没食子酸对M1型巨噬细胞极化的影响

目的:体外建立M1型巨噬细胞极化模型,探讨没食子酸(GA)对M1型巨噬细胞极化的影响.方法:选用8周龄C57BL/6雌性小鼠,取腹腔巨噬细胞进行体外原代培养,通过对细胞培养基进行不同的处理,将实验分为对照组(不做处理)、M1极化模型组[加入脂多糖(LPS,100μg·L-1)和干扰素γ(IFN-γ,20μg·L-1)诱...     

全反式维甲酸对M1型巨噬细胞极化的影响

目的 利用M1型巨噬细胞极化模型,探讨全反式维甲酸(ATRA)对M1型巨噬细胞极化的影响.方法 选用8周龄C57BL/6雌性小鼠,提取并纯化腹腔巨噬细胞,随机分为M组、M1组、DMSO组和ATRA组.脂多糖(LPS,100 ng/mL)联合干扰素-γ(IFN-γ,20 ng/mL)诱导巨噬细胞构建M1型巨噬细胞极化模型...     

M1/M2型巨噬细胞极化对动脉粥硬化炎症影响的研究进展

炎症是动脉粥样硬化最基本的病理改变之一,贯穿其发生、发展的全过程,并与急性脑血管事件密切相关.M1/M2型巨噬细胞的极化及其对炎症的调控作用,直接影响着动脉粥样硬化的疾病进程.本文对M1/M2型巨噬细胞的极化及其对动脉粥样硬化炎症的影响进行文献综述.     

LPS诱导巨噬细胞M1型极化对肿瘤生长的影响

目的 研究脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导巨噬细胞M1型极化对肿瘤生长的影响。方法 将Balb/c雌性小鼠随机分为对照组和实验组。Renca细胞皮下建模,待肿瘤体积生长至50mm3时瘤旁注射生理盐水（100μl/只, 1次/2d）或LPS（100μg/只,1次/2d）,采用流式细胞术检测肿瘤相关巨噬细胞M1型极化水平。将小鼠肿瘤细胞系（ML-1、MC38、Renca）分成三组：空白组（完全培养基加入50%DMEM基础培养基）、对照组（完全培养基加入50%巨噬细胞培养基上清液）和实验组（完全培养基加入50%LPS预处理的巨噬细胞培养基上清液）。采用细胞计数试剂-8（cell counting kit-8,CCK-8）实验检测肿瘤细胞增殖情况;采用流式细胞术检测肿瘤细胞周期及凋亡情况。 结果 经LPS处理后肿瘤相关巨噬细胞M1型比例增多（P<0.001）,从而增强其抗肿瘤功能;LPS诱导巨噬细胞M1型极化可显著抑制肿瘤细胞的增殖（Renca：P=0.023;ML-1：P=0.045）;LPS诱导巨噬细胞M1型极化可引起肿瘤细胞周期G0/G1（MC38：P=0.011;ML-1：P=0.022）或S期（Renca：P=0.022）阻滞,进而抑制细胞分裂;LPS诱导巨噬细胞M1型极化可引起肿瘤细胞凋亡（Renca：P=0.04;ML-1：P=0.007）。结论 LPS可通过诱导巨噬细胞M1型极化发挥抗肿瘤功能。     

酸性微环境对巨噬细胞中周期生物钟1的表达及M2型极化的影响

目的 探讨酸性微环境对巨噬细胞中周期生物钟1(PER1)的表达及替代途径激活的巨噬细胞(M2型)极化的影响。方法 20只6～8周龄C57/6J雌性小鼠,腹腔注射含5%淀粉的生理盐水,连续3 d,麻醉处死,对小鼠腹腔灌流并回收灌流液,接种至6孔板培养2 h,贴壁细胞即为小鼠腹腔巨噬细胞,分别加pH7.3培养基(pH7.3组)、pH6.5培养基(pH6.5组)及0.02 mol/L乳酸培养基(0.02 mol/L乳酸组),培养24 h;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测3组小鼠腹腔巨噬细胞中白细胞介素1 β(IL-1β)、血管内皮因子(VEGF)、精氨酸酶-1(ARG-1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及PER1信使RNA(mRNA)的表达,采用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测3组小鼠腹腔巨噬细胞中IL-10、IL-12、VEGF、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的水平;溴化三甲基-2, 3-二油酰氧基丙基铵(DOTAP)、二油酰基磷酰基乙醇胺(DOPE)、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(2000)-琥珀酰胺(DSPE-PEG2000-NHS)按摩尔比为7∶7...     

