂亮的脑片更难。作在用ABC漂片法做脑组织冰冻切片的免疫组织化学实验的过程中，通过改变常规的操作步骤环节，使做出的脑片质量大为提高。以下实验技术介绍的是将免疫组化ABC法的漂片法用于脑组织冰冻切片中的几点体会。     

小块神经组织整体孵育ABC法的探讨

本文介绍一种小块神经组织整体孵育的免疫细胞化学ABC法。组织块不切片而整体入一抗、二抗以及卵白素—生物素—过氧化物酶复合液中孵育,二氨基联苯胺—双氧水呈色,锇酸后固定,Epon包埋之后再行切片作光镜和电镜观察。依此程序以及改进的参数,对海兔侧神经节感觉神经元簇(平均直径1.0±0.2 mm)整体进行了5-羟色胺免疫组化反应。结果表明,侧神经节感觉神经元簇的浅、中、深层,光镜下均可见大量念珠状5-羟色胺免疫阳性反应纤维及其膨体。电镜下5-羟色胺免疫阳性反应物电子密度高,容易辨认。非免疫阳性反应的侧神经节感觉神经元的亚细胞结构亦清晰可见。此外,该法仍保持原法非特异性背底浅、免疫阳性反应物与背底对比明显以及保存时间长等特点。对于因组织小而不便先切片再进行免疫组化程序的,可试用此法。对1毫米左右厚的薄组织也可使用本法。     

单克隆抗体对靶细胞核中雌激素受体的定位

应用免疫酶标细胞化学技术在雌激素受体蛋白特异的5种大鼠单克隆抗体中分别对人乳腺肿瘤、人子宫、兔子宫等的冰冻切片进行雌激素受体蛋白(亲雌素)定位,可观察到核特异性的染色还可观察到染色有对单克隆抗体的存在与否及浓度,的依赖性,以及这种染色可被高度纯化的亲雌素竞争性抑制。非靶组织如结肠上皮细胞的染色总是阴性的,MCF-7细胞如同大多数人乳腺肿瘤一样对亲雌素的特异染色是不均一的,仅局限于核。染色的不均一性可能反映这些样品源自多克隆,或许也与细胞群的生理状态(如细胞周期)有关.迄今为止,在任何被测定的组织或肿瘤细胞中包括由于绝     

四种小鼠白血病细胞株免疫学分型的研究

本文通过卵白素生物素复合物(简称ABC)标记的抗Thy1.2,Lyt-1,Lyt-2和IaK~2四种单克隆抗体和马抗小鼠IgG抗体研究了L7212-85,L7811-85,L1210-86和P388-86四种小鼠白血病细胞株的免疫学分型。实验结果提示L-7212-85和L7811-85属于抑制性T淋巴细胞性白血病,P388-86属于B淋巴细胞性白血病,L1210-86属于非T非B细胞性白血病。     

环氧化酶-2在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨环氧化酶-2（COx-2）在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用链霉素抗生物素卵白素-过氧化物酶（SP）法进行免疫组化染色，观察43例结直肠癌组织和14例正常大肠组织中COX-2的表达情况。结果：COX-2在83．72％的结直肠癌组织中表达，仅在14．29％的正常大肠组织中表达（P〈0．005）。COX-2表达水平与肿瘤Duke’s分期、大小、淋巴结转移呈正相关（P〈0．05），而与肿瘤分化程度、位置、浸润深度及患者性别无明显相关性（P〉0．05）。结论：COX-2在结直肠癌组织中过表达，可能在结直肠癌的发生发展中起重要作用。     

