异基因造血干细胞移植后人类巨细胞病毒pp65的监测及疗效、危险因素分析

本研究探讨异基因造血干细胞移植（allo HSCT）后受者外周血白细胞巨细胞病毒（CMV）pp65抗原阳性细胞数的变化及临床意义。以104例HSCT受者为研究对象，采集移植前后及恢复期受者的抗凝血标本，用CMVpp65单克隆抗体荧光免疫组织化学法检测CMV早期抗原，并进行动态观察。结果表明：104例HSCT受者中29例移植后检出CMV pp65抗原阳性，检出率27．88％，其中16例为CMV血症，13例为CMV病。29例经抗病毒治疗后25例抗原转为阴性，有效率86．21％，死亡4例，病死率13．79％。CMV感染患者中，受非血缘或单倍体相合异基因HSCT的患者与受同胞全相合异基因HSCT的患者CMV感染率分别为39．29％和14．58％，两者相比较有显著性差异（P〈0．05）。0-Ⅰ度急性GVHD组CMV感染的发生率为19．44％，而Ⅱ-Ⅳ急性GVHD组为46．88％，两者间的差异有显著意义（P〈0.05）。CMV抗原阳性与阴性患者的急性GVHD发生率有显著性差异（P〈0．05）。结论：外周血白细胞CMV pp65病毒抗原检测可作为造血干细胞移植后CMV病的监测指标，用于指导移植后抗病毒的治疗和疗效评价。     

异基因造血干细胞移植后出血性膀胱炎发生率及其危险因素分析

目的分析异基因造血干细胞移植（HSCT）后出血性膀胱炎（HC）的发生率、危险因素及其与其他并发症的关系。方法对2003年9月至2005年9月在北京大学人民医院接受HSCT的250例患者发生HC的情况进行回顾分析。结果72例患者发生了HC，移植后180天的累积发生率为（28．80±0．29）％，其中轻度HC（Ⅰ-Ⅱ度）51例（70．83％），重度HC（Ⅲ～Ⅳ度）21例（29．17％）；全部为迟发性（LOHC）；中位发病时间为术后33（14—170）天，中位持续时间为[35．0±4．9（3～185）]d。单因素分析发现，年龄小于25岁、预处理使用抗胸腺细胞球蛋白（ATG）、疾病高危、巨细胞病毒（CMV）感染、移植物抗宿主病（GVHD）Ⅱ-Ⅳ度、非血缘关系或HLA不相合的血缘关系供者移植为HC发病的高危因素；多因素分析发现急性Ⅱ-Ⅳ度GVHD[相对危险度（RR）=2．75；95％可信区间（CI）=1．63—4．66；P〈0．01]和非血缘关系或HLA不相合供者（RR=2．60；95％CI 1．52—5．20；P〈0．01）移植为HC发生的独立危险因素。Kaplan—Meier生存分析显示HC发生对移植后1年的生存率无影响（RR=0．67，95％ CI0．33—1．36）。结论HC是异基因HSCT后常见的并发症，GVHD和非血缘关系或HLA不相合供者移植是其发生的危险因素。     

100例异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病的发生及其对患者复发和生存的影响

本研究探讨异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后急性移植物抗宿主病（aGVHD）和慢性移植物抗宿主病（cGVHD）的危险因素及其与预后的关系。对我院100例行allo—HSCT患者的临床资料进行了总结,对aGVHD、cGVHD的发生率和危险因素及其对复发和生存的影响进行了分析。结果表明：31例患者发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD,累积发生率为34．4％;14例发生Ⅲ-Ⅳ度aGVHD,累积发生率为17．7％。HLA相合程度与aGVHD的发生无显著相关性（P〉0．05）。曾发生的Ⅱ-Ⅳ度aGVHD是发生cGVHD的危险因素（HR=2．303,P=0．088）,女性因素为保护性因素（HR=0．401,P=0．055）。发生cGVHD者复发率较低。发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD为影响总生存率（OS）的危险因素（P〈0．05）,重度（Ⅲ-Ⅳ）aGVHD患者的死亡率极高（81．0％）,与0-Ⅰ度患者的死亡率（35．7％）相比有显著性差异（P=0．000）。结论：GVHD和移植物抗肿瘤效应（GVL）尚不能分离,但GVL的益处可能被GVHD相关死亡因素抵消,因此需积极防治重度aGVHD。局限型cGVHD可能是长期生存的有益因素。     

