白细胞介素-2预处理对缺氧/复氧心肌细胞收缩功能的影响

目的：观察白细胞介素-2（IL-2）预处理对缺氧/复氧过程中心肌细胞收缩功能的作用并探讨其作用机制。方法： 采用酶解法分离成年大鼠心室肌细胞缺氧/复氧模型，用视频跟踪计算机系统记录测定单个心室肌细胞收缩。心室肌细胞收缩参数包括最大收缩幅度（dL）、细胞最大收缩速度（+dL/dtmax）、细胞最大舒张速度（-dL/dtmax）和舒张末期细胞长度。结果： ①缺氧/复氧过程中，缺氧5、10、15和20 min时，心肌细胞dL、+dL/dtmax和-dL/dtmax明显降低。复氧5 min 时±dL/dtmax和dL有所恢复，但复氧10 min后±dL/dtmax、dL和舒张末期细胞长度又明显降低。②2×103 U/L IL-2对心室肌细胞收缩无明显作用。用此浓度IL-2预处理心室肌细胞15 min可明显改善缺氧/复氧引起的心室肌细胞收缩功能的减弱。③用选择性κ-阿片受体拮抗剂nor-BNI（10-8 mol/L）预处理后，IL-2对缺氧/复氧过程中心室肌细胞收缩的影响被减弱。④PKC抑制剂chelerythrine(3×10-6 mol/L) 可明显减弱IL-2的作用。⑤IL-2对缺氧/复氧过程中心室肌细胞收缩的影响可被线粒体ATP敏感性钾通道阻断剂5-HD（10-4 mol/L)明显抑制。结论： 2×103 U/L IL-2预处理可明显改善缺氧/复氧心室肌细胞的收缩功能。其作用是由κ-阿片受体介导的，IL-2作用的信号转导途径涉及PKC和线粒体ATP敏感性钾通道。     

白细胞介素-2对心肌β-肾上腺素受体作用的调制

目的：研究生理浓度白细胞介素-2（IL-2）对β-肾上腺素受体激动剂异丙肾上腺素（ISO）心肌细胞效应的调制作用及其信号途径。方法： 采用酶解分离的成鼠心室肌细胞模型，用视频跟踪系统测定单个心室肌细胞的收缩幅度、最大收缩速度和最大舒张速度（±dL/dtmax）；以Fura-2/AM为钙探针，用细胞内双波长钙荧光系统检测心肌［Ca2+］i的变化。结果： ① ISO显著增加心肌细胞的收缩幅度和±dL/dtmax，2×103 U/L的IL-2预处理15 min对心肌细胞的收缩没有影响，但是使心肌细胞对ISO的反应明显降低；② ISO浓度依赖性地增加心肌细胞的钙瞬态值，EC50为（0.12±0.01）μmol/L。2×103U/L的IL-2预处理15 min对心肌细胞的钙瞬态值没有影响，但是使心肌细胞对ISO的反应曲线显著降低，EC50为（0.44±0.06）μmol/L；③ 20 mg/L CTX预处理12 h可显著增加心肌细胞的钙瞬态值，2×103 U/L 的IL-2处理5 min可显著降低钙瞬态值；④ Forskolin显著增加单个心肌细胞的钙瞬态值，IL-2 2×103 U/L预处理15 min后，forskolin增加钙瞬态值的最大效应降低。结论： 生理浓度的IL-2 (2×103 U/L)能够显著抑制ISO对单个分离心肌细胞的正性肌力作用和钙瞬态值增高作用。IL-2的调制作用可能是通过抑制Gs蛋白，降低AC的活性来实现的。     