CD99在卵巢性索-间质肿瘤中的表达

一、材料与方法1.材料 :收集我院 2 0 0 0年 2月～ 2 0 0 1年 7月的石蜡组织标本 4 8份 (例 )。临床资料 :6例为正常卵巢 ,患者 2 3～ 5 9岁 ,2例已绝经 ;1例 17岁正常睾丸组织。 4 1例肿瘤中 2 9例为卵巢性索 间质肿瘤 ,年龄 17～ 73岁 ,平均 4 9.4岁 ,14例已绝经 ;12例为女性生殖道非性索 间质肿瘤 ,患者年龄 13～ 6 5岁 ,平均 4 2 .8岁。按ＷＨＯ 1999年卵巢肿瘤新分类诊断。2 .免疫组织化学检测 :ＣＤ99(Ｏ13)单克隆抗体为Ｚｙｍｅｄ公司产品 ,应用卵白素抗生物素结合法 (ＡＢＣ)法免疫组织化学染色 ,一抗工作浓度 1∶5 0 ,微波修复抗…     

CpG ODN对ZP~(121-140)表位合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应影响

目的:探讨CpG ODN对透明带(四)抗原表位ZP~(121-140)合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应影响.方法:应用人工合成ZP2~(121-140)表位肽,与20μg CpG ODN或等量完全弗氏佐剂(CFA)混悬后左胫前肌免疫雌性BALB/c小鼠,初次免疫后2、4、6周各加强免疫一次,共免疫四次.在每次加强免疫前和末次免疫后两周断尾取血,分离血清,分析特异性lgG抗体及非特异性细胞因子IFN-γ、TNF-Ⅱ,IL-10水平;收集小鼠阴道冲洗液,离心取上清,分析特异性IgA抗体水平.免疫小鼠生育实验结束后,取卵巢组织行病理学分析.结果:CpG ODN组诱导的特异性IgG和IgA水平较CFA组有增高趋势,但无显著性差异(P＞O.05).CpG ODN组诱导的非特异性IFN-γ和TNF-水平明显高于CFA组(P＜0.05);而CpG ODN组诱导的IL-10水平显著低于CFA 组(P＜0.05).两种佐剂对小鼠的受孕率影响没有显著性差异,但CpG ODN组孕鼠每胎产仔数明显低于CFA组(P＜O.05).病理学分析显示实验小鼠卵巢组织无病理性变化.结论:CpG ODN对Zp~(121-140)合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应略优于CFA,更适合用于避孕疫苗佐剂研究.     

应用两种免疫组化酶法染大鼠室旁核含神经垂体素1的细胞

我们应用辣根过氧化物酶抗辣根过氧化物酶(PAP)和卵白素生物素辣根过氧化物酶复合体(ABC)法染色,识别室旁核内含神经垂体素1(NP 1)的神经元。以0.1％辣根过氧化物酶(HRP)与福氏不完全佐剂的乳剂免疫家兔,获得兔抗HRP抗血清,免疫球蛋白(IgG)含量为43mg/ml,双向琼脂扩散试验抗血清效价1∶32。依改良Sternberger法制备PAP:     

应用LAB-ELISA法检测血清HBsAg的评价

生物素-抗生物素系统(BAS)是自然界中存在较广泛的-种生物亲和体系,将其引入酶免疫试验中,能使方法的敏感性及特异性均有所提高。我室自1986年起将其引入血清HBsAg检测,建立标记抗生物素-生物素ELISA(LABELISA),并将这一方法与国内新近推出的几种ELA方法进行了比较,现报道如下。     

