G0/G1期异时相Cyclin B1的表达对细胞凋亡的影响

目的 研究G0/G1期异时相细胞周期素B1(Cyclin B1)的大量表达对细胞凋亡的影响.方法 首先构建了四环素可诱导表达Cyclin B1的单克隆细胞株,其次,筛选出能最大程度阻滞细胞于G0/G1期的胸腺嘧啶核苷(Thymidine)浓度,最后,在阻滞的时间内加入四环素诱导Cyclin B1表达,并用免疫印迹和流式细胞仪检测证实后,用膜联蛋白/碘化丙啶(Annexin Ⅴ/PI)双染法和API法检测细胞凋亡.结果 终浓度为5 mmol/L的胸腺嘧啶核苷能阻滞单克隆细胞株在G0/G1期,并至少维持48 h;在细胞同步化期间加四环素诱导后,Cyclin B1表达增加,并且G0/G1期特异性细胞凋亡增加.结论 G0/G1期异时相Cyclin B1的表达能诱导细胞凋亡.     

CDC25B与CDK2/Cyclin A蛋白相互作用研究

目的:研究双特异性蛋白磷酸酶B（CDC25B）与细胞周期素 A(Cyclin A)和细胞周期素依赖性激酶2（CDK2）蛋白发生相互作用的结构基础。方法:应用Discovery Studio (DS) v3.5中的ZDOCK模块对CDC25B与CDK2/Cyclin A蛋白进行对接。应用“Analyze Protein Interface”模块计算CDC25B蛋白和CDK2/Cyclin A蛋白的溶剂可及表面积（SAS）并分析CDC25B蛋白和CDK2/Cyclin A蛋白相互作用界面的关键氨基酸残基。应用“Calculate Interaction Energy”模块计算 CDC25B蛋白和CDK2/Cyclin A蛋白相互作用界面处的关键氨基酸残基间的相互作用能。结果:对pose 1的疏水相互作用、氢键相互作用、相互作用能进行计算分析,预测得到CDC25B-CDK2/Cyclin A复合物的结合模式及起相互作用的氨基酸残基（CDC25B: GLY380,TYR382, ARG485, ARG488,GLU489,ARG490,ARG492,TYR497;CDK2/Cyclin A:THR165, TRP167,ASP206,SER207,ASP210, PHE213）。结论:该结果为今后深入研究 CDC25B通路和发挥协同刺激作用的信号体系以及基于该信号途径新型分子靶向药物的设计提供了理论基础。     

p21WAF1/CIP1基因的生物学功能及其与肿瘤发生的关系

p21WAF1/CIP1基因是在1993年由不同的实验室用不同的方法克隆出来的.Harper JW等[1]运用酵母双杂交的方法发现一种可与细胞周期依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)相互作用的蛋白,并经蛋白测序和PCR 的方法将其克隆,命名为CDK相互作用蛋白1(cyclin-dependent kinase interacting protein 1,CIP1).     

异时相Cyclin B1/CDK1表达有助于正常在体细胞进入细胞分裂周期

目的 研究通常表达于G2/M期的Cyclin B1在G_1期异时相表达的作用机制及意义.方法 用丝裂原刺激因子(PHA)刺激人外周血淋巴细胞使之进入细胞周期,分别在刺激后0、36、48、60 h收集细胞,并分成两部分,一部分用流式Cyclins/DNA多参数技术分析,一部分用Post-sorting Western blot分析.结果 处于G_0期的淋巴细胞经PHA刺激进入细胞周期后,可以观察到Cyclin B1在G_1期有异时相表达,相应的CDK1亦有异时相表达.结论 异时相Cyclin B1/CDK1可能有助于正常在体细胞进入细胞分裂周期.     

pkipl27的研究进展

细胞周期进行在细胞周期素(cyclin)-细胞周期素依赖激酶(CDK)-细胞周期素依赖激酶抑制因子(CKI)组成的立体调控网络精密控制下进行的。其中CKI细胞周期为负调控因子，作用尤为重要。根据其结构和功能特征，将其分为两大类：一类针对CDK4的特异性抑制蛋白(inhibitor of CDK4)INK家族，包括p16、p15、p18、p19。另一类为广谱CDKs抑制蛋白(cdk—interacting protein／kinase inhibitor protein)CIP／KIP家族.     

