紫杉醇对小鼠巨噬细胞免疫活性的影响

目的：研究紫杉醇对小鼠巨噬细胞免疫活性的调节作用。方法：按常规方法收集纯化８－１２周龄ＢＡＬＢ／ｃ雌性小鼠腹腔巨噬细胞,用ＲＰＭＩ１６４０培养基培养,按所用药物紫杉醇干扰素－γ（ＩＮＦ－γ）发组并设对照组。一氧化氮（ＮＯ）测定采用Ｇｒｉｅｓｓ法。结果：一定浓度的紫用醇能够诱导巨噬细胞产生ＮＯ,且随浓度增大而增加;紫杉醇联合ＩＦＮ－γ时,诱导作用明显增加,且紫杉醇腹腔给药更易达到有效活化巨中噬细胞浓     

电离辐射对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响

本实验观察了不同剂量（０、５０、７５、１５０ｍＧｙ和２、４Ｇｙ）Ｘ线单次全身照射昆明系小鼠后腹腔巨噬细胞（ＭΦ）对鸡红细胞（ＣＲＢＣ）吞噬消化功能的影响。其结果表明，５０和７５ｍＧｙ照射后３天和５天ＭΦ对ＣＲＢＣ的吞噬功能明显增加（Ｐ〈０．００１），７５ｍＧｙ照射后ＭΦ消化功能更为显著（Ｐ〈０．０１），而２和４Ｇｙ照射后其吞噬和消化功能降低。提示，低剂量辐射能够刺激机体非特异性免疫功能，大剂量照射     

注射紫杉醇的小鼠骨髓细胞体外分化巨噬细胞增强

目的 研究小鼠腹腔注射紫杉醇对体外骨髓细胞诱导分化巨噬细胞的影响.方法 小鼠连续5 d腹腔注射紫杉醇,无菌制备骨髓细胞,用含巨噬细胞集落刺激因子 (M-CSF) 的RPMI1640培养液培养骨髓细胞,通过流式细胞仪对其诱导分化的巨噬细胞表面分子、吞噬功能进行分析.结果 紫杉醇明显降低小鼠骨髓细胞数量,但骨髓细胞体外诱导分化成巨噬细胞的数量明显增加;F4/80+巨噬细胞中CD80、CD14表面分子表达升高,而I-Ad表达降低;紫杉醇处理组诱导分化的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力提高.结论 结果提示紫杉醇可能具有调节巨噬细胞表面分子的表达和吞噬功能.     

黄精粗多糖对体外培养小鼠脾淋巴细胞及巨噬细胞免疫活性的影响

[目的]探讨黄精粗多糖对体外培养小鼠脾淋巴细胞及巨噬细胞(RAW 264.7)免疫活性的影响.[方法]设置空白对照组及给药质量浓度分别为1 000,500,250,125 mg/L的黄精粗多糖组,分别与小鼠的脾细胞、巨噬细胞(RAW 264.7)共同培养.采用ELISA法检测共同培养后的细胞上清液中免疫因子IL-2,IL-6,IFN-γ和TNF-α的含量变化,利用MTT比色法测定黄精粗多糖对巨噬细胞(RAW 264.7)增殖作用的影响,Griess法测定细胞上清液中一氧化氮的水平,RT-PCR检测iNOS mRNA的表达情况.[结果]与空白对照组比较,各质量浓度黄精粗多糖组免疫因子IL-2,IL-6,IFN-γ和TNF-α含量明显增加(P<0.05),促进巨噬细胞(RAW 264.7)的增殖(P<0.05),一氧化氮分泌量及iNOS mRNA水平均明显增高(P<0.01).[结论]黄精粗多糖可增强体外培养小鼠脾淋巴细胞及巨噬细胞的免疫活性.     

艾灸大椎穴对免疫低下小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

目的探讨艾灸对免疫低下小鼠巨噬细胞吞噬功能的调整作用,为灸法的深入研究提供实验依据.方法将130只小鼠分为正常对照组、正常加灸组、免疫低下模型组、免疫低下加灸组,通过涂片镜检及流式细胞术两种方法计数其吞噬情况.结果艾灸大椎穴对正常小鼠巨噬细胞吞噬功能影响不大,对免疫低下小鼠巨噬细胞吞噬功能有显著增强作用.结论艾灸具有调衡作用.     