异基因造血干细胞移植后人类疱疹病毒6型活化与急性移植物抗宿主病的相关性研究

目的研究造血干细胞移植（HSCT）后人类疱疹病毒6型（HHV．6）活化与急性移植物抗宿主病（aGVHD）的相关性。方法移植前以及移植后每周1次连续采集72例患者的外周血样本，采用筑巢式聚合酶链反应扩增HHV-6基因序列，HindⅢ酶切对HHV-6基因分型。结果72例患者移植后45例（62．5％）检出HHV-6血症，中位时间为第14（7—63）天；40例（55．6％）患者发生Ⅰ～Ⅳ度aGVHD，中位时间第26（9～73）天。HHV．6血症发生的中位时间显著早于Ⅰ～Ⅳ度aGVHD发生时间（P=0．018）。Ⅰ～Ⅳ度aGVHD累积发生率在HHV-6阳性组为68．9％（45例中31例），显著高于HHV-6阴性组的33．3％（27例中9例）（P=0．003）。Ⅱ-Ⅳ度aGVHD累积发生率HHV-6阳性组为35．6％，显著高于HHV-6阴性组的14．8％（P=0．027）。移植后Ⅰ-Ⅳ度aGVHD的发生率在巨细胞病毒（CMV）和HHV-6共感染（CMV^＋／HHV-6^＋）组、CMV阳性HHV-6阴性（CMV^＋／HHV-6^-）组、CMV阴性HHV-6阳性（CMV^-／HHV-6^-）组和CMV与HHV-6均阴性（CMV^-／HHV-6^-）组分别为78，9％，55．6％，14．3％和22．2％，差异有统计学意义（P=0．0001）。Ⅱ～Ⅳ度aGVHD累积发生率在CMV^＋／HHV-6^＋、CMV^＋／HHV-6^-、CMV^-／HHV-6^＋和CMV^-／HHV-6^-组分别为42．1％．22．2％，0％和11．1％，差异有统计学意义（P=0．008）。结论HSCT后HHV-6感染以及HHV-6和CMV共感染与aGVHD发生率存在显著相关性。     

异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒感染的监测及分析

目的：探讨异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后巨细胞病毒感染的早期诊断及人类巨细胞病毒血症（Cy—tomegalovirus antigenemla）与巨细胞病毒病（CMVdisease）发生的关系。方法；CMVpp65单克隆抗体荧光免疫组织化学法检测CMV早期抗原，并进行动态观察。结果：47例I{SCT中，17例（36．17％）发生巨细胞病毒血症，7例（14．89％）发生CMV病。基础疾病为血液系统恶性疾病的患者，进行异基因造血干细胞移植后，巨细胞病毒抗原血症和巨细胞病毒病的发生率分别为54．55％和31．82％，而血液系统非恶性疾病的患者分别为20．00％和0．00％，两者之间差异有显著性（P〈0．05）。基础疾病、急性GVHD是巨细胞病毒抗原血症和巨细胞病毒病发生的危险因素。结论：CMVpp65病毒抗原检测在造血干细胞移植后CMV病的早期诊断、早期预防、早期治疗及延长移植后长期生存率具有重要意义。     

骨髓联合外周血单倍体相合造血干细胞移植治疗白血病

本研究探讨（G—CSF）动员骨髓加外周血联合进行单倍体相合造血干细胞移植（hiBM＋PBSCT）治疗白血病的可行性及疗效。125例白血病患者接受了单倍体相合未去T细胞的造血干细胞移植。所有供者应用G—CSF5μg/（kg·d）,皮下注射,连用7天。实验组（A组）29例患者在供者动员的第7、8天分别接受1次hiBMT＋PBSCT移植;对照组（B组）96例仅接受1次单倍体相合骨髓造血干细胞移植（hiBMT）。对两组患者应用相同的免疫抑制剂预防急性GVHD,观察临床的移植效果。结果表明：除hiBMT组有1例慢性髓系白血病合并骨髓纤维化患者移植失败外,其余全部患者移植后经检测证实为完全供者造血,hiBM＋PBSCT组和hiBMT组中性粒细胞数〉0．5×10^9／L的中位时间分别为15（10-23）天和19（11—26）天;血小板数〉20×10^9／L时间分别为18（9—33）天和23（13—35）天。hiBM＋PBSCT组和hiBMT组急性Ⅱ-Ⅳ度aGVHD的累计发生率分别是31．03％和12．5％,二者差异有显著性意义（P〈0．05）,但急性Ⅲ-Ⅳ度aGVHD的发生率分别是13．79％和10．41％（P〉0．05）、aGVHD相关死亡率分别为3．45％和5．21％（P〉0．05）,差异均无显著性意义。骨髓联合外周血移植组和单纯骨髓移植组慢性GVHD的累计发生率分别是48．2％和35．4％（P〉0．05）,二者差异无显著性意义。广泛型慢性GVHD发生率两组分别为23．3％和15．6％（P〉0．05）,差异无显著性意义。骨髓联合外周血移植组和单纯骨髓移植组疾病复发率分别是6．8％（2／29）和18．7％（18／96）（P〈0．05）,二者差异有显著性意义。结论：G—CSF动员骨髓联合外周血单倍体相合造血干细胞移植后造血重建更快,急性Ⅲ-Ⅳ度GVHD发生率和死亡率无明显增加,高危白血病的复发率下降,可以有效安全应用于临床。     