不同病变胆囊组织中P27kip1、CDK2、Cyclin E的表达及相关性研究

目的通过对胆囊结石、胆囊腺瘤性息肉及胆囊癌组织中细胞周期蛋白激酶抑制蛋白P27kip1、细胞周期蛋白依赖激酶CDK2、细胞周期素Cyclin E的表达及相关性研究,分析在3种胆囊病变组织中的表达与病理的关系,以探讨其与胆囊癌的发生、发展有关的可能因素.方法应用免疫组织化学的方法分析人类3组胆囊组织中的P27kip1、CDK2、Cyclin E的表达.结果P27kip1在胆囊癌的表达与CDK2的表达呈显著负相关(r=-0.949,P＜0.05);CDK2与Cyclin E的表达呈显著正相关(r=0.908,P＜0.01).胆囊癌中P27kip1的表达与Nevin病理分期呈显著负相关(r=-0.558,P＜0.01),而与患者的性别、年龄、分化及病理类型无明显关系(P＞0.05)P27kip1在胆囊癌与胆囊结石之间的表达差异有显著性(P＜0.01),胆囊结石与胆囊息肉之间的表达差异也有显著性(P＜0.01);CDK2、Cyclin E在胆囊癌与胆囊结石的表达差异有显著性(P＜0.01),胆囊结石与胆囊息肉之间的表达差异也有显著性(P＜0.05).结论胆囊癌中P27kip1、CDK2、Cyclin E基因出现异常表达,P27kip1的表达抑制及CDK2、Cyclin E的过度表达在胆囊癌的发生、发展过程中可能起促进作用.P27kip1、CDK2、Cyclin E并不能作为预测肿瘤发生,诊断早期肿瘤理想的指标;P27kip1的低表达是胆囊癌预后不良的预测指标之一,CDK2、Cyclin E作为单独的判断胆囊癌预后的指标尚缺乏足够的依据.     

塞来昔布对大肠癌细胞株HT-29增殖和凋亡的影响

目的体外观察塞来昔布对大肠癌细胞株HT-29细胞增殖和凋亡的影响,探讨其可能的作用机制.方法采用噻唑蓝(MTT)比色法,流式细胞(FCM)、吖啶橙/溴化乙啶染色结合荧光显微镜、Western印迹法等技术,研究塞来昔布对HT-29细胞增殖的抑制和可能的机制.结果塞来昔布抑制HT-29细胞生长,呈浓度和时间依赖性.流式术检测出典型的亚二倍体"凋亡峰",凋亡率(7.31±2.37)%～(48.30±2.86)%;使G0/G1期细胞比例升高,S期和G2/M期比例缩小、细胞核固缩、凋亡小体形成等.凋亡比例呈剂量和时间依赖.塞来昔布降低细胞周期素依赖蛋白激酶CDK2和CDK4的表达、上调细胞周期素依赖蛋白激酶抑制因子p21WAF1/CIP1n蛋白表达.结论体外塞来昔布抑制HT-29细胞增殖,并诱导细胞凋亡;下调CDK2和CDK4蛋白表达,上调P21WAF1/CIPln蛋白表达.塞来昔布抑制HT-29细胞增殖、诱导凋亡可能与阻止细胞周期进展有关.     

模拟IMRT对CNE-2细胞周期及Cyclin D1/Cyclin B1表达的影响

目的 探讨模拟调强放射治疗(IMRT)对人鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE-2)细胞周期及细胞周期素Cyclin D1、Cyclin B1转录水平的影响.方法 CNE-2分为急速照射(ART)组和模拟IMRT组,两组分别给予6MV X线2、4、6和8 Gy 四个剂量点的照射;ART组的照射时间为1～3 min,模拟IMRT组的完成时间为35 min.另设空白对照组,不接受照射,其余条件相同.照射后12 h,流式细胞术分析细胞周期分布,RT-PCR检测细胞周期素Cyclin D1和Cyclin B1的转录水平.结果 在相同剂量点,模拟IMRT组G2期细胞比例均低于ART组,两组G2期细胞比例随照射剂量的增加而逐渐增加.模拟IMRT组与ART组在相同剂量点之间比较,Cyclin D1转录水平的差异均无统计学意义(P均＞0.05);Cyclin B1转录水平的差异均有统计学意义(P均<0.05),且随照射剂量的增加而下降,模拟IMRT组Cyclin B1的表达高于ART组.结论 模拟IMRT照射时间延长对G2期阻滞作用下降,细胞周期素Cyclin B1的表达相对升高.     

