Rho在二氧化硅诱导的人支气管上皮细胞 α平滑肌肌动蛋白表达中的作用

目的：探讨Rho在二氧化硅（SiO2）诱导人支气管上皮细胞（HBECs）α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达中的作用。方法：以SiO2处理的HBE细胞为研究对象,免疫细胞化学及Western印迹检测α－SMA表达;GST pull down分析Rho的活化情况;干预实验中用Rho抑制剂Y27632处理细胞后,Western印迹检测SiO2对α-SMA表达的影响。结果：SiO2 (0,50,100,200,300 μg/mL)分别作用HBECs细胞72 h后,α-SMA表达增强,其中以200 μg/mL SiO2组α-SMA表达最强,为对照组的（5.09±1.98）倍（P＜0.01）;用200 μg/mL SiO2分别作用HBECs细胞1,2,6,12,24 h后,Rho明显活化（P＜0.01）;Rho抑制剂Y27632明显抑制了SiO2诱导的α-SMA表达,20和30 μmol/L的Y27632抑制率分别为68％和75％（P＜0.01）。结论：Rho参与介导SiO2诱导的HBECs中α-SMA的表达。     

Rho在二氧化硅诱导的人支气管上皮细胞α平滑肌肌动蛋白表达中的作用（英文）

目的：探讨Rho在二氧化硅（SiO2）诱导人支气管上皮细胞（HBECs）α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达中的作用。方法：以SiO2处理的HBE细胞为研究对象,免疫细胞化学及Western印迹检测α-SMA表达;GST pull down分析Rho的活化情况;干预实验中用Rho抑制剂Y27632处理细胞后,West-ern印迹检测SiO2对α-SMA表达的影响。结果：SiO2（0,50,100,200,300μg/mL）分别作用HBECs细胞72h后,α-SMA表达增强,其中以200μg/mL SiO2组α-SMA表达最强,为对照组的（5.09±1.98）倍（P〈0.01）;用200μg/mL SiO2分别作用HBECs细胞1,2,6,12,24h后,Rho明显活化（P〈0.01）;Rho抑制剂Y27632明显抑制了SiO2诱导的α-SMA表达,20和30μmol/L的Y27632抑制率分别为68%和75%（P〈0.01）。结论：Rho参与介导SiO2诱导的HBECs中α-SMA的表达。     

低氧对肾小管上皮细胞TGF—β1表达及增殖的影响

进展性肾脏疾病是以肾功能进行性减退为特征的一组肾脏疾病。当原始刺激终止后 ,肾脏病变仍进行性恶化 ,其机理尚未完全阐明。目前有研究者提出慢性低氧是肾脏疾病进展的原因之一[1] 。本研究观察了低氧对肾小管上皮(Ｍａｄｉｎ Ｄａｒｂｙｃａｎｉｎｅｋｉｄｎｅｙ ,ＭＤＣＫ)细胞的作用 ,以探讨低氧在肾小管间质病变进展中的作用机理。材料与方法一、实验材料ＭＤＣＫ细胞由法国Ｔｅｎｏｎ医院赠送。流式细胞仪由上海第二医科大学生物物理教研室提供。二、实验方法ＭＤＣＫ细胞于含 10 %小牛血清的ＤＭＥＭ培养液中培养 ,培养传代如常。细…     

CTNNAL1反义寡核苷酸对人支气管上皮细胞增殖和损伤修复的影响

目的 该实验旨在观察CTNNAL1反义寡核苷酸对人支气管上皮细胞增殖和损伤修复的影响.方法 引进人永生化支气管上皮细胞株进行细胞培养,设计合成CTNNAL1反义寡核苷酸和CTNNAL1错义寡核苷酸,分4组转染入人BEC:空白对照组;脂质体-CTNNAL1-ASODN转染组(Lip-CTNNAL1-A-SODN);脂质体-错义CTNNAL1-MSODN转染组(Lip-CTNNAL1-MSODN);脂质体转染组(Lip).荧光定量RT-PCR检测CTNNAL1 mRNA的表达,MTT法检测人BEC的增殖,测定损伤修复指数衡量各组细胞损伤修复速度.结果 CTNNAL1 ASODN能明显抑制人BEC的CTNNAL1 mRNA的表达,CTNNAL1ASODN能抑制人BEC的增殖,延长损伤后修复的速度,且呈剂量依赖性,在1.0μmol/L的CTNNAL1 A-SODN时,抑制作用最明显(P＜0.01).结论 CTNNAL1 ASODN通过沉默人BEC的CTNNAL1 mRNA的表达,抑制人BEC的增殖和损伤修复的速度.     

