畲药山里黄根中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定

摘 要 目的： 建立高效液相色谱法测定山里黄根中竹节参皂苷Ⅳa的含量。方法: 应用HPLC法测定,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（33∶67）;流速为1.0 ml·min^-1,柱温为30℃;检测波长为203 nm。结果: 山里黄根中竹节参皂苷Ⅳa与其他组分分离效果良好,理论板数在10 000以上。竹节参皂苷Ⅳa的线性范围为12.610～252.200 μg·ml^-1(r=1.000 0) ;平均加样回收率为98.13%,RSD=1.26%(n=6)。结论: 该方法简便易行、准确、重复性好,可用于山里黄根的质量控制。     

畲药山里黄根水提物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的 探讨畲药山里黄根水提物对卡介苗(bacillus calmette-guérin,BCG)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法 ICR小鼠,♂,随机分为正常组、模型组、山里黄根高、中、低剂量组和联苯双酯组。小鼠尾静脉注射BCG和LPS诱导小鼠免疫性肝损伤,正常组注射等体积的生理盐水。全自动生化分析仪分析小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,ELISA法测定血清中IL-2、IL-4、IL-10和TNF-γ的含量。HE染色观察小鼠肝脏的病理改变。结果 与模型组相比,山里黄根水提物能显著降低小鼠血清ALT、AST的活性(P<0.05),显著升高炎性因子IL-2与IL-10水平(P<0.05),显著降低炎性因子IL-4与TNF-γ水平(P<0.05)。与模型组相比,山里黄根水提物组小鼠肝组织炎症细胞浸润、水肿、坏死结构和免疫复合沉淀物均明显减轻。结论 山里黄根水提物对BCG联合LPS诱导的免疫性肝损伤具有保护作用。     

比浊法测定红霉素生物效价及其高通量测定方法探讨

基于比浊法测定抗生素体外抑菌活性原理,以红霉素发酵液为研究对象,采用96孔微孔板培养检定菌,直接用酶标仪检测各孔的光密度,定量分析发酵液中红霉素含量,并与管碟法比较.本文建立的抗生素生物效价检测方法具有快速、高效、样品和试剂用量少、结果可靠等优势,适合在有检测大量样品和快速获取结果的工作中推广.     

生物效价检测研究进展

目的介绍生物效价的含义、检测方法及近年来在生化药物、化学药物和中药领域中的研究进展,以期为药品质量控制方法研究提供思路和借鉴。方法概述生物效价检测的基本概念,包括生物效价含义、检测方法分类及其选用标准、检测思路,重点论述了生物效价检测在生化药物、化学药物、中药领域中的应用情况。结果和讨论生物效价检测将作为一种常规的分析手段应用于药品的质量控制中,生物检测结合化学检测的模式将是药物质量控制的必由之路。     

基于神经氨酸酶活性检测的板蓝根品质的生物评价

采用流感病毒神经氨酸酶 (NA) 体外活性荧光检测法测定板蓝根的NA抑制生物活性, 并建立板蓝根抗病毒生物效价检测方法。研究表明板蓝根具有抑制NA的活性, IC₅₀ = (0.90 ± 0.20) mg·mL^-1 (相当于生药), 其量效曲线形状与阳性对照药磷酸奥司他韦相似, 提示二者对NA的抑制可能具有相同的作用方式。采用“质反应平行线”法设计和优化的板蓝根抗病毒生物效价检测方法, 重复性较好 (RSD = 5.78%), 实际样品检测结果均能通过可靠检验 (偏离直线P > 0.05、偏离平行P > 0.05)。研究结果表明, 所建立的生物效价检测方法可以作为板蓝根品质生物评价的方法之一。     

活血化瘀类中药生物效价检测方法的建立

目的中药质量控制一直是中药现代化的重点和难点,随着中药国际化的进程,FDA也明确提出植物药申报时需提供适于质量一致性评价的生物效价(Bioassay)方法。目前,国际上获批的生物效价方法以均是以计算待测物与标准物质(同质物质)的相对效价值表示,由于中药成分复杂,很难找到同质物质作为标准物质使用,因此目前尚未有复方中药开发相对生物效价方法的报道。本课题组尝试选择适当的中药有效成分为标准物质,以效应曲线的斜率比为计算方法,建立相对生物效价检测方法,拟用于活血化瘀类中药质量生物控制。方法依据美国FDA最新颁布的《Botanical Drug Development Guidance for Industry》中对植物药生物效价研究提出的要求,针对活血化瘀药物多数具有的抗血小板聚集的作用机制,建立家兔体外抗血小板聚集检测方法,参照USP39中对方法学开发及方法学验证的要点要求,选择纯度高、来源稳定且具有较好的抗血小板聚集活性的中药活性成分丹酚酸B作为标准物质建立相对效价测定方法,并且从线性与范围、重复性、精密度及准确度四个方面对方法进行系统考察。同时开展了第三方实验室的验证研究,对方法的可推广性进行了评估。结果以LOG(剂量)为X轴,抑制率为Y轴,绘制标准物质丹酚酸B量效曲线,显示其呈现较好的线性关系。(y=0.8262x+0.0189,R2=0.9901),重复性考察RSD=11.9%,日内精密度为10.53%,日间精密度为10.58%,准确度考察,检测丹酚酸B的相对效价值,结果显示6次测定的效价值为1.083±0.129,测定准确度为8.3%,方法满足美国药典USP39以及CFDA颁布的《生物制品质量控制分析方法验证技术一般原则》中对离体效价实验方法对精密度的要求,方法通过验证。将方法推广应用,委托第三方实验室采用该方法对同一检测样本进行检测,检测结果实验室间无统计学差异,提示该方法具有较好的实验室间重现性。两家机构结果均显示加速过期样品效价值较提取物效价值有明显降低(P<0.01),证明方法有较好的区分性。结论经方法优化及方法学验证,所建立的抗血小板聚集生物效价检测方法与活血化瘀作用机制相关,与标准物质丹酚酸B计算出的相对效价值具有较好的精密度、准确度和重现性,可作为生物检测方法,用于活血化瘀类中药的质量控制。     