植物雌激素α-ZAL和17βE_2对大鼠单个心室肌细胞缩舒功能和胞内钙瞬时变化的影响

目的:比较植物雌激素α-ZAL和17βE2对大鼠心肌细胞缩舒和胞内钙瞬变的影响。方法:从成年雌性大鼠心脏分离单个心肌细胞,应用美国Ionoptix视频跟踪计算机图像分析系统在0.5Hz的电刺激下测定离体单个心肌细胞的收缩参数,其中包括最大收缩幅度(PS)、最大收缩幅度时间(TPS)、90%舒张幅度时间(TR90)和最大收缩速率(+dL/dttmax)及最大舒张速率(-dL/dttmax);同时用Fura2/AM钙荧光指示剂测定胞内钙浓度的变化。结果:10-9~10-5mol/L17βE2能使PS产生浓度依赖性的增加,最大增加35%,高浓度的17βE2对TPS有显著影响(P<0.05),能够使ΔFFI最大增加25%;而10-9~10-5mol/Lα-ZAL无论是心肌细胞缩舒功能还是胞内钙含量均无明显变化。且α-ZAL和17βE2对心室肌细胞静息状态下胞内钙浓度和胞内钙的荧光衰减率均无显著影响。结论:α-ZAL对心室肌细胞的作用与17βE2有很大不同,17βE2对心肌细胞缩舒有直接刺激作用,增强心肌收缩可能是通过胞内钙释放与胞外钙内流所介导;而α-ZAL无这种作用,它可能是通过抑制胞外钙内流和其抗氧化反应达到保护心室肌细胞的作用。     

杭白菊提取液对抗缺血再灌注引起的离体大鼠心肌收缩功能下降

目的:观察杭白菊水提取液在缺血再灌注和缺氧/复氧过程中对离体心脏和心室肌细胞的影响,并探讨其作用机制。方法:采用Langendorff离体灌流心脏模型,观察心室收缩功能;用视频跟踪系统和细胞内双波长荧光系统分别记录单个心肌细胞收缩和i;测定心肌丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:杭白菊(0.5g/L)可明显减轻缺血再灌注引起的离体灌流心脏左室发展压、最大收缩/舒张速率、冠脉流量和左室发展压与心率乘积的抑制作用;并明显减弱缺氧/复氧抑制心室肌细胞收缩幅度、最大收缩/舒张速度和细胞钙瞬态的作用。杭白菊处理的缺血再灌注组心肌SOD水平明显升高,MDA含量显著降低。结论:杭白菊可能通过对抗自由基的作用,从而减轻缺血再灌注和缺氧/复氧对心肌收缩功能的抑制。     

高钙对烧伤早期豚鼠离体心脏固有收缩性的影响

为了探讨烧伤早期心肌固有收缩力降低的机制,本实验观察了35％体表面积Ⅲ度烧伤后8小时,灌流豚鼠离体心脏对高钙溶液(含Cacl_2 3.2mmol/L台氏液)的反应及对Ca~(2+)的消耗量。结果表明,烧伤组在高钙液灌流情况下,左心室内压的±dp/dtmax、心室肌细胞动作电位幅度,最大去极化速率.复极化50％的时程缩短程度均低于对照组(P<0.05);对常钙或高钙灌流液中Ca~(2+)的交换量,烧伤组也显著低于对照组(P<0.01)。提示烧伤早期心肌细胞对Ca~(2+)的摄取、利用,心肌细胞电位对Ca~(2+)的反应均低于正常,这可能是此期心肌固有收缩性和舒张功能显著降低的重要原因之一。     

丹参对抗缺氧/复氧引起的大鼠心室肌细胞收缩和细胞内钙的改变

目的:观察丹参在常氧和缺氧/复氧过程中对心肌细胞收缩和电刺激诱导的细胞内钙([Ca²⁺]_i)瞬态的影响。方法: 采用酶解分离成年大鼠心室肌细胞化学缺氧模型, 用视频跟踪计算机系统和细胞内双波长钙荧光系统分别观察心肌细胞收缩力学和[Ca²⁺]_i等指标。结果:丹参(1-9 g/L)处理后降低心肌细胞最大收缩和舒张速率、收缩幅度以及电刺激诱导的[Ca²⁺]_i幅度, 且呈剂量依赖性。缺氧后, 与对照相比细胞收缩力和钙瞬态幅度降低、舒张末细胞长度缩短、舒张末钙水平增高;复氧后细胞收缩力、钙瞬态幅度和舒张末钙水平有所回复, 但不能达对照水平。用3 g/L的丹参处理后, 缺氧/复氧引起的心肌细胞最大收缩和舒张速率、收缩幅度和电刺激诱导的[Ca^2＋]_i幅度高于单纯缺氧组, 舒张末[Ca²⁺]_i水平低于单纯缺氧组。结论:丹参可对抗缺氧/复氧引起的大鼠心室肌细胞收缩力降低和细胞内动态和静态钙的变化。     

