中药对过敏性哮喘大鼠模型Th1/Th2型细胞因子的影响

目的:探讨中药治疗对哮喘大鼠IL- 4 mRNA和IFN-γ mRNA表达及IgE含量的影响.方法:24只Wistar大鼠, 随机分为中药治疗组、空白对照组和哮喘模型组, 利用卵白蛋白(OVA)及氢氧化铝制作大鼠哮喘模型, 在雾化激发期, 中药组用杏仁、甘草等中药制成的溶液雾化大鼠, 其余组用生理盐水代替.采用免疫放射法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法分别检测各组大鼠血清和肺泡灌洗液(BALF)中免疫球蛋白E(IgE)含量以及肺组织IL- 4 mRNA和IFN-γ mRNA表达.结果:与空白对照组比较, 模型组大鼠IgE含量和IL- 4 mRNA的表达明显升高(P<0.05).与模型组比较, 中药治疗血清IgE的含量和IL- 4 mRNA的表达明显降低(P<0.05), 而IFN-γ mRNA表达则升高(P<0.05).结论:IL- 4可能参与哮喘的发生, 而中药治疗可通过抑制IL- 4 mRNA和上调IFN-γ mRNA的合成, 改善哮喘炎症状态.     

牡荆素通过调节JAK2/STAT3/SOCS3通路改善哮喘幼鼠肺部炎症

目的 探究牡荆素对哮喘幼鼠的作用及其可能的作用机制。方法 卵清蛋白联合氢氧化铝制备BALB/c幼鼠哮喘模型,正常对照组、哮喘组、牡荆素组和地塞米松组各纳入9只BALB/c幼鼠。无创肺功能检测系统记录气道反应性;H-E染色检测肺组织病理学变化;PAS染色检测杯状细胞增生;收集肺泡灌洗液（BALF）并进行炎症细胞计数;ELISA试剂盒检测IgE、IL-4、IL-6、IL-13、IL-17和TNF-α水平;Western blot检测Bcl-2、Bax、c-caspase3、p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3和SOCS3蛋白表达。结果 与正常对照组相比,哮喘组幼鼠气道阻力、炎症评分和杯状细胞增生评分明显升高（P<0.05）,BALF中炎症细胞数量显著上升（P<0.05）,IgE、IL-4、IL-6、IL-13、IL-17和TNF-α水平明显升高（P<0.05）,Bax、c-caspase3、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3和SOCS3蛋白表达水平显著升高（P<0.05）,而Bcl-2蛋白表达水平显著降低（P<0.05）;与哮喘组...     

Th1/Th2类细胞因子在被动型Heymann肾炎发病中的作用

本文动态观测了被动型Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎（ＰＨＮ）发病各期的Ｔｈ１类细胞因子（ＩＬ ２,ＩＦＮ γ）和Ｔｈ２类细胞因子（ＩＬ ４）的变化。结果表明在注射兔抗肾近曲小管刷状缘抗体（Ｔｕｂ Ａｂ）７ｄ后即开始出现蛋白尿,同时ＩＬ ２,ＩＦＮ γ较正常对照诱生水平降低（Ｐ＜００５）,而ＩＬ ４诱生水平开始升高;在注射Ｔｕｂ Ａｂ第１４天时,出现大量蛋白尿,此时ＩＬ ４进一步升高,与正常对照及注射第７天时ＩＬ ４水平均存在统计学差异,ＩＬ ４与蛋白尿定量之间并有一定相关性;第２８天时蛋白尿开始降低,ＩＬ ２,ＩＦＮ γ比第７天和第１４天时略有升高,此时ＩＬ ４水平与正常对照无差异。表明ＩＬ ２,ＩＦＮ γ的降低和ＩＬ ４升高（即Ｔｈ１／Ｔｈ２的失衡）与本病存在一定关系。     

SOCS3通过抑制STAT3抑制受损伤大鼠初级感觉神经元生长

目的通过慢病毒转导SOCS3和作用相反的突变型SOCS3(mSOCS3),体外研究SOCS3在成年鼠的初级感觉神经元再生中的作用。方法将慢病毒载体质粒pRRL-SOCS3-IRES-GFP,pRRL-mSOCS3-IRES-GFP和pRRL-STAT3ER-IRES-GFP分别转染293T细胞,包装慢病毒载体并测定滴度。完全切断大鼠左侧坐骨神经,术后饲养8-128h,在不同时间点摘取双侧L5背根神经节。通过实时PCR和原位杂交检测DRGs中SOCS3 mRNA的存在;通过背根神经节分离神经元培养,分别将三种慢病毒载体感染神经元细胞,采用免疫荧光染色法观察神经元细胞核质反应和突起的长度。结果大鼠左侧坐骨神经损伤后,SOCS3 mRNA的表达在背根神经节神经元中明显增加,外源性SOCS3能阻止神经元中STAT3的磷酸化及核移位,mSOCS3增强了突起生长。结论 SOCS3可通过抑制STAT3抑制轴突生长。     