藤珠胃康颗粒中4种皂苷成分的大鼠体内药代动力学研究

目的研究藤珠胃康颗粒中人参皂苷Re、Ro、Rb1和竹节参皂苷Ⅳa在大鼠体内的药代动力学特征。方法大鼠灌胃藤珠胃康颗粒(9 g·kg~(-1)),于不同时间点眼眶静脉丛采血,乙腈沉淀蛋白,采用HPLC-MS法检测大鼠血浆中的人参皂苷Re、Ro、Rb1和竹节参皂苷Ⅳa,应用DAS 2.1.1软件拟合药动学参数。结果人参皂苷Re、Ro、Rb1和竹节参皂苷Ⅳa的t_(1/2)分别为(13.72±9.14)、(6.94±3.51)、(28.80±9.99)、(5.17±2.41)h,tmax分别为(1±0.00)、(4±0.00)、(2±0.00)、(4±0.00)h,Cmax分别为(370.27±88.27)、(649.06±98.22)、(111.10±3.38)、(686.94±145.55)ng·m L~(-1),AUC0~t分别为(2188.75±599.81)、(4743.44±509.26)、(1699.06±35.66)、(4427.82±1396.29)μg·h·L~(-1)。结论建立的人参皂苷Re、Ro、Rb1和竹节参皂苷Ⅳa血浆样品分析方法及得到的药动学参数,可为藤珠胃康颗粒的药代动力学研究提供参考。     

基于生物抑菌活性的金银花颗粒效价测定方法

摘 要 目的： 探讨符合中医药特点的中药固体制剂质量控制与评价的化学 生物联合评价模式。方法: 以金银花颗粒为模型药,采用菌敏试验（最小抑菌浓度和最小杀菌浓度的测定）考察金银花提取液对4种标准菌株（金黄色葡萄球菌、变形链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌）的抑菌性。建立敏感菌抑菌圈直径与不同浓度金银花提取液之间的相关曲线,计算不同厂家金银花颗粒的生物效价,并将测定结果与HPLC法测定（以绿原酸计）的结果相比较。结果: 抑菌实验表明,金银花对金黄色葡萄球菌、变形链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌敏感,其中金黄色葡萄球菌的抑菌圈边缘清晰、敏感度较高。当金银花的质量浓度在0.0142～0.0680 g·ml^-1范围内时,对数浓度与反应效应呈线性关系,且相关性好（ｒ＝0.990 9）。结论:以生物活性为导向的效价评价方法有望成为评价中药固体制剂有效成分含量的手段之一,可配合传统检验方法对中药材及其制剂进行质量监控。     

不同商品等级枸杞子的抗氧化活性比较及其生物效价检测

目的:针对枸杞子的抗氧化作用,尝试建立基于清除有机自由基1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)的枸杞子质量控制方法。方法:通过正交试验,优选枸杞子样品提取方法;通过单因素考察确定枸杞子与DPPH溶液的最佳反应条件。结果:固液比1∶10,50%乙醇超声提取20 min时自由基清除率最高;DPPH浓度0.05 mg.mL-1,样品浓度100 mg.mL-1,室温反应90 min为最适反应条件。不同商品等级的枸杞子自由基清除率不同。结论:文中建立的抗氧化生物效价检测法,以枸杞子对DPPH系统自由基清除率为评价指标,可以客观反映枸杞子抗氧化活性的差异,适用于枸杞子药材质量控制,对其他具有抗氧化作用中药的质量控制以及高通量活性筛选也具有一定的参考价值。     

基于消化酶活力检测的鸡内金质量生物检定方法研究

鸡内金是消食化积类中药的代表,疗效确切,现代临床应用广泛.但目前鸡内金的药效物质研究基础较为薄弱,2020版《中国药典》收载的鸡内金质量控制方法比较简单,并不能够有效控制其质量.本研究提出基于胃蛋白酶活性的鸡内金生物效价测定方法,作为其质量控制新的技术方法.以胃蛋白酶活力为评价指标,优化鸡内金提取方法,采用"质反应平行...     

国外药政部门采用溶出曲线评价口服固体制剂内在品质情况简介

美国FDA药品审评中心的仿制药办公室属下的生物等效部于2004年1月起，推出了采用溶出曲线来评价药品内在质量，即延伸至仿制药与原研药是否生物等效的情况；其中详细罗列了溶出度试验各参数以及取样时间点，并规定采用f2因子对溶出曲线的一致性进行评估（f2因子需大于50）；该做法与1998年日本实施至今的“薬品品臂再评俩工程”具有相同的出发点。故建议我国对于仿制药的研发、审评以及内在质量的评价，也能从国家的层面参照以上两国的做法，采用溶出曲线的方式来评价，并同时提高溶出度试验标准、严格溶出度试验参数，从而切实有效地提高国产仿制药的品质，力争使其具有与进口原研药相同的生物等效性，并最终得以促进我国工业药剂学的发展，为国产仿制药打入国际市场奠定基础。