重组Klotho蛋白对骨髓来源M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转变的影响

目的:探究重组Klotho蛋白对小鼠骨髓来源M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞表型转变的影响.方法:分离并鉴定小鼠骨髓来源性巨噬细胞,用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)转变为巨噬细胞M0,流式细胞术和细胞免疫荧光鉴定细胞,普通光镜观察M0细胞形态.将成熟骨髓来源巨噬细胞细胞M0分成LPS组...     

苦参素通过MAPK信号通路对EAE小鼠巨噬细胞M1/M2极化的影响

目的:探讨苦参素通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠巨噬细胞M1/M2极化的影响.方法:50只雌性C57BL/6小鼠分为对照组、EAE组、醋酸泼尼松(PA)组、苦参素组及激动剂组,每组各10只,除对照组外均建立EAE模型.于发病日开始给药干预,苦参素组腹腔注射200 mg/...     

Pyrin在巨噬细胞M1型极化中的作用研究

目的：探讨Pyrin在巨噬细胞M1型极化中的作用。方法：培养人单核细胞株THP-1细胞,提取人外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）、小鼠骨髓来源巨噬细胞（bone marrow-derived macrophage,BMDM）。随机分为对照组和实验组,实验组用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS,100 ng/mL）复合干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ,20 ng/mL）干预（THP-1 18 h,PBMC、BMDM 24 h）构建巨噬细胞M1型极化模型。qRT-PCR、Western blot和流式细胞术检测2组M1型极化相关标志物,同时利用qRT-PCR和Western blot检测MEFV基因和Pyrin蛋白表达水平。结果：与对照组相比,实验组在LPS+IFN-γ刺激后,qRT-PCR检测THP-1细胞M1型极化标志物：肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）（t=-4.360,P=0.007）、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）（t=-8.329,P=0.000）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）（t=-2.924,P=0.033）、CD14（t=-2.858,P=0.035）、CD80（t=-3.433,P=0.019）,PBMC细胞M1型极化标志物：TNF-α（t=-2.893,P=0.034）、IL-1β（t=-3.606,P=0.015）、IL-6（t=-2.895,P=0.034）、CD14（t=-2.645,P=0.046）、CD80（t=-3.648,P=0.015）,BMDM细胞M1型极化标志物：TNF-α（t=-6.123,P=0.002）、IL-1β（t=-2.697,P=0.043）、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein 1,MCP-1）（t=-4.335,P=0.007）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）（t=-3.607,P=0.015）均明显增加,Western blot检测THP-1细胞M1型极化标志物：TNF-α（t=-3.827,P=0.031）、IL-1β（t=-4.189,P=0.025）、IL-6（t=-5.345,P=0.002）均明显增加,流式细胞术检测THP-1细胞M1型极化标志物HLA-DR（t=-3.270,P=0.017）、BMDM细胞M1型极化标志物F4/80+CD11c+（t=-3.833,P=0.009）均明显增加,提示M1型极化模型构建成功;在构建成功的M1型极化模型中,qRT-PCR检测THP-1细胞、PBMC细胞和BMDM细胞MEFV基因表达水平较对照组明显增加（t=-3.226,P=0.023;t=-2.989,P=0.030;t=-2.891,P=0.034）,Western blot检测THP-1细胞Pyrin蛋白表达水平较对照组明显增加（t=-8.591,P=0.000）。结论：巨噬细胞M1型极化中Pyrin表达增加,Pyrin可能与巨噬细胞M1型极化相关。     