姜黄素对人支气管上皮细胞MMP-9的影响

【】目的：观察姜黄素(curcumin, cur)对人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells, HBECs)MMP-9表达的影响。方法：体外培养人支气管上皮细胞,分为空白组、LPS组及姜黄素组,其中姜黄素组在相同浓度LPS刺激下又各分为5、10、20、40和80μmol／L 5个浓度组,作用4h后在显微镜下观察cur干预后细胞的形态变化,采用实时荧光定量PCR观察人支气管上皮细胞MMP-9 mRNA的表达变化。结果：显微镜下观察姜黄素干预后的细胞形态良好,细胞无明显损伤。实时PCR结果显示,空白组可见一定量MMP-9 mRNA表达,与空白组比较,LPS组的人支气管上皮细胞MMP-9 mRNA表达量明显增加,80μmol／L cur亦可增加MMP-9 mRNA的表达(p<0.05)。与LPS组比较,10μmol／L cur组人支气管上皮细胞的MMP-9 mRNA表达量显著下降(p<0.05),5μmol／L、20μmol／L、40μmol／L的cur对支气管上皮细胞MMP-9的mRNA表达无明显作用。结论：10μmol／L姜黄素可降低人支气管上皮细胞的MMP-9mRNA的表达。     

阿德福韦酯对慢性乙肝患者血清中TGF—β1的影响

目的：观察慢性乙肝患者经阿德福韦酯治疗前后血清中TGF—β1变化,为阿德福韦酯的临床合理应用提供参考。方法：将72例患者随机分为试验组与对照组,其中,试验组36例患者分别口服阿德福韦酯10mg．每131次,同时加用一般保肝药;对照组36例患者仅给予保肝药。检测治疗前、治疗3个月、治疗6个月时患者血清中TGF—β1的含量,分析其变化。结果：试验组患者血清TGF—β1水平治疗后呈下降趋势,治疗前与治疗6个月比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。试验组与对照组在治疗6个月时血清TGF—β1比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：阿德福韦酯治疗后慢性乙肝患者血清中的TGF—β1水平明显下降。     

人TGFβ1cDNA高表达重组质粒的构建

目的为了得到基因工程制备的人重组TGFβ1,构建人TGFβ;cDNA高表达重组质粒。方法从人血小板中提取总RNA,经RT－PCR得到TGFβ;cDNA基因,并克隆到表达质粒pBLMVL2中,构建了在PL启动控制基因表达质粒pBLMVL2－TGFβ;,使其在大肠杆菌中进行温敏诱导表达。结果RT－PCR得到的TGFβcDNA经DNA序列分析与文献报道一致,pBLMVL2－TGFβ1在大肠杆菌中表达产物人重组TGFβ1经还原型SDS－PAGE电泳,呈一条蛋白条带,分子量12．5kd,表达产物约占全菌蛋白20％。结论构建的重组质粒pBLMVL2－TGFβ1能高表达人重组TGFβ1。     

红霉素抑制人支气管上皮细胞白介素-8基因的表达

目的 从分子水平上探讨红霉素(EM)的抗炎作用机制,为临床长期应用小剂量红霉素治疗慢性气道感染性疾病提供理论依据.方法 体外培养人支气管上皮细胞(16HBE),将细胞随机分为8组,先加入红霉素干预,后加入肿瘤坏死因子(TNF-α)刺激.分组如下:(1)空白对照组;(2)TNF-α(20ng/mL,16h);(3)EM(0.3μg/mL,24h)+TNF-α(20ng/mL,16h);(4)EM(3μg/mL,24h)+TNF-α(20ng/mL,16h);(5)EM(30μg/mL,24h)+TNF-α(20ng/mL,16h);(6)EM(0.3μg/mL,48h)+TNF-α(20ng/mL,16h);(7)EM(3μg/mL,48h)+TNF-α(20ng/mL,16h);(8)EM(30μg/mL,48h)+TNF-α(20ng/mL,16h).然后收集各组细胞分别提取RNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测白介素-8(IL-8)mRNA.结果 用前炎因子TNF-α刺激人支气管上皮细胞(16HBE)后,RT-PCR结果显示细胞IL-8mRNA表达增高.先加入不同浓度及作用时间的红霉素,后加入前炎因子TNF-α刺激人支气管上皮细胞(16HBE),RT-PCR结果显示各组细胞IL-8mRNA表达均降低,但其降低的水平与红霉素作用浓度及时间无明显关系.结论 前炎因子TNF-α能激活人支气管上皮细胞IL-8基因的表达,使其表达增高,促进炎症的发生发展,在炎症进程中发挥着重要作用.红霉素能抑制人支气管上皮细胞白介素-8基因表达,这可能是红霉素的抗炎作用机制之一.     

