重组人促红细胞生成素对急性高眼压兔视网膜谷氨酸表达的影响

目的探讨全身应用重组人促红细胞生成素（rhEPO）对急性高眼压兔眼视网膜谷氨酸表达的影响。方法采用日本大耳白兔54只,其中6只兔设为正常对照组。其余48只兔采用生理盐水前房灌注加压法建立急性高眼压模型,其中24只兔皮下注射rhEPO为EPO组,另外24只兔为模型组。分别于造模后第1、3、7、14天免疫组织化学法观察视网膜谷氨酸的表达。结果正常组视网膜组织无谷氨酸表达。模型组兔眼视网膜出现谷氨酸阳性表达细胞,各观察时间点EPO组兔眼视网膜谷氨酸阳性表达细胞数较模型组减少,差异均有统计学意义（P〈0.01）。实验第14天,模型组视网膜谷氨酸阳性表达细胞数为（3.3±1.1）个/高倍视野,EPO组为（0.3±0.2）个/高倍视野,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论rhEPO可以下调兔眼急性高眼压引起的视网膜谷氨酸高表达,可能与rhEPO保护视网膜神经功能损害有关。     

活血化瘀汤对急性高眼压模型大鼠视网膜谷氨酸转运体表达的影响

背景高眼压及缺血缺氧可使眼内谷氨酸的浓度增加,对视网膜神经节细胞（RGCs）造成兴奋性损伤,诱导其凋亡。国内外已进行了大量的谷氨酸兴奋性损伤的防护研究,但目前尚未见从细胞和分子水平对中药复方进行相关研究的报道。目的探讨活血化瘀汤方剂对急性高眼压模型大鼠视网膜谷氨酸转运体L-谷氨酸／L-天门冬氨酸转运体（GLAST）表达的影响。方法健康Wistar大鼠45只,随机分为正常对照组（5只）、单纯加压组（20只）、活血化瘀汤治疗组（20只）,后2组随机取一侧眼制作急性高眼压模型,活血化瘀汤治疗组于造模后即刻给予活血化瘀汤灌胃治疗,分别于给药后1、3、7、14d各时间点随机处死5只大鼠,单纯加压组分别在相同时间点随机处死5只大鼠,并获取其视网膜组织。用实时定量聚合酶链反应（real—time PCR）法检测3组大鼠视网膜中GLAST的表达变化,并对不同时间点视网膜组织行透射电镜及光学显微镜观察。结果急性高眼压损伤后3d,光学显微镜下可见视网膜变薄,14d时视网膜变得更薄,内层较显著,RGCs数量减少。透射电镜下,急性高眼压损伤后1d可见RGCs细胞器变性、肿胀,14d时出现部分细胞凋亡。Real—time PCR结果显示,单纯加压组及活血化瘀汤治疗组视网膜中GLAST mRNA的表达量在造模后1d快速上调,与正常对照组大鼠比较差异有统计学意义（P〈0．05）;3d时单纯加压组大鼠视网膜中GLAST mRNA表达量下降,与活血化瘀汤治疗组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;7d及1dd时单纯加压组与活血化瘀汤治疗组大鼠视网膜中GLAST mRNA的表达量均恢复至正常水平,2组间差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论活血化瘀汤方剂有可能通过增强GLAST的表达减轻急性高眼压对大鼠视网膜的损伤。     

金丝桃素对兔慢性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响

目的研究蛋白激酶C（PKC）特异性抑制剂金丝桃素（hypericin）对兔慢性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响。方法取29只成年家兔，后房内注射α-糜蛋白酶，建立兔慢性高眼压模型，以眼压≥30mmHg为造模成功。造模成功兔眼10d后玻璃体内分别注入0．1ml金丝桃素或生理盐水。另用3只正常兔作空白对照。用高效液相色谱法测定不同时间点的视网膜谷氨酸含量。结果正常免视网膜谷氨酸含量为（1．71×10^-5±0．23×10^-5）mmol／g，慢性高眼压免视网膜谷氨酸含量比正常免显著升高（P〈0．05）。慢性高眼压兔金丝桃素处理4d后视网膜谷氨酸含量为（8．53×10^-5±1．06×10^-5）mmol／g．同期生理盐水处理后为（11．31×10^-5±0．10×10^-5）mmol／g，二者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论慢性高眼压兔视网膜谷氨酸含量显著升高，可能与视网膜神经节细胞的损伤有关。金丝桃素玻璃体腔注射能显著降低免慢性高眼压模型视网膜谷氨酸含量。     