阻断TIM-4分子对M1/M2型巨噬细胞极化及同种异体免疫排斥反应的影响

目的: 运用特异性单克隆抗体阻断抗原T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域蛋白-4(T-cell immunoglobulin and mucin domain containing protein-4,TIM-4),探讨其对巨噬细胞(M1/M2)极化及同种异体免疫排斥反应的影响。方法: 构建同种异体免疫排斥模型,将BALB/c小鼠脾细胞悬液注入C57BL/6小鼠腹腔,分为同型对照组(n=6)和抗TIM 4组(n=6);分别腹腔注射同型对照免疫球蛋白和抗TIM-4单克隆抗体, 300 μg/只;第5天,重复注射1次;第10天,处死两组小鼠,采用流式细胞术检测受体鼠脾和腹腔中M1和M2型巨噬细胞百分比;用实时荧光定量PCR法检测受体鼠脾和腹腔细胞中微小RNA-21(miR-21)、IL-10、p40、p35和EB病毒诱导基因3 (Epstein-Barr virus-induced gene 3,EBi-3)等mRNA表达水平。结果： 在脾细胞中,与同型对照组相比,抗TIM-4组M1和M2型巨噬细胞百分比、miR-21和p40 mRNA表达水平无明显变化(P均>0.05),但IL-10和p35 mRNA表达水平明显升高(P均<0.05),EBi-3 mRNA表达水平明显下降(P<0.05);在腹腔中,与同型对照组相比,抗TIM-4组M1型巨噬细胞百分比和p35 mRNA表达水平无明显变化(P均>0.05),而M2型巨噬细胞百分比、IL-10、p40和EBi-3 mRNA表达水平均显著升高(P均<0.05),miR-21表达水平显著降低（P<0.05）。结论： 阻断TIM-4分子促进小鼠腹腔M2增殖分化,上调脾和腹腔细胞中抑炎因子和促炎因子mRNA表达,减轻同种异体免疫排斥反应。     

lncRNA-MIAT对肿瘤相关巨噬细胞M2型极化的作用及其机制

目的：探讨lncRNA-MIAT对肿瘤相关巨噬细胞M2型极化的作用,并阐明其可能的作用机制。方法：体外培养THP-1细胞,将过表达（LV-MIAT）与下调lncRNA-MIAT表达（LVshMIAT）的慢病毒颗粒及空载体（LV-Vector）转染入THP-1细胞中,将THP-1细胞诱导活化为巨噬细胞,并采用Transwell共培养体系将活化后的巨噬细胞与骨肉瘤（OS） MG63细胞共培养,将上述共培养体系分为MG63+LV-Vector组（阳性对照组）、 MG63+LV-shMIAT组、 MG63+LVMIAT组和IL-4+LV-Vector组。检测各组THP-1细胞中lncRNA-MIAT表达水平,流式细胞术检测各组细胞中M2型巨噬细胞百分率,ELISA法检测各组THP-1细胞上清液中血管内皮生长因子（VEGF）、、白细胞介素4 (IL-10)和转化生长因子β1 (TGF-β1)水平,检测各组HUVEC中血管内皮细胞生长因子受体2 (VEGFR2)、Notch1和δ样蛋白4 (DLL4)表达水平。取各培养体系中的巨噬细胞与人脐静脉内皮血管细胞（HUVEC）共培养,EDU染色法检测各组...     

2-DG抑制糖酵解和线粒体自噬调控M1型巨噬细胞极化

目的:研究2-脱氧-d-葡萄糖(2-DG)对M1型巨噬细胞炎症极化的调控作用,初步探索糖酵解及线粒体自噬在其中的作用机制.方法:将THP-1细胞分为3组:M0组[100 nmol/L佛波酯(PMA)刺激48 h极化为M0型]、M1组(M0组基础上用10 ng/mL LPS和20 ng/mL IFN-y共刺激48 h诱导...     

