金雀异黄素抑制糖基化终末产物对人腹膜间皮细胞CTGF、FN合成和表达的影响

目的 通过体外实验研究,观察糖基化终末产物(AGEs)对体外培养的人腹膜间皮细胞(HPMC)表达纤维连接蛋白(FN)和结缔组织生长因子(CTGF)的影响.观察金雀异黄素(Gen)对AGEs诱导HPMC的FN和CTGF表达的影响.进一步探讨Gen抑制腹膜透析患者腹膜纤维化的机制.方法 (1)分别以不同的浓度的AGEs(0、200、600、1 000mg / L)刺激HPMC 48h后,用RT-PCR方法检测FN的表达情况.(2)将体外培养的HPMC分为5组:正常组(未加任何刺激因素)、AGEs组(AGEs的终浓度为600mg / L)、低剂量Gen组(AGEs和Gen的终浓度分别为600mg / L、25μmol / L)、中剂量Gen组(AGEs和Gen的终浓度分别为600mg / L、50μmol / L)和高剂量Gen组(AGEs和Gen的终浓度分别为600mg / L、100μmol / L),各组予刺激HPMC48h后,用RT-PCR方法检测细胞内FN和CTGF mRNA的水平,ELISA方法测定细胞内FN和CTGF蛋白的表达.结果 (1)AGEs剂量依赖性上调HPMC FNmRNA的水平.(2)与正常对照组比较,AGEs组FN、CTGFmRNA的水平和蛋白的表达明显增加(均P<0.01);与AGEs组比较,25μmol / L、50μmol / L、100μmol / L的Gen均能明显抑制AGEs诱导的FN、CTGFmRNA的水平和蛋白的的表达(均P<0.01).结论 AGEs可诱导体外培养HPMC的FN、CTGF基因和蛋白的高表达;而Gen能抑制AGEs诱导的FN、CTGF基因和蛋白的表达.     

Troglitazone对人腹膜间皮细胞TGF-β1 和纤维连接蛋白表达的影响

目的:研究过氧化物增生体激活受体γ(PPAR-γ)激动剂troglitazone(曲格列酮,TGZ)对高浓度葡萄糖刺激下体外培养的人腹膜间皮细胞(HPMCs)中TGF-β1和细胞外基质纤维连接蛋白(Fn)表达的影响.方法:采用胰蛋白酶消化法从人大网膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型.根据细胞增殖与毒性实验选择troglitazone的最佳浓度15 μmol/L,干预高浓度葡萄糖(30 mmol/L D-葡萄糖)刺激下的人腹膜间皮细胞.采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)半定量检测HPMCs中PPAR-γ,TGF-β1以及Fn的mRNA表达;采用双抗夹心法酶联免疫吸附实验检测HPMCs培养液中TGF-β1蛋白质水平;Western印迹检测Fn蛋白质水平.结果:高糖(30 mmol/L D-葡萄糖)刺激可在mRNA和蛋白质水平明显上调HPMCs表达TGF-β1和Fn(P＜0.01),troglitazone干预高糖孵育的HPMCs,可使TGF-β1和FnmRNA和蛋白质的表达明显下调(P＜0.05).结论:Troglitazone能够明显抑制在高糖刺激下的HPMCsTGF-β1和Fn的表达,这可能为临床防治长期腹膜透析患者的腹膜纤维化提供一种较为有效的方法.     

葛根素对体外培养人腹膜间皮细胞保护作用的研究

目的:了解葛根素对体外培养的人腹膜间皮细胞增殖活性、氧化应激和转移生长因子-β1(TGF-β1)分泌的影响.方法:体外培养人腹膜间皮细胞,分对照组,腹膜透析液(PDS)组及葛根素1、2、3组(葛根素终浓度依次为50、100、200μg·ml-1)5组观察.检测各组间皮细胞的增殖活性,上清MDA、SOD、GSH水平以及TGF-β1的含量并进行比较.结果:在PDS干预下腹膜间皮细胞MTT还原能力明显下降,上清液MDA水平较对照组显著升高,SOD、GSH水平较对照组显著降低.葛根素组MDA水平显著低于PDS组,SOD、GSH水平显著高于PDS组.腹膜间皮细胞在PDS干预下分泌TGF-β1较对照组显著增加,葛根素组TGF-β1分泌与PDS组比较有显著下降.结论:葛根素可以拮抗商业性PDS对腹膜间皮细胞增殖活性的抑制作用,可以抑制氧化应激和TGF-β1分泌.     