电离辐射对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响

本实验观察了不同剂量（０、５０、７５、１５０ｍＧｙ和２、４Ｇｙ）Ｘ线单次全身照射昆明系小鼠后腹腔巨噬细胞（Ｍ）对鸡红细胞（ＣＲＢＣ）吞噬消化功能的影响。其结果表明，５０和７５ｍＧｙ照射后３和５天Ｍ对ＣＲＢＣ的吞噬功能明显增加（Ｐ＜０．００１），７５ｍＧｙ照射后Ｍ消化功能更为显著（Ｐ＜０．０１），而２和４Ｇｙ照射后其吞噬和消化功能降低。提示，低剂量辐射能够刺激机体非特异性免疫功能，大剂量照射使之受抑制。     

创伤兔血清免疫抑制物对巨噬细胞功能的影响

创伤兔血清免疫抑制物对巨噬细胞功能的影响李磊王正国胡承香张玉纯我们以往的研究发现，在闭合性粉碎性骨折家兔血清中有一分子量约９０００的异常蛋白，初步研究证实，该异常蛋白对正常淋巴细胞转化及白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生具有明显的抑制作用［１］。在本研究中...     

HG颗粒对免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响

目的:研究HG颗粒对免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响.方法:皮下注射环磷酰胺建立免疫功能低下小鼠模型,分别予HG颗粒、盐酸左旋咪唑片灌胃治疗.对照观察药物对免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬刚果红染料能力的影响.结果:免疫功能低下小鼠吞噬刚果红染料能力显著降低.经HG颗粒治疗后有明显提高,综合疗效优于阳性药物组.结论:HG颗粒能显著提高免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬能力.     

双黄连对小鼠免疫功能的影响

本文观察了双黄连对小鼠免疫功能的影响.小鼠腹腔注射双黄连8d后,发现小鼠脾细胞对ConA刺激的T细胞增殖反应和LPS刺激的B细胞增殖反应无明显作用.但对小鼠腹腔巨噬细胞功能有明显的增强作用.结果表明双黄连临床抗菌、抗病毒及抗真菌作用可能主要与其增强了巨噬细胞功能有关.     

内毒素和IFN-γ对巨噬细胞的体外调变作用

目的 探讨内毒素（LPS）和INF－γ对巨噬细胞免疫调节功能的影响。方法 LPS或IFN－γ体外处理小鼠腹腔原代巨噬细胞后，采用混合细胞培养结合^H-TdR掺入法，研究巨噬细胞对ConA介导的脾淋巴细胞增殖反应的影响。结果 LPS和IFN－γ作为刺激剂在体外实验中，可以明显地增强与巨噬细胞混合培养的脾脏淋巴细胞的增殖反应。结论 LPS IFN－γ可以体外调变巨噬细胞，影响巨噬细胞的免疫调节功能。     

层粘连蛋白总糖肽对小鼠巨噬细胞功能的影响

观察层粘连蛋白总糖肽对小鼠腹腔巨噬细胞杀伤黑色素瘤Ｂ１６细胞及噬抗体包被的羊红细胞作用的影响。将ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔Ｍψ体外培养４８ｈ后，再分别与０，５０，１００，２００μｇ／ｍｌ终浓度的ＬＮ－Ｇｐｓ预温３０ｍｉｎ，用噻唑蓝比色法检测Ｍψ对Ｂ１６细胞的杀伤作用，用联苯胺氧化比色法检测Ｍψ吞噬ＥＡ的功能。     

紫杉醇脂质体细胞毒作用和抗瘤作用的研究

为研究紫杉醇脂质体的体外细胞毒作用及体内抗瘤作用。进行噻唑蓝（MTT）体外试验法和腹腔给药体内抗瘤试验。发现紫杉醇脂质体对体外培养的人卵巢癌细胞COC1在浓度为22.5μg/ml、45μg/ml和90μg/ml时,其抑制率分别为78.48%、84.90%和93.53%。体内腹腔给予紫杉醇脂质体5mg/(kg     