ERK信号通路调控二氧化硅诱导的人支气管上皮细胞上皮-间质转化

目的:探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路在二氧化硅( SiO2)诱导人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBEC)上皮-间质转型(epithelial-mesenchymal transit...     

TGF—β1以及bFGF在扩张型心肌病中的表达及其意义研究

目的：观察人类DCM心肌组织中TGF—β1及bFGF的蛋白表达情况，探讨TGF—β1及bFGF在DCM心肌结构重塑中的作用及DCM引起猝死的分子机制。方法：采用法医病理尸检收集的30例DCM心脏标本，对心肌组织进行HE染色及TGFβl、TGFβlR、bFGF、bFGFR等细胞生长因子免疫组化染色，对染色结果进行光镜观察和图像分析。结果：TGF—β1表达显增高，bFGF表达阳性却无统计学意义。结论：TGF—β1是DCM心肌重构发生的重要细胞因子，而bFGF在DCM心肌结构重塑中的作用值得进一步研究。     

ERK信号通路调控二氧化硅诱导的人支气管上皮细胞上皮-间质转化

目的:探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路在二氧化硅(SiO2)诱导人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBEC)上皮-间质转型(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)中的作用机制。方法:SiO2(0～300μg/mL)处理HBEC 72 h,或不同浓度的U0126(0～30μmol/L)干预1 h后再行200μg/mL SiO2刺激72 h,Western印迹检测E-cadherin和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的改变;使用丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性检测试剂盒检测SiO2(200μg/mL)处理HBEC(0～8 h)后ERK激活情况。结果:SiO2刺激HBEC后,E-cadherin蛋白表达水平逐渐下调,以300μg/mL时最为明显(P<0.01),α-SMA蛋白表达水平逐渐上调,以200μg/mL时最为明显(P<0.01)。SiO2刺激HBEC后,ERK明显活化,ERK磷酸化水平于30 min开始升高,1 h后逐渐降低。ERK抑...     

CHL1在支气管哮喘中的表达及意义

目的：探讨神经细胞黏附分子L1样蛋白（cell adhesion molecule L1?like protein,CHL1）在支气管哮喘中的表达及潜在机制。方法：收集55例哮喘患者及同期18例健康对照的临床资料及血清标本,酶联免疫吸附法检测血清CHL1水平,分析其与肺功能指标、血清总免疫球蛋白E（immunoglobulin E,IgE）的相关性。构建卵清蛋白（ovalbumin,OVA）诱导的慢性过敏性哮喘小鼠模型,免疫组化观察小鼠肺组织CHL1的表达定位及分布。采用不同细胞因子刺激人支气管上皮细胞（16HBE）,分别用实时定量PCR法和蛋白质免疫印迹法检测细胞CHL1 mRNA和蛋白表达情况。结果：与对照组（4.174±2.122）ng/mL相比,哮喘患者血清CHL1水平明显增高［（7.497±3.274）ng/mL,P < 0.000 1］,与血清总IgE水平呈正相关（r=0.287,P=0.048）。CHL1主要表达于小鼠肺组织支气管上皮细胞,哮喘小鼠表达量较对照组升高。TGF?β可上调支气管上皮细胞CHL1 mRNA及蛋白表达水平。结论：哮喘中支气管上皮细胞CHL1表达增加,该过程可能与TGF?β相关信号通路有关。     

TGF—β1、EGF在人胎儿晶状体上皮细胞的表达

目的：观察转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）、表皮生长因子（ＥＧＦ）在人胎儿晶状体上皮细胞的表达。方法：用ＳＰ免疫细胞化学法对４８例人胎儿不同胎龄晶状体上皮细胞进行ＴＧＦ－β１、ＥＧＦ免疫细胞化学染色。结果：ＴＧＦ－β１、ＥＧＦ阳性细胞浆为桔黄色或棕黄色的颗粒状或斑块状;并且阳性细胞随着胎龄的增加而减少。经相关分析：ＴＧＦ－β１与ＥＧＦ呈正相关。结论：ＴＧＦ－β１、ＥＧＦ在人胎儿不同胎龄晶状体上皮细胞均有表达,并且随着胎龄的增加而减少;ＴＧＦ－β１与ＥＧＦ具有协同作用,共同促进晶状体上皮细胞的增殖。     