肝细胞癌患者中CAC1、CCNB2、Cyclin Y及Cyclin E1的表达及意义

目的 研究肝细胞癌(HCC)组织中细胞周期素依赖激酶2相关性Culin结构域1(CAC1)、细胞周期蛋白B2(CCNB2)、细胞周期蛋白Y(Cyclin Y)及细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)的表达，探讨四者的临床意义。方法 应用R语言分析癌症基因组图谱数据库中HCC癌和癌旁组织中CAC1、CCNB2、Cyclin Y及Cyclin E1 mRNA的表达。免疫组化检测诊治的84例HCC癌组织及癌旁组织中CAC1、CCNB2、Cyclin Y及Cyclin E1蛋白表达。Pearson相关分析癌组织中各指标表达的相关性。统计学分析HCC癌组织中CAC1、CCNB2、Cyclin Y及Cyclin E1表达与临床病理参数的关系。Kaplan-Meier生存分析(Log-rank检验)分析CAC1、CCNB2、Cyclin Y及Cyclin E1表达与HCC患者生存预后的关系。结果 TCGA数据库HCC癌组织中CAC1、CCNB2、Cyclin Y及Cyclin E1 mRNA的表达显著高于癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果CAC1、CCNB2...     

模拟IMRT对CNE-2细胞周期及Cyclin D1/Cyclin B1表达的影响

目的 探讨模拟调强放射治疗（IMRT）对人鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE-2)细胞周期及细胞周期素Cyclin D1、Cyclin B1转录水平的影响。 方法 CNE-2分为急速照射（ART）组和模拟IMRT组,两组分别给予6MV X线2、4、6和8 Gy 四个剂量点的照射;ART组的照射时间为1～3 min,模拟IMRT组的完成时间为35 min。另设空白对照组,不接受照射,其余条件相同。照射后12 h,流式细胞术分析细胞周期分布,RT-PCR检测细胞周期素Cyclin D1和Cyclin B1的转录水平。 结果 在相同剂量点,模拟IMRT组G2期细胞比例均低于ART组,两组G2期细胞比例随照射剂量的增加而逐渐增加。模拟IMRT组与ART组在相同剂量点之间比较,Cyclin D1转录水平的差异均无统计学意义（P均＞0.05）;Cyclin B1转录水平的差异均有统计学意义（P均<0.05）,且随照射剂量的增加而下降,模拟IMRT组Cyclin B1的表达高于ART组。 结论 模拟IMRT照射时间延长对G2期阻滞作用下降,细胞周期素Cyclin B1的表达相对升高。     

Cyclin D1和Cyclin B1在鼻咽癌中表达的免疫组织化学研究

目的为探讨Cyclin D1和CyclinB1在鼻咽癌中的表达、相关性及临床意义.方法用免疫组化SP法分别检测Cyclin D1和Cyclin B1在58例鼻咽癌组织标本中的表达.结果Cyclin D1和Cyclin B1在鼻咽癌组织中的阳性表达率分别为58.6%(34/58)和60.3%(35/58);Cyclin D1和Cyclin B1 阳性和阴性病例的平均生存期、五年生存率和中位生存期存在显著性差异(P＜0.05);鼻咽癌组织中Cyclin D1和Cyclin B1的表达一致率为60.3%(35/58),无显著相关.结论Cyclin D1和Cyclin B1表达均可以反映鼻咽癌的生存情况,在鼻咽癌预后预测中有重要意义.     

