基于JAK2/STAT3通路探究七氟醚对心肌缺血再灌注大鼠血管内皮损伤的改善作用

目的 探讨七氟醚是否能通过调节蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/转录激活因子3(STAT3信号通路减轻心肌缺血再灌注损伤（MIRI）大鼠血管内皮损伤。方法 将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、七氟醚组、抑制剂组和抑制剂+七氟醚组五组,每组各12只,除假手术组外,其余组通过冠状动脉（冠脉）左前降支结扎法建立MIRI模型。模型组和假手术组大鼠实验前2 h尾静脉注射生理盐水1 ml,缺血末再灌注开始时吸入纯氧3 min。七氟醚组大鼠实验前2 h尾静脉注射生理盐水1 ml,缺血末再灌注开始时吸入2%七氟醚3 min;抑制剂组大鼠实验前2 h尾静脉注射3 mg/kg JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG490;抑制剂+七氟醚组大鼠实验前2 h尾静脉注射3 mg/kg AG490,缺血末再灌注开始时吸入2%七氟醚3 min。超声心动图检测各组大鼠左心室射血分数（LVEF）、左心室短轴缩短率（LVFS）,左心室收缩末期内径（LVESD）和左心室舒张末期内径（LVEDD）,TTC染色检测各组大鼠心肌梗死面积,ELISA检测各组大鼠血清中内皮素-1(ET-1)、血栓素A2(TXA2)和前列环素（PGI2...     

JAK2/STAT3信号通路在阿托伐他汀抗大鼠血管平滑肌细胞增殖凋亡中的作用研究

目的探讨阿托伐他汀对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)非调脂作用机制与转录信号传导子和激活子3(Stat3)信号传导通路的关系,明确其细胞内信号传导机制。方法分别将阿托伐他汀、酪氨酸激酶抑制剂AG490及二者联合作用于大鼠VSMCs,应用MTT法检测细胞增殖状态;流式细胞仪观察药物对细胞凋亡的影响,进一步用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测药物作用前后 Stat3通路相关蛋白JAK2、STAT3、Cyclin D1、Bcl-2的表达及磷酸化活性。结果阿托伐他汀及AG490 都呈浓度依赖性方式抑制大鼠VSMCs增殖水平,促进其凋亡,二者联合应用则具协同作用。阿托伐他汀及AG490处理VSMCs后p-JAK2、p-Stat3、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平随作用时间延长而下降 (P<0．05),并且联合组蛋白表达水平较单独处理组相比有显著性差异(P<0．01)。结论阿托伐他汀对大鼠VSMCs非调脂作用机制与癌基因Star3信号通路高度相关,与酪氨酸激酶抑制剂AG490联合应用则具协同作用,可能通过作用于JAK2／Stat3下游靶基因Cyclin D1、Bcl-2影响其增殖及凋亡。     

维生素D通过JAK/STAT信号通路影响毛细支气管炎患儿免疫应答的研究

目的探讨维生素D用于毛细支气管炎患儿的治疗效果及如何通过对JAK/STAT信号通路影响患儿机体的免疫应答。方法选取96例住院毛细支气管炎患儿,按随机数表法分为观察组和对照组,各48例。对照组采取常规治疗,观察组在对照组基础上联合维生素D,两组疗程均3~7 d。比较两组患儿的憋喘消失时间、肺部哮鸣音消失时间、呼吸困难消失时间、住院时间、入院时和治疗后的血清IgA、IgG、IgM及IgE水平以及外周血单个核细胞(PBMCs)中STAT1、STAT2、IRF9表达。结果观察组各项症状缓解时间均显著短于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,对照组血清IgA、IgG、IgM、IgE水平较治疗前无明显变化(P0.05)。观察组治疗后的血清IgA、IgG分别为(0.41±0.11)g/L、(7.34±1.87)g/L,较治疗前明显升高且高于同期对照组;IgE为(118.74±23.63)×10~3 IU/L,较治疗前明显降低且低于同期对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。治疗后,对照组PBMCs中STAT1、STAT2、IRF9表达较治疗前无明显变化(P0.05)。观察组治疗后的PBMCs中STAT1、STAT2、IRF9表达量分别为(0.57±0.17)、(0.63±0.18)、(0.47±0.15),均较治疗前明显上调,且高于同期对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论维生素D可激活毛细支气管炎患儿PBMCs中JAK-STAT信号转导途径,促进STAT1、STAT2、IRF-9等特异性分子表达的上调,加强机体的免疫应答,促进患儿病情好转。     

