吉非替尼在丙烯醛诱导气道黏液高分泌中的作用

目的研究表皮生长因子酪氨酸受体抑制剂(EGFR-TKI)——吉非替尼(gefitinib)在丙烯醛诱导气道黏液高分泌中的作用。方法采用丙烯醛诱导气道黏液高分泌建立大鼠模型,将大鼠分为正常对照组(A组,不予以任何干预),模型组(B组,丙烯醛雾化吸入),药物干预组(C、D、E组,在丙烯醛雾化前30 min,分别以10 mg/kg、20 mg/kg、30 mg/kg的吉非替尼灌胃),药物对照组(F组,生理盐水雾化前30 min,以30 mg/kg吉非替尼灌胃),每组6只大鼠。上述处理持续3周后处死实验动物并取其肺组织,分别进行RT-PCR检测黏蛋白MUC5ACmRNA的表达,免疫组化检测气道MUC5AC和EGFR的蛋白表达,阿尔辛蓝-过碘酸雪夫氏染色(AB-PAS)检测杯状细胞数目。结果模型组大鼠肺组织MUC5AC、EGFR表达增强,杯状细胞数增加;吉非替尼对丙烯醛引起的MUC5AC表达、杯状细胞数增加均具有抑制作用,随着浓度的增加,抑制作用加强;吉非替尼对EGFR信号通路中EGFR蛋白表达具有抑制作用。结论丙烯醛活化EGFR使MUC5AC过度表达,吉非替尼通过对EGFR信号通路的调节,在气道黏液高分泌中具有保护作用。     

MARCKS相关多肽与地尔硫(艹卓)对大鼠气道黏液高分泌模型MUC5AC分泌的影响

目的 研究在大鼠气管内滴入MARCKS相关多肽（MANS）或/和地尔硫（艹卓）（DTZ）对气道黏蛋白5AC（MUC5AC）分泌的影响并探讨其可能的作用机制。方法 通过雾化吸入丙烯醛建立大鼠气道黏液高分泌模型后随机分为4组，对照组气管内滴入生理盐水，三个实验组即MANS组、DTZ组和联用组在气管内分别滴入MANS、DTZ以及二者同时滴入，1 h后获取支气管肺泡灌洗液（BALF）及肺组织。用ELISA法对BALF中的MUC5AC进行定量；用免疫组化染色对气道杯状细胞中MUC5AC进行特异性染色，用灰度扫描和图像分析对杯状细胞内的MUC5AC进行半定量分析。结果 BALF中MUC5AC的分泌量在MANS组和联用组均较对照组明显减少（P均〈0.05），在DTZ组无明显变化（P〉0.05）；在联用组较MANS组亦明显减少（P〈0.05）。气道杯状细胞内MUC5AC的量在MANS组和联用组均较对照组显著增多（P均〈0.05）；在单用DTZ组没有明显变化（P〉0.05）。结论 在丙烯醛诱导的大鼠气道黏液高分泌模型中，气管内滴入MANS可以减少气道黏液的分泌，单用DTZ气管内滴入不能减少气道黏液的分泌。但二者联合滴入时DTZ对MANS抑制气道黏液的分泌可能具有协同作用。     

辛伐他汀对丙烯醛暴露大鼠NF-κB表达的影响

目的通过检测辛伐他汀对大鼠肺组织中NF活性的影响,了解其对减少丙烯醛引起的气道黏液高分泌的可能机制。方法大鼠雾化吸入丙烯醛建立气道黏液高分泌模型。干预组在雾化吸入丙烯醛同时用不同浓度辛伐他汀灌胃。蛋白印迹（western blot）检测MUC5AC蛋白的表达,凝胶阻滞迁移分析方法（EMSA）检测NF-κB的活性。结果丙烯醛吸入刺激后12天,与正常对照组相比,MUC5AC蛋白、NF-κB活性增加。辛伐他汀干预后,与丙烯醛组相比,MUC5AC蛋白、NF-κB活性降低,应用甲羟戊酸后可以部分抵消辛伐他汀的作用,使MUC5AC蛋白产生、NF-κB活性增加。结论辛伐他汀可抑制丙烯醛所致气道粘液高分泌,其部分机制可能通过甲羟戊酸途径抑制NF-κB活性。     