高迁移率族蛋白 B1活化 p38 MAPK 对人支气管上皮细胞胸腺基质淋巴生成素表达的影响

目的：探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对人支气管上皮细胞（HBE）胸腺基质淋巴生成素（TSLP）表达的影响及机制。方法应用实时荧光定量PCR和ELISA分别检测HMGB1刺激HBE后TSLP基因表达及蛋白释放水平;用Western blot和ELISA分别检测p38 MAPK抑制剂SB202190干预HBE后磷酸化ATF－2蛋白（ p－ATF－2）表达及TSLP释放水平。结果（1）HMGB1以浓度依赖形式增加HBE TSLP的表达;（2）相对于HMGB12000 ng／mL的干预,SB202190抑制剂可明显减少活化的HBE p－ATF－2蛋白的表达（ P＜0.01）及其TSLP的释放（ P＜0.01）。结论 HMGB1可活化p38 MAPK通路增加HBE TSLP的表达,可能以此参与哮喘的发病过程。     

不同浓度百草枯对人支气管上皮细胞自噬的影响

目的研究不同浓度百草枯(PQ)对人支气管上皮细胞(16HBE)自噬的影响。方法不同浓度(50μM,150μM,500μM)的百草枯作用16HBE,分别在0 h、12 h、24 h通过Western Blot检测细胞中LC3-Ⅱ蛋白、LC3-I蛋白及P62蛋白的表达,电镜观察染毒组及对照组自噬小体变化。结果在实验中,PQ染毒组观察到细胞质中出现广泛大量自噬小体,相较对照组,自噬小体明显增多。50μMPQ染毒组Western Blot检测LC3-II/LC3-I蛋白浓度24 h组最高,12 h组次之,对照组表达水平最低(P<0.05),P62蛋白浓度24 h最低,12 h次之,对照组表达水平最高(P<0.05)。150μMPQ染毒组Western Blot检测LC3-II/LC3-I蛋白浓度各干预组与对照组相比无明显统计学意义,P62蛋白浓度各干预组与对照组相比统计学意义(P>0.05)。500μMPQ染毒组Western Blot检测LC3-II/LC3-I蛋白浓度各干预组与对照组相比无明显统计学意义(P>0.05),P62蛋白浓度各干预组与对照组相比无统计学意义... 更多     

TGF-β1在肺鳞癌细胞中的表达

目的探讨TGF-β1在肺鳞癌细胞中的表达.方法以原代培养的人肺鳞癌细胞为对象,采用ELISA法检测不同分化程度肺鳞癌细胞无血清培养液中TGF-β1蛋白含量.结果肺鳞癌各组细胞中TGF-β1蛋白含量均显著高于正常支气管上皮细胞(P<0.01),低分化组分别高于中分化组和高分化组(P<0.05),中分化组虽高于高分化组,但无显著差异(P>0.05).结论 TGF-β1蛋白在人肺鳞癌组织中表达增高,且与其分化程度基本呈正相关,提示TGF-β1对人肺鳞癌细胞生长的抑制作用丧失或下降.     

TGF—β1因子及其中医药拮抗的研究概况

生长因子在慢性阻塞性肺疾病气道重塑中发挥着重要的生物学效应。本文概述了TGF—β1在肺内分布、在慢性阻塞性肺疾病气道重塑中的作用及中西药对其拮抗作用的研究动态。     

实验性大鼠腮腺细胞缺血再灌注TGF—β1的表达

目的：探讨TGF—β1(Transforming growth facto-r-β1-转化生长因子—β1)在实验性大鼠腮腺导管细胞、腺泡细胞的表达区别与形态学改变的关系。材料和方法：采用颈总动脉结扎法建立腮腺缺血再灌注模型，用光镜、免疫组化的方法，观察腮腺导管细胞、腺泡细胞形态学及TGF—β1的表达变化。结果：实验组在缺血再灌注早期，开始出现形态学改变，中期明显，后期渐修复。在缺血和再灌注时间均相同时，TGF—β1在导管细胞较腺泡细胞表达高，前者增殖抑制明显。结论：①实验性腮腺缺血再灌注大鼠腮腺导管细胞有形态学改变。②TGF—β1在导管细胞表达比腺泡细胞高，导管细胞可能比腺泡细胞更客易发生增殖抑制。     

TNF-α诱导支气管上皮细胞表达ICAM-1

目的：探讨支气管上皮细胞活化对ICAM-1基因和细胞表面ICAM-1蛋白质表达的影响。方法：用10ng／ml TNF-α作用于正常培养的支气管上皮细胞（BEAS-2B）12h，通过RT-PCR分析ICAM-1在BEAS-2B细胞中的基因表达和用流式细胞仪分析ICAM-1在BEAS-2B细胞表面蛋白质量。结果：TNF-α与BEAS-2B细胞共同培养12h。可上调BEAS-2B细胞ICAM-1基因的表达和增加BEAS-2B细胞表面的ICAM-1蛋白质量。结论：TNF-α可诱导BEAS-2B细胞ICAM-1基因和蛋白质表达。