生殖股神经离断对正常大鼠睾丸生精功能的影响

目的探讨生殖股神经离断对正常大鼠睾丸生精功能的影响。方法建立正常大鼠单侧生殖股神经离断模型（日龄35 d）,术后第60天观察正常大鼠GFN离断侧的睾丸及对侧睾丸的HIF-1α基因表达情况和生精细胞凋亡情况;测定大鼠睾丸组织中丙二醛（MDA）的含量与超氧化物歧化酶（SOD）的活性。结果正常大鼠离断生殖股神经后,该侧睾丸HIF-1α蛋白的表达量较对侧与假手术组明显升高（F=4796,P〈0.01）,生精细胞的凋亡显著增加（F=420,P〈0.01）,SOD活性较对侧与假手术组明显降低（F=76,P〈0.01）,MDA含量明显高于对侧与假手术组（F=113,P〈0.01）,而对侧睾丸与假手术组相比无统计学意义（P〉0.05）。结论生殖股神经能对正常睾丸进行神经血管和温度调节,从而影响睾丸的生精功能。     

雄激素受体敲除小鼠睾丸生精功能变化及p63的表达

目的 研究雄激素受体（AR）敲除小鼠睾丸生精功能及p63在曲细精管中表达的改变.方法 采用雄性Flox-AR小鼠与雌性ACTB-Cre小鼠交配,并敲除胚胎中AR,筛选AR敲除（AR敲除组）和AR未敲除（对照组）雄性小鼠各10只,对比睾丸曲细精管生精功能及p63的表达.结果 两组小鼠曲细精管内径、管周膜厚度、管壁生殖细胞层数、生殖细胞成熟度评分及总Makler评分之间差异均有统计学意义（P＜0.05）,p63的阳性表达主要位于精原细胞及精母细胞,精子细胞及成熟精子中表达呈阴性,且AR敲除组表达阳性率及HSCRE评分均显著低于对照组（P＜0.01）.结论 AR表达与小鼠睾丸曲细精管p63表达关系密切,AR敲除小鼠睾丸曲细精管生精功能受损、p63表达下调,p63调控生殖细胞的早期分化.     

基因重组细胞生长肽和精氨酸拮抗环孢霉素A的睾丸毒性

目的 探讨基因重组细胞生长肽（bFGF)和精氨酸对环孢霉素A（CsA)在血和睾丸中药物浓度及其睾丸毒性的影响。方法 将80只大鼠随机分为4组：N组,正常对照组;A组,CsA;B组,CsA 精氨酸;C组,CsA bFGF。每天腹腔注射给药,连续3周后取血及睾丸测定CsA浓度,按抗精子发生效应积分评定法作生精功能的评价,测定曲细精管直径及作病理学检查。结果 血药浓度B组明显高于A组（P＜0．05）;A,B,C组睾丸的发生明显障碍,而B,C组比A组的精子发生障碍要轻（P＜0．05）,曲细精管的直径A,B、C组明显小于N组（P＜）．05）,但B组大于A组（P＜0．01）。结论 CsA影响睾丸的生精功能,精氨酸和bFGF能明显降低CsA对睾丸的毒性作用,精氨酸还能提高血中CsA的浓度。     

局部注射6-OHDA对大鼠生精过程神经调节的探讨

本实验以交感神经化学切除剂6-羟多巴胺(6-OHDA)一次性行幼龄大鼠睾丸内注射,观察到睾丸生精上皮细胞数量减少,出现一些多核巨细胞,睾丸重量减轻。结果提示,精子发生及生精上皮的分化与儿茶酚胺能神经调节有关。     

亚慢性苯吸入暴露抑制小鼠单倍体精子核蛋白基因的表达

目的：探讨苯对小鼠精子生成损伤的主要阶段。方法：6～8周龄C57BL/6J雄性小鼠,按体质量随机分为3组,对照组、1 ppm和100 ppm苯暴露组,模拟职业暴露情况,实施每天8 h,每周5 d,共13周的亚慢性动式吸入染毒。HE染色观察睾丸组织病理学改变。选取精子发生中阶段特异性表达基因作为不同阶段精子的marker,选定的marker基因有代表未分化型精原细胞的Plzf,分化型精原细胞的Stra8,初级精母细胞的Sycp3,圆形精子的过渡蛋白Tnp1、Tnp2,长形精子的Akap4,以及鱼精蛋白Prm1、Prm2,采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测marker基因mRNA表达。结果：苯暴露组小鼠睾丸组织呈现嗜酸性染色增强,1 ppm组出现少量核溶解、细胞脱落等改变;100 ppm组小鼠睾丸生殖细胞变性、坏死明显增多,管腔中心无（或少）细胞的曲细精管数量明显增多,表明亚慢性苯暴露可引起小鼠睾丸的病理改变。苯暴露组Plzf、Stra8、Sycp3、Akap4 的mRNA表达均未显示统计学差别,而1 ppm组鱼精蛋白Prm2的mRNA表达显著降低（P＜0.01）;100 ppm组过渡蛋白Tnp1、Tnp2,鱼精蛋白Prm1、Prm2的mRNA表达均显著降低（P＜0.05）。结论：亚慢性苯吸入暴露可导致小鼠睾丸组织的病理改变,下调Tnps和Prms mRNA表达,主要影响单倍体精子细胞核内组蛋白被鱼精蛋白取代的过程。     