造血干细胞移植后出血性膀胱炎多因素分析

本研究探讨造血干细胞移植后出血性膀胱炎（HC）发生的相关因素。对北京大学第一医院2003年7月-2009年8月收治的188例造血干细胞移植（HSCT）患者的资料进行了回顾性分析。以移植后180天为随访终点,对全部188例患者和其中150例异基因HSCT患者的临床资料,分别采用Cox回归模型分析与HC发生相关的危险因素。结果表明：①188例HSCT患者中,HC发生率为27．12％（51／188）。单因素分析显示,性别（男性RR=1．673,P=0．076）、异基因HSCT（RR=1．848,P=0．061）与HC的发生相关。多因素分析显示,只有异基因HSCT是HC发生的独立危险因素（RR=4．508,P=0．037）。②异基因HSCT的患者HC发生率32．67％（49／150）,其中Ⅱ-Ⅳ级HC发生率28．00％（42／150）。单因素分析提示,单倍体相合或非血缘供者（RR2．444,P=0．018）、尿巨细胞病毒（CMV）阳性（RR2．059,P=0．021）及血、尿CMV同时阳性（RR2．497,P=0．003）是Ⅱ-Ⅳ级HC发生的危险因素。患者中年龄26—40岁（与≤25岁或≥41岁相比,RR0．454,P=0．056）、预处理方案含氟达拉滨（Flu）（RR=0．504．P=0．059）、TBI（RR0．185,P=0．095）的患者Ⅱ-Ⅳ级的HC发生率有下降的趋势;预处理应用环磷酰胺（RR2．015,P=0．063）、使用抗人胸腺球蛋白（ATG）（RR2．343,P=0．054）、合并血CMV阳性（RR2．123。P=0．088）时Ⅱ-Ⅳ级HC的发生有增加的趋势。多因素分析显示,血、尿CMV同时阳性（RR2．269,P=0．008）、预处理未使用Ru（RR=2．106,P=0．040）是Ⅱ-Ⅳ级HC发生的独立危险因素,而使用ATG（RR=2．154,P=0．083）的患者Ⅱ-Ⅳ级HC的发生有增加的趋势。结论：异基因造血干细胞移植后HC发生率高,血、尿CMV同时阳性、预处理中未使用Flu是Ⅱ-Ⅳ级HC发生的独立危险因素,而使用ATG后Ⅱ-Ⅳ级HC发生有增加的趋势。     

异基因造血干细胞移植后34例肠道重度移植物抗宿主病临床特点及预后分析

本研究探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后重度肠道移植物抗宿主病(GVHD)的临床特点和影响预后的相关因素。选择北京市道培医院2007年1月至2011年1月共710例allo-HSCT后发生重度肠道GVHD的34例患者,随访至2011年7月1日,回顾性分析患者的临床特征,采用SPSS 19.0进行单因素分析影响预后的相关因素。结果表明,重度肠道GVHD发生率为4.79%,发生中位时间为移植后29(18-210)天。18例GVHD患者接受了肠镜检查,通过肠镜下组织改变及活检组织病理学检查确诊肠道重度GVHD,其中6例合并病毒性肠炎的患者镜下可见深在溃疡,组织病理学检查提示病毒包涵体或病毒抗原阳性。甲基泼尼松龙(MP)、他克莫司(FK506)或环孢素(CsA)、CD25单克隆抗体、布地奈德口服联合治疗好转率85.29%(29/34),29例治疗好转的病例中有9例死于肠道GVHD后的其他并发症,总生存率为58.82%(20/34)。单因素分析表明,超急性移植物抗宿主病(hGVHD)是影响肠道GVHD患者总生存率的不良因素(p=0.026)。结论:早期肠镜检查是确诊重度肠道GVHD的有效的方法,联合MP、CsA或FK506、CD25单克隆抗体治疗及布地奈德口服疗效显著,加强GVHD后期并发症的治疗能提高总生存率。     