卵巢非特异性类固醇细胞瘤临床病理分析

目的探讨卵巢非特异性类固醇细胞瘤的临床、病理学特征以及诊断、治疗。方法对8例卵巢非特异性类固醇细胞瘤进行HE和免疫组织化学（EliVision法）染色及特殊染色,结合临床资料和文献进行分析。结果7例良性非特异性类固醇肿瘤,肿瘤主要由两种细胞构成：一种为多角形细胞,胞质含小颗粒或嗜酸性;一种为胞质含空泡的较大细胞。细胞排列成巢或条索状,似肾上腺球状带和束状带。1例恶性非特异性类固醇肿瘤,细胞呈明显异型性,核分裂象7／10 HPF,伴出血、坏死。免疫组织化学显示：肿瘤细胞胞质内钙结合蛋白和α-抑制素普遍阳性表达。诊断非特异性类固醇细胞瘤需与广泛黄素化的颗粒细胞瘤、卵泡膜细胞瘤、富于脂质的支持细胞瘤和嗜酸型透明细胞癌等相鉴别。良性肿瘤治疗一般为肿瘤切除或加患侧附件切除术;恶性肿瘤行肿瘤加附件切除,辅以化疗或促性腺激素激动剂治疗。结论非特异性类固醇细胞瘤是类固醇细胞肿瘤中最常见的类型,良性多见;免疫组织化学可辅助肿瘤诊断;治疗方法主要取决于肿瘤的良恶性。     

新生大鼠心肌组织Telocytes的组织形态学研究

本研究以新生大鼠心肌组织为研究对象,分别采用组织学、免疫组织化学及甲苯胺蓝染色方法,对新生大鼠心肌组织中telocytes形态特征和免疫标志进行观察与分析.其中,组织学染色与甲苯胺蓝染色结果显示,新生大鼠心肌组织中存在大量间质细胞,其中telocytes的分布多紧贴于心肌纤维束周围或纤维之间,细胞呈现长梭形、纺锤形及三角形等多种形态,胞质少、有一至多条长而细的细胞突起,胞核结构较致密、着色较深.免疫组化染色结果进一步证实新生大鼠心肌组织中其不但表达间质细胞的免疫标志vimentin,有些还表达c - kit/CD117和CD34两种与干细胞相关的表面标志物.本研究从组织形态学的角度阐明了telocytes的基本特征和分布,为进一步揭示其功能奠定了在体形态结构上的基础.     

三种特殊染色方法的改进

随着病理技术的发展,免疫组织化学、原位杂交等技术越来越普及,与此同时,传统的特殊染色技术仍然是病理学诊断和鉴别诊断必不可少的技术.尤其在肾、骨髓活检组织的病理学诊断中,特殊染色与苏木精-伊红染色、免疫组织化学、电镜有着同等重要的地位.     

人肝细胞毛细胆管表达IL-2R_α的研究及意义

目的 了解人肝细胞毛细胆管是否表达IL-2Rα,观察其表达特异性和灵敏度.方法 对正常人肝组织、慢性乙型肝炎等不同病种人肝组织进行IL-2Rα标记,通过免疫组织化学染色、免疫荧光化学染色及免疫电镜3种方法 观察其表达.结果 免疫组化染色法和免疫荧光染色法显示IL-2Rα标记人肝细胞膜毛细胆管面定位正确,无非特异性染色,而肝细胞膜的血窦面、细胞质、细胞核不被IL-2Rα标记.酶标记免疫电镜显示人肝细胞膜毛细胆管面有明显电子致密物沉积.结论 人肝组织毛细胆管确实表达IL-2Rα,其特异性和灵敏度均优于CEA(多克隆抗体).     

促甲状腺激素生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种低成本、高灵敏度的检测血清促甲状腺激素(TSH)的生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法。方法引入生物素-亲和素放大系统,一株抗TSH的单克隆抗体包被微孔板,另一株标记生物素,辣根过氧化物酶标记链亲和素,鲁米诺作为发光底物,采用夹心法,建立TSH酶促化学发光免疫分析方法。结果方法分析灵敏度为0.01mIU/L,批内变异系数为2.01%～5.40%,批间变异系数为2.96%～17.9%,回收率为90.6%～114.4%,高值促甲状腺激素血清样品经系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性关系,相关系数大于0.99,与原子高科TSH免疫放射分析方法和罗氏电化学发光分析法的测定值具有良好的相关性。结论生物素-亲和素TSH酶促化学发光免疫分析方法具有成本低、灵敏度高、特异性高和稳定性好的特点,具有广阔的应用前景。