肝细胞癌组织GRIM-19和STAT3蛋白的表达

目的 探讨干扰素/维甲酸联合应用诱导的细胞凋亡相关基因19(GRIM-19)和信号转到子与转录激活子3(STAT3)蛋白在肝细胞癌中的表达、相互关系及在肝细胞癌发生发展中的意义.方法 应用免疫组化方法检测GRIM-19和STAT3在31例肝细胞癌组织和癌周肝组织、20例肝硬化组织及10例正常肝组织的表达水平.结果 肝硬...     

应用组织芯片检测Pin1在肝炎、肝硬化、肝细胞性肝癌组织中的表达

目的:利用组织芯片技术检测肽基脯氨酰顺反异构酶(Peptidlyl-proplyl isomerase 1,pin1)在正常、肝炎、肝硬化及肝癌组织中的表达,了解pin1在肝细胞性肝癌发生、发展不同阶段的表达情况及与临床病理参数的关系.方法:用免疫组织化学染色法在组织芯片上同时检测10例HBsAg阳性病毒性肝炎、40例肝硬化、19例肝细胞性肝癌及34例正常肝组织中pin1的表达情况,并分析pin1在不同肝脏疾病组织中的表达差异.结果:pin1在HBsAg阳性病毒性肝炎、肝硬化、肝细胞性肝癌及正常肝组织中的阳性表达率分别为80%(8/10)、82.5%(33/40)、100%(19/19)、55.8%(19/34),肝细胞性肝癌组织中的阳性表达率明显高于HBsAg阳性病毒性肝炎、肝硬化及正常肝组织,同时肝癌中pin1的表达强度也明显高于HBsAg阳性病毒性肝炎、肝硬化和正常肝组织(P<0.001),而在HBsAg阳性病毒性肝炎、肝硬化和正常肝组织中:pin1阳性表达率及表达强度均无差异无统计学意义(P>0.001);肝细胞性肝癌组织中pin1的表达与病理分级、有无淋巴结转移及临床分期无相关性(P>0.05).结论:pin1参与了HBsAg阳性病毒性肝炎,肝硬化到肝细胞性肝癌的疾病进展过程,在肝细胞性肝癌的发生和发展中发挥了一定作用.     

肝细胞癌和慢性肝病组织中p27kip1基因表达及甲基化分析

目的研究肝细胞癌和慢性肝病中细胞周期调控因子p27kip1的表达和甲基化的关系.方法应用免疫组织化学、原位分子杂交技术分别检测正常肝组织、肝硬化、癌周肝硬化和肝细胞癌共68例标本中P27蛋白和p27mRNA的表达.应用甲基化特异性PCR技术检测正常肝组织、肝硬化和肝细胞癌共44例标本中p27基因甲基化情况.结果P27蛋白阳性率在正常肝组织(66.7%,4/6)、肝硬化(60.0%,6/10)和癌周肝硬化(50.0%,12/24)各组间差异没有统计学意义(P>0.05),p27mRNA阳性率在正常肝组织(83.3%,5/6)、肝硬化(70.0%,7/10)和癌周肝硬化(75.0%,18/24)各组间差异也没有统计学意义(P>0.05),但肝细胞癌组P27蛋白(21.4%,6/28)和mRNA(25.0%,7/28)的阳性率与各组比较均显著下降(P<0.05).P27蛋白阳性信号在正常肝组织和肝硬化组主要定位于胞核,而癌周肝硬化组和肝细胞癌组主要定位于胞浆.正常组与肝硬化合并组P27蛋白和p27mRNA表达具有相关性,癌周肝硬化组和肝细胞癌组P27蛋白与p27mRNA表达不具有相关性.44例样本中检出1例肝细胞癌的p27基因发生甲基化,其蛋白和mRNA表达均呈阴性.结论P27蛋白及p27mRNA表达下降或缺失可能参与了肝细胞癌的发生和发展,p27基因甲基化可能导致p27mRNA的失转录.     

