内源性高甘油三酯血症患者血浆VLDL、LDL及HDL对血凝的影响

目的：研究内源性高甘油三酯血症(HTG)患血浆极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)是否发生了氧化修饰及其对血凝的影响。方法：对2l例内源性高甘油三酯血症患与2l例年龄性别相近的正常人的血脂、脂质过氧化物进行了分析。用一次性密度梯度超速离心法分离血浆VLDL、LDL及HDL，测定这三种脂蛋白的234nm光吸收、相对电泳迁移率(REM)和硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)，分别将这三种脂蛋白加入由正常人新鲜混合血浆构成的反应系统中，按试剂盒分别测定凝血酶原时间(PT)及活化部分凝血酶原时间(APIT)。结果：内源性HTG患血浆TG含量平均升高2．73倍，HDLC下降l.7l倍，同时LPO升高1．22倍;HTG组VLDL、LDL及HDL的REM、234nm光吸收值、TBARS含量均较对照组显增加(P＜0．01)，表明内源性HTG患血浆VLDL、LDL及LDL均发生了氧化修饰生成Ox—VLDL、Ox-LDL.PT及APTT在分别加入HTG组的VLDL、LDL及HDL后均比加入相应正常组脂蛋白明显缩短(P均＜0．05)。相关分析表明，HTG组血浆VLDL及HDL相对电泳迁移率(REM)与PT呈负相关(P＜0．01)。结论：HTG患血浆VLDL、LDL及HDL发生了氧化修饰，并使PT及APTT明显缩短。     

编码人肝脂解激活受体跨膜域和配体结合域的基因cDNA片段的克隆及表达

目的和方法 :研究发现肝细胞膜apoCIII受体在性质、分布及功能上与人肝脂解激活受体 (lipolysisstimulatedreceptor,LSR)极为相似 ,因此我们拟克隆、表达LSR基因cDNA中编码跨膜域与配体结合域的片段 ,以进一步探讨LSR与apoCIII及VLDL的结合特性 ,确定LSR的结构是否与apoCIII受体具有同源性。本研究以大鼠肝脏LSRcDNA序列为基础 ,通过同源性分析寻求到与大鼠肝LSRcDNA序列具最高同源性的人肝mRNA序列XM - 0 2 86 70 ,并以其为模板设计一对引物 (P1:5 '-ATATAAGCT TATGCTGCCCTGTACCTACCAGATG - 3';P2 :5 '-…     

载脂蛋白B基因位点遗传多态性对家族性高胆固醇血症病人血清LDL胆固醇水平的影响

载脂蛋白B(apoB)是一种由4 539个氨基酸组成的多肽,它在维持体内胆固醇平衡方面起着重要作用。apoB是乳糜微粒和极低密度脂蛋白(VLDL)的合成和分泌所必需的并在低密度脂蛋白(LDL)与LDL受体相互作用中起着配体的作用。血清中apoB水平升高,早发动脉粥样硬化风险就增加。apoB基因位于人的第2号染色体上,它的3’端     

肝细胞膜apoCIII受体的研究进展

为阐明apoCIII在抑制富含甘油三酯脂蛋白代谢中的作用机理 ,1988年本室刘秉文、张林华基于大量实验依据首次提出肝脏存在“apoCⅢ受体的假设” ,并以 [12 5I]-apoCIII为配体 ,证实大鼠肝实质与非实质细胞膜上存在可饱和的、特异的apoCIII受体 (结合位点 )。继后本室建立apoCIII     

非酒精性脂肪肝CT表现及与血脂水平的相关性分析

目的探讨非酒精性脂肪肝患者肝脏CT值与血脂之间的关系。方法选取非酒精性脂肪肝患者43例及对照组30例,分别测量肝脏的CT值及血脂水平,然后进行统计分析。结果对照组及非酒精性脂肪肝组血中TG,HDL,LDL,VLDL之间差异有统计学意义(P<0.05),但血中的CHOL差别没有统计学意义,肝脏CT值与TG、CHOL、LDL、VLDL负相关,而与HDL正相关,即CT值越低,则TG,CHOL,LDL,VLDL越高,脂肪肝程度越重。TG、HDL、LDL在非酒精性脂肪肝轻、中、重组间有差距。结论非酒精性脂肪肝患者肝脏CT值与血脂水平密切相关,血脂水平的变化会导致肝脏CT值的变化。     

载脂蛋白E及其等位基因在健康个体和动脉粥样硬化个体中的作用

载脂蛋白E（ApoE）作为LDL、VLDL及其残余受体的配体在脂蛋白代谢中起重要作用．ApoE主要由肝细胞和单核巨噬细胞合成,它有三个共显性的异位体E2、E3、E4,但脂蛋白E2不与LDL和残余受体结合．ApoE的等位基因在个体之间变化频率较大．在欧洲,从南到北,E4等位基因在心血...     