表皮生长因子受体在中性粒细胞弹力酶诱导气道粘液高分泌中的作用

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)活化在中性粒细胞弹力酶(NE)引起气道粘蛋白(MUC)分泌增加信号传导中的作用。方法 健康Wistar雄性大鼠40只，随机分为3组：A组为正常对照组；B组动物采用气管内一次性给予后每日雾化小剂量NE法建立慢性支气管炎模型；C组在每次NE前预先给予EGFR拮抗剂BIBX1522。上述处理2周后于第3周取实验动物肺组织，分别行阿尔辛蓝一过碘酸雪夫氏染色(AB-PAS)测定杯状细胞数目；免疫组化法检测气道MUC5AC和EGFR的表达。结果 B组大鼠气道杯状细胞数和MUC5AC、EGFR的表达强度与A组、C组比较均有显差异。结论 NE可通过气道上皮EGFR的活化使杯状细胞数目增加及MUC5AC过度生成，提示EGFR在气道粘液高分泌过程中具重要的介导作用。     

辛伐他汀对丙烯醛暴露大鼠NF-kB表达的影响

目的 通过检测辛伐他汀对大鼠肺组织中NF活性的影响,了解其对减少丙烯醛引起的气道黏液高分泌的可能机制.方法 大鼠雾化吸入丙烯醛建立气道黏液高分泌模型.干预组在雾化吸入丙烯醛同时用不同浓度辛伐他汀灌胃.蛋白印迹(western blot)检测MUC5AC蛋白的表达,凝胶阻滞迁移分析方法(EMSA)检测NF-<,k>B的活性.结果 丙烯醛吸入刺激后12天,与正常对照组相比,MUC5AC蛋白、NF-<,k>B活性增加.辛伐他汀干预后,与丙烯醛组相比,MUC5AC蛋白、NF-<,k>B活性降低,应用甲羟戊酸后可以部分抵消辛伐他汀的作用,使MUC5AC蛋白产生、NF-<,k>B活性增加.结论 辛伐他汀可抑制丙烯醛所致气道粘液高分泌,其部分机制可能通过甲羟戊酸途径抑制NF-<,k>B活性.     

内毒素致大鼠气道黏液高分泌的研究

[摘要] 目的 探讨内毒素致大鼠气道黏液高分泌的发生机制。 方法 将12只雄性SD大鼠随机分为对照组和脂多糖组。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-10浓度。分别用HE染色、阿辛蓝-过碘酸雪夫（AB-PAS）和免疫组化染色进行气道上皮杯状细胞计数,检测气道黏液物质和MUC5AC表达。结果 LPS气道内注射后BALF中TNF-α、IL-1β和IL-10水平较对照组升高,气道上皮杯状细胞积分、气道黏液物质及MUC5AC表达明显升高（均P<0.01）。相关性分析示LPS组BALF中TNF-α、IL-1β水平与气道MUC5AC呈正相关（r分别为 0.921、0.883,均P<0.01）,IL-10与MUC5AC呈负相关（r为-0.852,P<0.05）。 结论 侵入气道的细菌致病因子可上调MUC5AC表达,引起气道黏液高分泌,其发生机制可能与失控性炎症反应有关;大鼠气道内注射LPS能成功建立气道黏液高分泌模型。     