复发性自然流产育龄期妇女外周血Th1/Th2细胞因子表达分析

我们观察了21例复发性自然流产（recurrent spontaneousabortion,RSA）育龄期妇女外周血IL-4、IFN-γ表达水平及IFN-γ/IL-4比值变化,并与同期正常怀孕妇女的检测结果比较,现报告如下。     

细胞因子信号抑制因子在支气管哮喘TH1/TH2细胞失衡中的作用

目的 探讨细胞因子信号抑制因子（SOCS）在支气管哮喘（简称哮喘）患儿TH细胞亚群（TH1／TH2）功能失衡中的作用，以及转录因子T-bet和GATA3与TH1／TH2反应的关系。方法 观察20例哮喘患儿及相同数量同龄对照，采用流式细胞术（FCM）检测哮喘患者外周血CD4^＋T淋巴细胞浆中白细胞介素4（IL-4）和γ干扰素（INF-γ）的表达，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和荧光定量聚合酶链反应（real time PCR）测定淋巴细胞SOCS3、SOCS5、T-bet、GATA3 mRNA表达水平。结果 急性发作期哮喘患儿TH1细胞比例显著下降，TH2细胞显著增高（P〈0．01）；哮喘患儿淋巴细胞SOCS3、GATA3 mRNA表达水平显著高于正常同龄对照（P〈0．01），SOCS5、T-bet mRNA表达显著下降（P〈0．01）。结论 SOCS3、SOCS5、T-bet和GATA3表达异常与哮喘患儿TH1／TH2失衡有关，其中SOCS3和SOCS5表达异常可能是重要的因素之一。     

化学修饰的糖脂4′″-dh-iGb3对NKT细胞分泌Th1/Th2型细胞因子的影响

为研究两种i Gb3类似物(化学修饰的糖脂4′″-dh-i Gb3和4-HO-i Gb3)对NKT细胞Th1/Th2型细胞因子分泌的影响。采用流式细胞术检测经腹腔注射两种i Gb3类似物后C57BL/6小鼠脾脏NKT细胞数量的变化以及NKT细胞胞内IFN-γ和IL-4的表达水平;用Real-ti me PCR方法检测体外培养的脾脏淋巴细胞与i Gb3类似物共孵育后IFN-γ和IL-4的mRNA表达水平,并用ELISA方法检测孵育上清中IFN-γ和IL-4的含量。结果显示:与i Gb3组相比,经两种i Gb3类似物体内刺激后脾脏NKT细胞的数量都没有显著性变化。糖脂4-dh-i Gb3能够较i Gb3更强地诱导脾脏NKT细胞胞内IFN-γ的表达,也能够上调体外培养的脾脏淋巴细胞IFN-γ的mRNA水平及IFN-γ的分泌,而IL-4在所检测的各个水平上都没有显著性变化。提示化学修饰的糖脂4′″-dh-i Gb3能够诱导C57BL/6鼠脾脏NKT细胞Th1型细胞因子的分泌,而并不显著影响Th2型细胞因子的分泌,从而诱导Th1/Th2型细胞因子平衡向Th1方向偏移。     

锌通过调节Th1/Th2平衡及抗氧化降低哮喘大鼠气道炎症

目的 探讨锌对哮喘大鼠气道炎症的影响及机制。方法 建立哮喘大鼠模型,SD大鼠32只,按体重随机分为4组,A组为缺锌饲料+卵清蛋白（OVA）激发组;B组为补锌饲料+ OVA激发组;C组为正常锌饲料+ OVA激发组;D组为正常锌饲料+生理盐水激发组。诱喘后24 h取右肺HE染色,观察气道壁细胞成分;取左肺制备肺组织匀浆检测γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）水平。结果 与C组相比,A组大鼠支气管壁中嗜酸粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞数及肺组织匀浆中MDA均明显增加（P<0.05）,而IFN-γ、IFN-γ/IL-4、SOD及GPX均明显减少（P<0.05）;B组大鼠上述炎性细胞及MDA均明显减少（P<0.05）,而IFN-γ、IFN-γ/IL-4、SOD及GPX均明显增加（P<0.05）;IL-4含量两组无明显变化。结论 锌可能通过调节Th1/Th2平衡及抗氧化降低哮喘大鼠气道炎症。     

