人体胃组织褪黑素受体鉴定及生物学特性

为明确人体胃组织是否存在褪黑素受体 (MR) ,应用放射配体结合法检测人体胃组织MR特异结合量。结果发现12 5I标记褪黑素 (12 5I -Mel)最大结合容量 (Bmax) 0 .48± 0 .11fmol/ 蛋白 ;平衡解离常数 (Kd)为 5 1±17pmol/L。动力学分析表明该特异结合为可逆性结合。特异性分析表明对Mel及其激动剂具高度特异性。亚细胞分布 ,以线粒体及细胞核含量最高。GTPrS试验 :MR的Bmax及Kd 值均有改变。结论 :人体胃组织存在MR ,其信号转导通路可能为G蛋白介导的通路     

汉族成人部分外周组织褪黑素受体分布及意义

褪黑素 (melatonin ,Mel)具有广泛的生物学效应 ,但其在生物体内作用的靶器官未完全明确 ,阻碍了对它作用机制的进一步研究。本实验室研究显示人胚胎甲状腺、肾上腺、心血管等组织均存在MR。因而 ,明确外周组织是否存在MR ,对于研究Mel在更为广泛的生物学作用及其机制具有重要意义。目的 :证实汉族成人骨骼肌和皮肤等外周组织存在褪黑素受体 (mela toninreceptor,MR) ,并研究MR亚型及其亚细胞分布。方法 :所有组织均取自健康志愿者。用免疫组织化学和逆转录 -多聚酶链反应 (RT -PCR)产物基因测序等方法证实人骨骼肌组织存在MR及其亚…     

鸟类及鼠类的胸腺、腔上囊及脾脏褪黑素受体的鉴定及意义

应用放射配体结合法检测大鼠、小鼠、仓鼠、鸡、鸭、鸽子及鹌鹑的胸腺、腔上囊及脾脏的[~(125)I]褪黑素(M)特异结合位点。结果显示鸟类及鼠类免疫器官均存在[~(125)I]M特异结合位点,并具低结合容量、高亲和力特点;动力学研究表明具可饱和性及可逆性,符合受体的结合及解离过程;特异性研究显示对M及激动剂有高度特异性,符合特异结合位点的全部条件,亚细胞分布的研究表明以细胞核含量最高,线粒体次之,且该结合位点具年龄依赖性降低。结果证实免疫器官存在根黑素受体(MR),免疫组织是M作用的靶器官,M对免疫系统的调节作用是通过免疫组织上MR直接作用的结果。     

褪黑素受体信号通路在2型糖尿病中的作用

褪黑素是松果体分泌的激素,能调节包括睡眠在内的诸多生理过程。褪黑素通过与其受体特异性结合而在中枢和外周都发挥功能。胰腺β细胞中,褪黑素受体介导的信号通路可影响胰岛素的分泌以及β细胞的功能,并可通过提高5-羟色胺-N-乙酰基转移酶的活性来促进褪黑素的生成,而上调的褪黑素可抑制胰岛素的分泌,升高血糖。     

褪黑素对小鼠胃癌细胞褪黑素膜受体MT1、MT2表达的影响

目的:探讨褪黑素对小鼠胃癌细胞褪黑素膜受体MT1、MT2表达的影响。方法:应用小鼠MFC前胃癌细胞建立荷胃癌小鼠模型,不同浓度褪黑素干预后,运用免疫组织化学、实时荧光定量PCR、免疫印迹定位定量检测MT1、MT2表达的变化。结果:移植瘤肿瘤细胞表达褪黑素膜受体MT1、MT2,褪黑素促进肿瘤组织膜受体MT1、MT2表达,并呈剂量依赖关系。结论:褪黑素上调褪黑素膜受体MT1、MT2的表达,说明褪黑素可能通过膜受体信号通路抑制胃癌生长。     

Mel-la,Mel-1b褪黑素受体在大鼠海马分布的原位杂交研究

Mel-la,Mel-1b为分别从人大脑和视网膜克隆的两种褪黑素膜受体.随着褪黑素的各种重要生理作用的不断发现,对其受体的研究也日益广泛和深入.本文采用原位杂交技术研究了Mel-1a,Mel-1b两种褪黑素膜受体mRNA在海马中的表达和分布,结果表明此两种受体mRNA在成年大鼠海马各区神经元中均有表达.由于褪黑素是通过细胞膜上与G蛋白耦联的Mel-1a,Mel-1b受体而发挥作用的,而海马又是与老化密切相关的脑区,提示褪黑素对海马的老化有调节作用.     