清热化痰法对慢性阻塞性肺疾病急性加重期痰热证大鼠气道黏液高分泌的影响

目的：研究循清热化痰法组方的蒌芩止嗽煎通过影响慢性阻塞性肺疾病急性加重（ AECOPD）大鼠气道黏液高分泌,提高抗生素在肺内的药物浓度的机制。方法50只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、氨溴索组、二陈汤组、蒌芩止嗽煎组,每组各10只。用熏吸香烟加气管内注射内毒素及鼻腔滴入金黄色葡萄球菌,合并风热刺激的方法建立大鼠AECOPD痰热证模型。模型建立后,氨溴索组腹腔内注射氨溴索6 mg／（kg· d）,二陈汤组及蒌芩止咳煎组分别灌胃相应的中药3．33 g／（kg· d）,共7 d。 AB-PAS染色,镜下观察杯状细胞酸性黏蛋白的分泌;病理组织使用Image-Pro Plus 6．0软件计数每个视野下杯状细胞总数,计算杯状细胞占所有上皮细胞比例;ELISA法检测支气管灌洗液中肺组织黏蛋白（ MUC5AC）含量及血清中中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）含量。结果与模型组比较,各药物组杯状细胞分泌的MUC5AC及气道杯状上皮细胞计数均明显降低（P＜0．05）,且蒌芩止嗽煎组NE及MUC5AC降低更为明显（P＜0．05）,而其余各组无明显差异。结论蒌芩止嗽煎提高抗生素在肺组织内转运能力的机制,可能是通过减少黏蛋白和气道杯状上皮细胞数量,降低血清NE和灌洗液中MUC5AC,减少气道黏液分泌,减轻气道阻塞,促进抗生素在肺组织内的正相扩散作用而实现的。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ在大鼠气道黏液高分泌中的表达及意义

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在内毒素诱导大鼠气道黏液高分泌中的作用.方法 将12只雄性SD大鼠随机分为对照组和内毒素组.采用HE染色和阿辛蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色进行气道上皮杯状细胞计数及检测气道黏液物质表达.用免疫组化染色及实时定量-PCR检测气道及肺组织黏蛋白5AC(MUC5AC)、PPARγ蛋白及mRNA表达.结果 内毒素组气道上皮杯状细胞积分、气道黏液物质、气道及肺组织MUC5AC、PPARγ蛋白及mRNA表达均较对照组升高(P<0.05).相关性分析显示,内毒素组气道及肺组织PPARγ蛋白表达水平与气道及肺组织MUC5AC mRNA表达水平呈负相关(r=-0.829,P<0.05).结论 PPARγ参与了内毒素诱导气道黏液高分泌的发生.     

辛伐他汀对大鼠气道黏液高分泌的影响和机制研究

目的了解辛伐他汀对丙烯醛引起的气道黏液高分泌的作用及其可能的机制。方法大鼠雾化吸人丙烯醛,建立气道黏液高分泌模型。将42只雄性SD大鼠按随机数字表法分为7组：对照组（A组）、辛伐他汀自身对照组（B组）、模型组（C组）、低剂量辛伐他汀组（D组）、中剂量辛伐他汀组（E组）、高剂量辛伐他汀组（F组）和甲羟戊酸组（G组）,每组6只。分别用阿辛蓝-过碘酸雪夫（AB—PAS）和免疫组化染色检测气道黏蛋白和黏蛋白5ac（mucinSac,MUC5ac）的表达。RT—PCR检测MUC5acmRNA的表达。结果丙烯醛刺激可以使大鼠气道黏蛋白、MUC5ac蛋白和mRNA表达增高,使支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞数增多。结论辛伐他汀可以抑制丙烯醛所致的气道黏液高分泌,甲羟戊酸可以部分逆转辛伐他汀的作用,其机制可能是通过甲羟戊酸途径减少巨噬细胞在肺中的浸润。     