细胞周期蛋白B1与存活素蛋白在肝细胞癌中的表达

目的研究细胞周期蛋白B1和存活素蛋白在不同分化程度肝癌细胞中的表达情况及与临床因素之间的关系,以探讨两者在肝细胞癌发病机制中的作用。方法选取我院病理科手术切除肝细胞肝癌存档蜡块46例,另取正常肝组织13例作为对照,以免疫组化法染色,测定细胞周期蛋白B1和存活素蛋白的表达情况,并结合患者的临床资料,运用统计学分析数据。结果细胞周期蛋白B1及存活素蛋白均在正常肝组织无表达,均在肝癌组织中有明显表达（P〈0.01）,并随着肝癌细胞分化程度的降低,表达逐渐增强（P〈0.01）,在低分化肝癌组织中的表达最强。均与肝内转移与否及3年生存率有关（P〈0.05）。两者的阳性表达呈显著正相关（r=0.476,P〈0.001）。结论细胞周期蛋白B1与存活素蛋白在肝癌细胞中,均随肝癌分化程度的降低表达增强,且两者的表达呈正相关。     

卵巢上皮性癌组织中细胞周期素B1和CDK1的表达

目的:探讨卵巢上皮性癌组织中细胞周期素B1(CyclinB1)和细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)的表达及其意义。方法:应用免疫组化SP法检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上皮性肿瘤组织、40例卵巢上皮性癌组织中CyclinB1和CDK1蛋白的表达。结果:①卵巢上皮性癌组织中CyclinB1和CDK1蛋白的阳性表达率分别为77.5%和90.0%,良性卵巢上皮肿瘤组织分别为25.0%和35.0%,正常卵巢组织分别为5.0%和10.0%,3者相比差异有统计学意义(χ2=33.036,39.568;P<0.001)。②CyclinB1蛋白的表达与卵巢上皮性癌FIGO分期、组织分化和淋巴结转移有关(P<0.05),CDK1蛋白的表达与卵巢上皮性癌临床病理特征无关。结论:CyclinB1和CDK1蛋白在卵巢上皮性癌组织中存在异常高表达,可能在卵巢上皮性癌的早期恶变过程中发挥重要作用。     

Cyclin B1在早期乳腺癌的蛋白表达及其意义

目的 探讨Cyclin B1在早期乳腺癌组织中蛋白表达与ER、PR及HER2的关系. 方法用免疫组化二步法检测76例有完整随访资料的早期乳腺癌患者乳腺癌组织中Cyclin B1、ER、PR及HER2的蛋白表达,并进行统计学分析.结果 Cyclin B1在乳腺癌组织中的阳性率为68.42%.Cyclin B1蛋白表达与肿瘤的病理类型、患者的年龄、PR及HER2的蛋白表达无关( P >0.05),与绝经状态、ER相关(P<0.05).单因素分析示Cyclin B1、ER、HER2与预后相关,多因素分析显示无一基因表达与预后相关. 结论本组早期乳腺癌患者的Cyclin B1蛋白表达与绝经状态、ER蛋白表达有关,与患者的预后无关.Cyclin B1在早期乳腺癌的作用尚需进一步研究.     

上皮性卵巢癌组织中泛素与细胞周期蛋白B1的表达

目的:检测上皮性卵巢癌组织中泛素(Ub)与细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)的表达情况.方法:应用免疫组织化学SP法检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性肿瘤组织及50例上皮性卵巢癌组织中Ub和Cyclin B1蛋白的表达.结果:上皮性卵巢癌组织中Ub和Cyclin B1蛋白的阳性表达率分别为34.0%(17/50)和42.0%(21/50),与正常卵巢组织的5.0%(1/20)、5.0%(1/20)和卵巢良性肿瘤组织的10.0%(2/20)、15.0%(3/20)相比,差异有统计学意义(P=0.014;χ2=11.841,P=0.003).上皮性卵巢癌组织中Ub和Cyclin B1蛋白的表达与FIGO分期(χ2=4.529,P=0.033;χ2=5.520,P=0.019)、分化程度(χ2=5.451,P=0.020;χ2=5.889,P=0.015)和淋巴结转移(χ2=6.269,P=0.012;χ2=6.226,P=0.013)有关.上皮性卵巢癌组织中Ub和Cyclin B1蛋白的表达有关联(χ2=5.451,rP=0.314,P=0.020).结论:Ub和Cyclin B1可能协同参与上皮性卵巢癌的恶性进展和转移,可用于评估上皮性卵巢癌的恶性程度及预后.     