大蒜素抗隐孢子虫的免疫机制观察

目的　研究大蒜素对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响 ,观察大蒜素抗隐孢子虫的免疫机制。方法　采用大蒜素胶囊和注射液多次给药 ,观察小鼠巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数。结果　大蒜素胶囊 5 0mg·kg-1灌胃给药 4次 ,或大蒜素注射液腹腔注射给药 4次 ,均可明显提高小鼠吞噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数。结论　大蒜素制剂对小鼠巨噬细胞吞噬功能具有增强作用     

皮质酮对大鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的 进一步明确天然糖皮质激素对巨噬细胞免疫功能的影响及其时效和量效关系.方法 收集大鼠腹腔巨噬细胞,分别用10～1 000 ng/ml的皮质酮(corticosterone,CORT)刺激,检测细胞的黏附、趋化和吞噬功能;使用ELISA试剂盒检测细胞培养上清中TNF-α的含量.结果 50 ng/ml的皮质酮显著增强巨噬细胞的黏附功能(P＜0.05),10 ng/ml和50 ng/ml的皮质酮刺激细胞后,其趋化功能均显著增加(P＜0.05).同时,50 ng/ml的皮质酮还可显著增强巨噬细胞的吞噬功能(P＜0.05)和促进巨噬细胞分泌TNF-α(P＜0.01),而使用高浓度皮质酮(500 ng/ml和1 000 ng/ml)处理时,巨噬细胞的上述功能增强趋势减弱或无增强;在0.5～5 h范围内,皮质酮处理1 h时细胞的吞噬功能和分泌TNF-α的功能增强最明显,刺激更长时间后其功能的增强趋势逐渐减弱.结论 一定剂量的天然糖皮质激素急性刺激可明显增强免疫功能.     

巨噬细胞移动抑制因子及巨噬细胞在糖尿病大鼠肾脏的表达及其意义

目的研究糖尿病大鼠肾组织巨噬细胞移动抑制因子(MIF)蛋白和巨噬细胞标记抗原(ED-1)以及肾组织MIF与ED-1的相关关系,探讨巨噬细胞(ED-1 细胞)与MIF在糖尿病大鼠肾脏的表达及其意义。方法将实验动物分为正常对照组大鼠16只(A),糖尿病大鼠8周组8只(B1),糖尿病大鼠16周组8只(B2)。分别于8周、16周后检测各组大鼠尿白蛋白排泄率、内生肌酐清除率、血糖、血脂、HE及PAS染色观察肾脏病理改变,采用微波免疫组织化学染色及双标记技术检测肾组织中MIF及ED-1 细胞的表达。将MIF在糖尿病大鼠肾脏组织中的表达水平与巨噬细胞浸润、肾脏病理改变、肾功能损害的程度进行相关性研究。结果MIF在正常肾组织中基本不表达,在糖尿病大鼠肾组织高表达正常大鼠肾组织基本未见ED-1 细胞分布,糖尿病大鼠肾脏组织中明显增多,ED-1 细胞在肾组织分布与MIF表达明显相关,且与肾小管间质病变程度及血肌酐显著相关。结论MIF尤其巨噬细胞参与了糖尿病大鼠肾脏病变的免疫病理损伤,且巨噬细胞浸润糖尿病肾病(DN)肾组织可能与MIF介导有关。     