麻黄附子细辛汤联合环磷酰胺对肺癌大鼠JAK/STAT通路的作用

目的 研究麻黄附子细辛汤联合环磷酰胺对肺癌大鼠Janus酪氨酸蛋白激酶/信号转导及转录激活因子(JAK/STAT)通路的调节作用。方法 60只大鼠随机分为空白对照组、肺癌组、麻黄附子细辛汤组、环磷酰胺组及联合组各12只,除空白对照组,其余大鼠采用尾静脉注射Walker-256细胞法建立肺癌大鼠模型,麻黄附子细辛汤组灌胃给予麻黄附子细辛汤(3 g/kg),环磷酰胺组腹腔注射环磷酰胺(0.05 g/kg),联合组同时给予麻黄附子细辛汤及环磷酰胺,1次/d,连续8 w,末次给药24 h后取肺组织测定肺湿重、肿瘤抑制率,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡率,苏木素-伊红染色法检查肺病理变化,实时定量聚合酶链反应(PCR)、免疫组化及Western印迹分别检测肺组织JAK2、STAT3 mRNA及蛋白水平变化。结果 与肺癌组比较,麻黄附子细辛汤组、环磷酰胺组及联合给药组肺湿重、肺组织JAK2、STAT3 mRNA及蛋白水平显著降低,肿瘤细胞凋亡率显著升高(均P<0.05),与麻黄附子细辛汤及环磷酰胺单独给药组比较,联合给药组肺湿重、肺组织JAK2、STAT3 mRNA及蛋白水平显著降低,肿瘤抑制...     

JAK2/STAT3信号通路在柴胡皂苷D调控非小细胞肺癌H460细胞增殖、凋亡过程中的作用研究

目的 观察柴胡皂苷D对非小细胞肺癌(NSCLC)H460细胞增殖、凋亡的影响,并探讨可能机制。方法 取对数期H460细胞,随机分为对照组,实验A、B、C组,对照组常规培养,实验A组加入柴胡皂苷D(20μmol/L),实验B组加入colivelin[Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活子3(STAT3)通路激活剂](0.5μmol/L),实验C组加入柴胡皂苷D(20μmol/L)与colivelin(0.5μmol/L)。MTT法检测细胞增殖能力;双染法检测细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞白介素-2(IL-2)、白介素-10(IL-10)mRNA表达量;Western blotting法检测细胞p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3蛋白表达量。结果 与对照组比较,实验A组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3降低,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量升高(P<0.05),实验B组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-1...     

芒柄花素调节JAK2/STAT3信号通路对妊娠高血压大鼠的治疗作用

目的:探讨芒柄花素(FMN)对妊娠高血压(PIH)大鼠的治疗作用及可能机制。方法:将妊娠大鼠分为正常组(Normal组,生理盐水)、PIH组(生理盐水)、FMN组[40 mg/(kg·d) FMN)]、Janus激酶2(JAK2)抑制剂组[AG490组,5 mg/(kg·d) AG490]、FMN+JAK2抑制剂组[FMN+AG490组,40 mg/(kg·d) FMN+5 mg/(kg·d) AG490],每组12只。除Normal组外,其余各组大鼠连续4 d皮下注射125 mg/(kg·d) L-精氨酸甲酯构建PIH模型。观察大鼠尾静脉压、24 h尿蛋白含量,血清血管内皮因子[内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)]、炎性因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)]、心肌损伤指标[肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)]、肾损伤指标[血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)]水平,心肌、肾组织病理学变化及心肌、肾组织中氧化应激指标[丙二醛(MDA)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)]和JAK2/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路相关蛋白...     

