双氢青蒿素对前列腺癌PC-3细胞体内生长及Caspase-3表达的影响

目的：研究双氢青蒿素（DHA）对前列腺癌PC-3细胞裸鼠种植瘤生长的抑制作用及对半胱天冬酶_3（Caspase-3）表达的影响,并探讨其可能的作用机制．方法：采用人前列腺癌PC·3细胞株建立裸鼠种植瘤模型,将20只模型鼠随机分为对照组,二甲基亚砜（DMSO）溶剂组,DHA0．1,0．2mmo/kg组．各组经13d干预后,计算抑瘤率;光镜及电镜观察肿瘤组织形态学变化,以Hoechst33258染色,荧光显微镜观察细胞凋亡,免疫组织化学法检测Caspase-3的表达水平．结果：DHA0．1,0．2mmol／kg组瘤质量明显〈对照组及DMSO溶剂组（P〈0．05）,DHA0．1,0．2mmol／kg组抑瘤率分别为69．221％,63．186％．光镜及电镜可观察到典型的凋亡细胞和凋亡小体;Hoechst33258染色可见DHA0．1,0．2mmol／kg组凋亡细胞明显增多,其凋亡细胞密度显著增大（P〈0．05）;免疫组化结果显示,DHA0．1,0．2mmol/fkg组Caspase-3表达明显升高（P〈0．05）．结论：DHA能够抑制前列腺癌PC．3细胞裸鼠种植瘤的生长,其机制可能与上调凋亡相关基因Caspase-3表达有关．     

Caspase-8和Caspase-3在大鼠急性心肌损伤中的作用及药物预处理对其影响

目的:研究半胱天冬酶-8(caspase-8 )、半胱天冬酶-3(caspase-3)在异丙基肾上腺素(isoprenaline,Iso)致大鼠急性心肌损伤心肌细胞凋亡中的作用及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)预处理对其影响.方法:将Wistar大鼠随机分成三组:对照组、Iso损伤组和bFGF预处理组,光镜观察心肌组织病理变化,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组化和RT-PCR法检测caspase-8 、caspase-3蛋白及mRNA的表达水平,底物降解法测定酶活性.结果:损伤组心肌坏死较重,心肌细胞凋亡显著,且caspase-8 、caspase-3蛋白及mRNA的表达水平明显升高,酶活性增加;预处理组心肌坏死明显减轻,细胞凋亡减少,caspase-8 、caspase-3蛋白及mRNA的表达水平明显下降,酶活性受抑制.结论:bFGF预处理可能通过抑制caspase-8 、caspase-3的表达及酶活性以减少心肌细胞凋亡从而减轻大鼠心肌损伤.     

锌对幼鼠脑金属硫蛋白表达的影响

目的：研究不同含锌铜饲料对幼鼠脑金属硫蛋白表达的影响。方法：从哺乳期开始建立幼鼠低锌、常锌和高锌动物模型，以流式细胞仪及免疫组化的方法，定位、定量观测脑组织（皮层、海马）内ＭＴ表达的变化。结果：幼鼠在哺乳期末（４周）和７周档脑内ＭＴ含量；ＺＤ组明显低于ＺＮ组，而ＺＥ组明显高于ＺＮ组。Ｍ广泛分布于胶质细胞，散在分布于神经元内，在络膜、脑室管及血管内皮细胞内含量丰富。结论；饲料锌明显影响幼离ＭＴ表达。     

缺锌对生长期小鼠肾脏金属硫蛋白-1表达的影响

目的在成功制备缺锌小鼠动物模型的基础上,观察缺锌对生长期小鼠肾脏中金属硫蛋白-1(MT-1)定位、定量表达的影响,初步探讨锌缺乏影响肾发育的机制。方法应用免疫组织化学技术观察缺锌小鼠肾组织中MT-1的定位表达变化。应用蛋白印迹技术检测缺锌小鼠肾组织中MT-1蛋白表达量变化。结果免疫组化结果显示:在小鼠肾脏MT-1定位表达于近端小管上皮细胞胞浆内,分布较均匀,少量分布在远端小管和集合管上皮细胞胞浆,肾小球无明显表达。蛋白印迹结果显示:与对照组相比,缺锌组小鼠肾脏MT-1表达量明显下降。结论发育期锌缺乏可使肾组织中MT-1蛋白表达降低,从而影响肾脏的发育和功能。     