褪黑素在消化生理和病理中的作用

除松果腺分泌褪黑素 (MT)外 ,胃肠道组织也能分泌MT ,且其分泌与进食和营养成份有关。胃肠道组织有广泛分布的MT结合位点 ,其密度较高 ,部位多是结肠、回肠、盲肠和阑尾。胃肠道组织分泌MT ,以回肠末端为甚。MT有保护胃粘膜、增加胃粘膜血流量、清除氧自由基等作用 ,可抑制溃疡的发生和发展。MT还可调节回 盲 结肠的肌电活动 ,导致胃肠运动加快 ,并可协调胆囊收缩素 (CCK)的促结肠运动功能 ,其机制与拮抗 5 HT的作用有关。MT亦能减轻化学致癌物的致癌作用 ,促进Aloe的抗癌作用。     

6-羟基多巴胺诱导的帕金森病大鼠眼内褪黑素受体的变化

目的:观察6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的偏侧帕金森病(PD)模型大鼠毁损同侧及对侧眼褪黑素受体MT1和MT2的变化及其与视网膜酪氨酸羟化酶(TH)的关系。方法:将6-OHDA注射至大鼠右侧黑质致密部和前脑内侧束两点,制备偏侧PD模型。大鼠分为溶剂对照和PD模型组,于建模后6周取双侧眼球。采用RTPCR和Western-Blot检测大鼠两侧眼组织褪黑素受体MT1和MT2的表达水平,采用免疫荧光组织化学检测MT1和MT2受体,以及TH在大鼠视网膜内的分布及表达情况。结果:与对照相比,PD大鼠毁损对侧眼组织MT1和MT2的mRNA水平分别降低了84.06%和81.66%(P0.01),蛋白水平分别降低了59.06%和41.06%(P0.01),而PD大鼠毁损同侧眼组织MT1和MT2的mRNA、蛋白水平无显著变化(P0.05)。MT1和MT2受体在视网膜全层均有分布,且主要分布在感光细胞层内段、内丛状层、外丛状层和神经节细胞层,TH分布于内核层与内丛状层之间;与对照组相比,PD大鼠毁损对侧视网膜MT1和MT2以及TH荧光强度分别减少了61.6%、51.2%和43.0%(P0.01),TH和MT1或TH和MT2存在共定位,且毁损对侧视网膜共定位细胞数减少52.3%,而PD大鼠毁损同侧视网膜无显著变化(P0.05)。结论:6-OHDA诱导的偏侧PD大鼠毁损对侧眼褪黑素受体表达下调可能与PD有关。     

人肌肉组织褪黑素受体mRNA的表达

为证实褪黑素受体(melatonin receptor, MR)存在于人肌肉组织内, 取人脊柱两侧肌肉组织抽提总RNA, 应用RT-PCR检测MR mRNA并测序.结果表明人脊柱两侧肌肉组织内有褪黑素受体mt1及MT2表达, 测序结果与人类褪黑素受体cDNA相吻合.证明肌肉组织是褪黑素作用的靶器官, 褪黑素可能通过存在于肌肉组织中的mt1及MT2受体, 来调节脊柱两侧肌肉组织的生长发育.     

蛋白质糖基化病理生理的研究进展

1980年Gend和Browlee等发现糖尿病患者体内蛋白质由于持续高血糖症而被非酶促糖基化修饰，近年进一步证实：持久的高血糖会导致人体内许多结构蛋白、功能蛋白和核酸蛋白非酶糖基化，这在糖尿病慢性并发症的发生中占有重要地位，且与衰老过程密切相关［1、2」。本文就这方面的研究作一综述。（一）糖基化终产物的基本生化特性：葡萄糖及其他糖类能与蛋白质氨基以共价键相结合形成糖基化产物，此过程无需酶的参与。糖基化是一动态的连续过程，早期形成可逆的Amadori产物，通常于数周内达到平衡；Amadori产物可经脱水及分子重排，形成一系列…     