树突状细胞和巨噬细胞对外源性抗原内吞路径的比较研究

目的　观察并比较小鼠树突状细胞 (DC)和巨噬细胞对外源性抗原的内吞路径的差异。方法　将小鼠骨髓DC和腹腔巨噬细胞与辣根过氧化物酶 (HRP) 5nm胶体金共孵育 10分钟后再培养 0～ 12 0分钟 ,进行酸性磷酸酶细胞化学反应和组织相容性抗原 (MHC)Ⅱ免疫胶体金标记 ,最后在电镜下观察 5nm胶体金的细胞内运行路径。结果　DC内吞HRP 5nm胶体金 10分钟后再培养 30分钟 ,大部分 5nm胶体金进入MHCⅡ隔室 (MⅡC)中 ,只有极少数酸性磷酸酶阳性的溶酶体内含少量 5nm胶体金。而与DC显著不同的是巨噬细胞摄入的大部分 5nm胶体金进入了溶酶体 ,还有部分 5nm胶体金进入MⅡC中。内吞后再培养 60分钟 ,DC内仍有许多 5nm胶体金 ,而巨噬细胞内已很少见到 5nm胶体金。结论　同一种外源性抗原被DC和巨噬细胞内吞后 ,在这两类细胞中的运行路径明显不同。内吞后 30分钟 ,巨噬细胞摄入的大部分抗原进入溶酶体 ,而DC则将大部分抗原送入MⅡC ,这可能与DC独特的抗原提呈功能有关。另外 ,巨噬细胞对抗原的清除能力比DC强得多。     

Endocytic routes of exogenous antigen in murine dendritic cells and macrophage

Objective　To compare the endocytic routes of exogenous antigen between murine dendritic cells (DCs) and macrophages (Mφs). Methods　Murine bone marrow-derived DCs and peritoneal Mφs were pulsed with horseradish peroxidase (HRP)-5 nm colloidal gold for 10 minutes, then grouped and chased for 0-120 minutes in culture medium. Intracellular distribution of 5 nm colloidal gold was explored by means of the cellular enzymatic-chemistry of acid phosphatase and MHC Ⅱ immuno-cytochemistry under electron microscope. Results　After 10 minutes of pulse with HRP-5 nm colloidal gold and 30 minutes of chase, most HRP-5 nm gold particles internalized by DCs entered into MHC class Ⅱ compartments (MⅡCs), and a small portion entered into acid phosphatase-positive lysosomes. In contrast to DCs, most Ms lysosomes were accessed by HRP-5 nm gold particles, and a small portion of HRP-5 nm gold particles entered into MⅡCs. After 60 minutes of chase, 5 nm gold particles could hardly be seen within Ms, whereas most 5 nm gold particles were still retained in DCs. Conclusions　The endocytic route of exogenous antigen in DCs seems to be different from that in Ms. Antigens taken by Ms mainly enter into lysosomes within 30 minutes. In the case of DCs, most internalized antigens enter into MⅡCs, which may be related to their unique antigen-presenting function . In addition, Ms seem to have more powerful capacity to scavenge exogenous antigen than DCs.     

小鼠MME基因真核表达载体的构建与鉴定

目的克隆小鼠巨噬细胞金属弹力酶(MME)基因结构域Ⅰ和Ⅱ,构建真核细胞表达载体,用于动物肿瘤原位种植模型的研究.方法通过PCR选择性扩增MME基因结构域Ⅰ和Ⅱ,克隆入pGEM-T载体中,限制性内切酶、DNA序列分析鉴定目的基因后,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,并进行双酶切及PCR鉴定.结果以MME cDNA为模板进行PCR扩增的特异性片段在750 bp和1 000 bp之间.以此构建的pGEM-T-MME克隆载体和表达载体, 经限制性内切酶酶切证实载体中带有MME目的基因片段; 与小鼠MME cDNA序列的碱基符合率为99.63%; 证明MME基因已正确克隆到了真核细胞表达载体pcDNA3.1中.结论成功构建了pcDNA3.1-MME重组质粒,奠定了转基因研究MME表达与肿瘤生长转移关系的实验基础.     

紫杉醇对人食管癌Eca109细胞株生长的影响

目的：观察不同浓度的紫杉醇对食管癌细胞Eca109的影响。方法：应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验,细胞形态学观察及流式细胞仪等方法对人食管癌细胞Eca109进行检测和观察。结果：MTT实验显示紫杉醇可抑制食管癌细胞增殖;光镜及电镜可发现药物作用组细胞核固缩、解聚以及凋亡小体,流式细胞仪检测显示G1峰前有明显的凋亡峰。细胞周期分析提示紫杉醇可将Eca细胞阻滞于G2－M期,且与浓度相关。结论：紫杉醇对人食管癌细胞系Eca109细胞的生长有明显的抑制作用,使细胞分裂阻滞于G2－M期,并诱导肿瘤细胞凋亡。