高眼压缺血-再灌注中视网膜NOS的表达及L-NAME对其表达的影响

目的探讨高眼压缺血－再灌注损伤时视网膜一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的表达、Ｌ－ＮＡＭＥ对ＮＯＳ表达的影响及视网膜ＮＯＳ的作用。方法用免疫组织化学ＳＡＢＣ法检测ｎＮＯＳ，ｅＮＯＳ和ｉＮＯＳ在高眼压缺血－再灌注模型视网膜中的表达及ＮＯＳ抑制剂Ｌ－ＮＡＭＥ对其表达的影响。结果在高眼压缺血－再灌注下，视网膜神经节细胞、神经胶质细胞ｎＮＯＳ，ｅＮＯＳ，ｉＮＯＳ均呈阳性，对照组ｎＮＯＳ呈弱阳性；注射Ｌ－ＮＡＭＥ后，在高眼压缺血－再灌注中，视网膜神经节细胞、神经胶质细胞均呈ｉＮＯＳ强阳性，ｎＮＯＳ，ｅＮＯＳ呈阴性。结论在高眼压缺血－再灌注中ｎＮＯＳ，ｅＮＯＳ，ｉＮＯＳ合成的一氧化氮（ＮＯ）可能对视网膜细胞等有细胞毒性作用；Ｌ－ＮＡＭＥ通过抑制ｎＮＯＳ，ｅＮＯＳ的活性，对高眼压缺血－再灌注视网膜损伤产生保护作用。     

一氧化氮与视网膜缺血-再灌注损伤

一氧化氮（NO）在视网膜缺血-再灌注损伤中占重要地位。视网膜缺血-再灌注时,一氧化氮合成酶（NOS）被多种炎性介质和细胞因子激活,使NO大量生成。NO是一种活性很强的自由基,具有广泛的生物学活性。在缺血-再灌注早期,少量NO可降低缺血缺氧对视网膜的损伤程度;晚期过多的NO可通过多种途径对视网膜造成损害。就目前有关NO在视网膜缺血-再灌注损伤中的研究进展进行综述。     

兔实验性急性高眼压模型视网膜谷氨酸的变化

目的 研究兔实验性急性高眼压状态下视网膜谷氨酸含量的变化。探讨谷氨酸在青光眼高神经损害中的作用。方法 应用邻苯二甲醛衍生法、高效液相色谱仪测定视网膜谷氨酸的含量,将１８只大白兔分成３组,其中２个组１个正常对照组,每组均６只兔（６只眼）。实验１组：每只兔随机选取１只眼行生理盐水前房内高压灌注,６０ｍｍＨｇ（１ｍｍＨｇ＝０．１３３ｋＰａ）持续４ｈ。另１只眼生理盐水前房内灌注,方法同前,量压力为２０ｍｍ     