巴豆醛抑制小鼠心肌收缩功能

目的研究香烟烟雾中α,β-不饱和醛-巴豆醛对小鼠心肌细胞收缩功能和心肌细胞内Ca~(2+)功能的影响。方法经Langendorff装置灌注消化分离出C57BL/6小鼠心肌细胞,与不同浓度(1、10、25和50μmol/L)巴豆醛孵育6 h,对照组不经巴豆醛处理,然后分别检测心肌细胞收缩峰值(PS)、最大收缩和舒张速率(±dL/dt)、心肌细胞收缩峰值时间(TPS)、心肌细胞舒张90%时间(TR_(90))、fura-2荧光强度(FFI)、细胞内Ca~(2+)衰退和SERCA~(45)Ca~(2+)摄取,Western blot分析Na~+-Ca~(2+)交换体的表达。结果与对照组相比,较高浓度(25和50μmol/L)的巴豆醛组能明显降低心肌细胞PS、±dL/dt、ΔFFI、SERCA活性及Ca~(2+)衰退速度(P0.05),并能延长TR_(90)(P0.05);而不同浓度巴豆醛对小鼠心肌细胞Na~+-Ca~(2+)交换体的表达无明显影响。结论巴豆醛可能是通过抑制小鼠心肌细胞内SERCA活性来影响心肌细胞内Ca~(2+)功能,从而抑制心肌细胞的收缩功能。     

信息

大鼠胚胎干细胞体外分化模型在上海建立大鼠干细胞(rESCs)已可分化具有功能的心肌细胞,可包括三种主要细胞:心室肌细胞、心房肌细胞和窦房结细胞。此研究为心肌细胞的功能提供新途径。     

2型糖尿病大鼠心室肌细胞离子通道功能和表达变化

目的:探讨2型糖尿病大鼠心室肌细胞离子通道电流及其相关蛋白表达的改变。方法:采用Zucker糖尿病肥胖(Zucker diabetic fatty,ZDF)大鼠建立2型糖尿病大鼠模型,Zucker瘦型(Zucker lean,ZL)大鼠为对照组。采用急性酶解法分离大鼠单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录其动作电位、L型钙通道电流(I_Ca-L)及瞬时外向钾电流(I_to)的变化;提取大鼠心肌组织蛋白,采用Western blot检测心肌细胞肥大标志物β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)和心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP),以及L型钙通道(Cav1.2)和钾通道(Kv4.3)的蛋白表达水平。结果:用高脂饮食诱导ZDF大鼠成功建立2型糖尿病模型;与ZL大鼠相比,ZDF大鼠心室肌细胞的动作电位时程显著延长,I_Ca-L和I_to密度显著降低[峰值分别为(?5.96±0.37)pA/pF vs(?4.92±0.30)pA/pF,(12.43±0.86)pA/pF vs(7.48±0.58)pA/pF,均P<0.05];与ZL大鼠相比,ZDF大鼠心肌组织中β-MHC和ANP的表达水平明显增加,伴有Cav1.2和Kv4.3蛋白表达下降(P<0.05)。结论:与ZL大鼠相比,2型糖尿病大鼠心肌细胞肥大,心室肌细胞动作电位时程延长,I_Ca-L和I_to密度及其相关蛋白表达水平降低,提示糖尿病大鼠心室肌细胞发生电生理重构。     

参麦注射液改善急性心肌梗死大鼠心功能与左室重构的机制初探

目的：观察了参脉注射液对心肌梗死后心功能和心室重构的影响，及其对心肌细胞凋亡的影响。方法：（1）结扎大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠心肌梗死心室重构模型，随机分为心肌梗死后1、2周模型组，②参麦注射液治疗1、2周治疗组，另设两假手术组。多导生理记录仪测量：左室收缩压（LVSP）、左室舒张末压（LVEDP）、左室内压最大上升速率（＋dp／dtmax）和下降速率（-dp／dtmax）以反映左室收缩与舒张功能。测定心脏心脏总重量、左室截面直径，并计算心室重量指数；HE染色、Masson染色、透射电镜观察心结构改变。（2）乳鼠心肌细胞原代培养，AngⅡ诱导凋亡模型。利用荧光染色观察凋亡形态变化；流式细胞仪检测细胞凋亡、心肌细胞线粒体膜电位；激光共聚焦显微镜检测钙离子荧光强度。免疫组化染色检测Bcl-2／Bax、Caspase-3蛋白的表达。     

