缬沙坦对糖尿病大鼠心肌血小板源生长因子-B的表达及心肌纤维化的影响

目的 探讨缬沙坦对糖尿病(DM)大鼠心肌血小板源生长因子-B(PDGF-B)表达及心肌纤维化的影响.方法 32只大鼠分为对照组、DM未治疗组、缬沙坦小剂量治疗组(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))、缬沙坦大剂量治疗组(30 mg·kg~(-1)·d~(-1));12 w后放免法测定血浆和心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)浓度;称量体重及全心、左室重量,计算心体比(H/B)和左室重量指数(LVMI);天狼星红染色测量心肌间质的胶原容积分数(CVF). RT-PCR检测各组心肌PDGF-B、纤维连接蛋白(FN)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)的mRNA表达情况.结果 DM未治疗组H/B、LVMI增高(P＜0.01);PDGF-B、FN和ColⅢ mRNA表达显著上调;缬沙坦干预12 w后,血浆和心肌 AngⅡ浓度升高;H/B、LVMI降低(P＜0.05或P＜0.01),DM心肌中FN、ColⅢ mRNA的表达减少,心肌间质CVF降低(均P<0.01);大小剂量治疗组可以减少DM心肌PDGF-B mRNA的表达(P<0.01).以上效应具有剂量依赖性.结论 DM大鼠心肌PDGF-B表达明显上调.缬沙坦能减少DM大鼠心肌细胞外基质(ECM)积聚,改善心肌结构,PDGF-B表达下调可能是缬沙坦抑制DM心肌纤维化的心脏保护作用机制之一.     

糖尿病大鼠视网膜中核因子-kB活性与血小板源生长因子-B表达的意义

糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见的微血管病变，是成人致盲的常见原因。DR的发病机制尚不完全清楚，近年的研究表明，血小板源生长因子-B（PDGF-B）在增殖期糖尿病视网膜病变（PDR）的玻璃体和视网膜上表达显著增高，参与了PDR的病理改变。NF-kB是一种重要的核转录因子，文献显示PDGF-B可以作为NF-kB的下游物质接受后者的调控。我们前期的研究提示，     

丝胶对糖尿病大鼠肾脏血小板衍生生长因子表达的调控作用

目的观察丝胶对2型糖尿病大鼠肾脏血小板衍生生长因子(PDGF)表达的调控作用。方法健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组(n=12)。链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,丝胶治疗组大鼠按照2.4 g·kg~(-1)·d~(-1)的剂量灌胃给予丝胶、阳性对照组大鼠按照55.33 mg·kg~(-1)·d~(-1)的剂量灌胃给予二甲双胍。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清Ⅰ型胶原的含量;Western印迹和RT-PCR法检测各组大鼠肾脏PDGF蛋白和mRNA的表达。结果丝胶治疗组较糖尿病模型组血清Ⅰ型胶原的含量、肾脏PDGF蛋白和mRNA的表达明显降低(P0.01,P0.05)。结论丝胶可通过下调糖尿病大鼠肾脏PDGF的表达,恢复肾脏细胞外基质代谢的平衡,从而发挥对糖尿病肾脏损伤的保护作用。     

血小板源性生长因子及受体与心肌纤维化相关性研究

心肌纤维化(myocardial fibrosis, MF)是心肌组织中胶原合成和降解代谢失衡的结果,以细胞外基质在心肌中过度沉积为特点。心肌纤维化发生机制复杂,肾素-血管紧张素-醛固酮系统、内皮素、缓激肽及细胞因子等均参与其调控过程。血小板源性生长因子作为细胞因子之一与其受体形成通路,诱导胶原的合成与增殖,与心肌纤维化的发生发展密切相关。     

血小板源性生长因子与肾脏纤维化相关性的研究进展

肾脏纤维化是在多种致病因子作用下,肾间质细胞及细胞基质增多,基质降解受抑制而造成细胞外基质(ECM)大量堆积,最终导致的肾小球硬化和肾小管间质纤维化.肾脏纤维化是各种肾脏疾病进展至终末期肾病的共同途径及主要病理基础,是由多种因素共同作用的结果,其中细胞因子包括血小板源性生长因子(PD GF)、转化生长因子(TGF)-β、结缔组织生长因子(CTGF)等在其中发挥重要作用.     