异基因造血干细胞移植后的巨细胞病毒肠炎24例分析

目的 分析异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后巨细胞病毒(GMV)肠炎的临床特点、诊断方法和危险因素.方法 总结北京市道培医院2007年8月至2009年7月确诊的24例CMV肠炎患者的一般临床资料和内窥镜、组织病理学和病毒学检查结果,以及CMV肠炎与CMV病毒血症和移植物抗宿主病(GVHD)的关系.结果 87.5%的患者年龄≥18岁,诊断CMV肠炎的中位时间为allo-HSCT后第63天.内窥镜下的肠黏膜表现对区分单纯CMV肠炎和肠炎合并GVHD没有鉴别意义.用于诊断的方法包括组织病理学(32.1%)和病毒学(92.9%)检查.肠黏膜标本中每106个单个核细胞的CMV DNA定量大于105时更有诊断价值.在死亡和存活两组患者中进行了下列危险因素的比较:移植类型、预处理方案、更昔洛韦预防病毒天数、确诊肠炎前有无Ⅱ～Ⅳ度急性GVHD、GVHD确诊时间、是否使用≥1 mg/kg的甲泼尼龙治疗GVHD、GVHD距离确诊肠炎的时间、肠炎前是否有CMV血症、确诊肠炎的时间、肠黏膜CMV DNA定量,差异均无统计学意义.结论 进行内窥镜检查并通过组织病理学和病毒学检查确诊是CMV肠炎诊断中的决定性因素,最好进行全结肠检查并到达回肠末端.PCR方法能明显提高CMV检出率.对那些无法进行肠镜检查的患者,采用粪便检测CMVDNA能够对诊断提供帮助.

Abstract：

Objective To analyse the clinical features, diagnostic methods and risk factors of cytomegalovirus(CMV) enteritis after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation(allo-HSCT).Methods Analysis was made on 24 cases of CMV enteritis after allo-HSCT in Beijing Daopei Hospital from Aug.2007 to Jul.2009, including clinical data, endoscopic diagnosis, histopathological and virological results, and the association between CMV enteritis with viremia and graft-versus-host disease(GVHD).Results 87.5% of the patients were over 18 years old.The median time to diagnosis of CMV enteritis was 63 days after HSCT.The mucosal lesions in enteroscopic examination had no significant differences between CMV enteritis and gastrointestinal GVHD complicated with the enteritis.The methods used in diagnosis included histopathology (32.1%) and virology (92.9%).The copies of CMVDNA in mucosal samples greater than 105/106 PBNC was better diagnosis.A number of risk factors were compared between the survival and death groups: type of transplant, conditioning regimen, the time span of ganciclovir prophylaxis therapy, grade Ⅱ - Ⅳ GVHD before enteritis, the time of diagnosis as GVHD, using MP≥1 mg,/kg to treat GVHD, the time between GVHD and enteritis, CMV viremia before enteritis, the time of diagnosis as enteritis, CMVDNA quantitation, and there were no any statistic differences.Conclusion Cytomegalovirus enteritis should be carefully diagnosed by histopathology and virology through endoscopic examination.It is better to undertake pan-colon endoscopy as well as terminal ileum examination for more accurate diagnosis.PCR can significantly improve the detection rate.CMVDNA detection in patients' stool may be helpful to diagnosis, especially for those patients who can not stand the endoscopy examination.     

芦可替尼联合糖皮质激素一线治疗急性移植物抗宿主病对巨细胞病毒激活的影响北大核心CSCD

目的观察芦可替尼联合糖皮质激素一线治疗急性移植物抗宿主病(GVHD)对巨细胞病毒(CMV)激活的影响。方法回顾性分析2018年8月至2020年9月期间195例在解放军总医院第一医学中心血液病科进行异基因造血干细胞移植患者的临床资料, 根据急性GVHD发生情况分为无、Ⅰ度、Ⅱ~Ⅳ度、Ⅲ/Ⅳ度急性GVHD组, 根据急性GVHD一线治疗方案分为联合方案组(芦可替尼联合糖皮质激素)及经典方案组(单用糖皮质激素)。分析移植后90 d及180 d各组CMV激活累积发生率、CMV激活时长及转阴时长, 比较联合方案组及经典方案组总生存率及无病生存率。结果 195例患者中无急性GVHD 64例(32.8%)、Ⅰ度急性GVHD 30例(15.4%)、Ⅱ~Ⅳ度急性GVHD 101例(51.8%)、Ⅲ/Ⅳ度急性GVHD 14例(7.2%)。联合方案组、经典方案组Ⅰ~Ⅳ度急性GVHD患者在移植后90 d及180 d CMV激活累积发生率差异无统计学意义(P值均>0.05), 且CMV激活时长及转阴时长差异也无统计学意义(P值均>0.05)。进一步对两种方案一线治疗Ⅱ~Ⅳ度及Ⅲ/Ⅳ度急性GVHD进行分析, 发现在移植后90 d及180 d CMV激活累积发生率、激活时长及转阴时长差异均无统计学意义(P值均>0.05)。此外, 两组急性GVHD患者移植后2年总生存率及无病生存率差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论芦可替尼联合糖皮质激素一线治疗急性GVHD不增加CMV激活的风险。     