阳和平喘颗粒不同阶段干预对哮喘大鼠气道黏液高分泌及血清IL-13水平影响

目的:探讨阳和平喘颗粒不同阶段干预对哮喘大鼠气道黏液高分泌的影响及可能作用机制。方法:将70只SD大鼠随机分为模型组,正常组,地塞米松组,阳和平喘颗粒早期、晚期低剂量组,阳和平喘颗粒早期、晚期高剂量组,每组大鼠10只,OVA致敏,激发制备哮喘大鼠模型。正常组和模型组用生理盐水代替实验药物进行干预,其他组则分阶段给予相应药物干预。在AB-PAS染色后,光镜下观察气道组织形态学变化。采用ELISA法检测血清IL-13水平,采用免疫组化法检测各组大鼠气道MUC5AC水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠气道内可见大量黏液分泌及杯状细胞增生,IL-13和MUC5AC表达水平也显著升高(P0.01)。与模型组比较,各干预组大鼠气道内可见少量黏液分泌,无明显杯状细胞增生,IL-13及MUC5AC表达水平也显著降低(P0.01)。其中,阳和平喘颗粒高剂量组的效应表达显著优于低剂量组,早期用药在降低IL-13和MUC5AC表达水平方面优于晚期用药(P0.05或P0.01)。结论:阳和平喘颗粒可减少哮喘大鼠气道内黏液分泌及杯状细胞增生,抑制MUC5AC转录和蛋白合成,能有效抑制气道炎症,其作用机制可能与下调IL-13水平有关,早期用药的效应表达明显优于晚期用药,且具有一定的剂量依赖性。     

阳和平喘颗粒对哮喘大鼠气道黏液高分泌的影响

目的 观察阳和平喘颗粒对哮喘大鼠气道黏液高分泌的干预作用,探究其作用机制.方法 将50只清洁级SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳和平喘颗粒低剂量组、阳和平喘颗粒高剂量组和地塞米松组,每组10只.采用卵清蛋白成功诱发大鼠哮喘后,并予相应药物干预8周.阿尔辛蓝过碘酸雪夫氏染色,光镜下观察气道杯状细胞;采用免疫组织化学法检测大鼠气道黏蛋白5AC（mucin 5AC,MUC5AC）的表达水平;采用Western blot、RT-PCR分别检测大鼠肺组织转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1,TGF-β1）蛋白及其mRNA表达水平.结果 阳和平喘颗粒高、低剂量组及地塞米松组大鼠气管可见少量黏液分泌,未见明显杯状细胞增生;与模型组比较,阳和平喘颗粒高、低剂量组及地塞米松组大鼠气道组织杯状细胞面积和MUC5AC蛋白表达水平,以及肺组织TGF-β1蛋白及TGF-β1mRNA表达水平均显著降低（P＜0.01）;阳和平喘颗粒高剂量的效应显著优于低剂量,呈现明显的剂量依赖性（P＜0.01）.结论 阳和平喘颗粒可降低哮喘大鼠气道黏液高分泌,机制可能与其下调肺组织TGF-β1蛋白及其基因表达水平,抑制MUC5AC生成有关.     

Brg1通过STAT6促进哮喘气道黏液高分泌

目的研究染色质重构复合物核心催化亚基（Brg1）对哮喘小鼠气道黏液高分泌的影响及其作用机制。方法将6~8周龄 雌性野生型C57bl/6小鼠和Brg1-/-小鼠（Ⅱ型肺泡上皮细胞AEC2s上特异性条件敲低Brg1的C57bl/6小鼠）随机分为4组：正常 对照组、哮喘组、Brg1敲低对照组（Brg1-/-）和Brg1敲低后构建哮喘模型组（Brg1-/-+哮喘）,每组10只。哮喘组和Brg1-/-+哮喘组用 鸡卵清蛋白（OVA）制备过敏性哮喘模型,对照组用生理盐水代替。收取标本,用ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中 黏蛋白MUC5AC和IL-13的表达。糖原染色检测小鼠气道杯状细胞的增生和黏液分泌,q-PCR和免疫组化检测各组小鼠气道 黏蛋白MUC5AC的表达和定量。Western blot检测各组小鼠肺组织中STAT6、p-STAT6的表达。结果Brg1-/-+哮喘组较哮喘组 气道杯状细胞增生和黏液分泌均显著减少,BALF中IL-13、MUC5AC表达明显降低,肺组织MUC5AC mRNA表达显著降低, 同时肺组织STAT6和磷酸化STAT6显著下调。结论Brg1-/-敲低的小鼠建立哮喘模型时气道黏液分泌较野生型小鼠减轻,其可 能通过影响STAT6从而抑制黏蛋白MUC5AC的表达,抑制支气管哮喘气道黏液高分泌,表明Brg1具有促进哮喘气道黏液高分 泌的作用。     