血小板衍化生长因子B在糖尿病大鼠肾皮质中的表达

本研究以半定量RT-PCR法测定了糖尿病及对照Wistar大鼠肾皮质血小板衍化生长因子B(PDGFB)mRNA水平,发现糖尿病大鼠为对照组2.5倍,提示PDGFB在糖尿病肾病中起一定作用。     

氟伐他汀对糖尿病大鼠心肌结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨氟伐他汀对糖尿病大鼠心肌结缔组织生长因子（CTGF）表达的效应及意义。方法32只大鼠分为对照组、糖尿病未治疗组、氟伐他汀小剂量治疗组及氟伐他汀大剂量治疗组，12周后称重并计算心体比（H／B）和左室重量指数（LVMI），RT-PCR检测各组心肌CTGF、纤维连接蛋白（FN）、Ⅲ型胶原（ColⅢ）、TGF-β1的表达。结果糖尿病未治疗组H／B、LVMI增高;CTGF、TGF-β1、FN和ColⅢ的mRNA表达显著上调。氟伐他汀治疗能降低H／B、LVMI（P〈0．05～0．01）；减少糖尿病心肌CTGF、TGF-β1、FN和ColⅢ的mRNA表达（均P〈0．01），下调CTGF比TGF-β1显著。以上效应具有剂量依赖性。结论氟伐他汀可抑制糖尿病大鼠心肌细胞外基质积聚，CTGF表达下调可能是其心脏保护的作用机制之一。     

转化生长因子β1在糖尿病大鼠心肌中的表达及福辛普利的干预

目的 研究转化生长因子β_1(TGF-β_1)在糖尿病大鼠心肌中的表达及福辛普利(Fosino-pril)的干预作用。方法 大鼠20只建立糖尿病模型后,随机分为福辛普利治疗组及糖尿病未治疗组,每组10只,用免疫组织化学法检测糖尿病大鼠心肌TGF-β_1的表达及用福辛普利治疗后的变化,并与正常组对照。结果 正常组心肌细胞胞浆内,TGF-β_1表达呈弱阳性反应;糖尿病未治疗组呈强阳性反应;福辛普利治疗组呈阳性反应。用图像分析仪计算其平均吸光度A值分别为0.009±0.004、0.198±0.007及0.104±0.005。未治疗组TGF-β_1的表达明显高于正常组及治疗组(P<0.01)。结论 TGF-β_1在糖尿病大鼠心肌中的表达明显增强,而福辛普利能在一定程度上抑制其表达从而可能延缓糖尿病性心肌病的病理学进展。     

基质细胞衍生因子-1α及其受体在糖尿病大鼠心肌病变中的表达及意义

目的观察糖尿病大鼠心肌病变与基质细胞衍生因子-1α（SDF-1α）及其受体（CXCR-4）的关系。方法以链脲佐菌素（STZ）诱导建立糖尿病大鼠模型。随机分为1个月病程组（M1组）、3个月病程组（M3组）、5个月病程组（M5组）。心肌切片后行SDF-1α,CXCR-4及血管内皮生长因子（VEGF）免疫组化,抗vWF抗体染色心肌微血管计数,半定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测SDF-1α,CXCR-4及VEGFmRNA在大鼠心肌中的表达水平。结果随着病程的延长,心肌组织中SDF-1α,CXCR-4表达水平逐渐增高,与正常对照组相比,造模后1个月就有增高,5个月时增高最明显,而心肌组织中VEGF表达无明显改变;心肌微血管计数显示造模后5个月心肌内微血管数量明显减少。结论糖尿病心肌病变时SDF-1α/CXCR-4在心肌中的表达水平随糖尿病病程延长逐步增高,而VEGF表达无明显改变,糖尿病心肌病变时微血管减少可能与VEGF表达不足有关。     