选择性一氧化氮合酶抑制剂对大鼠视网膜缺血再灌注损伤影响的光镜观察

目的观察选择性一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂7-硝基-吲唑(7-nitro-indazole,7-NI)、氨基胍(aminoguanidine,AG)对视网膜缺血再灌注损伤影响的组织学变化,探讨NOS亚型神经原型和诱导型及其所产生的一氧化氮(nitric oxide,NO)在视网膜缺血再灌注损伤中的作用.方法56只Sprague Dawley大鼠随机分为正常对照组、阴性对照组、缺血再灌注非处理组、7-NI缺血前处理组、7-NI再灌注前处理组、AG缺血前处理组、AG再灌注前处理组及7-NI+AG处理组计八组.采用升高眼内压的方法诱导视网膜缺血,100分钟后,缓慢降压至正常眼内压,使视网膜再灌注.用7-NI或/和AG处理动物(腹膜腔内注射),光镜观察视网膜组织学变化,图像分析仪测量视网膜内层(IRL)、内网层(IPL)厚度及神经节细胞(RGCs)的数目.结果缺血再灌注非处理鼠IRL和IPL厚度比正常对照鼠明显变薄(P＜0.0001),RGCs层和内核层神经细胞比正常对照鼠明显减少,残留者排列紊乱,空泡形成及核固缩现象多见.7-NI缺血前处理鼠和AG再灌注前处理鼠IRL和IPL分别比缺血再灌注非处理鼠明显增厚(P＜0.001),RGCs层和内核层神经细胞少数丢失,排列稍乱,偶见空泡形成.7-NI+AG处理鼠IRL和IPL分别比7-NI缺血前处理组和AG再灌注前处理鼠都增厚(P＜0.001),RGCs层和内核层神经细胞排列基本整齐,偶见核固缩现象.结论神经原型和诱导型NOS及其产生的NO在视网膜缺血再灌注损伤中起重要作用;选择性NOS抑制剂7-NI和AG能够选择性抑制神经原型和诱导型NOS的活性,从而抑制NO的生成,对视网膜缺血再灌注损伤有保护作用.     

正常大鼠和急性高眼压诱导的视网膜缺血再灌注损伤大鼠模型的视网膜电图

目的：探索闪光视网膜电图（F－ERG）对大鼠视网膜功能评价的客观性和可靠性;并探讨急性高眼压诱导的视网膜缺血再灌注损伤大鼠在视网膜神经细胞保护研究方面的可行性。方法：采用Nicolet Spirit电生理诊断仪,检测34只Sprague-Dawley（SD）大鼠的F－ERG的最大反应和Ops波;用提高眼压的方法造成视网膜缺血60分钟,然后恢复眼压形成血流再灌注造成大鼠动物模型,随后检测灌注后24h,72h以及168h时的F－ERG的最大反应和Ops波。结果：每只正常大鼠均可引出典型的ERG的a波,b波以及Ops波,但个体之间存在一定差异;模型大鼠的各波比灌注前均显著降低,而且灌注后各时间点也有一定差异。结论：本模型操作简单,可控性好以及F－ERG的最大反应和Ops波能客观反映大鼠视网膜功能,因此可以用来进行视网膜神经细胞保护方面研究。     

金丝桃素对兔急性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响

目的:探讨蛋白激酶C抑制剂金丝桃素对兔急性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响。方法:新西兰大白兔35只,随机挑选3只为空白对照组,16只为金丝桃素处理组、16只为生理盐水对照组。分别向玻璃体腔内注射0.1mL的金丝桃素(金丝桃素处理组)和生理盐水(生理盐水对照组),并分别于12,24,48h和72h后经前房灌注升高眼压达100mmHg(1kPa=7.5mmHg),持续90min,24h后取材。用高效液相色谱法测定不同时间点的视网膜谷氨酸含量。结果:急性高眼压兔视网膜谷氨酸含量比正常兔显著升高(P<0.05)。急性高眼压兔金丝桃素预处理48h后视网膜谷氨酸含量最低,为(5.66±0.21)×10-5mmol/g,同期生理盐水对照后为(8.41±0.27)×10-5mmol/g,二者差异有显著性(P<0.05)。结论:金丝桃素玻璃体腔注射能降低兔急性高眼压视网膜谷氨酸含量,对视网膜的有一定的保护作用。     

L-NAME对急性高眼压状态下大鼠视网膜的影响

目的通过对大鼠实验前给予左旋-硝基精氨酸甲脂（L-NAME,NO前体左旋精氨酸类似物）后,观察急性高眼压后大鼠视网膜电图（ERG）b波幅的变化,iNOSmRNA的表达情况。探讨L-NAME和iNOS在高眼压视网膜损伤中的作用。方法Wister大鼠48只随机分为6组,前房加压灌注成高眼压模型,6组分别为高眼压30min,90min组,高眼压90min后12h组;注射L-NAME＋高眼压30min,90min组,注射L-NAME＋高眼压90min后12h组。Alnplaldamk15型视电生理仪检测FERG-b波波幅变化。RT-PCR法检测iNOSmRNA的表达。结果注射L-NAME组的ERG-b波波幅与未用药高眼压组相比,前者明显恢复（P〈0.01）。高眼压30min,90min,高眼压90min后12hiNOSmRNA的表达逐渐增强,但L-NAME组iNOSmRNA的表达明显低于对应的高眼压未用药组（P〈0.01）。结论L-NAME做为一氧化氮合酶的抑制剂,通过抑制iNOS合成,有助于缺血后的视网膜功能的恢复,对视网膜起到保护作用。     