左旋聚乳酸对单核细胞来源巨噬细胞M1/M2极化的影响及姜黄素的干预作用

目的观察可降解生物医学材料左旋聚乳酸(poly-L-lactic acid,PLLA)对巨噬细胞极化的体外影响,并探讨姜黄素改善PLLA植入后生物相容性的作用。方法采用PLLA(PLLA组)、姜黄素(姜黄素组)及其两者共同作用(PLLA+姜黄素组)于人类THP-1单核细胞分化而来的巨噬细胞,通过CCK8试剂盒检测PLLA和姜黄素对巨噬细胞的细胞毒性,通过ELISA和RT-qPCR检测各组巨噬细胞M1和M2的细胞因子[白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-10]的表达水平和基因转录水平检测。结果与对照组比较,PLLA组巨噬细胞炎症型M1细胞因子TNF-α、IL-6表达和转录水平显著升高,修复抗炎型M2细胞因子IL-10的表达水平升高但转录水平下降;与PLLA组比较,PLLA+姜黄素组的M1型细胞因子TNF-α、IL-6表达和转录水平下降,M2型细胞因子IL-10表达和转录水平上升。结论 PLLA促使体外培养的巨噬细胞向炎症型M1转化为主,且姜黄素促使PLLA作用下的巨噬细胞向M2型转化。     

平喘颗粒对哮喘小鼠Ⅱ型固有淋巴细胞及巨噬细胞M2型极化的影响

目的:观察平喘颗粒对哮喘小鼠肺组织中Ⅱ型固有淋巴细胞(ILC2)数量和巨噬细胞M2型极化的影响.方法:采用卵清蛋白致敏和激发构建哮喘小鼠模型,在此基础上分别给予平喘颗粒或IL-33中和抗体进行干预,分别通过HE、PAS和Masson染色观察各组小鼠肺组织病理形态,分别以ELISA和qRT-PCR法检测肺泡灌洗液及肺组织...     

TGF-β1对M2型巨噬细胞诱导淋巴瘤细胞增殖的影响

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对M2型巨噬细胞诱导淋巴瘤细胞增殖的影响。方法用TGF-β1处理淋巴瘤细胞Jiyoye,MTT测定细胞增殖。用M2型巨噬细胞培养液上清处理淋巴瘤细胞,同时给予TGF-β1刺激,MTT测定细胞增殖,Transwell小室测定细胞迁移和侵袭,Western blot测定基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞核增殖抗原(Ki-67)蛋白水平。结果 TGF-β1作用后的淋巴瘤细胞增殖能力下降,细胞侵袭数目、迁移数目明显降低,细胞中MMP-2、MMP-9、PCNA、Ki-67蛋白水平降低,与未处理的淋巴瘤细胞比较,差异有显著性(P0.05)。M2型巨噬细胞培养液上清处理后的淋巴瘤细胞增殖能力升高,细胞侵袭数目和迁移数目增多,细胞中MMP-2、MMP-9、PCNA、Ki-67蛋白水平升高,与未处理的淋巴瘤细胞比较,差异有显著性(P0.05)。淋巴瘤细胞经M2型巨噬细胞培养液上清和TGF-β1处理后细胞增殖能力、细胞侵袭数目、细胞迁移数目及MMP-2、MMP-9、PCNA、Ki-67蛋白水平较单纯TGF-β1处理的细胞相比明显升高,较单纯M2型巨噬细胞培养液上清处理后的细胞相比明显降低,差异有显著性(P0.05)。结论 TGF-β1可以降低巨噬细胞诱导淋巴瘤细胞增殖、侵袭和迁移,作用机制与MMP-2、MMP-9、PCNA、Ki-67蛋白表达有关。     

黄芪甲苷促M2型巨噬细胞极化的作用研究

目的 探讨黄芪甲苷对M2型巨噬细胞极化的影响.方法 黄芪甲苷体外作用小鼠原代巨噬细胞,用流式细胞仪检测其表面分子(CD206、MHCⅡ和CD80/86)表达,Real time-PCR检测M1/M2型巨噬细胞特征基因(iNOS、YM1和Arg1)的表达,ELISA测定炎症相关细胞因子(TNF-α、IL-6、TGF-β)的表达.结果 黄芪甲苷单独处理未能诱导M2型巨噬细胞生成,但其与IL-13联合处理可明显上调M2型巨噬细胞标志CD206、YM1和Arg1的表达,下调抗原提呈相关分子MHCⅡ和CD80/86的表达,促进抑炎细胞因子TGF-β的分泌.结论 黄芪甲苷通过协同作用方式促进M2型巨噬细胞极化.     