用双单克隆抗体ELISA定量测定人血清载脂蛋白B100

Kane等发现,载脂蛋白B100由肝脏合成,是血浆低密度脂蛋白(LDL)及极低密度脂蛋白(VLDL)的主要组成成份,占LDL蛋白质98％以上,在转运脂质及识别脂蛋白受体上具有重要作用。大量资料证明,血浆LDL与动脉粥样硬化的发生关系密切。目前国内已报道用火箭电泳法及单向免疫扩散法检测血清apo B100。我们建立的人血清apoB100酶联免疫测定法灵敏可靠,简便易行。     

中国人内源性高甘油三酯血症载脂蛋白E基因多态性的研究

目的 探讨中国人内源性高城油三酯血症（endogenous hypertriglyceridemia,HTG)患者载脂蛋白E（apolipoprotein E,apoE)基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系。方法 采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性分析方法,分别对225例HTG患者及230名血脂正常者的apoE基因型、空腹血脂及载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ、E进行了分析。结果 HTG患者的体重指数(BMI)` 清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、非高密度脂蛋白胆固醇（nHDLC)水平较对照组显著升高,血清高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）则显著降低（P＜0．001）,并伴有载脂蛋白水平的异常。HTG组与对照组apoE基因型及等位基因频率分布均以E3／3和ε3最高,HTG组的ε2等位基因有增高的趋势（P＞0．05）。对照组ε2等位基因携带者血清TG和apoE水平较ε3和ε4等位基因携带者显著升高（P＜0．001）,其低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）水平及apoE/ApoC Ⅲ比值则显著降低（P＜0．001）。结论 ε2等位基因与血清TG和apoE水平升高及LDLC水平降低有关,apoE/apoC Ⅲ比值降低可能与HTG患者血TG水平升高有关。     

巨噬细胞极低密度脂蛋白受体的调节作用

富含甘油三酯(TG)的VLDL在动脉粥样硬化(AS)发病中的作用日益受到重视,我们发现巨噬细胞存在VLDL受体,可饱和结合,摄取VLDL,随后Kraemer,Steinberg等得到相同的结果。VLDL受体是否可以调节尚未见有文献报道,本文研究了小鼠腹腔巨噬细胞VLDL受体的调节作用。     

肝细胞生长因子在2型糖尿病肾病患者血清中的表达及临床意义

目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)在糖尿病肾病(DN)患者血清中的作用及临床价值。方法:92例2型糖尿病(T2DM)患者按尿白蛋白肌酐比(ACR)分为三组:单纯糖尿病组(简称为A组,30例),微量蛋白尿组(简称为B组,30例),大量蛋白尿组(简称为C组,32例),选择正常健康者50例为对照组,采用自动分析仪测定HGF、空腹血糖(FBG)、血甘油三醋(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平。结果:与对照组比较,2型糖尿病各组患者血清HGF、FBG、HDL水平显著升高(P0.05);B组与A组比较、C组与B组比较患者血清HGF、FBG水平显著上升(P0.05);TG、LDL水平在各组间比较差异无统计学意义。相关性分析结果表明,HGF水平与FBG、HDL水平呈显著正相关(r=0.619,0.373;P=0.000,0.012),HGF水平与TG、LDL水平无相关性(r=0.071,0.018;P=0.782,0.893)。结论:HGF可作为DN发生和发展的重要指标,检测HGF有利于早期DN的诊断和治疗。     

脂质转运和脂酶水解对低密度脂蛋白的修饰作用

采用胆固醇脂转运蛋白（CETP）介导极低密度脂蛋白（VLDL）中甘油三酯（TG）与低密度脂蛋白（LDL）中胆固醇（CH）交换：再行脂蛋白脂酶（LPL）水解LDL中TG，对LDL进行修饰，引起LDL颗粒组成和大小的变化，探讨体内小而致密的LDL形成的可能途径，及易于致动脉粥样硬化（As）作用的机制。结果示CETP介导的脂质转运使LDL中TG含量增加，CH降低，颗粒直径轻微变大；再经LPL水解的共同作用，LDL中TG含量降低，颗粒变小。同时LDL中载脂蛋白B（apoB）免疫反应性也发生相应的变化，LDL中TG含量同apoB免疫反应性高度负相关。认为大而轻的A型LDL经修饰作用可转变为小而致密的B型LDL，富含TG的LDL不易于通过apoB受体途径清除，史易于氧化。     