膀胱癌组织中GRIM-19及其靶基因产物STAT3的表达及其相关性的研究

目的:研究GRIM-19及其靶基因产物STAT3在膀胱癌组织中的表达情况及其相关性.方法:采用Westernblot方法分别检测50例膀胱癌患者膀胱癌、癌旁组织及正常膀胱组织中GRIM-19及其靶基因产物STAT3的表达情况.结果:显示GRIM-19、STAT3膀胱癌、癌旁组织中的表达与正常膀胱组织比较差异有统计学意义(P＜0.01),膀胱癌、癌旁组织中的表达比较差异有统计学意义(P＜0.05).GRIM-19、STAT3膀胱癌、癌旁组织中的表达呈负相关.结论:GRIM-19、STAT3在膀胱癌、癌旁组织及正常膀胱组织均表达,二者表达在膀胱癌、癌旁组织及正常膀胱组织中有差异,GRIM-19、STAT3可以作为膀胱癌的早期诊断及判定预后的指标.     

骨形态发生蛋白7在慢性HBV感染者肝组织中的表达

 目的]通过对不同慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者肝组织中骨形态发生蛋白7（BMP-7）表达的分析,初步探讨BMP-7在肝脏炎症和肝细胞再生过程中可能发挥的作用。[方法]对56例慢性HBV感染者及5例正常对照肝组织进行常规组织学观察,按病理诊断分组。其中病毒性肝炎乙型慢性轻度12例,中度12例,重度6例,重型8例,乙肝肝硬化10例,肝癌8例。进行BMP-7的免疫组织化学染色,观察光镜下分布特点,取部分标本进行图像分析。取8例肝癌患者癌结节及3例癌旁组织进行实时荧光定量RT-PCR,检测BMP-7mRNA的表达。[结果]BMP-7阳性单位在正常人肝脏（7.27±2.88）、病毒性肝炎（乙型）慢性轻度（8.50±3.22）、中度（10.96±2.88）、重度（13.11±1.26）有逐渐增加趋势,重型肝炎（7.50±1.21）、肝硬化（8.24±1.79）较中度、重度低;进一步比较BMP-7阳性区灰度有相似结果（P值均小于0.01）。BMP-7在肝脏既有胞浆型表达,也有胞膜型表达。在慢性中度、重度患者及肝硬化结节内为弥漫性表达;但在重型肝炎患者,仅呈灶状表达;在癌周组织有弥漫或灶状表达,在癌结节表达极少。[结论]在慢性乙型肝炎患者肝组织中BMP-7表达增多,但是在重型肝炎肝组织及肝癌结节中表达减少,值得进一步研究。     

细胞死亡调节因子GRIM-19蛋白在肾脏透明细胞癌组织中的表达及意义

目的：探讨细胞死亡调节因子（GRIM-19）蛋白在肾脏透明细胞癌组织和正常肾组织中的表达及意义,阐明GRIM-19在肾脏透明细胞癌发生发展中的抑癌作用。方法： 采用免疫组织化学染色方法检测21例肾脏透明细胞癌组织和7例正常肾组织GRIM-19蛋白的表达;RT-PCR方法检测4例正常肾组织和8例肾脏透明细胞癌组织中GRIM-19基因mRNA的表达。结果： 免疫组化检测GRIM-19蛋白在肾脏透明细胞癌组织中阳性表达率为52.3%（11/21）,在正常肾脏组织的阳性表达率为100%（7/7）,两者比较差异有显著性（P<0.05）。病理分级Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级的肾脏透明癌组织中的表达率分别为100%（6/6）、40%（4/10）和20%（1/5）,三种病理分级GRIM-19表达率比较差异有显著性（P<0.01）。RT-PCR检测GRIM-19基因在肾脏透明细胞癌组织中阳性表达率为62.5%（5/8）,在正常肾脏组织的阳性表达率为100%（4/4）,两者比较差异有显著性（P<0.01）。结论：GRIM-19在肾脏透明细胞癌基因和蛋白水平表达明显下降,并与其病理分级存在明显的关联性,提示GRIM-19蛋白可能在肾脏透明细胞癌发生发展中发挥抑癌作用。     