白细胞介素15与天然免疫

白细胞介素 15 (IL 15 )是一种广泛分布于人体组织和细胞的一种细胞因子。它与白细胞介素 2 (IL 2 )具有某些相同的生物学活性和受体组成。它能促进B细胞的分化增殖 ,诱导NK细胞增殖、细胞毒活性、细胞因子的产生等。本文主要就IL 15在NK细胞和巨噬细胞 (MΦ)相互调节中的作用 ,IL 15对γδT细胞及NK T的作用特点 ,IL 15与粘膜免疫 ,以及IL 15抗病毒作用的最新研究结果作一综述     

TNFα对单个大鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

目的探讨TNFα对心肌细胞L型钙电流的影响。方法分离大鼠单个心室肌细胞,用全细胞膜片钳方法检测TNFα对单个心室肌细胞L型钙电流的影响。结果 TNFα使单个大鼠心室肌细胞L型钙电流持续增强,促进细胞外钙离子持续向细胞内流动。结论 TNFα与感染性休克心脏收缩性改变相关。     

C57胎鼠、乳鼠及成年小鼠心室肌细胞分离、培养及鉴定

背景：培养的心肌细胞被广泛应用于心肌细胞的生理特性、毒性实验、基因工程、疾病模型和药物筛选等方面的研究。获得纯度较高活性良好的品系小鼠心肌细胞是研究的关键前提。 目的：分离和培养C57小鼠胎鼠、乳鼠及成年小鼠心室肌细胞。 方法：应用机械切碎心室肌后,胰蛋白酶消化不同发育阶段的C57小鼠心室肌细胞,差速贴壁1 h纯化心室肌细胞,锥虫蓝染色判定心肌细胞活力,体外分别培养48~72 h后分别行倒置显微镜、扫描及透射电镜观察细胞形态,微电极阵列评价细胞电生理指标,免疫组化鉴定。 结果与结论：经3~6次消化后,心室组织消化完全,即刻细胞存活率大于85%。倒置显微镜下观察,细胞呈梭形、多角形。12 h有少部分细胞搏动,48 h细胞交织成网,搏动呈同步性,搏动频率30~90次/min。说明用胰蛋白酶组织消化法可以成功地分离、培养,并获得形态、活力良好的胎鼠、乳鼠及成年C57小鼠心室肌细胞。     

IL-13抑制人肾小球系膜细胞IL-12的表达

为了探讨白细胞介素 13(IL 13)对体外培养的人肾小球系膜细胞产生白细胞介素 12 (IL 12 )的影响。我们用脂多糖(LPS 10 μg/ml) ,不同浓度的IL 13对系膜细胞培养 ,分别采用ELISA法和半定量RT PCR法检测细胞上清液的IL 12和系膜细胞IL 12p4 0mRNA表达。结果提示 5 %NCSRPMI 16 4 0基础培养条件下的系膜细胞未检测到IL 12蛋白分泌及其mRNA表达。在LPS刺激下系膜细胞的IL 12p4 0mRNA表达加强 ,并分泌出大量的IL 12。IL 13在 1～ 10 0ng/ml浓度范围内对LPS诱导的系膜细胞IL 12分泌及IL 12p4 0mRNA表达的抑制作用呈剂量依赖趋势。本研究认为IL 13可能通过抑制IL 12的产生 ,而调整了体内Th1/Th2细胞因子平衡 ,作为抗炎性细胞因子在肾小球肾炎发病机制中发挥一定作用     