中国人内源性高甘油三酯血症患者β2肾上腺素受体基因Arg16Gly多态性的研究

目的 研究β2肾上腺素受体(β2-adrenergic receptor,β2AR)基因Arg16Gly多态性是否与中国人内源性高甘油三酯血症(hypertriglyceridemia,HTG)有关联,为探讨本病的分子遗传基础提供依据.方法 应用聚合酶链反应.限制性片段长度多态性分析法,对成都地区341名汉族人(241名正常人及100例HTG患者)β2AR基因Arg16Gly多态性位点进行分析.结果 中国人β2AR基因Arg16Gly多态位点Gly等位基因频率为0.446,与日本人的0.505相近,较美国白人的0.248显著增高,而低于欧洲波兰人的0.633.HTG组和对照组之间β2AR基因Arg16Gly位点Gly等位基因的频率差异无统计学意义(0.490 vs 0.427,P》0.05).在正常对照组,Arg/Arg基因型携带者血清TG水平显著高于Arg/Gly基因型携带者[(1.24±0.36)mmol/L vs(1.13±0.34)mmol/L,P《0.05],而与Gly/Gly基因型携带者比较,其血清apoB100显著增高(P《0.01),apoAⅡ显著降低(P《0.05).HTG组Arg/Arg基因型携带者血清TC及低密度脂蛋白胆固醇水平较Gly/Gly基因型者显著升高[(5.36±0.74)mmol/L vs(4.77±1.07)mmol/L,P《0.05;(3.03±0.70)mmol/L vs(2.38±1.10)mmol/L,P《0.05].结论 β2AR基因Arg16Gly多态性不仅与成都地区正常汉族人血清TG、apoB100和apoAⅡ含量有关,而且还与内源性高甘油三酯血症患者血清TC和低密度脂蛋白胆固醇水平相关联,Arg16Gly多态性可能在影响中国汉族人血清甘油三酯和(或)胆固醇的代谢中起一定的作用.     

胚脑组织中VLDL受体Ⅱ型的克隆,表达及其对VLDL结合能力的测定

目的探讨极低密度脂蛋白(VLDL)受体亚型变化在胚胎发育中的生物学意义。方法利用RT-PCR技术检测胚胎不同组织中VLDL受体亚型mRNA的分布,然后从人胚胎脑组织中克隆VLDL受体Ⅱ型(VLDLRⅡ)的全长eDNA,构建了VLDLRⅡ型真核表达载体,将其导入1d1-A7细胞,经G418筛选获得稳定表达Ⅱ型受体的1d1-A7细胞。测定这些细胞与荧光染料DiI标记的VLDL结合能力。结果 VLDLRⅡ型与VLDLR Ⅰ型的配体结合能力存在明显差异,Ⅱ型受体的结合能力仅为Ⅰ型受体的50％左右。结论提示VLDLR亚型的功能差异可能在胚脑发育过程中具有独特的生物学意义。     

2型糖尿病患者的高密度脂蛋白和乏脂血清对细胞内胆固醇外流的影响

目的 研究2型糖尿病患者高密度脂蛋白（HDL）及乏脂血清（LPDS）介导的细胞内胆固醇外流变化。方法 选取2型糖尿病患者13例和正常对照组17例,分离HDL和LPDS。利用人皮肤纤维母细胞（HSF）和人肝癌细胞（HepG2细胞）为实验细胞系,测定ATP结合盒受体A1（ABCA1）、ATP结合盒受体G1（ABCG1）和清道夫受体B1（SR-B1）的mRNA和蛋白表达。以HDL、LPDS为接受体测定3H胆固醇在上述细胞的胆固醇流出率。 结果HepG2 细胞高表达SR-B1;HSF经22-羟基胆固醇刺激后高表达ABCA1。2型糖尿病患者的HDL诱导HepG2细胞的胆固醇流出率显著低于对照组（P＜0.001）;而LPDS介导的HSF细胞的胆固醇外流率在两组间无显著差异。 结论 2型糖尿病患者的HDL诱导HepG2细胞的胆固醇外流功能明显降低,提示HDL功能异常在糖尿病患者的细胞内胆固醇积聚及动脉粥样硬化发展过程中发挥重要作用。     

Apo A-对LDL受体的表达作用

Brown等证明细胞LDL受体的表达是受细胞内外环境LDL胆固醇浓度的调控,当细胞在缺乏脂蛋白血清(LDS)中培养,LDL受体表达加强。因此,体外观察脂蛋白受体一直沿用LDS方法。作者曾报导国产人清蛋白(HSA)代替LDS,观察到LDL受体作用,并进一步比较了HSA、LDS、BSA(牛清蛋白)的作用,发现HSA>LDS>BSA,经鉴定发现HSA试剂中无脂质而含Apo A-I,BSA有脂质而无Apo A-I。提示在缺脂前提下,Apo A-I可能加强LDL受体表达作用,这种作用是否由于Apo A-I有接纳细胞内胆固醇外流的功能,为此,作者同时观察了不同量的Apo A-I对细胞内胆固醇外流及LDL受体表达作用。     