铁离子通过ROS-乙酰化P53促进巨噬细胞M1型极化

目的 探讨铁离子在促进巨噬细胞向促炎型表型(经典激活型,M1)极化的具体机制.方法 Western blot、qRT-PCR、流式细胞术(FCM)、组织免疫荧光、ROS探针(DCFH-DA)分别检测巨噬细胞极化指标(IL-1β、TNF-α、IL-10、TGF-β、CD86及CD206等)、p53、乙酰化p53和细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;通过还原性谷胱甘肽(reduced glutathione hormone,GSH)和P300/CBP乙酰化转移酶抑制剂(C646)分别处理巨噬细胞后,观察巨噬细胞的极化状态;通过皮下注射H22肝癌细胞,建立BALB/c裸鼠皮下H22肝癌细胞模型,给予铁剂处理后,观察肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophage,TAM)极化状态.结果 铁剂处理促鼠源性巨噬细胞(RAW 264.7)向M1型极化并高表达乙酰化P53(P ＜0.05);抑制p300/CBP乙酰化转移酶,能够明显抑制p53乙酰化、减弱M1极化效应(P＜0.05);小鼠皮下瘤模型中,经铁剂处理后,小鼠皮下瘤组织中CD86高表达、CD206低表达,并有更多的ROS产生.结论 细胞内铁过载促巨噬细胞向M1型极化,其机制可能与ROS产生,提高p300/CBP乙酰化转移酶活性,促进p53乙酰化有关.     

华蟾素通过调控M2型巨噬细胞极化抑制结直肠癌转移

目的 探讨华蟾素通过调控M2型巨噬细胞极化抑制结直肠癌转移的作用。方法 将THP-1诱导成M0型巨噬细胞,收集HCT116细胞的条件培养基,刺激M0型巨噬细胞,通过流式细胞术、RT-qPCR、ELISA实验观察M2型巨噬细胞极化状态;收集M0型巨噬细胞和HCT116-Mφ细胞的条件培养基,刺激HCT116细胞,通过划痕实验和Transwell实验观察迁移和侵袭能力;用CCK-8实验检测华蟾素对HCT116细胞活力的影响;收集HCT116和HCT116+华蟾素的条件培养基,刺激M0型巨噬细胞,通过流式细胞术、RT-qPCR、ELISA实验观察M2型巨噬细胞极化状态;收集HCT116-Mφ细胞和(HCT116+华蟾素)-Mφ细胞的条件培养基,刺激HCT116细胞,通过划痕实验和Transwell实验观察迁移和侵袭能力的改变。结果 M0型巨噬细胞在HCT116细胞的条件培养基刺激后,形态变成梭形的细胞,CD11b⁺CD206⁺细胞比例增高,M2型巨噬细胞标志物白细胞介素-10(IL-10)及转化生长因子-β(TGF-β)表达升高;HCT116细胞在...     

M1和M2型巨噬细胞在ACS中的研究

目的:探讨M1和M2型巨噬细胞在急性冠状动脉综合征(ACS)中的表达水平。方法:选取本院32例ACS患者为ACS组、30例稳定性心绞痛(SAP)患者为SAP组及32例健康对照者(HC)为HC组,流式细胞技术检测外周血M1、M2细胞,ELISA方法检测M1分泌的细胞因子TNF-α、M2分泌的细胞因子TGF-β1,仪器法检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)。结果:ACS组M1型细胞比例、TNF-α、hs-CRP水平均高于HC组、SAP组(P0.05),且M1细胞与TNF-α呈显著正相关(P0.000 1);ACS组M2型细胞比例、TGF-β1水平均低于HC组、SAP组(P0.05),且M2细胞与TGF-β1呈显著正相关(P0.000 1);SAP组M2型细胞比例、TGF-β1水平均低于HC组,TNF-α水平高于HC组,差异均有统计学意义(P0.05),SAP组和HC组M1型细胞比例、hs-CRP水平比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:在ACS的病程进展中,M1型细胞及其分泌的细胞因子TNF-α具有促炎作用,而M2及其分泌的细胞因子TGF-β1可能具有免疫保护作用。