杏杷止咳颗粒对气道黏液高分泌大鼠杯状细胞的影响研究

目的：研究杏杷止咳颗粒对气道黏液高分泌大鼠杯状细胞的影响。方法：48只SD大鼠随机分为6组,空白组（A）、模型组（B）、低（C）、中（D）、高剂量止咳颗粒组（E）、氨溴索组（F）各8只,采用丙烯醛雾化造模气道黏液高分泌大鼠,应用阿尔辛蓝-过碘酸-希夫（AB-PAS）染色检测杯状细胞阳染率、管腔内黏液分泌。结果：1AB-PAS染色病理切片：正常大鼠气管及支气管见到极少量杯状细胞存在;模型组小鼠每一级气道均可见到大量杯状细胞增生并有大量黏液分泌;低剂量组杯状细胞分布稍减少;中剂量组杯状细胞分布明显减少;高剂量组和氨溴索组可见少量杯状细胞分布;2杯状细胞阳染率：模型组、低剂量止咳颗粒组杯状细胞阳染率较空白组、高剂量止咳颗粒组、氨溴索黏组高（P〈0.01）。结论：杏杷止咳颗粒能够减轻气道黏液高分泌杯状细胞增生,其机制有待进一步研究。     

铜绿假单胞菌密度感应系统对气道黏液高分泌的影响

目的 探讨铜绿假单胞菌(PA)的密度感应系统(QS)在气道黏液高分泌中的作用.方法 60只大鼠随机分为3组(野生型菌株PA01组、QS基因突变型菌株PA01-JP2组和对照组),分别将包被不同亚型PA的硅胶管置人大鼠一侧主支气管,建立慢性肺部感染模型,对照组则用生理盐水浸泡硅胶管.28 d后处死大鼠,取肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF)采用AB-PAS染色、ELISA和RT-PCR等方法检测气道内黏蛋白MUC5AC蛋白及mRNA的表达水平,比较野生型菌株PA01和QS突变型菌株PA01-JP2对大鼠气道黏液分泌的影响.结果 PA01组较PA01-JP2组气道黏膜上皮的杯状细胞数目显著增多(P＜0.05),对照组的杯状细胞数目极少.PA01组MUC5ACmRNA表达量较PAO1-JP2组显著增多(P＜0.05),对照组MUC5AC mRNA仅有少量表达.PA01组BALF中MUC5AC蛋白分泌量明显高于PA01-JP2组(P＜0.05).结论 PA的QS重要基因缺损导致气道黏液分泌的能力显著下降.     

PPAR-γ和MMP-9对COPD病人气道杯状细胞增生和MUC5AC表达的影响

目的探讨气道中过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)对气道杯状细胞增生及黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响。方法选取男性肺鳞癌手术病人40例,根据肺功能分为COPD组和正常对照组,各20例,取手术切除肺叶的无癌组织浸润的外周支气管组织制备切片,阿辛蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色法检测气道上皮杯状细胞百分比,免疫组化法测定气道中PPAR-γ、MMP-9及MUC5AC的含量。结果与对照组比较,COPD组气道上皮杯状细胞数目及气道中PPAR-γ、MMP-9及MUC5AC表达量均明显增高(t=-9.41～-3.85,P0.01)。COPD组气道中PPAR-γ表达水平与气道上皮杯状细胞百分比、MUC5AC表达水平均呈明显负相关(r=-0.824、-0.865,P0.01),而MMP-9表达水平与气道上皮杯状细胞百分比、MUC5AC表达水平均呈明显正相关(r=0.875、0.754,P0.01)。结论COPD气道杯状细胞明显增生、MUC5AC表达增高,而气道PPAR-γ和MMP-9表达异常参与了黏液高分泌的调控。     