结缔组织生长因子在自发性高血压大鼠肾脏的表达及意义

为了研究结缔组织生长因子在自发性高血压大鼠肾脏中的表达及其与高血压肾损害的关系 ,以同龄雄性WKY大鼠和自发性高血压大鼠为研究对象 ,测量 12周和 32周时尾动脉压、肾功能和尿 β2微球蛋白 ,并用免疫组织化学法检测结缔组织生长因子在肾脏中的表达。结果发现 ,与同龄WKY大鼠比较 ,自发性高血压大鼠的尿素氮和血肌酐的差异无显著性统计学意义 ,而尾动脉压明显增高 (12周时前者为 138± 17mmHg ,后者为 16 9± 6mmHg ,P <0 .0 1;32周时前者为 133.4± 14 .2mmHg ,后者为 185 .7± 12 .3mmHg ,P <0 .0 1) ;尿β2微球蛋白也显著增高 (12周时前者为 4 8.1± 9.3ng/L ,后者为 76 .4± 11.2ng/L ,P <0 .0 5 ;32周时前者为 6 1.5± 14 .7ng/L ,后者为 135 .2± 2 7.6ng/L ,P <0 .0 5 ) ,且在自发性高血压大鼠组 ,32周龄大鼠的尿 β2微球蛋白也比 12周龄的明显增加 (P <0 .0 5 )。免疫组织化学半定量检测发现 ,自发性高血压大鼠组肾脏中结缔组织生长因子的表达相对与同龄WKY大鼠明显升高 (12周时前者为 0 .4 9± 0 .0 7,后者为 0 .2 8± 0 .0 5 ,P <0 .0 5 ;32周时前者为 0 .81± 0 .0 8,后者为 0 .32± 0 .0 4 ,P <0 .0 1)。同样在自发性高血压大鼠组 ,结缔组织生长因子在 32周龄大鼠肾脏的表达也比 12周龄     

血管紧张素受体拮抗剂缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

探讨血管紧张素受体拮抗缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法将实验动物分为正常对照组,糖尿病组及缬沙坦疗组。检测各组第２、４、８周的平均动脉压,血糖、血胰岛素,血肌酐、尿白蛋白、肾组织血管紧张素转换酶活性、血管紧张素Ⅱ含量及肾脏肥大指标的变化。     

血小板衍生生长因子在胃癌中表达的临床意义

目的：研究血小板衍化生长因子（PDGF－A）在胃癌中表达的临床意义。方法：应用免疫组织化学和分子原位杂交方法检测有随访资料的101例胃癌手术切除标本中的PDGF－A蛋白及mRNA表达。结果：在101例胃癌手术切除标本中PDGF－A阳性表达者43例（42．57％）。有淋巴结转移者（65．12％）明显高于无淋巴结转移者（30．61％）（P＜0．05）；脉管内有癌栓者（64．52％）明显高于无癌栓者（32．86％）（P＜0．01）；癌组织浸及粘及粘膜下，肌层、浆膜下及浆膜者分别为13．04％、37．04％、58．82％，三者间比较，差异有显著性（P＜0．01）。PDGF－A阳性表达者5年及10年生存率分别为60．34％和47．28％，低于阴性表达者5年及10年生存率（73．55％，56．19％）。说明PDGF－A阳性表达者预后较差，阴性表达者预后较好。癌组织PDGF－A阳性表达的病例，间质中浆细胞和树突状细胞阳性表达者5年生存率分别为54．81％和74．40％，明显高于阴性表达者5年生存率（36．30％、29．74％），（说明PDGF－A在浆细胞和树突状细胞阳性表达者预后后经阴性者好。PDGF－AmRNA表达（61．54％）与PDGF－A蛋白表达（42．57％）一致）。结论：PDGF－A阳性的胃癌恶性度高、易转移、预后差，而胃癌间质中浆细胞和树突状细胞PDGF－A阳性表达者的胃癌预后较好。PDGF－A参与肿瘤免疫调节，可作为判断胃癌预后的指标之一。     

转化生长因子βⅡ型受体在糖尿病大鼠血管损伤后的表达及氯沙坦对其调节作用

目的　观察转化生长因子 βⅡ型受体 (TGF βⅡR)在糖尿病鼠血管损伤后血管平滑肌细胞 (VSMCs)和血管壁中的表达及血管紧张素Ⅱ 1型受体拮抗剂氯沙坦对其调节作用。方法　 ( 1)Wistar大鼠单次腹腔注射链脲佐菌素成糖尿病模型后被随机分为糖尿病组和氯沙坦组 ,每组 8只。16只正常鼠随机分为正常对照组和手术对照组。除正常对照组外 ,全部动物均行胸主动脉至左髂总动脉球囊损伤 ,氯沙坦组用氯沙坦 2 0mg·kg- 1 ·d- 1 灌胃 ,余两组均用等量蒸馏水灌胃。 ( 2 )观察实验前、后各组血糖变化和测定动脉壁血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )含量。 ( 3)用RT PCR及Northern印迹杂交测定VSMCsTGF βⅡR和Ⅰα(Ⅳ )前胶原mRNA的表达。 ( 4)用免疫组化检测TGF βⅡR和Ⅰα(Ⅳ )前胶原在血管壁的表达。结果　 ( 1)与手术对照组相比 ,糖尿病组AngⅡ含量、TGF βⅡR和Ⅰα(Ⅳ )前胶原mRNA和蛋白水平表达均增高 (P <0 0 1) ,而手术对照组又明显高于正常对照组 (P <0 0 1)。 ( 2 )与手术对照组相比 ,氯沙坦治疗后可明显降低动脉壁AngⅡ含量 ,TGF βⅡR和Ⅰα(Ⅳ )前胶原mRNA、蛋白水平的表达分别被抑制达 6 0 %、5 7%、6 2 %、46 %。结论　糖尿病血管损伤后再狭窄的形成与TGF βⅡRmRNA和蛋白的过度表达有关 ,氯沙坦对其有抑制作     