巨细胞病毒定量PCR与pp65抗原测定监测异基因造血干细胞移植巨细胞病毒感染的比较

本研究比较巨细胞病毒（CMV）定量PCR检测和CMV—pp65抗原检测在异基因造血干细胞移植CMV感染中的诊断价值。以84例异基因造血干细胞移植患者为研究对象,自预处理开始每周对患者EDTA抗凝外周血血标本进行CMV—pp65抗原及cMV定量PCR动态检测,直至出院,比较观察两者在诊断CMV感染中的作用。结果表明：84例移植患者的732份系列血标本中,26例移植后检出CMV定量PCR阳性,检出率30．95％,其中9例为cMV血症,13例为cMV病,检出中位时间为37．1（7—105）天;22例CMVpp65抗原检测阳性,检出率26．19％,检出中位时间为46．6（10—128）天;所有CMV—pp65抗原检测阳性患者CMV定量PCR均为阳性,4例CMV定量PCR阳性但CMV—pp65抗原检测阴性患者均未发展为CMV病。CMV病多出现于CMV定量PCR中等至高拷贝数或中等至高水平病毒血症（CMV—pp65抗原）病例中。治疗后CMV定量PCR转阴中位时间为17．5（11—28）天。CMV—pp65抗原转阴中位时间为10．0（7—21）天。结论：CMV定量PCR和CMV—pv65抗原检测均能作为异基因造血干细胞移植CMV感染早期诊断的有效手段,CMV定量PCR更敏感,CMV—pp65抗原检测更特异,两者同时使用能更有效地提高CMV感染诊断水平,监控其发生发展。     

非血缘关系异基因造血干细胞移植66例分析

目的对66例血液病患者进行非血缘关系异基因造血干细胞移植（allo-HSCT），探索提高移植疗效的措施。方法慢性粒细胞白血病（CML）患者24例，急性白血病（AL）患者40例，其他血液病患者2例，经预处理治疗后，进行人类白细胞抗原（HLA）基本相合的非血缘关系骨髓移植（BMT）48例，外周血干细胞移植（PBSCT）18例：部分患者采用长程加强的移植物抗宿主病（GVHD）的预防方案（将环孢菌素A提前至预处理开始时使用，同时加用霉酚酸酯）。结果64例患者达到完全稳定的供者植入，WBC植活中位时间15d（BMT组16d；PBSCT组12d，P〈0．01）。45例患者发生急性GVHD（aGVHD），累积发生率为71．16％，其中28例患者发生Ⅰ～Ⅱ度GVHD，累积发生率57．15％；17例患者发生Ⅲ～Ⅳ度GVHD，累积发生率32．25％；COX模型分析得出HLA配型及移植方式是影响aGVHD发生的因素，HLA配型相合、采用G-CSF动员的PBSCT可以降低aGVHD，尤其是重度GVHD的发生。可供分析的36例患者中有21例发生慢性GVHD。66例接受移植的患者中复发6例，死亡27例，5年的预期生存率为52．91％。用COX模型分析得出aGVHD以及aGVHD与GVHD的预防方案的交互冈素是影响生存率的惟一因素，其相对危险度分别为1.517和1.255。结论提高非血缘关系allo-HSCT疗效的关键是控制aGVHD，而选择HLA配型相合的供者，加强移植早期的免疫抑制，可以减少aGVHD的发生     