褪黑素受体与妊娠期高血压疾病的相关性研究

目的 探讨褪黑素受体表达水平下降是否为妊娠期高血压疾病的发病机理或危险因素.方法 随机选择初产妇60例,其中子痫前期30例作为研究组,无妊娠期高血压疾病30例为对照组,用免疫组化法检测两组胎盘组织中MTR的表达情况.结果 研究组MTR在胎盘血管平滑肌细胞胞浆中的阳性表达率低于对照组(0.025＜P＜0.05).重度子痫前期组MTR的阳性表达率低于轻度组(0.025＜P＜0.05).结论 妊娠期高血压疾病-子痫前期的产妇胎盘血管平滑肌细胞中褪黑素受体表达水平下降可能是妊娠期高血压疾病发病的相关因素,且随病情的加重而进一步下降.     

Mel—la,Mel—lb褪黑素受体在大鼠海马分布的原位杂交研究

Mel-la,Mel-1b为分别从人大脑和视网膜克隆的两种褪黑素膜受体。随着褪黑素的各种重要生理作用的不断发现,对其受体的研究也日益广泛和深入,本文采用原位杂交技术研究了Mel-1a,Mel-1b两种褪黑素膜受体mRNA在海马中的表达和分布,结果表明此两种受体mRNA在成年大鼠海马各区神经元中均有表达。由于褪黑素是通过细胞膜上与G蛋白耦联的Mel-1a,Mel-1b受体而发挥作用的,而海马又是与老化密切相关的脑区,提示褪黑素对海马的老化有调节作用。     

褪黑素RIA的建立及肝抑郁症大鼠血浆褪黑素含量的观察

目的:建立褪黑素的放射免疫分析法,观察肝抑郁症小鼠模型血浆褪黑素含量的变化。方法:利用甲醛将褪黑素与牛甲状腺球蛋白连接后免疫新西兰白兔获得高品质褪黑素抗血清,125I标记褪黑素获得标记物,非平衡竞争法建立褪黑素放射免疫分析方法。利用随机组合多项应激方法建立大鼠肝抑郁症模型,并测定其冬夏两季血浆及松果体褪黑素含量。结果:抗血清滴度1 1800,亲和常数1.7×109L/M;125I-褪黑素,比放强度55μC i/μg,放化纯度93%,稳定期65d;方法灵敏度5pg/m l,批内CV 6.5%,批间CV 11%;无论冬季还是夏季,生理组与模型组相比大鼠血浆、松果体褪黑素含量均有非常显著性差异(P<0.01),无论生理组还是模型组,冬季和夏季相比大鼠血浆、松果体褪黑素含量均有极显著性差异(P<0.001)。结论:褪黑素放免法灵敏度高(5pg/m l)稳定期长(65d),可满足褪黑素研究工作的需求,标记物免疫活性好稳定期长。动物模型测定的结果说明慢性应激肝抑郁症与褪黑素之间确实存在明确的相关性,但慢性应激肝抑郁症的严重程度与季节并无明确的关联。另外,冬夏不同季节内褪黑素含量的显著差异主要是因为光照强度和总量的不同。     

Mel-1a,Mel-1b褪黑素受体在大鼠海马分布的原位杂交研究

Mel-1a,Mel-1b为分别从人大脑和视网膜克隆的两种褪黑素膜受体。随着褪黑素的各种重要生理作用的不断发现 ,对其受体的研究也日益广泛和深入。本文采用原位杂交技术研究了 Mel-1a,Mel-1b两种褪黑素膜受体 m RNA在海马中的表达和分布 ,结果表明此两种受体 m RNA在成年大鼠海马各区神经元中均有表达。由于褪黑素是通过细胞膜上与 G蛋白耦联的 Mel-1a,Mel-1b受体而发挥作用的 ,而海马又是与老化密切相关的脑区 ,提示褪黑素对海马的老化有调节作用     

NMDA受体在发育过程中的表达及其生理意义

在脊椎动物的中枢神经系统中，谷氨酸是一种重要的兴奋性神经递质，它在脑中的众多功能是由不同的受体所介导的。谷氨酸受体可分为离子型（ｉｏｎｏｔｒｏｐｉｃ）和代谢型（ｍｅｔａｂｏｔｒｏｐｉｃ）两大类。离子型谷氨酸受体即为配体门控性离子通道（ｌｉｇａｎｄ－ｇ...     