BMP5在乙型肝炎中的表达及其作用

目的 探讨骨形态发生蛋白5在乙型病毒性肝炎中的表达及其作用.方法 分别选择正常对照9例,乙型病毒性肝炎20例,肝硬化22例,原发性肝细胞肝癌28例作为研究对象.应用酶联免疫吸附法测定4组血清中BMP5的浓度.结果 与正常对照组比较,乙型病毒性肝炎组的BMP5浓度升高(195.350 pg/ml vs 137.011 pg/ml,P＜0.05);肝硬化组的BMP5浓度升高(138.830 pg/ml vs 137.011 pg/ml),但差异没有统计学意义(P＞0.05);原发性肝细胞肝癌的BMP5的浓度降低(107.097 pg/ml vs 137.011 pg/ml,P＜0.05).结论 在乙型病毒性肝炎中BMP5表达增加可能是促进肝细胞凋亡的一个因素.     

DLK1在肝癌和相关慢性肝病组织中的表达

目的探讨DLK1基因在肝癌和相关慢性肝病组织中的表达情况,寻找新的肝癌标志物.方法采用免疫组化S-P法检测正常肝组织(Norma)l、中度慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)、癌周肝硬化(PC)和肝细胞癌(HCC)共95例标本中AFP和DLK1的表达;应用原位杂交方法检测癌周肝硬化、肝细胞癌组织共45例标本中DLK1 mRNA和AFP mRNA的表达.结果 AFP蛋白和DLK1蛋白在正常肝组、慢性肝炎组和肝硬化组均不表达,在癌周肝硬化组阳性表达率为27.9%和23.3%,在肝癌组为46.7%和51.1%,肝癌组AFP蛋白阴性病例中仍有22.73%的DLK1蛋白阳性表达.肝癌组与癌周肝硬化组比较,差异有统计学意义(P<0.05),癌周肝硬化组AFP蛋白表达与DLK1蛋白表达之间具有相关性.AFP mRNA和DLK1 mRNA阳性表达率在癌周肝硬化组为23.3%和41.9%,在肝癌组为40%和31.1%.DLK1 mRNA阳性表达率在癌周肝硬化组和肝癌组差异无统计学意义(P>0.05).结论 AFP联合检测DLK1蛋白可提高肝癌的检出率,DLK1蛋白可作为肝癌诊断候选标志物;癌周肝硬不同于不伴癌的肝硬化而具有癌前病变性质.     

原发性肝细胞癌癌组织中p33ING1b与p53基因的表达

目的研究p33ING1b与p53蛋白在原发性肝细胞癌中表达的相关性及ING1b基因在原发性肝细胞癌中的突变率.方法应用免疫组织化学SP方法检测了57例原发性肝细胞癌癌组织、51例癌旁肝组织及12例正常肝组织中p33ING1b和p53蛋白的表达,并分析了原发性肝细胞癌癌组织中乙肝病毒(HBV)的感染率;应用聚合酶链式反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测了28例配对癌及癌旁肝组织中ING1b基因两个外显子的突变情况,对有异常泳动条带的DNA片段分别克隆测序.结果在57例原发性肝细胞癌癌组织中,p33ING1b、p53蛋白的阳性率分别为42.1%和57.9%,p33ING1b、p53表达均呈阳性者有19例(33.3%),且两者在癌组织中阳性分布区域相同;p33ING1b蛋白表达与p53蛋白表达在癌组织中呈显著正相关(r=0.783, P<0.01);配对癌旁肝组织及正常肝组织中p53蛋白表达均为阴性,p33ING1b蛋白在13例癌旁肝组织及2例正常肝组织中呈弱阳性表达;在57例原发性肝癌组织中有35例(61.4%)HBV X蛋白呈阳性,其病理类型均为肝细胞肝癌,在51例癌旁肝组织中检出HBV X蛋白阳性者39例(76.47%),癌组织中HBV感染与p33ING1b、p53蛋白表达均有关(P<0.01);PCR-SSCP结果表明,ING1b基因在原发性肝细胞癌中突变率较低为7.1%(2/28).结论 p33ING1b、p53蛋白在原发性肝细胞癌中的表达呈显著正相关,p33ING1b的存在可能还有其他不依赖p53蛋白的途径;HBV感染与p33ING1b、p53蛋白表达均有关;基因突变不是p33ING1b丧失抑癌功能的主要因素.     