通络方剂对1型糖尿病大鼠肾功能及肾脏CTGF、RAGE、p-ERK1/2表达的影响

目的观察通络方剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病大鼠肾组织CTGF、RAGE、p-ERK1/2表达的影响,并探讨其可能的肾脏保护机制。方法健康SD大鼠随机分为正常组(n=10)和造模组(n=50)。造模组大鼠给予单次腹腔注射STZ 60 mg/kg,造模成功后随机分为5组:糖尿病非治疗组,通络方剂低、中、高剂量组,氯沙坦组(n=10)。适应性饲养1周后,按分组不同每天分别给予不同处理因素,持续12周后处死,称体质量,测血肌酐、尿素氮,留24 h尿检测尿肌酐、尿蛋白、尿微量白蛋白,取左肾称质量,Real-time PCR法检测右肾组织中CTGF mRNA、RAGE mRNA的表达,Western印迹法检测右肾组织CTGF、RAGE、p-ERK1/2、Total-ERK1/2蛋白的表达。结果通络方剂中、高剂量组较糖尿病非治疗组能明显降低糖尿病大鼠血尿素氮、24 h尿蛋白、尿微量白蛋白、肌酐清除率,改善肾功能,降低RAGE mRNA、CTGF mRNA的表达,减少RAGE、CTGF、p-ERK1/2蛋白表达(P<0.05)。结论通络方剂可能通过抑制RAGE-ERK1/2-CTGF信号转导通路发挥对1型糖尿病大鼠的肾脏保护作用。     

氟伐他汀对高糖腹透液诱导人腹膜间皮细胞纤维连接蛋白表达的影响

目的:探讨氟伐他汀(fluvastatin,Flu)对高糖腹透液(high-glucose peritoneal dialysate,HGPDS)诱导人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)纤维连接蛋白(fibronectin,FN)表达的影响?方法:体外培养HPMCs,同步化24 h后,分为正常对照组?HGPDS组?HGPDS+Flu组?单纯氟伐他汀组?DMSO对照组,各组分别刺激不同时间后,噻唑蓝(MTT)检测各组细胞的活力,RT-PCR检测FN的mRNA表达,ELISA法检测上清液FN蛋白表达的变化?结果:与正常对照组比较,HGPDS明显抑制细胞活力,HGPDS联合Flu共同培养24?36 h,细胞活力有所恢复,其中,1 × 10-6 mol/L Flu作用24 h,细胞活力改善差异有统计学意义(P < 0.05);与正常对照组比较,HGPDS明显增加人腹膜间皮细胞FN mRNA及蛋白表达(P < 0.05),并呈时间依赖性,其中FN mRNA于6 h达高峰,FN蛋白于24 h达高峰?Flu 可抑制HGPDS诱导的FN的高表达(P < 0.05),并呈浓度依赖性?结论:HGPDS诱导体外培养人腹膜间皮细胞FN表达增加,此作用可被Flu 抑制?     

左旋肉碱对高糖条件下人腹膜间皮细胞增殖、凋亡及纤维连接蛋白分泌的影响

目的：探讨左旋肉碱对高糖条件下体外培养人腹膜间皮细胞增殖、凋亡及纤维连接蛋白（FN）分泌的影响。方法：以不同浓度左旋肉碱作用体外培养人腹膜间皮细胞，MTT法测定细胞增殖，Annexin V-FITC／PI双标记法检测细胞凋亡，ELISA法检测培养液中FN浓度。结果：不同浓度左旋肉碱作用24h后，0．1％左旋肉碱组细胞增殖活性显著升高（P〈0．05），作用72h后0．5％及1．0％左旋肉碱组细胞增殖活性明显降低（P〈0．05）。作用48及72h后0．05％及0．1％左旋肉碱组细胞凋亡率降低。作用24h后0．05％左旋肉碱组培养液中FN浓度升高（P〈0．05），作用72h后左旋肉碱组培养液中FN浓度均下降（P〈0．01）。结论：高糖条件下一定浓度的左旋肉碱可以促进人腹膜间皮细胞增殖、减少其凋亡。     