外源金属硫蛋白基因表达对NIH3T3细胞耐寒力的影响

目的：研究金属硫蛋白基因对细胞耐寒力的影响．方法：通过将金属硫蛋白基因（ｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ,ＭＴ）的表达载体ｐＢＡｃＮｅｏ－ＭＴⅡＡ转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞（小鼠胚胎成纤维细胞系）,筛选获得了高表达ＭＴ的细胞克隆ＭＴ１（ＭＴ阳性细胞百分比为２９．４％）,用四唑盐（ＭＴＴ）比色实验观察了该细胞的生长曲线以及不同低温条件下的存活能力,并通过电镜观察超微结构以进一步证实．结果：与转染ｐＢＡｃＮｅｏ空载体的细胞克隆Ｎｅｏ相比,常温下二者的增殖能力无显著差别．在不同的低温条件下,存活能力都受到一定程度的影响,细胞克隆ＭＴ１的存活细胞数明显高于阴性对照（Ｐ＜０．０１）,超微结构改变不明显．结论：上调金属硫蛋白基因表达可能具有增强耐寒的能力．     

PCNA与Caspase-3在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨增殖细胞核抗原(PCNA)、半胱天冬酶-3(Caspase-3)与胃癌组织分化程度、临床分期及浸润转移的关系,为临床早期诊断、治疗提供实验依据.方法 应用SP免疫组织化学技术检测PCNA,Caspase-3在68例胃癌的发生、发展、分化与浸润转移过程中的表达变化.结果 ①胃癌组织中PCNA的表达随肿瘤病理分化程度的降低、浸润程度的加深、淋巴结转移的产生而增高;②胃癌组织中Caspase-3的表达随肿瘤病理分化程度的降低、浸润程度的加深、淋巴结转移的产生而降低;③胃癌组织中的PCNA与Caspase-3表达呈负相关.结论 PCNA是反映胃癌细胞增殖的一项重要指标,与胃癌组织的分化程度、临床分期及浸润转移密切相关;胃癌组织中Caspase-3表达下调,增殖/凋亡比例失衡是胃癌发生发展的重要因素之一.     

高压氧对短暂前脑缺血小鼠海马半胱天冬酶-3表达的影响

旨在通过测定缺血再灌注时半胱天冬酶 3(caspase 3)的表达以及高压氧对表达的影响 ,从细胞凋亡的角度探讨高压氧治疗脑缺血的分子生物学机制。将C5 7BL/ 6N小鼠分为假手术组 (正常对照组 )、缺血再灌注组 (I/R组 )及缺血再灌注加高压氧治疗组 (HBO组 ) ,后 2组夹闭双侧颈总动脉 2 0min后再通血流 ,建立脑缺血再灌注模型 ,分别于再灌注 6h、12h、2 4h和 4 8h取海马。采用半定量反转录 PCR及蛋白免疫印迹 (WesternBlotting)方法分别检测caspase 3在转录水平(mRNA)及翻译水平的表达变化。结果 :各I/R组及HBO组海马中caspase 3mRNA及酶原表达水平与假手术组相比均有明显升高 ,且差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;各I/R组与相应时相点HBO组caspase 3mRNA及酶原表达水平相比差异均无统计学意义 (P >0 .0 5 )。提示 :脑缺血再灌注损伤诱发caspase 3转录水平增加 ,而且这是引起其酶原增加的主要原因 ;caspase 3介导的细胞凋亡参与了缺血再灌注损伤 ;本实验中所采用的HBO治疗方案对caspase 3转录及酶原水平无明显作用。     

铅对人胎盘金属硫蛋白表达的影响

目的了解铅对孕妇胎盘金属硫蛋白(MT)表达的影响,为预防胎儿铅中毒提供依据。方法选择早孕期(6～10周)的孕妇77例,检测其血铅水平,对其进行追踪,检测其分娩后胎盘MT的表达水平。结果 MT主要表达于胎盘组织细胞的胞浆,不同血铅水平孕妇的胎盘MT的表达不同(Hc=29.03,P0.01);胎盘MT表达水平与血铅的浓度呈正相关(rs=0.55,Uc=2.443,P0.05)。结论铅能诱导人胎盘组织MT的表达,其表达与孕妇的血铅水平有关。     