NF-κBp65在肝癌血管生成中的作用

目的本实验通过对肝细胞癌(HCC)组织、癌旁组织、肝硬化组织及正常肝组织中NF-κBp65蛋白表达和微血管密度(MVD)进行检测,探讨NF-κBp65的蛋白表达与HCC新生血管生成的关系,初步阐述NF-κBp65在HCC血管生成中的机制。方法选用45例肝细胞癌组织和32例癌旁肝组织、15例肝硬化组织、10例正常肝组织标本作对照,采用免疫组化法(SABC)检测NF-κBp65的表达和MVD值,并结合患者的临床病理指标进行统计学分析。结果NF-κBp65在HCC中的表达及MVD值显著高于癌旁肝组织、肝硬化组织和正常肝组织(P<0.05);HCC组织中NF-κBp65阳性表达组显著高于阴性表达组(P<0.05);血管侵犯组显著高于无血管侵犯组(P<0.05)。结论NF-κBp65在HCC组织中的表达高于癌旁肝组织、肝硬化组织和正常肝组织;HCC中NF-κBp65的表达与肝癌血管生成有关。     

非小细胞肺癌GRIM-19和STAT3的表达及临床意义

目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）GRIM-19和STAT3蛋白的表达及与临床病理因素的关系。方法：应用免疫组化ABC法检测GRIM-19和STAT3在49例NSCLC及20例正常肺组织中的表达。结果：NSCLC中GRIM-19和STAT3的阳性率分别为55.1%（27/49）和65.3%（32/49）,正常肺组织中表达阳性率分别为95%（19/20）和0%（0/20）,NSCLC与正常肺组织比较差异有显著性（P〈0.01）。GRIM-19的阳性表达与肿瘤组织的临床分期有关,Ⅰ-Ⅱ期的表达明显高于Ⅲ＋Ⅳ期（P〈0.05）;STAT3的阳性表达与肿瘤组织的临床分期及是否有淋巴结转移有关,Ⅰ期、无淋巴结转移分别低于Ⅱ期、Ⅲ＋Ⅳ期和有淋巴结转移者（P〈0.05）。NSCLC中GRIM-19和STAT3的表达呈显著负相关（r=-0.647,P〈0.05）。结论：NSCLC中GRIM-19低表达与STAT3高表达共存,通过提高GRIM-19的表达抑制或阻断STAT3信号转导通路或能成为治疗肺癌的新途径。     