非清髓异基因外周血造血干细胞移植后巨细胞病毒感染的危险因素分析

本研究旨在探讨非清髓异基因外周血造血干细胞移植（NST）后CMV感染及CMV病的发生特点及其危险因素,为NST后cMV感染的诊断、监测和抢先治疗提供参考。用实时定量聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测了80例在本院血液科行NST患者外周血白细胞巨细胞病毒（CMV）DNA载量,并对其临床资料进行了回顾性分析。结果表明,NST后62／80例发生cMV感染（77．5％）,首次检出CMV—DNA阳性的中位时间为移植后35d（17—133）,经抢先治疗后,移植后100d内CMV病累积发生率为11．3％。单因素分析及多因素分析均显示,预处理方案中使用抗人胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）、合并其它疱疹病毒感染（单纯疱疹病毒、EB病毒、水痘-一带状疱疹病毒等）及移植前有真茵感染病史均为CMV感染的危险因素。单因素分析提示,CMV血症及预处理方案中使用ATG是CMV病的危险因素。合并Ⅱ-Ⅳ度aGVHD23例患者CMV感染率为91．3％（21／23）,但与0-I度aGVHD组的CMV感染率71．9％相比,无统计学差异（P=0．06）。多因素分析未发现与CMV病相关的危险因素。结论：预处理过程中使用ATG有可能增加NST后CMV感染和CMV病的发生率,CMV感染容易与其它疱疹病毒感染及真菌感染伴发。移植后亦应当重视对其它疱疹病毒及真菌的监测及预防。     

HLA—Cw配型与异基因造血干细胞移植后GVHD关系的临床初探

目的探讨HLA-Cw配型在异基因造血干细胞移植中与GVHD的发生和复发的关系。方法对HLA6个位点（A、B、DR／DQ）全相合的同胞供者9例异基因外周血干细胞移植和10例脐带血移植进一步进行HLA-Cw配型,分析HLA-Cw配型与GVHD发生的关系。结果16例HLA-Cw相合者,共植入15例（94％）,其中Ⅰ-Ⅱ度急性GVHD发生11例（69％）,Ⅲ度急性GVHD2例（12．5％）,慢性GVHD15例（94％）,无复发病例。在HLA—Cw不相合3例中,2例发生Ⅲ度GVHD并且早期死亡,1例早期复发。在HLA—Cw配型相合与不相合两组间,急性Ⅰ～Ⅱ度及Ⅲ度GVHD的发生其差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论HLA—Cw配型相合供体造血干细胞移植有利于减少植入后急性GVHD发生及复发,提示HLA-Cw位点配型在造血干细胞移植,尤其是异基因移植中具有重要意义。     

异基因移植患者RQ-PCR监测巨细胞病毒感染并指导抢先治疗的临床研究

本研究旨在评价血浆巨细胞病毒（CMV）-DNA实时荧光定量PCR（RQ-PCR）用于异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）患者cMV感染的诊断监测和指导抢先治疗的I临床作用及特点。通过回顾性统计2008年1月至2010年6月在我院血液科行allo-HSCT的141例患者的病例资料及cMV检测数据并随访至移植后180d,分析患者特征、RQ-PCR检测结果、CMV感染及治疗情况和相关危险因素。结果显示,患者CMV感染和CMV肺炎发生率为81．5％和2．9％,主要发生在移植后2个月内。发生CMV感染后63例患者接受单药更昔洛韦、6例接受单药膦甲酸钠抢先抗病毒治疗,治疗的总有效率为87．8％,并表现出不同的疗效反应模式。女性、预处理中使用ATG或巴利昔单抗以及发生急性移植物抗宿主病（GVHD）的患者更容易感染CMV。使用ATG或巴利昔单抗以及发生急性GVHD的患者中CMV感染发生的时间更早（P〈0．05）。急性GVHD、病毒DNA最大负荷量、阳性次数及治疗疗程与疗效有关（P〈0．05）。结论：allo-HSCT患者的CMV感染发生率仍然很高,RQ-PCR检测血浆CMV-DNA与临床转归有很强的相关性,是监测allo-HSCT患者CMV感染情况并指导抢先抗病毒治疗的有效方式。     