NCXα1重复序列短肽主动免疫大鼠对心脏结构和功能的影响

目的:观察钠钙交换体(NCX)α1重复序列中胞外环124HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF145合成肽段长期主动免疫大鼠对其心脏结构和功能的影响.方法:选用2月龄健康Wistar雄性大鼠,以NCXα1重复序列中胞外环124HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF145合成肽段对其进行主动免疫,对照组给予同等剂量佐剂.连续免疫12周.用ELISA法监测抗体滴度.实验结束后经Langendorff离体心脏灌流方法检测其心脏功能(左心室主动发展压 LVSP-LVDP,收缩最大速率 +dp/dtmax,舒张最大速率-dp/dtmax).组织病理切片观察心室肌细胞的结构的变化.结果:免疫组所有大鼠均产生了较高浓度的特异性抗体;与对照组相比,免疫组大鼠心脏功能指标(LVSP-LVDP,+dp/dtmax,-dp/dtmax)均明显增强(P＜0.05).HE染色切片显示对照组心肌纤维排列整齐、致密、且纤维连续性较好.免疫组心肌纤维排列紊乱,部分可见肌原纤维断裂,细胞间有淋巴细胞浸润.结论:钠钙交换体(NCX)α1重复序列中胞外环124HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF145合成肽段长期主动免疫大鼠可以同时加强心脏的收缩和舒张功能,但是长期高滴度的抗体存在可以造成心肌结构损伤.     

大鼠胚胎干细胞体外分化模型在上海建立

大鼠干细胞（rESCs）已可分化具有功能的心肌细胞，可包括三种主要细胞：心室肌细胞、心房肌细胞和窦房结细胞。此研究为心肌细胞的功能提供新途径。     

培养乳鼠心房肌细胞电生理及与心室肌的比较

利用标准微电极技术记录了原代培养乳大鼠心房肌细胞和心室肌细胞动作电位。结果显示,心房肌细胞动作电位与心室肌细胞相比其最大差别是动作电位时程较短,而其它参数,如动作电位振幅(APA)、零相最大去极速度(Vmax)差异不显著;但培养乳大鼠心肌细胞的APA和Vmax却较非培养乳大鼠或成年大鼠心肌细胞的相应参数低     

失血性休克对脾脏细胞因子释放的影响

目的 :细胞因子是近年来发现的体内一类具有广泛生物活性物质 ,可以传递细胞间信息、调节细胞功能、参于对外入侵微生物等的防卫反应 ,因此细胞因子在休克的发生发展中的调节作用日趋受到重视。但有关失血性休克时细胞因子的研究 ,较多集中在血清水平和肝枯否细胞、血单核细胞及腹腔巨噬细胞产生细胞因子的能力上 ,而脾脏对这些细胞因子的生成与释放有何影响报道不多。因此本研究重点观察了脾脏对肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ)、白细胞介素 - 1 (ＩＬ - 1 )、白细胞介素 - 2、(ＩＬ - 2 )、白细胞介素 - 6(ＩＬ - 6)、白细胞介素 - 8(ＩＬ - 8)等细…     

白细胞介素12与系统性红斑狼疮

白细胞介素 12 (IL - 12 )在诱导T细胞向Th1类细胞分化过程中起关键性作用 ,可选择性抑制自身免疫性抗体分泌细胞B1细胞的增殖 .对系统性红斑狼疮 (SLE)患者的多种体外研究均说明 :IL - 12分泌减少在SLE患者细胞因子分泌异常及多克隆自身抗体产生中起重要作用     

肌球蛋白调节性轻链在慢性心力衰竭大鼠心室肌的表达变化

目的:检测肌球蛋白调节性轻链(MYL2)在慢性心衰大鼠心室肌的表达变化。方法:建立腹主动脉缩窄大鼠慢性心衰模型,采用免疫组化染色和集成光学密度(IOD)定量观测MYL2在心室肌的表达及其表达程度,并与假手术组对照分析。结果:心衰组大鼠左室收缩末压(LVSP)、左室内压上升最大速率(+dp/dtmax)、左室内压下降最大速率(-dp/dtmax)显著低于假手术组,左室舒张末压(LVEDP)显著高于假手术组(P均<0.01)。免疫组化染色示心衰组心室肌MYL2表达显著低于假手术组;心衰组染色标本的平均IOD为(47.12±12.08)×106,假手术组为(97.77±36.21)×106,前者显著低于后者(P<0.01)。结论:心室肌MYL2表达的显著降低可能是慢性心衰发生的重要机制。