川芎嗪对大鼠缺血再灌注视网膜SOD，MDA和NO水平及细胞凋亡的影响

目的 观察川芎嗪对大鼠视网膜缺血再灌注后视网超氧化物歧化酶（SOD）,丙二醛（MDA）,一氧化氮（NO）水平及细胞凋亡的影响。方法 采用大鼠视网膜压力缺血再灌注模型,分光光度法测定SOD,MDA和NO,琼脂糖凝胶电泳分析DNA断裂。结果 川芎嗪能显著对抗视膜膜缺血再灌注后视网膜SOD水平的下降及MDA和NO水平的升高;同时能阻断缺血再灌注12h后细胞DNSA凋亡样断裂。结论 川芎嗪可能通过抑制自由基的产生和提高抗氧化能力来对抗大鼠视网缺血再灌注诱导的细胞凋亡。     

小鼠视网膜急性谷氨酸损伤后囊泡膜与质膜谷氨酸转运体的表达

目的:探讨不同类型囊泡膜和质膜谷氨酸转运体在小鼠视网膜急性损伤后的表达变化及其可能性作用。方法:C57BL/6小鼠78只,随机分为3组:正常对照组6只,实验对照组36只(玻璃体内注射生理盐水),实验组36只(玻璃体内注射谷氨酸)。分别于注射后0.5,3,6,12,24,72h各处死6只,其中3只鼠的眼球用于冰冻切片,以免疫细胞化学法检测各时间点视网膜内Ⅰ型和Ⅱ型囊泡膜谷氨酸转运体(VGluT1和VGluT2)及3种质膜谷氨酸转运体:谷氨酸/天门冬氨酸转运体(glutamate/aspartate transporter,GLAST)、谷氨酸转运体-1(glutamate transporter-1,GLT-1)及兴奋性谷氨酸转运体-1(excitatory amino acid transporter-1,EAAC-1)的表达情况。另外3只鼠的眼球用于RNA抽提,以半定量RT-PCR检测各谷氨酸转运体mRNA的水平变化。结果:与实验对照组相比,实验组小鼠视网膜兴奋性损伤12h内,VGluT1和VGluT2的表达水平和分布情况均未看到明显变化;24～72h,虽然VGluT1的表达仍未发生改变,但VGluT2却明显地减少。GLAST,GLT-1及EAAC-1的表达在谷氨酸损伤3～12h均有明显增高,但在24～72h它们的表达水平开始逐渐降低。半定量RT-PCR结果与免疫细胞化学结果一致。结论:视网膜急性损伤12h内囊泡膜谷氨酸转运体表达没有发生变化,而质膜谷氨酸转运体表达明显升高。     

Metabotropic glutamate receptors in vertebrate retina

A striking feature in visual information processing is the fact that the primary signaling elements, the rods and the cones, are hyperpolarized and thus inhibited by light, the physiological stimulus. Light effectively shuts down neurotransmitter release by the photoreceptors onto the second-order retinal neurons. It has long been recognized that a sign-inverting synapse utilizing a specialized receptor is required to translate the inhibitory photoreceptor response into an excitatory signal suitable for transmission to the visual cortex. Although the first clues to the underlying mechanism were discovered in the 1970s, the actual receptor initiating the sign inversion in the ON bipolar cells was only identified in 1993. This receptor was found to belong to the family of metabotropic glutamate receptors (mGluRs) and is referred to as mGluR6. Subsequent studies have focused on the intracellular transduction pathway allowing mGluR6 to mediate a hyperpolarizing response to the neurotransmitter glutamate. The mGluR family of receptors comprises seven additional members, all of which are also found in retinal cells. Their function is to modulate rather than to transmit visual signals. In this brief overview, I describe the basic properties of mGluRs and summarize their roles in retinal signaling.     