非亲缘关系脐带血移植治疗25例血液系统疾病患者的临床研究

本研究观察非亲缘脐带血造血干细胞移植（UCBT）在血液系统疾病患者的植入率、移植物抗宿主病（GVHD）、移植相关死亡（TRM）、复发和生存情况。25例接受UCBT的血液系统疾病患者（儿童8例、成人17例）中。3例接受单份脐带血（CB）,22例接受双份脐带血。供／受体低分辨人类白细胞抗原（HLA）配型结果为9例6／6位点相合、16例4—5／6位点相合。在预处理方案中21例采用TBI／Cy±Flu±ATG或BuCy±Flu±ATG,4例采用FC＋ATG方案。移植物抗宿主病（GVHD）的预防采用以环孢素（CsA）为主的方案。结果表明,存活超过42d的20例患者中16例（80．0％）获得植入;粒系植入至移植后42d的累积发生率为64．0％,中位时间17．0d;巨核系植入至移植后100d的累积发生率为60．0％,中位时间35．0d;Ⅱ—IV度、Ⅲ—IV度急性GVHD（aGVHD）至移植后100d的累积发生率分别为44．0％和30．7％;截止至随访结束日期,移植相关死亡率（TRM）的累积发生率为54．3％;25例患者的总生存率为42．7％;17例可评估恶性血液病患者中7例（41．2％）存活,且仅有1例复发,无事件生存率（EFS）为35．3％;5例可评估的非恶性血液病患者中4例存活,2例处于持续脐血植入状态,2例自身造血恢复;处于疾病进展期的3例患者中仅1例患者存活。结论：低分辨HLA-4-6／6位点相合的UCBT治疗血液系统疾病是可行的,双份脐血移植（dUCaT）可以克服单份脐血细胞数量不足的缺点,可用于治疗大体重儿童及成人患者。     

造血干细胞移植相关性肠道血栓性微血管病:临床病理学特征、诊断标准和治疗

异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后肠道血栓性微血管病（TMA）是一种少见的、致死性的、临床表现酷似肠道GVHD的合并症，此前国内尚无报道。自2002年5月至2004年7月，在本研究所接受allo-HSCT的患者总计373例，其中184例为HLA配型全相合，189例为HLA配型至少1个位点不合的亲缘供者移植。为探索TMA的临床及其病理学特征，本研究将其中30例allo-HSCT后因严重腹泻接受结肠镜以及病理检查的患者活检组织样本进行复检研究。结果发现，7例患者样本具有TMA特征性病理学改变，占活检例数的23．3％（7／30）。全部患者均伴有巨细胞病毒（CMV）血症和CMV疾病（CMV-IP5例、CMV肠炎2例）；5例伴有乳酸脱氢酶（LDH）增高。TMA组织学特征是多发性微血管管腔内血小板-纤维素血栓；血管内皮细胞肿胀、剥脱，伴有或不伴有血管周围出血。3例样本兼有TMA和GVHD的病理学特征；4例具备TMA的病理学特征而无GVHD的组织学改变。3例患者临床表现酷似急性缺血性肠炎，均有间断性或持续性鲜血便、明显腹痛伴有迅速发展的溶血性贫血、顽固性血小板减少、肝静脉阻塞综合征（VOD）、毛细血管渗漏综合征以及低蛋白血症。在移植后活存101-254天。结论：诊治肠道GVHD的同时应排查TMA，病理学特征可资鉴别；与此同时，初步研究首次证实TMA和TMA-GVHD各自具有特定病理特征，其治疗反应及转归也有差异。     

活化性及抑制性免疫球蛋白样受体对非去T细胞异基因造血干细胞移植预后的影响

本研究探讨异源反应性NK细胞免疫球蛋白样受体（KIR）与HLA配体的关系对非去T细胞异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）预后的影响。应用序列特异性引物分型技术检测供受者的K／R及HM基因型,并对我院67例接受非去T细胞allo—HSCT的病例资料进行回顾性分析。根据供者KIR及受者H厶4关系及供者是否表达活化性KIR进行分组,通过单因素及多因素分析确定抑制性及活化性KIR基因对移植预后的影响。结果表明,抑制性KIR／配体相合组无事件生存率（EFS）略高于不合组,其中KIR2DL1／C2相合组3年EFS显著高于C=2不相合组（69．2％vs44．8％,P=0．043）,而抑制性K／R／配体相合组的复发率、急性GVHD发生率及移植相关死亡率（TRM）与不合组无显著差异。供者表达活化性KIR2DS2的患者,其3年EFS更高（81．3％vs52．6％,P=0．05）,且复发率显著减低（7．7％vs34．2％,P=0．05）。而受者不表达c2组配体时,供者表达活化性KIR2DSl的患者。即KIR2DS1阳性／HLA—C2阴性组,其3年EFS明显下降（P=0．028）,急性GVHD发生率明显上升（P=0．028）。多因素分析表明,疾病进展期、活化受体数目增多、供者不表达KIR2DS2表型是生存率下降的独立危险因素（HR=3．34、2．19、3．18;95％CI=1．43—7．82、0．99—4．83、0．93一11;P=0．005,0．053,0．066）。此外,疾病进展期、供者不表达KIR2DS2表型也是高复发率的独立危险因素（HR=6．72,9．43;95％CI为1．36—33．16,1．03—8．33;P=0．019,0．047）。而供者KIR2DSl阳性／受者HLA-C2阴性是移植相关死亡的唯一危险因素（HR=3．27,95％CI1．78—9．06,P=0．023）。结论：在非去T细胞allo-HSCT中,抑制性K／R／HLA不合对移植后患者生存率、疾病复发率及TRM的影响较小,但可能干扰移植早期抗病毒免疫。抑制性KIR2DL1／HLAC2不合组EFS显著低于相合组,这可能与该组患者TRM上升、急性GVHD发生率升高有关。而活化性K／R对患者EFS、复发及急性GVHD发生率都有影响。供者不表达KIR2DS2预示着生存期延长,这与复发率低有关,而供者KIR2DS1阳性／受者HLA-C2阴性组,预示着生存期缩短及急性GVHD发生率增高,TRM增高。因此,在非去Tallo—HSCT中,分析供受者KIR及其配体可以为供者优化选择提供分子生物学依据。     