氨基胍对乳酸盐腹膜透析液致人腹膜间皮细胞损伤及血管内皮生长因子表达的影响

目的 研究氨基胍(AG)对乳酸盐腹膜透析液(L-PDS)致人腹膜间皮细胞(HMrSV5)损伤及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 采用人腹膜间皮细胞株HMrSV5为体外实验模型,分为无血清DMEM培养液对照组、L-PDS组(2.5%L-PDS)、L-PDS+AG组(2.5%L-PDS+10 mmol/L AG)、单纯AG组(终浓度10 mmol/L).各组以上不同干预因素与HMrSV5细胞共孵育.MTT法检测各组细胞增殖、评估细胞活力,Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测VEGF蛋白及mRNA的表达.结果 MTT试验表明,L-PDS组OD值为(0.120±0.019),明显低于对照组的(0.298±0.031),差异有统计学意义(P<0.05);L-PDS+AG组OD值为(0.289±0.022),明显高于L-PDS组,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot和RT-PCR结果均表明,与对照组比较,L-PDS组细胞中VEGF蛋白和mRNA表达明显增加,与L-PDS组比较,PDS+AG组VEGF蛋白和mRNA的表达明显减低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 AG可拮抗乳酸盐腹膜透析液致人腹膜间皮细胞损伤并下调VEGF的表达.     

葛根素抑制葡萄糖腹膜透析液中糖基化终末产物形成的体外研究

目的：观察葛根素能否在体外减少葡萄糖腹膜透析液中晚期糖基化终末产物（AGEs）的产生。方法：将20 g牛血清白蛋白充分溶解于1 000 m l 2.5%腹膜透析液中,根据葛根素终浓度分5组观察（葛根素终浓度A组为0 g.L-1,B组为0.01 g.L-1,C组为0.05 g.L-1,D组为0.1 g.L-1,E组为0.2 g.L-1）。过滤除菌后37℃保存,分别于第1天、7天、1个月、2个月以及3个月时取样本1 m l进行AGEs测定。结果：腹膜透析液中添加牛血清白蛋白后,随着时间的延长,透析液中AGEs的浓度逐渐升高。加入不同浓度葛根素的试验组,其AGEs的浓度均较同期未加入葛根素的试验组明显降低,并且随着葛根素浓度增加,AGEs的浓度渐降。结论：葛根素对体外腹膜透析液中AGEs形成有明显的抑制作用,且它的这种抑制作用呈现剂量依赖性。     

腹膜透析大鼠腹膜组织中HIF-1α和CTGF的表达

目的:探讨尿毒症腹膜透析大鼠腹膜组织中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和结缔组织生长因子(CTGF)的表达及意义。方法:32只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、尿毒症组及腹膜透析组,每组8只。尿毒症和腹膜透析组大鼠制备尿毒症模型,腹膜透析组于尿毒症造模成功后第6周开始每天规律行腹膜透析,28d后取4组大鼠新鲜腹膜组织,采用免疫组化及RT-PCR技术检测HIF-1α、CTGF蛋白及mRNA的表达水平,并采用免疫组化技术检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果:4组大鼠腹膜组织中HIF-1α、CTGF蛋白和mRNA的表达水平及α-SMA蛋白表达水平差异均有统计学意义(P均<0.001),尿毒症组上述指标较正常对照组升高,腹膜透析组较尿毒症组升高更明显(P<0.05)。4组腹膜组织中3个蛋白的表达均呈正相关(P<0.05)。结论:腹膜透析大鼠腹膜纤维化的发生可能与HIF-1α、CTGF的表达上调有关。     