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在原发性肝癌组织中表达的初步研究

目的 以原发性肝癌患者 （未发生临床远处转移）为研究对象,对半胱氨酸蛋白酶抑制剂C （cystatin C）在原发性肝癌组织中的表达做初步研究。方法 建立原发性肝癌组(n=41)、肝硬化组(n=24)和正常健康对照组(n=40)。比较肝癌组 （癌组织、癌旁组织、远癌组织）与肝硬化组肝组织中cystatin C的表达,比较各组外周血中cystatin C的水平,并同时进一步就癌组织cystatin C表达强度与肿瘤大小、肝内转移情况,及血清甲胎蛋白(AFP)水平做相关性分析。结果 原发性肝癌所有癌组织切片中cystatin C表达均呈阳性反应。部分癌旁组织、远癌组织和肝硬化组织切片中有不同程度cystatin C表达。秩和检验结果显示,肝组织中各组cystatin C表达差异具有统计学意义 （P<0.01）,cystatin C在肝组织中阳性细胞比例、染色强度和以上两者乘积的表达均为:肝癌组织＞癌旁组织＞肝硬化组织＞远癌组织。血清cystatin C水平比较显示,原发性肝癌组与肝硬化组均高于正常健康对照组,差异具有统计学意义 （P<0.001）,而肝癌组与肝硬化组之间差异无统计学意义 （P=0.769）。相关性分析显示,肝癌组织中cystatin C表达程度 （阳性细胞比例分值,染色强度分值）同血清AFP水平、肿瘤大小、肝内转移情况无特殊相关。结论 在未发生远处转移的原发性肝癌患者,癌组织中cystatin C表达增强,高于癌旁组织、肝硬化组织及远癌组织,同时血清中cystatin C水平也高于正常健康对照。因此检测组织或血中cystatin C表达水平对判断原发性肝癌不同的疾病阶段具有一定意义。     

GRIM-19及其靶基因产物STAT3与肺癌相关性的研究

目的观察干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(GRIM-19)蛋白及其靶基因产物转录信号转导子与激活子3(STAT3)蛋白在肺癌组织和癌旁组织中的表达,探讨GRIM-19及其靶基因产物STAT3在肺癌发生、发展中的作用。方法用Western blot方法检测37例人肺癌及其癌旁组织中GRIM-19蛋白、STAT3蛋白水平的表达,对两组蛋白的表达与相关临床病理特征进行统计学分析。结果①在肺癌组织中GRIM-19蛋白表达明显低于癌旁组织(P<0.01),而STAT3蛋白表达则高于癌旁组织(P<0.01),且GRIM-19与STAT3在肺癌组织中的表达呈负相关(r=-0.327;P<0.05)。②GRIM-19蛋白表达水平与肺癌临床分期相关(P<0.05),而STAT3蛋白表达水平则与肺癌临床分期(P<0.05)及是否有淋巴结转移相关(P<0.05),两者均与患者性别、年龄、组织分型、吸烟指数之间无关联(P>0.05)。结论GRIM-19和STAT3蛋白在肺癌组织中有表达,并与临床分期相关,提示GRIM-19作为一个新的细胞凋亡促进基因,在肺癌的发生发展过程中可能发挥着重要的作用。     

GRIM-19及其靶基因产物STAT3在十二指肠癌中的表达及其意义

目的:研究干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因-19(GRIM-19)及其靶基因产物信号转导和转录活化因子3 (STAT3)在十二指肠癌中的表达,探讨其在十二指肠癌发生和发展中的作用.方法:32例十二指肠癌组织和30例十二指肠炎及溃疡对照组织,采用免疫组织化学方法检测其GRIM-19及STAT3蛋白表达情况.结果...     

Plk1在肝癌组织中表达及意义

目的:探讨Plk1在原发性肝细胞性肝癌中的表达及其意义。方法:用半定量RT-PCR、Western blot的方法检测21例原发性肝细胞性肝癌中Plk1的表达情况,并分析其与肝癌临床病理因素的关系。同时取肝硬化及正常肝组织各7例做对照。结果:肝癌组织中Plk1mRNA表达比值(Plk1/β-actin)为0.572±0.144,明显高于肝硬化组织中的0.250±0.057和正常肝组织的0.218±0.073(P<0.01)。Plk1 mRNA表达水平在肿瘤直径大于5 cm组中为0.641±0.110,而在肿瘤直径小于5 cm组中为0.458±0.120,两组之间比较有统计学差异(P<0.01)。其在有门静脉癌栓患者中的表达为0.652±0.107,明显高于无门静脉癌栓者中的表达0.522±0.144(P<0.05)。而与有无包膜,肿瘤病理分级和AFP阳性与否无明显相关。肝癌组织Plk1蛋白表达明显高于肝硬化及正常肝组织中的Plk1蛋白表达量。结论:原发性肝癌组织中Plk1mRNA及蛋白表达均明显增加;Plk1的表达高低与原发性肝癌的肿瘤直径大小及脉管侵犯有明显相关,提示其在肝癌生长及侵袭中发挥重要作用,为进一步研究肝癌的生长侵袭机制提供了思路。     