视网膜光化学损伤后MDA、SOD及NO浓度变化的研究

目的通过检测大鼠视网膜急性光损伤后丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),一氧化氮(NO)浓度的变化,探讨视网膜光损伤的发病机制。方法20只SD健康大鼠,体重200～220g,雌雄不分,随机分成对照组及实验组。对照组5只;实验组15只分在3个不同时间点(光照后24h,6、10d)各5只,经手术显微镜灯泡连续照射1h,于光照前及光照后3个不同时间点急性处死大鼠进行视网膜MDA、SOD及NO浓度的检测。结果光照后3个不同时间点NO及MDA浓度均比对照组增高,差异均有显著意义;SOD浓度比对照组降低,各项指标差异均有显著意义。结论MDA及NO浓度增高及SOD浓度降低可能与视网膜光化学损伤的发病有关。     

刺五加联合尼莫地平对兔实验性急性青光眼视网膜MDA,SOD,GSH含量的影响

目的:探讨中药刺五加(acathopanaxsenticosu,sAS)和钙通道阻滞剂尼莫地平(nimodipine)对青光眼视网膜中丙二醛(maleicdialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathion,eGSH)含量的影响。方法:通过前房平衡盐溶液持续灌注建立日本大耳白兔双眼实验性急性青光眼模型,动态测定青光眼兔眼视网膜中MDA,SOD,GSH的动态变化。然后,将实验兔随机分为刺五加组、尼莫地平组、联合用药组和生理盐水组,每组5只,分别于高眼压结束前2￣3min静脉注射药物。高眼压结束后24h处死动物,测定视网膜组织中MDA,SOD,GSH的变化。结果:高眼压后兔视网膜组织中MDA含量增高,SOD活性下降和GSH含量下降。使用药物后,AS组,尼莫地平组,联合用药组的MDA含量分别为7.015±0.344,8.021±0.385,6.561±0.228nmol/mgprot,而生理盐水组为9.009±0.276nmol/mgprot,两者相比,用药后MDA含量明显下降(P<0.01);SOD活性在上述用药组中分别为69.898±2.089,61.416±2.369,74.491±3.254u/mgprot,同生理盐水组50.732±2.880U/mgprot相比,活性上升(P<0.01);GSH含量在上述用药组中分别为60.354±1.625,58.548±1.953,61.938±1.814mg/gprot,较生理盐水组的54.360±1.585mg/gprot亦有明显增加(P<0.01)。结论:实验性青光眼兔眼自由基产生增多;刺五加和尼莫地平能够抑制视网膜自由基的产生,提高视网膜的抗氧化能力,有望临床用于青光眼视神经保护的治疗。     

视网膜光损伤机制中NOS作用的实验研究

目的　探讨一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase ,NOS)活性异常变化在视网膜光损伤发生机制中的作用。方法　60只SD大鼠随机分为5组,1组为正常对照,其它4组以持续强光照射6小时造成视网膜光损伤,并按光照后1天和6天两个观察点各分为实验组与空白对照组,实验组大鼠给予左旋硝基精氨酸治疗,并分别测定比较各组大鼠视网膜外核层厚度以及NOS和超氧化物歧化酶(superoxidedismutase ,SOD)的活性。结果　光损伤后第1天和第6天空白对照组大鼠视网膜内NOS的活性均异常升高,SOD活性均显著下降,视网膜外核层厚度进行性减小;实验组大鼠视网膜内NOS的活性低于正常水平,SOD活性和视网膜外核层厚度均显著高于相应的空白对照组。结论　过度光照后视网膜内NOS活性持续异常升高是视网膜氧化损伤的重要原因并与感光细胞退行性变性的发生密切相关。     