大鼠睾丸组织中ALR的研究

目的:研究大鼠睾丸组织中肝再生增强因子(ALR)的表达情况,探讨睾丸ALR与生殖的关系.方法:取幼年、成年、老年大鼠睾丸组织以及部分肝切除(PH)术前、术后12h、24h、48h大鼠肝脏、睾丸组织进行免疫组化,了解大鼠睾丸组织中ALR的表达.结果:睾丸组织中ALR广泛存在于间质细胞、支持细胞和生精细胞,其中尤以精原细胞、精母细胞表达最强.不同年龄段ALR的表达不一样,幼年最强、成年次之、老年最弱.70%PH后肝脏ALR表达增强,24h达峰值,睾丸组织中ALR表达无明显变化.结论:睾丸组织有较强ALR表达,不同脏器的ALR作用具有脏器特异性,ALR与睾丸的发育以及精子生成及成熟密切相关.     

抗卵泡刺激素自身抗体引起大鼠睾丸生精细胞凋亡

目的：研究抗卵泡刺激素（FSH）自身抗体大鼠模型睾丸生精功能低下的可能机制.方法：SD大鼠（21d龄,30只）,随机分为实验组和对照组,每组各15只.实验组用18肽-KLH免疫,对照组用KLH免疫,每隔2周加强免疫1次,共7次,直至实验结束.分别于免疫第77、91及105 d时心脏取血处死实验组和对照组大鼠各5只,收集血清.采用ELISA法检测模型大鼠血清FSH、黄体生成素（LH）和抑制素B水平,并以Rpl19为内参照,用荧光定量PCR法检测睾丸内Bax mRNA水平,同时用末端标记技术（TUNEL）检测睾丸生精细胞凋亡情况.结果：免疫后第77和91 d的实验组大鼠血清FSH水平显著低于对照组（P＜0.05）,免疫105 d后,实验组大鼠FSH水平有所回升.与对照组相比,实验组大鼠血清抑制素B水平均显著降低（P＜0.05）.血清LH水平在两组大鼠间无显著差异.免疫后第77、91及105 d的实验组大鼠睾丸内Bax mRNA水平,分别为对照组的2.15、3.77和1.89倍,TUNEL检测结果也显示实验组大鼠睾丸生精细胞凋亡指数显著高于对照组.结论：抗FSH自身抗体可能通过与FSH形成抗原抗体免疫复合物,以降低外周血中FSH浓度,进而激活Bax相关凋亡通路,诱导生精细胞凋亡,导致模型大鼠睾丸生精功能低下.     

Rad18打靶小鼠模型遗传稳定性分析

  目的探讨RAD18在维持遗传稳定性中的作用。方法对Rad18-/-小鼠模型进行生育力检测。观察不同月龄Rad18-/-雄小鼠睾丸质量、结构以及精子发生和形态的变化。结果Rad18-/-小鼠具有生育能力,但随着年龄增加睾丸质量和生育力下降。组织学检测显示Rad18-/-小鼠睾丸的生精小管有正常的精子发生,睾丸特异性tH2B分布正常。但在12月龄时,25%的生精小管中仅残留已分化的生殖细胞,缺失精原细胞,并且附睾中的精子形态无异常。结论含有精原干细胞的精原细胞耗尽导致了Rad18-/-小鼠随年龄增加而生育力下降。     

尼莫地平、精氨酸对环孢霉素A血药浓度和睾丸毒性的影响

目的 :研究尼莫地平和精氨酸对环孢素 A(Cs A)血药浓度和睾丸毒性的影响。方法 :将 80只大鼠分为 4组进行实验 :N组 ,正常对照组 ;A组 ,Cs A2 0 m g/ kg.d- 1 ;B组 ,Cs A2 0 mg/ kg· d- 1 +精氨酸 2 g/ kg· d- 1 ,C组 ,Cs A2 0 m g/ kg· d- 1+尼莫地平 40 0 μg/ kg· d- 1 。每天腹腔注射给药 ,连续 3周后取血及睾丸测定 Cs A浓度 ,按抗精子发生效应积分评定法作生精功能的评价 ,测定曲细精管直径及作病理学检查。结果 :血药浓度 B组明显高于 A组 (P <0 .0 5 ) ;A、B、 C三组睾丸的精子发生明显障碍 ,而 B、C组比 A组的精子发生障碍要轻 (P <0 .0 5 ) ,曲细精管的直径 A、B、C三组明显小于 N组 (P <0 .0 5 ) ,但 B组大于 A组 (P <0 .0 1)。结论 :Cs A影响睾丸的生精功能 ,精氨酸和尼莫地平能明显降低 Cs A对睾丸的毒性作用 ,而精氨酸能提高血中 Cs A的浓度     