GRIM-19及其靶基因产物STAT3在胃癌组织中的表达及其意义

目的:探讨维甲酸-干扰素诱导死亡相关基因-19(GRIM-19)及其靶基因产物STAT3在胃癌组织中的表达及其临床意义,阐明其在胃癌发生和发展过程中的作用.方法:应用 RT- PCR、免疫组织化学染色法和Western blotting法检测48例胃癌组织、癌旁组织及正常胃组织中GRIM-19和STAT3的mRNA及蛋...     

IMP3与IGF2在乙肝相关性肝癌组织中表达及与临床病理特征的关系

目的:研究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IMP3)与胰岛素样生长因子2(IGF2)在乙肝相关性肝癌中的表达,并探讨二者的相关性及与乙肝相关性肝癌临床病理特征的关系?方法:采用免疫组织化学法,检测82例乙肝相关性肝癌组织及对应癌旁组织中IMP3及IGF2的表达;采用实时定量聚合酶链式反应法检测32例冰冻肝癌组织中IMP3及IGF2 mRNA含量;采用蛋白质印迹法检测4例IMP3强阳性染色及4例IMP3阴性染色对应的新鲜冰冻肝癌组织中IMP3及IGF2蛋白含量?结果:IMP3在62.2%肝癌组织中表达,在癌旁组织中不表达?IGF2在59.8%肝癌组织及14.6%癌旁组织中表达?同时,IMP3与IGF2在乙肝相关性肝癌组织中表达密切相关(rn = 0.335,P = 0.002)?另外,IMP3高表达与Edmondson-Steiner 3~4级(P = 0.001)?TNM 3~4期(P = 0.001)?α-甲胎蛋白(AFP)> 200 ng/ml (P = 0.012)及伴有门脉癌栓的肿瘤(P = 0.018)均密切相关;与IMP3表达相似,IGF2高表达亦与Edmondson-Steiner 3~4级(P = 0.001)?TNM 3~4期(P < 0.001)及伴有门脉癌栓的肿瘤(P < 0.001)密切相关?结论:IMP3与IGF2在乙肝相关性肝癌组织中表达密切相关,同时,IMP3与IGF2蛋白分子的检测有助于判断肿瘤恶性分化程度及进展?     

GRIM-19在子宫腺肌病中的表达及促进疾病发展的机制研究

目的 研究诱导细胞凋亡相关基因-19(GRIM-19)在子宫腺肌病患者子宫内膜组织中的表达水平,并探讨其在疾病发生发展中的分子机制.方法 取30例子宫腺肌病患者异位和在位内膜组织,采用免疫组织化学和Western blot检测内膜组织中GRIM-19、磷酸化信号转导及转录激活蛋白3(pSTAT3)和内皮生长因子(VEGF)的表达水平.采用TUNEL检测内膜组织凋亡,CD34抗体直接检测内膜组织新生血管形成.构建GRIM-19 siRNA和重组质粒,转染Ishikawa细胞后检测下游信号分子pSTAT3、信号转导和转录激活因子3(STAT3)和VEGF的变化.结果 与对照组相比,子宫腺肌病患者在位内膜和异位内膜组织中GRIM-19表达水平降低.在位内膜和异位内膜组织中细胞凋亡减少,微血管密度、pSTAT3和VEGF表达水平升高.转染Ishikawa细胞,下调GRIM-19表达可显著激活pSTAT3和VEGF.结论 GRIM-19通过抑制细胞凋亡和增加新生血管形成,促进子宫腺肌病的发生发展.