JAK2/STAT3信号通路介导小鼠骨性关节炎中软骨细胞代谢和抗氧化应激的研究

目的 在小鼠骨性关节炎（OA）模型中观察Janus酪氨酸蛋白激酶2/信号转导子与转录激活子蛋白3（JAK2/STAT3）信号通路对软骨细胞代谢的影响以及线粒体抗氧化应激能力的改变,探讨JAK2/STAT3信号通路在此过程中的作用。方法 将10只C57BL/6小鼠随机分为两组,选择其中一组小鼠建立OA模型,3周后取材,培养软骨细胞作为实验组,其余小鼠正常培养细胞作为对照组。在对照组和实验组中分别加入JAK2/STAT3信号通路激动剂SC-39100,运用蛋白印迹法（Western blotting）检测各组细胞p-JAK2、p-STAT3、B淋巴细胞瘤?2（Bcl-2）蛋白和Bax蛋白的表达,同时检测各组线粒体氧化应激指标琥珀酸脱氢酶（SDH）、细胞色素c氧化酶（COX）、丙二醛（MDA）改变。结果 与对照组相比,OA模型组软骨细胞p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2蛋白的表达偏低（P＜0.05）、Bax蛋白的表达水平偏高（P＜0.05）,且OA模型组软骨细胞SDH和COX的表达水平均偏低（P＜0.05）、MDA的含量偏高（P＜0.05）;当OA模型组加入SC-39100后,p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2表达均较OA模型组升高（P＜0.05）、Bax蛋白表达下降（P＜0.05）,SDH和COX的表达水平均较OA模型组升高（P＜0.05）,MDA的含量较OA模型组降低（P＜0.05）;对照组中加入SC-39100后的各指标与加入SC-39100前比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;OA模型加入SC-39100组后的各指标与对照组加入SC-39100比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 JAK2/STAT3信号通路和OA中软骨细胞变化密切相关,JAK2/STAT3信号通路激活后可抑制软骨细胞的凋亡;当激活的JAK2/STAT3信号通路活化时会增加软骨细胞线粒体抗氧化应激能力。     

人参皂苷Rb1对过敏性哮喘大鼠炎症反应、免疫功能及JAK2/STAT3信号通路的影响

目的 探讨人参皂苷Rb1对过敏性哮喘大鼠炎症反应、免疫功能、Janus激酶(JAK)2/信号转导和转录激活因子(STAT)3信号通路的影响。方法 卵清蛋白致敏建立过敏性哮喘大鼠模型,造模成功的SD大鼠随机分成模型组、地塞米松组(0.5 mg/kg)、人参皂苷Rb1低剂量组(25 mg/kg)、人参皂苷Rb1高剂量组(50 mg/kg),每组14只。取14只健康大鼠设为对照组,各组腹腔注射相应药物处理14 d。酶联免疫吸附试验检测大鼠血清白细胞介素(IL)-4、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ、免疫球蛋白(Ig)E水平,苏木素-伊红染色观察肺组织病理变化并进行肺损伤评分,分别采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法和Western印迹法测定大鼠肺组织JAK2、STAT3 mRNA和蛋白表达水平。结果 对照组肺组织结构正常,未观察到病理学改变;模型组肺组织出现肺泡壁充血和炎性细胞浸润的明显病理变化;地塞米松组、人参皂苷Rb1高剂量组肺组织损伤的严重程度明显减轻,炎性细胞浸润明显被抑制;人参皂苷Rb1低剂量组肺组织仍可见炎症反应,但较模型组程度轻。与对照组比较,模型组血清IL-4...     