粉防己碱对糖尿病大鼠心肌保护作用及机制的研究

目的研究粉防己碱对糖尿病(DM)大鼠心肌的保护作用及相关机制。方法36只W istar大鼠用链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病模型后,随机分为粉防己碱治疗组、苯那普利治疗组及糖尿病未治疗组,以10只正常大鼠作为对照。12 w末检测血糖、血脂、心肌组织血管紧张素Ⅱ,应用RT-PCR检测心肌结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGR)mRNA的表达水平。结果DM未治疗组心肌组织血管紧张素Ⅱ含量、CTGR mRNA的表达分别为(26.5±3.38)和(1.0±0.10),明显高于对照组和治疗组(P<0.01)。结论粉防己碱能在一定程度上降低心肌血管紧张素Ⅱ含量,抑制CTGF mRNA表达,从而可能减轻糖尿病性心肌病的病理变化。     

表皮生长因子纳米微粒对糖尿病大鼠皮肤创面愈合的影响

目的 观察表皮生长因子（EGF）纳米微粒对糖尿病大鼠皮肤创面的愈合作用,探讨EGF纳米微粒促进愈合的机制.方法 制备EGF纳米微粒,测定EGF纳米微粒载药率、包封率和释药行为.用打孔器制备糖尿病大鼠皮肤创面模型.分为4组：EGF纳米组（给予含1μg/d EGF的纳米微粒）,EGF组（给予1μg/d EGF）,空微粒组（给予不含EGF纳米微粒）,磷酸盐缓冲液（PBS）对照组,于3、7、14、21 d照相并取材,计算创面愈合率并比较创面病理学变化及EGF受体阳性细胞面积.结果 EGF纳米微粒平均粒径为193.5 nm,载药率为0.02％,包封率为85％.药物释放达24h.EGF纳米组创面愈合比EGF组快[14 d,（93.8±1.8）％比（89.3±2.3）％,P＜0.05;21 d（96.6±1.6）％比（92.1±4.3）％,P＜0.05].EGF纳米组创面内EGF受体阳性细胞面积高于EGF组[7d,（49.4±6.5）％比（35.1±2.8）％,P ＜0.05;14 d,（80.2±3.8）％比（73.4±1.7）％,P＜0.05].结论 EGF纳米微粒上调创面内细胞EGF受体表达,加速创面的愈合,效果优于EGF.     

胰岛素样生长因子-I对糖尿病大鼠心脏功能的影响

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实验性糖尿病肺细胞外基质免疫组织化学研究

目的 观察糖尿病４周大鼠肺细胞外基质的变化。方法 采用特殊染色,免疫组织化学方法和图像分析技术,了解肺细胞外基质变化。结果 糖尿病肺弹性纤维,胶原纤维和网状纤维增多,增粗;Ⅳ型胶原吾索状或丛状分布于肺泡隔,细支气管基底膜和毛细血管基底膜,图像分析表明,糖尿病肺弹性纤维,胶原纤维,网状纤维、Ⅳ型胶原和层粘连蛋白的着色面积,积分光密度和相对含量均高于对照组。结论 提示糖尿病早期已存在肺细胞外基质异常变     