川芎素对高糖致人腹膜间皮细胞分泌FN和PAI-1的作用

目的研究高糖对人腹膜间皮细胞(HPMC)分泌纤维连接蛋白(FN)和血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响,并进一步探讨川芎素对高糖致HPMC分泌FN和PAI-1的干预作用。方法采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立体外培养模型;用酶联免疫双抗夹心法(ELISA)检测HPMC培养液中FN和PAI-1蛋白质水平;用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测HPMC细胞内FN和PAI-1mRNA的表达。结果与单纯对照组相比,2.5%高糖刺激后,HPMC 培养液内FN和PAI-1蛋白质水平显著升高(P< 0.01),并上调HPMC FN和PAI-1的mRNA表达;加入低剂量(20,40μg/ml)川芎素后,FN和PAI-1蛋白质水平显著下降(P<0.01),mRNA表达水平下调。但随着剂量的加大,川芎素的上述作用减低乃至消失。结论高糖可引起HPMC FN和PAI-1蛋白质水平增加,并上调HPMC FN和PAI-1mRNA的表达,适当剂量的川芎素可拮抗高糖的上述作用。     

糖基化终产物诱导肾系膜细胞CTGF mRNA表达的规律

目的:探讨糖基化终末产物(AGEs)对大鼠肾系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达的影响。 方法：在体外培养的大鼠肾系膜细胞培养基中,分别加入不同浓度的糖化牛血清白蛋白（AGE-BSA）及牛血清白蛋白（BSA）,RT-PCR法检测细胞转化生长因子β₁ (TGF-β₁)和结缔组织生长因子(CTGF) mRNA表达。 结果：与加入BSA组比较,AGE-BSA组TGF-β₁和CTGF mRNA表达明显增强（P<0.01）,TGF-β₁ mRNA表达增强发生时间早于CTGF。 结论：AGEs能明显诱导肾系膜细胞CTGF mRNA表达上调,并且具有时间和剂量依赖性。     

糖基化终产物对人单核细胞EMMPRIN基因表达的影响

目的:探讨糖基化终产物(AGEs)对人单核细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)表达的影响。方法:在培养的人单核细胞株中分别加入不同浓度AGEs干预24h和同一浓度AGEs干预不同的时间点,以1640培养基和相应浓度的牛血清白蛋白为对照组。用逆转录聚合酶链反应检测EMMPRIN mRNA的表达水平。结果:AGEs干预人单核细胞的EMMPRIN mRNA水平与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);且其表达呈时间和浓度依赖性降低(P<0.05)。结论:AGEs以时间及浓度依赖的方式减少人单核细胞EMMPRIN mRNA的表达。     

人巨细胞病毒和糖基化终产物共同作用对血管内皮细胞的影响

目的：观察人巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）和糖基化终产物（advanced glycation end products, AGEs）共同作用对血管内皮细胞（vein endothelial cells，ECV）氧化应激的影响及对糖基化终产物受体（the receptor for advanced glycation end products, RAGE）表达的影响，明确HCMV和AGEs在致内皮细胞损伤作用中是否具有协同效应，探讨HCMV和AGEs致动脉粥样硬化 （AS）发生和发展的可能机制。方法：用HCMV和AGEs分别及共同作用于ECV，将实验对象分为：对照组、HCMV组、牛血清白蛋白（BSA）组、AGEs组、AGEs＋HCMV组5组；用激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧（ROS）的改变；采用RT-PCR方法检测血管内皮细胞RAGEmRNA的表达。结果：HCMV感染ECV后，对照组荧光强度和BSA组荧光强度均较弱，两组间比较差异无统计学意义（P>0.05）；AGEs组和HCMV组荧光强度强于对照组（P<0.01）；AGEs＋HCMV组荧光强度高于AGEs组和HCMV组（P<0.05），两者联合作用存在协同效应。对照组和BSA组ECV细胞RAGEmRNA均有低水平表达，两组之间比较无差异（P>0.05）；AGEs组和HCMV感染组RAGEmRNA表达量高于对照组（P<0.01）；AGEs＋HCMV组表达量高于AGEs组和HCMV组（P<0.01）。在相同病毒滴度感染的情况下，随AGEs浓度增加RAGEmRNA的表达增高，呈浓度依赖性；在相同AGEs浓度作用时，随HCMV感染滴度增加RAGEmRNA的表达水平升高，呈滴度依赖性。各组之间比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：HCMV和AGEs均能够增强血管内皮细胞氧化应激，促进RAGEmRNA的表达，两者共同作用时呈协同效应。HCMV和AGEs有可能通过协同增强氧化应激、进一步上调RAGEmRNA的表达，介导血管内皮细胞的炎症反应，促进动脉粥样硬化的发生、发展。     