JAK/STAT信号通路相关基因在人胃腺癌5-氟尿嘧啶耐药细胞株中的表达变化

目的 用基因芯片技术研究人胃腺癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药细胞株SGC7901／R及其亲本细胞株SGC7901 JAK／STAT信号传导通路相关基因表达谱的差异。方法 分别抽提两种细胞mRNA，经逆转录反应，用生物素标记的16-duTP将两种细胞的mRNA分别标记成两种CDNA探针，并与载有-组靶基因的人JAlL／STAT信号通路芯片进行杂交，通过软件对扫描图像进行数字化处理和分析，筛选2种细胞在该信号通路中有表达差异的基因。通过RT-PCR法分别对耐药细胞及其亲本细胞中的Stat3、核因子(NF)-KB1和bcl-x mRNA的表达水平进行检测。结果通过两种细胞株JAKIC／STAT信号通路的基因谱平行比较，筛选出人胃腺癌5-Fu耐药细胞株及其亲本细胞株中有表达差异2倍以上的基因共70个，其中表达上调＞2倍的40个，表达下调＞2倍的30个。RT-PCR的验证结果与芯片的筛查结果基本相符。结论 人胃腺癌5-Fu耐药细胞株中JAK／STAT信号通路基因表达谱的变化研究是对胃癌多药耐药分子机制研究的有力补充。     

酪氨酸蛋白激酶/信号转导和转录激活因子信号转导途径与支气管哮喘

众多细胞因子通过调节Th2优势应答、IgE的类型转换、嗜酸粒细胞的募集和活化等生物学效应,在哮喘的发生发展中起着至关重要的作用。而越来越多的证据表明参与哮喘发病的多种细胞因子是通过活化Janus激酶／信号转导子和转录激活因子（JAK／STAT）途径转导信号,从而促进哮喘的发生发展的。新近研究发现JAK／STAT途径的异常在哮喘的发病机制中具有重要意义,从而提示JAK／STAT途径可望成为治疗哮喘的新靶点。     

JAK/STAT信号转导通路在肝纤维化形成中的作用

JAK/STAT信号转导通路是一条由多种细胞因子和生长因子介导的信号转导通路,能参与细胞的增殖、分化、凋亡及炎症等病理生理过程。研究表明,JAK/STAT通路在肝纤维化的形成进程中具有重要的调控作用。本文就近年JAK/STAT信号转导通路在肝纤维化形成过程中的作用作一综述。     

IL-6对人胰腺癌细胞生长及STAT3信号转导通路的影响

目的 探讨IL-6对人胰腺癌细胞株Capan-2生长及STAT3信号转导途径的影响.方法 采用MTT法检测不同浓度IL-6刺激后Capan-2细胞的增殖率;免疫细胞化学染色确定磷酸化STAT3(P-STAT3)在Capan-2细胞内的定位及IL-6刺激前后表达量的变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡;Western blot检测IL-6刺激前后Capan-2细胞中P-STAT3、bcl-xl、Cyclin D1蛋白表达量的变化.结果 100 ng/ml的IL-6作用Capan-2细胞后,细胞的增殖从1增加到4.965±0.18(P<0.05);细胞凋亡率从(3.21±0.23)%下降到(1.98±0.67)%(P<0.05);P-STAT3、bel-xl、Cyclin D1蛋白表达明显升高(P<0.05),且bcl-xl的表达与P-STAT3的表达呈正相关(r=0.985,P=0.015);Cyclin D1的表达与P-STAT3表达也呈正相关(r=0.914,P=0.036).结论 JAK/STAT信号转导途径的活化介导了IL-6对Capan-2细胞的增殖促进功能.     