加味麻杏石甘汤治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重的机制研究

目的探讨加味麻杏石甘汤对慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)的作用机制。方法40只清洁级Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、加味麻杏石甘汤组、克拉霉素组。空白对照组正常喂养,模型组、加味麻杏石甘汤组、克拉霉素组采取气道滴注脂多糖(LPS)联合烟熏的方法建立AECOPD模型,并连续30 d分别给予生理盐水、加味麻杏石甘汤(8.7 g/kg)、克拉霉素混悬液(50 mg/kg)灌胃。实验第31天,测大鼠肺功能,取大鼠肺组织,制作病理切片,行AB-PAS染色观察杯状细胞,并采用免疫组化法对肺组织中黏蛋白5AC(MUC5AC)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)进行检测。结果与空白对照组比较,模型组、加味麻杏石甘汤组、克拉霉素组第0.3秒用力呼气容积与用力肺活量的比值(FEV_(0.3)/FVC)明显下降,杯状细胞数、MUC5AC、NE表达均显著升高,具有统计学差异;加味麻杏石甘汤组与模型组比较,FEV_(0.3)/FVC明显上升,杯状细胞数、MUC5AC、NE表达显著降低,具有统计学差异;加味麻杏石甘汤组与克拉霉素组比较,FEV_(0.3)/FVC、杯状细胞数、NE、MUC5AC均无统计学差异。结论加味麻杏石甘汤可显著提升AECOPD模型大鼠FEV_(0.3)/FVC,抑制杯状细胞增生,降低肺组织中NE及MUC5AC的表达,从而减轻AECOPD气道黏液高分泌,这可能是加味麻杏石甘汤治疗AECOPD的机制之一。     

平喘宁对支气管哮喘大鼠黏蛋白AC表达影响

目的探讨平喘宁对支气管哮喘模型大鼠气道黏液高分泌的调控机制。方法 SPF级别雄性SD大鼠140只,随机分为正常组,模型组,平喘宁低、中、高剂量组、桂龙咳喘宁组及地塞米松组,每组20只。以卵清蛋白(OVA)联合氢氧化铝复制大鼠哮喘模型,造模28 d后,正常组、模型组每天给予等量蒸馏水灌服,平喘宁低、中、高剂量组按0.49、0.98、1.96 g/(kg·d)灌胃给药,桂龙咳喘宁按0.405 mg/(kg·d)灌胃给药,地塞米松组按0.5 mg/(kg·d)灌胃给药。灌胃4周后,在末次OVA激发后2 h内解剖大鼠并取出肺组织。采用HE染色法观察肺组织的病理形态学改变;采用RT-PCR法检测肺组织MUC5AC mRNA的表达;采用免疫荧光法与Wersten-blot法检测肺组织中MUC5AC蛋白表达量;ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中MUC5AC的分泌水平。结果与正常组比较,模型组肺组织病理切片观察可见炎性细胞浸润,气道壁增厚,气道狭窄、变形,肺泡增大、断裂,间隔增厚及气道平滑肌增厚;MUC5AC阳性表达IOD值明显增加(P0.01);MUC5AC蛋白及mRNA表达水平升高(P0.01)。与模型组比较,各治疗组大鼠肺组织病理形态学结构改善;MUC5AC阳性表达IOD值降低(P0.01);MUC5AC蛋白及mRNA表达水平下降(P0.01)。结论平喘宁对支气管哮喘具有治疗效果,作用机制可能与调节MUC5AC水平、减少气道黏液高分泌有关。     