BA-ELISA改良法检测新鲜分离的人单个核细胞LDL受体活性

低密度脂蛋白(LDL)受体活性的高低和细胞的胆固醇代谢,以及动脉粥样硬化的发生均有密切的关系。以往LDL受体测定一般采用~(126)I-LDL的放射性配体法,但这一方法操作复     

受体—配体免疫荧光法研究淋巴细胞低密度脂蛋白受体活性

以异氰荧光素标记豚鼠抗兔LDL－IgG与结合在细胞受体上LDL的免疫强弱（相对荧光强度和特异性荧光细胞的百分率），来显示LDL受体的活性（受体－配体免疫荧光法）。观察实验性高胆固醇血症时兔淋巴细胞LDL受体活性的变化。结果显示随着血胆固醇的升高，淋巴细胞LDL受体活性降低，表现为细胞的LDL免疫荧光强度减弱，特异性荧光细胞数目减少；随着血胆固醇的降低，细胞的LDL免疫荧光增强，特异性荧光细胞数目增加，即LDL受体活性恢复。这表明，血胆固醇水平与淋巴细胞LDL受体活性呈相关，说明体内也存在着LDL受体途径的负反馈调节。此法取材容易，操作简便、安全，可作为检测LDL受体活性的临床应用。     

雌三醇对乙型肝炎病毒转录和复制水平的影响

目的:研究雌三醇对乙型肝炎病毒(HBV)转录和复制水平的影响。方法:采用不同浓度(从640μmol/L到5μmol/L倍比稀释)的雌三醇作用于体外培养的HepG2. 2. 15和HepG2-NTCP细胞,MTS法检测雌三醇的细胞毒性。用10、20和40μmol/L雌三醇处理HepG2. 2. 15和HepG2-NTCP细胞,以恩替卡韦(25 nmol/L)作为阳性对照,6 d后采用RT-qPCR法检测细胞中HBV DNA和RNA水平,ELISA法检测上清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)水平。对雄性HBV转基因小鼠腹腔注射雌三醇(5 mg/kg),以恩替卡韦(0. 02 mg/kg)作为阳性对照,28 d后取小鼠血清和肝脏,采用ELISA法检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、HBsAg和HBeAg水平,RT-qPCR法检测血清和肝脏中HBV DNA水平及肝脏中HBV RNA水平。结果:与对照组相比,10、20和40μmol/L雌三醇可以显著降低HepG2. 2. 15和HepG2-NTCP细胞分泌的HBsAg和HBeAg水平及细胞中HBV DNA和RNA水平(P0. 05)。此外,雌三醇也可以显著降低HBV转基因小鼠血清中HBsAg、HBeAg和HBV DNA水平,以及肝组织中HBV DNA和RNA水平(P0. 05)。结论:在HepG2. 2. 15细胞、HepG2-NTCP细胞和HBV转基因小鼠模型中雌三醇均具有较强的抑制HBV转录和复制水平的作用。     

人血清脂蛋白的代谢 Ⅰ.人血清极低密度脂蛋白的分解代谢及其与其他脂蛋白的相互关系

近年来,Tall和Eisenberg等分别提出一重要假设:即VLDL在脂蛋白脂肪酶(LDL)的作用下、水解其核心中的Tg、核心体积逐渐变小,导致外壳过剩。过剩的外壳可能脱落而形成一些盘形结构,类似新生的高密度脂蛋白(HDL),后者在血清卵磷脂胆固醇脂酰转换酶的作用下,酯化颗粒表     

高血脂对血清组织多肽特异性抗原检测的影响

为研究高血脂患者在检测组织多肽特异性抗原(TPS)时,其血脂水平对TPS检测结果的影响,应用ELISA方法检测血清中TPS水平,应用日立7600型全自动分析仪检测标本血清的甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)、低密度脂蛋白(LDL)水平.结果表明,高血脂组TPS水平明显高于正常对照组(P＜0.01),以高TG组的TPS阳性率最高,为72.46%;在几种不同的组合中,以(高TG +正常CHOL)组和(高TG +正常LDL)两种组合的TPS阳性率最高,分别为78.79%和78.41%;随血清TG水平的升高,TPS水平呈现明显的上升趋势,P＜0.05.因此高血脂对TPS的检测有一定影响,尤以高TG的影响最为显著.