雨蛙素诱导的急性胰腺炎体外细胞模型的信号转导通路研究

目的 观察急性胰腺炎(AP)体外细胞模型Janus激酶/信号转导和转录激活子(JAK/STAT)信号转导通路及细胞因子表达的变化,探讨其机制.方法 应用雨蛙素处理大鼠胰腺外分泌细胞株AR42J细胞建立AP体外模型,再用雷帕霉素(RPM)及AG490干预.采用Western blotting检测细胞JAK1、磷酸化JAK1(P-JAK1)、STAT1、P-STAT1及TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表达水平;RT-PCR检测TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达;台盼蓝染色测定细胞存活率.结果 未经雨蛙素处理的AR42J细胞的JAK1、P-JAK1、STAT1、P-STAT1及TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白的相对表达量分别为0.09±0.04、0.14±0.08、0.21±0.09、0.12±0.12、0.10±0.02、0.08±0.03、0.02±0.02.雨蛙素处理后,AR42J细胞上述蛋白的表达呈时间依赖性增加,24 h时的表达量分别为0.53±0.09、0.53±0.13、0.56±0.09、0.55±0.10、0.25±0.04、0.25±0.09、0.27±0.07,均较雨蛙素未处理组显著增加(P＜0.05).再分别应用RPM和AG490抑制24 h后,细胞TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表达量显著降低到0.17±0.03和0.17±0.01、0.15±0.05和0.14±0.07、0.19±0.04和0.19±0.05,它们的mRNA表达量也显著降低(P值均＜0.05);RPM和AG490抑制组的细胞存活率分别为(72.4±11.2)%、(69.7±9.8)%,均显著高于单用雨蛙素处理细胞组的(42.2±12.3)%(P＜0.05).结论 JAK1/STAT1信号通路早期参与雨蛙素诱导的AP细胞促炎症细胞因子释放.早期抑制JAK1/STAT1信号通路有利于控制AP的炎症反应.     

BCG-CpG-DNA对支气管哮喘小鼠肺组织STAT4、STAT6表达的影响

目的 观察BCG-CpG-DNA干预对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠信号转导和转录激活因子4(STAT4)、STAT6的影响,探讨其对小鼠哮喘的作用机制.方法 将30只BALB/c小鼠随机分为3组:正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、BCG-CpG-DNA治疗组(C组).其中B、C组小鼠于第0天、第13天分别给予卵清白蛋白(OVA)和佐剂液态铝混悬液致敏,于第25天至第30天每天给予雾化OVA建立哮喘模型,C组于致敏后以BCG-CpG-DNA腹腔注射,A组以生理盐水代替OVA致敏和激发.所有动物于第31天处死,采用Western blot技术检测小鼠肺组织中STAT4、STAT6的蛋白表达水平.结果 与A组比较,B组STAT4、pSTAT4表达降低(P值均＜0.01),STAT6、pSTAT6的表达升高(P值均＜0.01);与B组比较,BCG-CpG-DNA治疗后小鼠哮喘症状和肺组织的炎症病理变化减轻,STAT4、pSTAT4表达增加,STAT6、pSTAT6表达降低,差异具有统计学意义(P值均＜0.01).结论 BCG-CpG-DNA可能通过抑制STAT6、促进STAT4的表达,调节Th1/Th2细胞因子平衡,从而起到抑制气道炎症的作用.     

STAT5b蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 探讨信号转导和转录激活因子5b(STAT5b)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义.方法 用免疫组化SP法检测40例手术切除的NSCLC和20例正常肺组织中STAT5b的表达.结果 STAT5b在NSCLC中的表达明显高于正常肺组织(P＜0.01),STAT5b的表达与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期等病理因素无关,但是在NSCLC中,STAT5b与患者的性别有相关性(P＜0.05),其表达女性患者高于男性患者(P＜0.05).结论 研究结果显示在NSCLC中存在STAT5b的过度表达,但是与临床病理因素无关,提示它参与了NSCLC的发生,但与肿瘤的进展可能无关.在NSCLC的发生中,STAT5b与性别有一定的相关性.