晚期糖基化终产物与糖尿病性勃起功能障碍

糖尿病性勃起功能障碍（DMED）是糖尿病患者常见的并发症之一，其发病机制十分复杂，涉及到神经、血管、代谢、内分泌、神经递质等多方面因素。大量研究表明，糖尿病患者体内不断积聚的晚期糖基化终产物（AGE）在各种糖尿病并发症的发生发展过程中起了重要的作用，作者针对AGE在DMED发生发展过程中的作用作一综述。     

葡萄子原花青素对糖尿病肾病大鼠非酶糖基化终产物和骨形态蛋白7表达的影响

   目的   研究葡萄子原花青素（GSPE）对糖尿病大鼠非酶糖基化终产物（AGEs）、肾组织结缔组织生长因子（CTGF）及骨形态蛋白7（BMP 7）表达的影响。  方法   将45只链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型随机分为糖尿病组（DM组,n=15只）、GSPE小剂量［250mg/（kg·d）］治疗组（T1组,n=15只）和大剂量［500mg/（kg·d）］治疗组（T2组,n=15只）,另以15只正常大鼠作为对照组（C组）,15只正常大鼠给予GSPE 250mg/（kg·d）作为正常治疗组（CT组）。于24周末检测各组大鼠血糖、血清AGEs、血压、24?h尿蛋白定量、血肌酐（Scr）、尿肌酐（Ucr）、肾重/体重水平。以光镜PAS染色及电镜观察肾脏病理改变。用RT PCR、Western blot方法及免疫组化方法检测肾组织中CTGF、BMP-7mRNA及蛋白表达水平的改变。  结果   与C组相比,DM组血清AGEs、血压、24h尿蛋白定量、内生肌酐清除率（Ccr）、肾重/体重均显著升高（P＜0.01）,肾病理改变加重,肾组织CTGF mRNA及蛋白表达增加（P＜0.01）,而BMP-7mRNA及蛋白降低（P＜0.05）。与DM组相比,T1组和T2组血清AGEs、血压、24h尿蛋白定量、Ccr和肾重/体重显著降低（P＜0.05或P＜0.01）,病理改变减轻, BMP-7mRNA及蛋白表达水平升高(P＜0.05或P＜0.01）,而CTGF mRNA及蛋白显著降低（P＜0.01）。T1组与T2组之间相比,Ccr、肾重/体重水平、CTGF mRNA及蛋白差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。   结论    GSPE可以减轻糖尿病大鼠蛋白尿、改善肾脏病理,对其肾脏有明显保护作用,其机制与降低血清AGEs、抑制肾组织CTGF过高表达、上调BMP-7表达有关。     

晚期糖化终产物对离体血管平滑肌细胞的影响

探讨晚期糖化终产物对离体新生牛胸主动脉血管平滑肌细胞的影响及机制。方法：观察ＶＳＭＣ受ＡＧＥｓ刺激后其生长,超微结构和血小板源生长因子－Ａ（ＰＤＧＦ－Ａ）的变化以及维生素Ｅ对上述变化的影响。结果：ＡＧＥｓ促进ＶＳＭＣ生长,细胞内ＡＧＥｓ和ＰＤＧＦ－Ａ的免疫反应呈阳性,线粒体和粗面内质网增多。     

晚期糖基化终末产物对骨髓内皮祖细胞功能的影响及意义

目的 观察体外培养的骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)在晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)作用后功能的改变,探讨AGEs影响EPCs功能的可能机制及在动脉粥样硬化发生、发展中的作用. 方法 使用密度梯度离心法从骨髓获取单个核细胞并进行体外培养.对贴壁细胞进行细胞化学分析,以激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记荆豆凝血素Ⅰ(FITC-UEA-Ⅰ)和DiI-标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-acLDL)双染色阳性细胞为正在分化的EPCs.培养细胞中加入不同浓度AGEs,测定AGEs作用后EPCs的迁移、黏附、增殖能力,同时分析细胞内活性氧浓度及细胞的凋亡情况.结果 AGEs作用后EPCs生物学功能明显减退,细胞内氧化应激增强,凋亡率增加;同时这种改变可以被AGEs蛋白交联阻断剂ALT711削弱. 结论 AGEs增加骨髓EPCs内活件氧生成,增强氧化应激,破坏细胞内环境稳定性,使细胞生物学功能受损,最终导致细胞凋亡.这种变化与AGEs浓度成剂量依赖性.     