绵羊在四季中生精规律的研究(Ⅰ.精子发生的季节变化)

利用发育的精子细胞顶体形态变化的分类法对绵羊在四季中睾丸曲细精管横切面上的精原细胞、精母细胞和精细胞进行了观察和统计,并对生殖细胞的比率和精子发生的效率进行了研究。结果表明,繁殖季节和非繁殖季节在精子发生水平等方面均存在着显著的季节变化。     

Survivin蛋白在小鼠生精恢复过程中的表达及其与生殖细胞凋亡的关系

目的: 探讨新的凋亡相关基因survivin蛋白在小鼠生精恢复过程中的表达及其与生殖细胞凋亡的关系. 方法: 间隔24 d两次腹腔注射白消安建立小鼠生精恢复过程的动物模型,第2次给药后随机分为1,2,3,4,6,8,10 wk 7组,于相应时间点及给药前取材,采用免疫组化S-P法和透射电镜、DNA原位末端标记TUNEL法分别检测survivin蛋白的表达和细胞凋亡. 结果: Survivin蛋白主要表达于间质细胞、次级精母细胞和精子细胞,生殖细胞的凋亡主要发生于初级精母细胞和圆头精子细胞. Survivin蛋白的表达与生殖细胞凋亡指数(AI)呈负相关(r=-0.784,P<0.01). 结论: Survivin蛋白表达而引起的凋亡抑制,有利于生殖细胞凋亡稳态的维持,对正常的精子发生起重要作用.     

男性避孕药AF-2364对雄兔生殖细胞的影响

目的：观察男性避孕药AF-2364对雄兔生殖细胞的组织学和超微结构的影响。方法：将27只雄兔随机分为对照组、静脉给药组和灌胃给药组,静脉给药组和灌胃给药组分别给予AF-2364 25 mg/kg每周1次,连续4周;每隔2周,各组随机处死3只兔子,取睾丸、附睾等组织;睾丸电镜标本用2.5%戊二醛固定,制作成组织标本,用H-7500透射电镜观察;光镜标本用Bouin液固定,用OLYMPUS CX31电子显微镜观察。结果：光镜检查显示给药后生精细胞脱落,生精上皮变薄,附睾管内精子减少。电镜检查显示精子核头部溶解,尾部中段线粒体数目减少,生精细胞之间以及与支持细胞间的连接点破坏,间隙增大。结论：AF-2364能有效、可逆地抑制兔睾丸精子的发生。     

一氧化氮合酶在不同年龄大鼠睾丸中的表达

目的研究一氧化氮合酶(NOS)在不同年龄大鼠睾丸中的表达情况，探讨NO在睾丸生殖功能中的作用。方法将健康雄性Wistar大鼠按月龄分为成年组和未成年组，4％多聚甲醛灌流固定，取大鼠睾丸，常规石蜡切片，免疫组化SABC法检测NOS在不同年龄大鼠睾丸中的表达。结果成年组大鼠睾丸间质细胞和间质血管中均有nNOS、iNOS和eNOS阳性物质表达，生精小管周围肌样细胞和腔面精子可见nNOS阳性物质；未成年组大鼠睾丸间质血管中偶见iNOS和eNOS阳性物质表达。结论3种NOS在睾丸中均有表达，但定位不同，且与年龄相关。     

Effects of Cypermethrin on Male Reproductive System in Adult Rats

Objective To evaluate effects of cypermethrin on the testis histology and testosterone, LH and FSH in adult male Sprague‐Dawley rats. Methods The intact adult male rats were randomly divided into five groups and were treated with cypermethrin at doses of 0, 7.5, 15, 30, or 60 mg/kg per day by oral gavage for 15‐days. After the treatments, serum was collected for hormone assays. The testes, epididymides, seminal vesicles, and prostates were excised and weighed. The right testis was frozen for daily sperm production and the left one was processed for histopathology. Results Daily sperm production decreased significantly in 30 and 60 mg/(kg day) groups. Testicular structure abnormalities included atrophic and distorted seminiferous tubules, deformed and disordered arrangement of germ cells, reduced germ cells, Sertoli cells and Leydig cells, vacuolization and multinucleated formations of spermatids in the cypermethrin‐treated rats. Vacuolization was found in Sertoli cells and the deformed nucleus was noted in Leydig cells. Serum testosterone reduced significantly in 30 and 60 mg/(kg day) groups. Serum FSH increased significantly in 60 mg/(kg day) group. Conclusion Cypermethrin induces impairments of the seminiferous tubules structure and spermatogenesis in the rats. The damages of the male reproductive system may be attributed to the imbalance of circulating testosterone.     