磷酸二酯酶4抑制剂对大鼠肺粘液分泌的影响

目的探讨磷酸二酯酶4（PDE4）抑制剂YM976对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠肺粘液分泌的影响。方法将40只SD大鼠随机等分为4组：正常对照组、药物对照组、COPD模型组、药物干预组。测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞总数和巨噬细胞绝对计数及百分比，阿辛蓝和MUC5AC免疫组化染色检测MUC5AC表达，RT-PCR检测MUC5AC mRNA在肺组织中的表达。结果YM976可以降低丙烯醛诱导的COPD大鼠BALF中的细胞总数和肺泡巨噬细胞计数及百分比，降低其肺组织MUC5AC的mRNA水平和MUC5AC蛋白表达。结论YM976能有效减少大鼠BALF中细胞总数和巨噬细胞数，从蛋白和基因水平抑制大鼠肺组织MUC5AC的表达。     

半夏提取物对气道黏液高分泌的影响

目的 探讨半夏提取物(EP)对脂多糖诱导的大鼠气道黏液高分泌模型的干预作用.方法 30只Wistar大鼠随机分为5组(n=6),分别为空白组、模型组、低剂量EP组、中剂量EP组及高剂量EP组.模型组和EP组经气道注入脂多糖(LPS)复制大鼠气道黏液高分泌模型.低、中、高剂量EP组连续4 d分别给予管饲EP 10、30及60 g/kg;采用免疫组化法检测肺内气道的黏蛋白5AC(MUC5AC)蛋白表达,RT-PCR法检测肺组织MUC5AC mRNA、水通道蛋白5(AQP-5)mRNA;ELISA法检测BALF中的TNF-α浓度.结果 大鼠气道上皮MUC5AC蛋白和肺组织MUC5AC mRNA的表达在模型组中均明显高于空白组(P<0.05);在低剂量及中剂量EP组较模型组稍降低(P>0.05),仍显著高于空白组(P<0.05);在高剂量EP组显著低于模型组(P<0.05).大鼠AQP-5 mRNA表达在模型组显著低于空白组(P<0.05);在低剂量及中剂量EP组较模型组稍升高(P>0.05),仍较空白组显著降低(P<0.05);在高剂量EP组显著高于模型组(P<0.01).BALF中TNF-α浓度与肺组织MUC5AC mRNA的表达呈正相关(r=0.948,P<0.05),肺组织AQP-5 mRNA与MUC5AC mRNA及TNF-α的表达呈负相关(r=-0.955,P<0.05;r=-0.909,P<0.05).结论 高剂量的EP能明显抑制大鼠气道上黏液高分泌状态.     

HSP70在香烟诱导人类气道上皮细胞黏液高分泌中的作用

目的 研究热休克蛋白70(HSP70)在香烟提取物(CSE)诱导人类支气管上皮细胞(16-HBE)黏液高分泌中的作用.方法 建立CSE刺激16-HBE诱导黏液蛋白基因(MUC5AC)高表达模型,给予HSP70单抗阻断HSP70生物活性;提取细胞mRNA、蛋白,采用RT-PCR及Western blot等方法检测炎性细胞因子(TNF-α)、HSP70及MUC5AC的表达.结果 CSE刺激后细胞MUC5AC、TNF-α、HSP70 mRNA和HSP70蛋白表达较空白组(未予CSE刺激)增高(P<0.05).HSP70生物作用阻断后,MUC5AC和TNF-α mRNA的表达水平降低(P<0.05),同时表皮生长因子受体(EGFR)磷酸化水平也降低(P<0.05).结论 CSE可诱导16-HBE细胞MUC5AC基因表达增高,是重要的气道黏液刺激因子.HSP70参与了气道黏液分泌,其机制可能是通过上调TNF-α表达量,从而激活EGFR通路导致MUC5AC表达增加.