糖基化终末产物损伤冠状动脉平滑肌细胞Kv通道

目的 研究糖基化终末产物（advanced glycation end products,AGEs）对大鼠冠状动脉平滑肌细胞电压门控性钾离子（voltage-gated K⁺,K_v）通道电流的影响。方法 分离大鼠冠状动脉平滑肌细胞,分为空白对照组、糖基化牛血清白蛋白（AGE-bull serum albumin,AGE-BSA）组、AGE-BSA+抗AGE受体抗体（anti-receptor of AGEs immunoglobulin G,anti-RAGE IgG）组进行干预。采用膜片钳技术检测各组细胞K_v通道电流,采用Western blotting、实时荧光定量PCR方法检测各组细胞K_v1.2和K_v1.5通道蛋白及mRNA的表达。结果 AGE-BSA直接干预冠状动脉平滑肌细胞明显抑制了平滑肌细胞的K_v电流达32.7%,并使K_v1.2和K_v1.5通道蛋白及mRNA的表达明显下调。而给予anti-RAGE IgG预处理30 min后再加入AGE-BSA刺激,平滑肌细胞的Kv电流密度及Kv1.2和Kv1.5通道蛋白及mRNA的表达与空白对照组相比,差异无统计学意义。结论 AGEs通过结合RAGE损伤冠状动脉平滑肌细胞K_v通道。     

糖化终末产物对人结肠癌HCT116细胞中ChREBP表达的影响

目的 研究糖化终末产物（advanced glycation end products, AGEs）对人结肠癌HCT116细胞中碳水化合物反应元件结合蛋白（carbohydrate responsive element binding protein, ChREBP）表达的影响。方法 采用RT-PCR检测AGEs处理的人结肠癌HCT116细胞中ChREBP及其下游基因的表达;使用N-乙酰半胱氨酸（NAC）干预氧化应激状态;运用Western印迹法观察在HCT116细胞中AGEs诱导对ChREBP表达的影响;运用MTS比色法观察AGEs诱导对HCT116细胞增殖的影响。结果 AGEs刺激后人结肠癌HCT116细胞中转录因子ChREBP表达增加（P<0.05）;细胞经抗氧化剂NAC处理后,AGEs刺激所致ChREBP表达增加和HCT116细胞增殖均被明显抑制（P<0.05）。结论 AGEs通过激活氧化应激反应来上调人结肠癌HCT116细胞中的ChREBP表达。     

高糖腹透液对腹膜间皮细胞分泌VEGF的影响及氟伐他汀的干预作用

目的:观察氟伐他汀(fluvastatin,Flu)对高糖腹透液(high-glucose peritoneal dialysate,HGPDS)诱导的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响?方法:体外培养HPMCs,同步化48 h后,分组如下:正常对照组?HGPDS组?HGPDS+Flu组?单纯Flu组?倒置显微镜观察各组细胞形态,RT-PCR法检测各组VEGF的mRNA表达,Western blot检测各组VEGF蛋白的表达?结果:与正常对照组相比,在HGPDS作用下,48 h后细胞由铺路石样转变为长梭形,1 × 10-6 mol/L Flu可部分逆转HPMCs的形态改变?与正常对照组相比,在HGPDS作用下,人腹膜间皮细胞VEGF mRNA及蛋白表达明显增多(P < 0.05),并呈时间依赖性,VEGF mRNA和蛋白分别在HGPDS干预后12 h和48 h达高峰(P < 0.05)?Flu可明显抑制HGPDS诱导的VEGF的表达(P < 0.05),并呈浓度依赖性?结论:适当浓度的Flu可以抑制HGPDS刺激体外培养人腹膜间皮细胞VEGF表达增加?