杏仁对家兔动脉粥样硬化及金属硫蛋白含量的影响

目的 :研究杏仁对家兔动脉粥样硬化 (AS)及肝、心组织、血浆金属硫蛋白 (MT)的影响 ,探讨杏仁对AS的防治作用及可能机制。方法 :高脂组家兔高脂饮食 8周 ,复制高脂血症 -动脉粥样硬化模型。杏仁组动物高脂饮食 4周后 ,腹腔注射杏仁液 ,对照组家兔喂养普通饲料 8周。以 [10 9Cd \〗血红素饱和法和硫代巴比妥酸法测定动物肝、心组织及血浆MT和MDA含量。结果 :AS组家兔肝、心组织及血浆MT水平分别较对照组升高 84% (P <0 0 5 )、48% (P <0 0 5 )、44 % (P <0 0 5 )。腹腔注射杏仁液后家兔肝、心组织和血浆MT含量进一步增高 ,分别较AS组升高 12 8% (P <0 0 5 )、3 3 % (P <0 0 5 )、46% (P <0 0 5 ) ,而MDA含量较AS组明显下降。结论 :杏仁可促使家兔组织MT合成增多 ,减轻AS的发生。     

哮喘对豚鼠金属硫蛋白合成的影响

目的 :观察哮喘豚鼠组织及血浆金属硫蛋白 (MT)含量的变化 ,认识哮喘时机体氧化防御系统的改变。方法 :复制豚鼠哮喘模型 ,分别以 [10 9Cd]-血红蛋白饱和法和硫代巴比妥酸法测定豚鼠组织及血浆MT及丙二醛(MDA)含量。结果 :哮喘豚鼠肝、心、肾和肺组织及血浆MT水平分别较对照组高 2 0 .3% (P <0 .0 5 )、6 4.3%(P <0 .0 5 )、5 2 .5 % (P <0 .0 1)、5 0 .0 % (P <0 .0 5 )、2 8.5 % (P <0 .0 5 )。MDA含量分别较对照组高 16 0 .8(P <0 .0 1)、38.5 % (P <0 .0 5 )、40 .0 % (P <0 .0 5 )、71.4% (P <0 .0 1)、89.5 % (P <0 .0 1)。结论 :哮喘豚鼠组织及血浆MT产生增多 ,并与氧化损伤有关     

地塞米松对大鼠肝脾细胞凋亡的影响

目的探讨地塞米松对大鼠肝脾等器官淋巴细胞的影响和对机体免疫抑制作用的机制。方法将20只Wistar大鼠随机分成两组,每组10只,实验组每天腹腔注射地塞米松3 mg/(kg.d),3 d后称大鼠体重、脾湿重、肝湿重。用流式细胞仪分析Annexin V/PI双染后脾细胞的凋亡率。结果实验组体重、脾湿重明显减轻(P<0.001),肝重改变不明显(P=0.75),脾细胞的凋亡率为(34.9±5.8)%,较对照组的凋亡率(0.71±0.09)%显著高(P<0.01)。结论地塞米松促进大量淋巴细胞凋亡是其抑制机体的免疫功能的一种重要机制。     

异氟醚对老年小鼠空间参考记忆和脑细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

目的 观察异氟醚对老年小鼠空间学习记忆能力及其大脑Caspase-3蛋白表达、细胞凋亡的影响.方法 24只16月龄C57BL/6老年小鼠分层随机分为异氟醚组(Iso,n=12)和对照组(Con,n=12).lso组使用1.0%异氟醚行麻醉暴露4h/d,连续2d;Con组同期只使用30%的氧气和70%氮气混合气.在麻醉暴露后,采用Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力,再分别使用免疫荧光染色法及TUNEL法检测小鼠大脑皮质区(CX)、海马Cal区和齿状回(DG)的Caspase-3蛋白表达及神经细胞凋亡的变化.结果 在Morris水迷宫的定位航行测试中,2组间逃避潜伏期的变化差异无显著性(F=0.007,P=1.235),但在空间探索实验测试中,Iso组在原平台所在象限(靶象限)停留时间[(34.5±5.0)%]明显短于Con组[(45.1±4.9)%],差异具有显著性(P<0.01).测试过程中2组小鼠寻找平台游泳的速度差异无显著性F=1.537,P=0.241).免疫荧光染色检测结果显示,DG、CAI及Cx区均可见Caspase-3阳性细胞,然而2组间的单位面积的阳性细胞数(阳性密度)比较差异无显著性(P>0.05).TUNEL 法检测到极少量阳性凋亡细胞.结论 重复使用1%异氟醚麻醉暴露可损害老年小鼠的空间参考记忆能力,但无明显影响大脑Caspase-3蛋白表达及细胞凋亡.     