血浆Reg3α蛋白水平与肠道aGVHD的相关性研究

本研究探讨血浆Re83d蛋白水平与异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后肠道急性移植物抗宿主病（GI—aGVHD）的临床诊断及预后的相关性。以我院2011年12月至2012年12月行allo—HSCT的103例患者为研究对象。采集移植前9d、0d、移植后14d、移植后28d、腹泻时多个时间点抗凝外周血,对发生aGVHD的患者进一步采集治疗1周及4周后抗凝外周血,采用ELISA方法检测血浆Reg3α蛋白浓度。结果表明,103例患者中无aGVHD17例,非aGVHD腹泻27例,单纯皮肤aGVHD10例,Ⅰ-Ⅱ度肠道aGVHD（GI—aGVHD）17例．Ⅲ-Ⅳ度GI—aGVHD32例。GI—aGVHD患者和非aGVHD腹泻患者腹泻时血浆Reg3et蛋白水平分别为111．5（54．7—180．2）ng／ml和23．9（14．5—89．5）ng／ml（P〈0．001）。Ⅲ-Ⅳ度GI—aGVHD患者治疗4周后,治疗有效组17例与治疗无效组7例血浆Reg3a蛋白水平分别为137．2（51．7—205．4）ng／ml和679．4（122．3—896．8）ng／ml（P=0．028）。治疗无效组7例全部死于aGVHD相关的多器官功能衰竭。血浆Reg3α蛋白浓度≥87．73ng／ml时预测Ⅲ-Ⅳ度GI—aGVHD的鉴别效度即曲线下面积最大（AUC=0．902）,其诊断Ⅲ-Ⅳ度GI—aGVHD敏感度为81．48％,特异性为82．86％。移植后Reg3α[蛋白高水平组（〈87．73ng／m1）患者Ⅲ-Ⅳ度GI—aGVHD发生率明显高于低水平组（〈87．73ng／m1）（P〈0．001）。结论：移植后血浆Reg3α蛋白水平升高提示Ⅲ-Ⅳ度GI—aGVHD的发生,Ⅲ-Ⅳ度GI—aGVHD患者免疫抑制治疗后血浆Reg3α蛋白水平不降低与预后不良相关,血浆Reg3α蛋白水平可作为提示GI—aGVHD的生物学标志物。     

异基因造血干细胞移植后侵袭性真菌感染及其危险因素分析

本研究分析异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后患者侵袭性真菌感染（IFI）的发生及其高危因素。选择自2000年1月至2007年3月在我院行allo—HSCT患者180例，随访至2007年10月31日，用Kaplan—Meier和Cox回归模型方法，分析了IFI的发生率及其相关的危险因素。结果表明，35例（19、5％）患者在HSCT后发生了IFI，确诊1例，临床诊断34例；其中曲霉菌感染18例（51、4％），念珠菌感染17例（48．6％）。IFI组1年的存活率为34．3％．无IFI组1年的存活率为53．8％，存在显著性差异。在单因素分析中，与IFI的发生率增加有关的因素包括移植前真菌定植或感染、非血缘供者allo—PBHSC或allo—BMHSC移植、急性GVHD发生、广泛性慢性GVHD、应用甲基泼尼松龙。在多因素分析时，非血缘供者异基因外周血或骨髓干细胞移植、急性GVHD发生及移植前真菌感染或定植使IFI发生危险增加（RR分别为：1．589、2、399、1．410）。结论：IFI是allo—HSCT的常见并发症，也是主要致死原因之一，对移植前真菌感染或定植、非血缘供者allo-PBHSC或allo—BMHSC移植及发生急性GVHD的高危患者有必要早期采取干预性治疗。