Effects of interleukin-18 on airway inflammation and the Th1/Th2 cytokine imbalance in guinea pig asthmatic model

Withrecent development of molecular biology andimmunology, more and more evidences suggestthat the Th1/Th2imbalanceis one of theimportantaspect of pathogenesisin bronchial asthma [1-3] .And modulation of the Th1/Th2 balance to controlthe airway inflammations has been proved to be ahot-spot inthe study of immune therapyfor bron-chial asthma [4-6] .Interleukin-18 (IL-18) , anewly discovered cytokine withregulatory effect onimmuno-competent cells ,has beeninvestigated byvarious authors for the …     

Th1/Th2类细胞因子失衡对哮喘大鼠淋巴细胞分泌神经生长因子的影响

研究已证实,T1亚群辅助细胞/12亚群辅助细胞(Th1/Th2)平衡失调是哮喘发病机制中关键的中心环节;而神经生长因子(nerve growth factor,NGF)作为神经可塑性调控因子,通过诱导神经源性炎症反应参与哮喘发病[1].     

Thioredoxin suppresses airway inflammation independently of systemic Th1/Th2 immune modulation

Oxidative stress plays an important role in the pathogenesis of asthma via the upregulation of local inflammatory mediators and/or promoting Th2‐skewing during Ag sensitization. Thioredoxin (TRX), a 12 kDa redox‐active protein with antioxidative property, has been recently shown to play a protective role in various inflammatory diseases. Using a mouse model of asthma, we show here that IL‐13 and eotaxin production are decreased in TRX‐Tg mice leading to reduced eosinophils recruitment and mucus metaplasia. The reduction in airway inflammation occurs without the attenuation of systemic Th2 immunity in that comparable levels of Th2‐type cytokines and Ig were detected in LN and serum, respectively, from TRX‐Tg and WT mice. Likewise, CD4⁺ T cells from both strains of mice developed similar Th1 and Th2 responses in vitro. Asthmatic lungs of TRX‐Tg and WT mice contained similar amounts of GATA‐3⁺ and Foxp3⁺ T cells. Finally, production of MIF, an upstream modulator of airway inflammation, was significantly reduced in the lungs of TRX‐Tg mice. Our data suggest that TRX suppresses airway inflammation by inhibiting MIF production thereby limiting the downstream recruitment of eosinophils to the lung independently of modulating systemic Th1/Th2 immunity.     

神经生长因子对哮喘大鼠Th1/Th2类细胞因子分泌的调控作用

目的探讨支气管哮喘时神经生长因子(NGF)对Th1/Th2类细胞因子分泌的调控作用。方法随机将SD大鼠分为4组:正常对照组、哮喘组(建立哮喘模型)、外源性NGF干预组(NGF组)、抗NGF抗体干预组(抗NGF抗体组),每组8只。14d后取肺组织进行HE染色,观察病理改变;免疫组化和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织的NGF蛋白,Th1类细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、Th2类细胞因子白细胞介素4(IL-4)蛋白水平。结果哮喘组支气管、肺组织炎症明显;肺组织NGF蛋白的分泌水平和免疫阳性信号也显著增高(P<0·001);IL-4蛋白水平明显增强(P<0·05),而IFN-γ蛋白水平明显减低(P<0·001);肺组织中的NGF蛋白与IFN-γ/IL-4蛋白比值呈显著负相关(P<0·01)。NGF组更进一步增强上述变化(P<0·05),而抗NGF抗体干预组显著缓解上述变化(P<0·05)。结论NGF可诱导哮喘大鼠神经源性炎症,并分别通过增强Th2类细胞因子分泌,减弱Th1细胞因子分泌,诱导哮喘Th1/Th2免疫失衡效应。     

Cavin-1 promotes M2 macrophages/microglia polarization via SOCS3

Purpose

Our study aimed to investigate the function of Cavin-1 and SOCS3 in macrophages/microglia M2 polarization and further explored the relevant mechanism.

Methods

Expression levels of Cavin-1 and SOCS3 in macrophages/microglia were measured by western blotting and RT-PCR, respectively. Then, Cavin-1 or SOCS3 was gene silenced by a siRNA approach, and gene silencing efficiency was determined by western blotting. Next, co-immunoprecipitation (Co-IP) was employed to further analyze the interaction between Cavin-1 and SOCS3. Finally, the activation of STAT6/PPAR-γ signaling was evaluated using western blotting, and the M2 macrophages/microglia polarization was validated by measuring the mRNA expression of M2 markers by RT-PCR.