大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3的表达及胰岛素的影响

目的探讨Caspase-3在缺血再灌注大鼠脑皮质神经元中的表达及胰岛素干预的影响。方法将动物随机分为假手术组、缺血组及干预组,参照ZeaLonga线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉闭塞（MCAO）局灶性脑缺血再灌注模型,干预组大鼠在脑缺血即刻给予胰岛素及葡萄糖腹腔注射,分别在缺血2小时再灌注后不同时间点断头取脑,免疫组化法测定脑皮质神经元Caspase-3的表达。结果缺血组大鼠脑皮质Caspase-3的表达较假手术组显著增强（P〈0.01）,给予胰岛素处理后,Caspase-3的表达较缺血组减弱（P〈0.05）,但仍显著高于假手术组（P〈0.01）。结论短暂的脑缺血再灌注可导致脑皮质神经元Caspase-3的表达增加,胰岛素可抑制脑皮质神经元Caspase-3的表达。     

鞘内注射塞地塞米松联合螺内酯对大鼠根性神经痛行为的影响

目的 探讨鞘内注射地塞米松(Dex)联合螺内酯(Spir)对大鼠根性神经痛行为的影响.方法 选择成功鞘内置管后无运动障碍的雄性SD大鼠48只,分为假手术组(Sham组,n=12)、溶剂对照组(C组,n=12)、Dex组(D组,n=8)、Spir组(S组,n=8)和Dex联合Spir组(DS组,n=8),制备注射式根性神经痛模型.D组、S组和DS组分别于造模后第2～4天,每次鞘内给予Dex 4μg、Spir 3μg、Dex 4μg+Spir 3μg,每天2次.Sham组和C组则给予等量的10%酒精.于造模前后测量双侧足底机械缩足阈值(PWMT)和热辐射刺激潜伏期(PWTL).结果 与Sham组相比,CCD术后同侧PWMT和PWTL都明显降低(P＜0.01).与C组相比,鞘内注射Dex明显抑制疼痛行为(P＜0.01),并一直持续到术后第10天;Spir也明显改善PWMT(P＜0.01)和PWTL(P＜0.01),并持续到术后第7天;Dex联合Spir则产生明显的协同作用[PWMT:(13.52±0.72)g,(11.58±1.38)g,P＜0.0l;PWTL:(19.63±1.68)s,(14.14±1.52)s,P＜0.01],并且这一作用持续了至少10 d.结论 鞘内注射Dex和Spir对慢性压迫大鼠背根神经节诱导的根性神经痛有治疗作用,二者联合使用可以产生明显的协同作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of intrathecally coadministered dexamethasone and spironolactone in trathecally on radicular pain behaviors.Methods Using rat model of radicular pain induced by chronic compression of dorsal root ganglion (CCD) ,48 male SD rats successfully received intrathecal catheter implantation and without motor dysfunction were randomly divided into Sham-operation group (Sham group, n= 12),Control group ( C group, n = 12 ), Dexamethasone group ( D group, n = 8 ), Spironolactone group ( S group, n = 8 )and Dexamethasone plus spironolactone group (DS group, n=8).Rats in D group,S group or DS group were intrathecally treated with dexamethasone 4 μg, spironolactone 3 μg or dexamethasone 4 μg plus spironolactone 3 μg twice daily on day 2 ～4 after CCD respectively,while rats in C and Sham group received 10μl 10% alcohol.Paw withdrawal mechanical threshold(PWMT) and paw withdrawal thermal latency (PWTL) were tested on day 1 before CCD and day 1,4,7,10,14,17 and 21 after CCD.Results Compared with Sham group, both PWMT and PWTL were significantly decreased after CCD surgery on the ipsilateral side(P＜0.01 ＝.Intrathecally administrated with dexamethasone significantly improved pain behaviors (P＜0.01 ＝ and these therapeutic effects lasted up to 10 days after CCD surgery.As with dexamethasone,intrathecal spironolactone also significantly attenuated PWMT (P＜0.01 ＝ and PWTL (P＜0.01 ＝ and the change lasted up to 7 days after CCD surgery.Coadministration spironolactone and dexamethasone exhibited significant synergies( PWMT: ( 13.52 ± 0.72) g vs ( 11.58 ± 1.38 ) g, P ＜0.01; PWTL: ( 19.63 ± 1.68) s vs ( 14.14 ± 1.52) s, P ＜ 0.01 ＝.These effects lasted up to at least 10 days.Conclusion Both dexamethasone and spironolactone intrathecally have therapeutic effects on radicular pain behaviors, combination injection of these two drugs could generate significant synergies.     