基因芯片技术在肾脏生理、病理研究中的应用

基因芯片技术目前广泛应用于基因序列分析、突变检测、多态性分析、基因组图谱分析以及疾病的基因诊断等方面。基因表达谱芯片和基因诊断芯片是基因芯片的两种重要形式，前者可以提供待测组织的基因表达谱，即组织中基因整体表达情况；后者主要通过检测疾病相关基因突变或者表达情况的改变等信息来诊断疾病。目前将基因芯片技术     

李氏5号方对半乳糖老化小鼠海马神经元褪黑素受体和Nogo受体表达的影响

为了观察李氏5号方对半乳糖老化小鼠海马神经元褪黑素受体(MTR)和Nogo受体(NogoR)表达的影响。我们将昆明小鼠随机分为五组:正常对照组(C组)、D半乳糖模型组(D组)、李氏5号方大剂量药物治疗组(L组)、中剂量药物治疗组(M组)和小剂量药物治疗组(S组);D、L、M、S四组每日皮下注射半乳糖65mg/kg体重,持续三个月。应用免疫组织化学染色方法检测小鼠海马神经元MTR和NogoR的表达水平。NogoR免疫组化染色结果:D组海马阳性反应细胞着色浅,少有突起,细胞数目少,仅为正常小鼠的20%,三个剂量李氏5号方治疗组染色结果与C组相似。结果提示:半乳糖老化小鼠海马神经元MTR免疫反应阳性神经元数的上调可能是老化小鼠的一种代偿性反应;NogoR表达下调提示老化小鼠可能存在脑白质的损害,出于机体自我保护的需要,NogoR表达下调以避免神经元修复机制对大脑的进一步损害;不同剂量的李氏5号方水提取液对两种受体的调节作用极为明显,说明这两种受体的表达可受到外源性药物的干预。     

松果体及褪黑素对大鼠胸腺巨噬细胞酪氨酸激酶受体B表达的影响

目的:研究松果体摘除及补充褪黑素对大鼠胸腺巨噬细胞酪氨酸激酶受体B(trkB)表达的影响.方法:选用2月龄清洁级SD大鼠,分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除组、松果体摘除+褪黑素注射7.5mg·kg~(-1)·d~(-1)组和松果体摘除+褪黑素腹腔15mg·kg~(-1)·d~(-1)组,术后4、 8周取材.应用trkB和单克隆抗体ED1免疫荧光双标显色法观察分析松果体摘除及补充外源性褪黑素后胸腺巨噬细胞trkB表达的变化.结果:与对照组相比,松果体摘除术后4周胸腺双阳性细胞表达减弱,补充褪黑素后无变化.术后8周松果体摘除组与对照组相比无明显差异,而低剂量组双阳性细胞表达异常增高,高剂量组恢复正常.各组平均灰度无明显差异.结论:松果体及褪黑素在影响胸腺细胞分化发育过程中,胸腺巨噬细胞表达的trkB也随之发生变化,其与胸腺细胞表达的trkB共同作用参与胸腺细胞分化发育.胸腺神经内分泌微环境的分泌调节是松果体及褪黑素保护胸腺细胞的通路之一.     

受体活性修饰蛋白病理生理作用的研究进展

受体活性修饰蛋白(RAMPs)是一种具有单一跨膜功能域的蛋白,它可以与降钙素基因相关肽家族(CGRP)受体、降钙素受体(CTR)及降钙素受体样受体(CRLR)等Ⅱ型G蛋白偶联受体(GPCRs)相互作用,形成稳定的异二聚体在细胞膜上表达.不同的RAMPs可与降钙素受体样受体(CRLR)或降钙素受体(CTR)结合,形成对配体具有特异性亲和的不同受体表型,从而决定受体的生物学效应.此外,RAMPs还能与其他GPCRs相互作用,表明RAMPs在G蛋白偶联受体功能调节中具有更为广泛的作用.RAMPs对GPCRs的调节依赖于它的分子基础.RAMPs的研究为GPCRs受体功能及CGRP信号转导的研究提供了新思路.