负透镜诱导型近视豚鼠视网膜中谷氨酸及其受体的表达

目的　观察谷氨酸及其离子型受体Ｎ-甲基-Ｄ-天冬氨酸受体（Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-Ｄ-ａｓｐａｒｔａｔｅｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＮＭＤＡＲ）功能亚单位ＮＲ２Ａ在近视豚鼠视网膜上的动态表达,探讨其在近视发病过程中的作用。方法　选取３周龄健康三色短毛豚鼠１２０只,采用随机数字表法分为０周正常组、２周正常组、２周近视组、４周正常组、４周近视组,每组２４只;正常组不作任何干预,近视组右眼均戴－１０Ｄ透镜,左眼不戴镜作为对照。入组前与处死前均进行屈光度及眼轴长度检测,腹腔注射过量水合氯醛处死,并分离视网膜,采用高效液相色谱分析检测视网膜中谷氨酸的含量变化,实时荧光定量ＰＣＲ以及ＥＬＩＳＡ分别检测豚鼠视网膜中ＮＲ２ＡｍＲＮＡ及其蛋白水平的表达变化。结果　造模前各组屈光度及眼轴长度差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。造模后各组与造模前比较,眼轴长度及屈光度差异均有统计学意义（２周正常组Ｐ＜０．０５,２周近视组Ｐ＜０．００５,４周正常组Ｐ＜０．０１,４周近视组Ｐ＜０．００１）。造模后,正常组间眼轴长度和屈光度比较差异均有统计学意义（Ｆ＝２０．３２,Ｐ＜０．０１;Ｆ＝１９９．６５,Ｐ＜０．０１）;２周近视组与４周近视组比较,右眼眼轴长度和屈光度差异均有统计学意义（Ｆ＝７８．９６,Ｐ＜０．００１;Ｆ＝２５２．１０,Ｐ＜０．００１）,左眼眼轴长度和屈光度差异均无统计学意义（Ｆ＝１３．６６,Ｐ＞０．０５;Ｆ＝２１．２０,Ｐ＞０．０５）;２周近视组与４周近视组右眼分别与相应的左眼比较,眼轴长度差异均有统计学意义（２周近视组:ｔ＝９．５１５,Ｐ＜０．００５;４周近视组:ｔ＝９．４４９,Ｐ＜０．００１）,屈光度差异同样均有统计学意义（２周近视组:ｔ＝８．８９７,Ｐ＜０．００１;４周近视组:ｔ＝１７．２３５,Ｐ＜０．００１）。视网膜中谷氨酸含量正常组之间差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）;造模后２周近视组与４周近视组比较,右眼视网膜中谷氨酸含量逐渐增加,差异有统计学意义（ｔ＝３６．２３０,Ｐ＜０．０１）。造模后２周近视组较２周正常组右眼谷氨酸含量增加,差异有统计学意义（ｔ＝－２３．２４０,Ｐ＜０．０５）;同样４周近视组较４周正常组右眼谷氨酸含量亦增加,差异亦有统计学意义（ｔ＝－５３．６９０,Ｐ＜０．０１）。视网膜中ＮＲ２ＡｍＲＮＡ的表达量,正常组之间差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。造模后４周近视组与２周近视组比较,右眼视网膜ＮＲ２ＡｍＲＮＡ表达量明显上调,差异有统计学意义（ｔ＝５５．６６０,Ｐ＜０．００１）;２周近视组与２周正常组右眼比较表达量增加,差异有统计学意义（ｔ＝－１５．０８６,Ｐ＜０．００５）,同样４周近视组与４周正常组右眼比较差异亦有统计学意义（ｔ＝－４３．２７６,Ｐ＜０．００１）。正常组之间视网膜中ＮＲ２Ａ蛋白表达量,差异无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。４周近视组与２周近视组比较,右眼视网膜ＮＲ２Ａ蛋白表达量明显上调,差异有统计学意义（ｔ＝４３．２１０,Ｐ＜０．００５）;２周近视组与２周正常组右眼比较ＮＲ２Ａ蛋白表达量增加,差异有统计学意义（ｔ＝－２．３６５,Ｐ＜０．０５）,同样４周近视组与４周正常组右眼比较差异亦有统计学意义（ｔ＝－５．５１８,Ｐ＜０．０１）。结论负透镜诱导型近视豚鼠视网膜中谷氨酸及其ＮＭＤＡＲ受体亚单位ＮＲ２Ａ在透镜诱导眼中表达上调,并随透镜诱导时间的延长和近视程度的加深而增加。