Results

In the polarization process of macrophages/microglia to M2 phenotype, both Cavin-1 and SOCS3 increased synchronously at protein and mRNA level, reached the peak at the 6 h, and then decreased. After Cavin-1 or SOCS3 silencing, the expression of Cavin-1 and SOCS3 declined. These results suggested that Cavin-1 and SOCS3 were positively correlated in macrophages/microglia, and this conjecture was verified by Co-IP. Besides, Cavin-1 silencing not only suppressed the activation of STAT6/PPAR-γ pathway, but also suppressed the release of anti-inflammatory factors. Finally, we found that SOCS3 overexpression reversed the inhibitory effect of Cavin-1 silencing on the release of anti-inflammatory factors in M2 macrophages/microglia.

Conclusions

Cavin-1 and SOCS3 are actively involved in the process of M2 macrophages/microglia polarization. As a SOCS3 interacting protein, Cavin-1 can promote M2 macrophages/microglia polarization via SOCS3.

     

CCK-8对KLH免疫小鼠脾细胞Th1/Th2平衡的影响

目的： 探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）对Th1/Th2平衡的调节作用。方法: 给予BALB/c小鼠钥孔戚血蓝蛋白（KLH）免疫同时体内给予不同剂量的CCK-8,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其脾细胞培养上清中Th1型细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2（IL-2）和Th2型细胞因子白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）水平,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测脾细胞中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5 mRNA表达;ELISA法检测血清中Th1型抗KLH抗体IgG2a和Th2型抗KLH抗体IgG1水平。结果: ①KLH免疫使小鼠脾细胞分泌Th1/Th2型细胞因子水平明显增高,mRNA表达增高,KLH免疫同时给予CCK-8可使脾细胞培养上清中IFN-γ、IL-2含量进一步增加和IFN-γ、IL-2mRNA表达增高,而使IL-4、IL-5含量降低,IL-4、IL-5 mRNA表达减低和降低IL-4/IFN-γ比值。②KLH免疫小鼠血清中IgG2a、IgG1发生不同程度增高,CCK-8可使其血清中IgG1水平减低而使IgG2a水平增高。结论: CCK-8可促进KLH免疫小鼠体内Th1反应,使Th2优势反应向Th1方向转变。     

细粒棘球蚴感染对哮喘大鼠血清白介素-17水平及Th1/Th2平衡的影响

目的建立细粒棘球蚴感染并发过敏性哮喘实验动物模型及探讨细粒棘球蚴感染对过敏性哮喘的作用。方法 24只健康Wistar大鼠,随机分为3组,A组为正常对照组,B组为单纯哮喘组,C组为细粒棘球蚴感染并发哮喘组。C组大鼠经腹腔注射感染细粒棘球蚴,70 d后,以卵白蛋白(OVA)分别对B组、C组大鼠进行致敏及激发,建立过敏性哮喘模型。取大鼠肺组织作病理切片,观察大鼠肺组织的炎症变化,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清白介素-17(IL-17)、白介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)的水平。结果与B组比较,C组大鼠血清IL-17和IL-4的水平明显下降(P<0.05),而血清IFN-γ的水平明显上升(P<0.05)。各组大鼠血清IL-4与IFN-γ水平呈密切负相关(r=-0.915),IL-4和IFN-γ水平与IL-17呈负相关关系(r=-0.406,-0.603),P<0.05。结论细粒棘球蚴感染对过敏性哮喘的发生有抑制作用。     

地塞米松对哮喘大鼠T-bet/GATA-3的影响

目的：探讨地塞米松对转录因子T-bet/GATA-3的影响。方法：将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组与地塞米松组,每组10只。于第1、8天腹腔注射卵白蛋白,第15天雾化吸入卵白蛋白引喘,每日一次,共14次。地塞米松组于实验开始后第15天起,按0.5 mg/kg予以腹腔注射地塞米松,每日一次,共14次。流式细胞术测脾及外周血Th1、Th2含量,免疫组化法及免疫印迹法测T-bet、GATA-3蛋白表达,逆转录聚合酶链反应测T-bet、GATA-3mRNA的表达。结果：模型组与正常组比较,脾与外周血中Th1、Th2含量有非常显著性增多（P＜0.01）;肺组织中T-bet、GATA-3蛋白与mRNA的表达亦有非常显著性升高（P＜0.01）。而地塞米松组与模型组比较,T-bet/GATA-3有显著（P＜0.05）或非常显著（P＜0.01）性升高。结论：T-bet/GATA-3是影响Th1/Th2平衡的关键转录因子,地塞米松可提高T-bet/GATA-3比值,从而减轻哮喘的发作。