血管内皮生长因子、血小板源性生长因子-BB与2型糖尿病患者血糖波动及微血管病变的关系

目的观察糖化血红蛋白（HbAlC）〈7．0％的2型糖尿病患者血糖波动与糖尿病微血管病变（视网膜病变、糖尿病肾病）及血清血管内皮生长因子（VEGF）、血小板源性生长因子-BB（PDGF—BB）水平之间的关系,探讨其在HbAlC达标患者中的相互影响机制。方法选取2010年10月至2012年8月在黑龙江省医院内分泌科就诊的2型糖尿病患者100例,其中男52例、女48例,年龄40～66岁。根据是否合并糖尿病微血管病变分为单纯2型糖尿病组[A组,n=30,男14例,女16例,年龄（50±11）岁],糖尿病肾病组[B组,n=38,男20例,女18例,年龄（52±10）岁]和糖尿病视网膜病变组[C组,n=32,男18例,女14例,年龄（53±13）岁]。另以同期于黑龙江省医院进行体检的25名健康者为正常对照组[Con组,n=25,男12例,女13例,年龄（48±9）岁]。人院前糖尿病患者均使用药物治疗。所有参试者均测定空腹血糖浓度（FPG）、总胆固醇（TC）、甘油i酯（TG）、低密度脂蛋白胆同醇（LDL—C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、餐后2h血糖浓度（2hPG）、24h尿微量白蛋白（24h尿ALB）和HbAlc。应用动态血糖监测系统连续监测血糖3d,计算平均血糖（MBG）、平均血糖标准差（SDBG）、平均血糖波动幅度（MAGE）、日内最大血糖波动幅度（LAGE）、日间血糖平均绝对差（MODD）和曲线下面积（AUC）。采用酶联免疫吸附法分别检测血清中VEGF和PDGF—BB水平。计量资料组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,糖尿病微血管并发症的影响因素采用logistic回归分析,PDGF．BB、VEGF相关因素采用多元线性回归分析。结果（1）B组PDGF—BB水平高于A组和Con组[分别为（53±12）、（31±6）、（26±4）μg／ml,F=9．56,P〈0．05];C组VEGF水平高于A组和Con组[分别为（217±57）、（105±12）、（74±10）μg／ml,F=8．13,P〈0．05]。（2）动态血糖监测指标B组与A组比较,SDBG、LAGF、MAGE、MODD、AUC明显升高（t=2．57、3．46、5．75、3．59、4．28,均P〈0．05）,C组与A组比较,SDBG、LAGF、MAGE、MODD、AUC明显升高（t=3．29、3．77、5．38、4．54、3．16,均P〈0．05）,而MBG在3组间的差异无统计学意义,均P〉0．05。（3）logistic回归分析显示PDGF-BB、VEGF及血糖波动是糖尿病微血管并发症独立危险因素。分别以PDGF-BB、VEGF为因变量,以血糖波动指标SDBG、LAGF、MAGE、MODD、AUC及2hPG为自变量,采用多元线性回归分析可能影响PDGF-BB、VEGF的相关因素,结果显示,MAGE、SDBG和2hPG对PDGF-BB、VEGF影响最大。结论2型糖尿病患者微血管病变的发生发展与血糖波动具有明显相关性,血糖波动可导致血清血管内皮生长因子和血小板源性生长因子-BB水平增高,从而参与糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病等微血管病变的进展。     

外源性牛初乳短链IGF-1治疗改善糖尿病大鼠GH/IGF-1轴的紊乱

目的　观察外源性牛初乳短链胰岛素样生长因子 - 1(BC- t IGF- 1)对糖尿病生长激素 GH/ IGF- 1轴的影响。方法　链脲佐菌素 (STZ) 5 5 mg/ kg空腹腹腔注射 (IP)制备糖尿病大鼠模型 ,随机分为糖尿病对照组 (DM- C,生理盐水0 .1ml/ d IP)和糖尿病治疗组 (DM- BC,BC- t IGF- 12 5 0 ng/ kg· d- 1 IP)。并设正常对照组 (NC) ,每组 n=5。治疗前测定尾尖血血糖 (BG0 ) ,治疗 6周后测定尾尖血血糖 (BG)、血清果糖胺 (FMN)、甘油三酯 (TG)、胆固醇 (CHO)、GH、IGF- 1和肝脏 IGF- 1含量。结果　与 NC相比 ,DM- C血清 FMN、TG明显升高同时血清 GH升高而血清和肝脏 IGF- 1降低 ;与DM- C相比 ,DM- BC血清 FMN、TG明显降低同时血清 GH降低而肝脏 IGF- 1显著升高。结论　外源性 BC- t IGF- 1治疗改善糖尿病大鼠代谢同时改善了糖尿病时的 GH/ IGF- 1轴的紊乱