小白鼠生精上皮周期的形成

在小白鼠生后第1天到第56天,根据细胞核及精细胞顶体的形态变化,分别观察睾丸生精上皮周期的形成。结果表明,小白鼠在生后第1天睾丸的生精上皮由原始生殖细胞和支持细胞组成。生后7天出现精原细胞。生后14天出现分裂前期的初级精母细胞。生后21天出现发育早期的精细胞。生后35天少数曲细精管内出现了成熟精子,生精上皮周期已经形成,并与成鼠一样,生精上皮周期由12种时相组成。     

白消安诱导小鼠无精子症模型

目的 采用白消安诱导建立小鼠无精子症模型。方法 采用腹腔内单次注射白消安(40mg／kg)，对白消安的毒性、模型的形态学变化，小鼠的生育能力以及免疫功能进行了观察。结果 白消安单次注射可造成半数的小鼠死亡，用药后4周，睾丸曲细精管呈唯支持细胞样表现，3个月有20％的曲细精管恢复生精，存活小鼠中半数小鼠的生育力正常，模型小鼠的免疫学功能正常。结论 该小鼠无精症模型用作生精干细胞移植的受体模型是可行的。     

高脂饮食诱导大鼠生精功能障碍

目的观察给予高脂饮食对大鼠生精功能的影响。方法健康成年雄性SD大鼠20只随机分为正常对照组和高脂饮食模型组。正常对照组给予正常饮食喂养,高脂饮食模型组大鼠给予高脂饮食喂养,8周后观察其生精功能的变化。结果与正常组大鼠相比,高脂饮食组大鼠的睾丸重量/体重下降,组织学分析显示睾丸生精小管直径、生精细胞计数、间质细胞计数均下降,血清性激素水平明显异常。同时,高脂饮食组大鼠睾丸凋亡增强。结论高脂饮食可诱导大鼠生精功能障碍。     

细胞凋亡因子survivin与男性不育症

细胞凋亡是生精过程中的一个普遍现象,它的失调与男性不育症有着密切关系。survivin是一种细胞凋亡抑制蛋白,它在细胞分裂时调控细胞凋亡,不仅在人类肿瘤组织中普遍过度表达,而且表达于人类的正常睾丸组织中。不断有研究显示survivin是精子发生过程中的一个潜在的分子标志物,它的表达在生精障碍的患者中有明显改变。本文就survivin与男性不育症的关系作一综述。     

精子发生过程中的组蛋白变化与雄性不育

男性不育的许多病理现象与生精细胞的表观遗传改变关系密切。表观遗传在精子发生过程中调控着生精细胞的有丝分裂、减数分裂和精子形成过程,其中,作为表观遗传的一个重要研究内容——组蛋白,在精子发生过程中会发生多位点和多种形式的氨基酸残基修饰,不同的修饰方式在精子发生的不同阶段精确地调控着生殖细胞的发育过程,且在精子形成阶段发生鱼精蛋白和组蛋白的替换。此外,在精子发生过程中,组蛋白修饰的异常改变还可能会损伤精子的发育过程,导致雄性不育。本文总结了精子发生过程中组蛋白修饰的变化、对生殖细胞发育的调控作用,以及组蛋白的异常改变与雄性不育的关系。     

不同年龄人睾丸组织及精液中ALR表达研究

目的研究人不同年龄睾丸组织和精液中肝再生增强因子(ALR)的表达. 方法临床收集小儿、青年男性,有过生育的老年男性的睾丸以及正常精液,用S-P法免疫组化检测睾丸组织中ALR的表达,用ELISA法检测精液ALR.结果睾丸组织中hALR表达呈胞浆、胞膜型,hALR广泛分布于各级生精细胞、间质细胞和支持细胞,以精原细胞、初级精母细胞表达最强;小儿睾丸各种细胞均有表达且强,成人以间质细胞表达最强;不同年龄段间睾丸组织ALR的表达有显著差异(P<0.05),小儿最强、成年次之、老年较弱.正常生育组精液的ALR检测结果呈阳性.结论人不同年龄睾丸的hALR表达、作用可能不一样,睾丸ALR的表达与睾丸的发育以及精子生成可能相关.正常精液中存在ALR,可能参与了生殖过程.