P73、细胞周期素B_1在皮肤血管瘤组织中的表达及临床意义

目的 :检测P73、细胞周期素 (Cylin)B1蛋白在皮肤血管瘤组织中的表达 ,探讨P73、CylinB1在血管瘤发生发展中的作用及临床意义。方法 :采用免疫组织化学SP法检测增生期血管瘤、退化期血管瘤、正常皮肤组织 (各2 0例 )中P73、CylinB1蛋白的表达 ,并采用病理图像分析系统定量分析和比较P73、CylinB1蛋白在增生期血管瘤、退化期血管瘤和正常皮肤组织中的表达。结果 :在增生期血管瘤、退化期血管瘤和正常皮肤组 ,P73蛋白免疫组化阳性反应颗粒的平均光密度分别为 :6 .4 0 8± 2 .15 1,1.0 73± 0 .5 16 ,0 .95 3± 0 .12 0 ;阳性面积率分别为 :0 .184± 0 .0 15 ,0 .0 98± 0 .0 14 ,0 .0 87± 0 .0 12 ;CylinB1蛋白免疫组化阳性反应颗粒的平均光密度分别为 :0 .14 6± 0 .0 16 ,0 .0 79± 0 .0 18,0 .0 6 8± 0 .0 2 1;阳性面积率分别为 :0 .5 38± 0 .0 6 5 ,0 .2 0 4± 0 .0 79,0 .176± 0 .0 5 4。增生期血管瘤与退化期血管瘤、正常皮肤组分别相比 ,P73、CylinB1蛋白阳性表达的平均光密度和阳性面积率差异均有极显著性 (P <0 .0 0 1) ,消退期血管瘤与正常皮肤组之间 ,P73、CylinB1蛋白阳性表达的差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :P73、CylinB1蛋白在血管瘤发生发展和毛细血管内皮细胞的异常过度增生中?     

永生化食管上皮恶变细胞中核干细胞因子、细胞周期蛋白B1和PTEN的表达

目的 观察核于细胞因子(nucleostemin,NS)、细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)及抑癌基因PTEN mRNA和蛋白的表达情况.方法 正常食管上皮细胞(shantou human embryonic esophageal epithelial cell line,SHEE)和永生化食管上皮恶变细胞(shantou human embryonic esophageal carcinoma epithelial cell line,SHEEC)连续传代培养,取对数生长期SHEE和SHEEC细胞,采用RT-PCR及Western blot方法检测细胞中NS、Cyclin B1及PTEN mRNA和蛋白的表达并做相关性分析,MTT法检测抑制NS表达后的细胞增殖活性.结果 以SHEE细胞中NS、Cyclin B1和PTEN mRNA的表达量为1,SHEEC细胞中对应的相对表达量分别为(2.047±0.507)、(2.214 ±0.213)及(0.668 ±0.188),两组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);SHEE及SHEEC细胞中NS、Cyclin B1及PTEN蛋白表达量分别为(1.142±0.113),(3.161 ±0.108)、(1.585 ±0.056),(2.173 ±0.058)及(1.894 ±0.341),(1.162 ±0.524),两组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);NS mRNA和蛋白与Cyclin B1 mRNA和蛋白的表达呈正相关(r=0.832,P＜0.01;r=0.991,P＜0.05),与PTEN mRNA和蛋白的表达呈负相关(r=-0.924,P＜0.01;r=-0.769,P＜0.05);MTT检测结果显示,NS RNA干扰(RNA interference,RNAi)组与空白对照组和阴性对照组在干扰后12 h细胞增殖能力差异无统计学意义(P＞0.05),而在干扰后24、36、48 h差异有统计学意义(P＜0.05).结论 SHEEC细胞中NS、Cyclin B1 mRNA和蛋白的表达量均高于SHEE,而PTEN的表达量低于SHEE,NS可能对细胞恶变有影响.     

Cyclin D1与卵巢肿瘤

目的:探讨Cyclin D1在卵巢肿瘤发生中的作用及其预后关系。方法:阅读国内外有关文献并进行综述。结果:Cyclin D1在肿瘤的发生发展中发挥着“中央靶”的作用。Cyclin Dl在卵巢肿瘤的发生、发展中所起的作用还存在争议。结论:Cyclin Dl与卵巢肿瘤的发生、发展的关系还有待进一步的研究。