雷公藤内酯醇协同地塞米松诱导蕈样肉芽肿hut-102细胞凋亡及其机制

目的:探讨雷公藤内酯醇(Triptolide,TP)与地塞米松联合对蕈样肉芽肿(Mycosis fungoides,MF)hut-102细胞体外增殖、凋亡是否具有协同作用及其机制.方法:MTT法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白印迹法检测糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptor,GR)和凋亡相关蛋白Caspase-3表达.结果:①不同浓度TP(6.25、12.5、25 nmol/L)和地塞米松(10-7、10-6、10-5mol/L)对hut-102细胞均有增殖抑制作用,与时间、浓度相关;12.5 nmol/L TP与不同浓度地塞米松联合,细胞抑制率随地塞米松浓度升高呈现协同作用.②TP和地塞米松均能诱导hut-102细胞凋亡,联合用药凋亡率明显高于单药,具有交互效应.③10-5mol/L地塞米松作用hut-102细胞后,GR表达降低(P<0.05),联合用药(12.5 nmol/L TP+10-53mol/L地塞米松)GR表达上调、Caspase-3激活增强(P<0.05).结论:TP联合地塞米松可明显抑制hut-102细胞增殖,增强诱导凋亡,具有协同效应,其作用机制可能与GR表达上调、Caspase-3激活增强有关.     

银杏叶提取物预处理对大鼠肝移植细胞凋亡及Caspase-3 mRNA和FasmRNA表达的影响

目的探讨银杏叶提取物（ginkgo Biloba extract EGb）预处理对大鼠肝移植的保护作用及其对供肝FasmRNA Caspase-3mRNA表达的影响。方法雄性SD大鼠分别作供体、受体；采用Kamada’s袖套法建立大鼠原位肝移植模型，根据供肝切取前1h是否静脉注射银杏叶提取物（40mg／kg）将大鼠随机分为银杏叶提取物预处理组（EGb）：生理盐水对照组（Saline group NS）；假手术组（Sham operation SO）。分别于供肝再灌注后2h、6h、24h处死动物，检测血清ALT、AST，部分肝组织，10％的甲醛固定、石蜡包埋，病理切片HE染色作组织学检查，TUNEL法检测细胞凋亡，新鲜肝组织用RT-PCR检测FasmRNA，Caspase-3mRNA的表达。结果供肝再灌注2h、6h、24h各时点，银杏叶提取物预处理组大鼠血清ALT水平及细胞凋亡指数均明显低于生理盐水对照组（P〈0．01）。血清AST水平在供肝再灌注2h、6h各时点明显现低于生理盐水对照组（P〈0．01）。供肝再灌注后2h、6h、24h银杏叶提取物预处理组Caspase-3mRNA及FasmRNA的表达明显低于生理盐水对照组（P〈0．05）。结论银杏叶提取物预处理大鼠供肝，可以减轻移植肝的缺血／再灌注损伤和细胞凋亡，影响FasmRNA，Caspase-3mRNA的表达，对供肝有保护作用。     

Effect of dexamethasone on nitric oxide synthase and Caspase-3 gene expressions in endotoxemia in neonate rat brain

INTRODUCTION Fifty percent to seventy percent of the patientsare complicated with brain damage at various degreesduring endotoxemia, which is characterized bydamage to the neurons, microvascular injury,increased endothelial permeability, and neutrophilinfiltration and accumulation in the brain. It has beenrecognized that bacterial endotoxin (lipopolysaccharideLPS) plays important roles in this pathophysiologicalprocess, but the mechanism and approach toprevention of brain damage during en…     

疼痛对不同年龄大鼠脊髓背角Caspase-3表达的影响

目的 探讨凋亡相关蛋白Caspase-3在大鼠疼痛模型脊髓背角中的表达及与年龄的关系。方法 应用免疫组织化学和免疫印迹反应方法检测Caspase-3在脊髓背角的表达。结果 未刺激侧不同年龄组间Caspase-3表达量无显著性差异（P〉0．05）;疼痛刺激侧青年组Caspase-3表达量明显高于中、老年组（P〈0．05）,中、老年组之间Caspase-3表达量无显著性差异（P〉0．05）;老、中、青各组刺激侧Caspase-3的表达均较同组未刺激侧增加（P〈0．05）。结论 疼痛刺激可以促进脊髓背角Caspase-3的表达,并且疼痛刺激时Caspase-3的表达与年龄有密切的关系。     

地塞米松对成年大鼠持续性局灶性脑缺血后凋亡和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨药理剂量地塞米松对成年大鼠持续性局灶脑缺血后凋亡及凋亡相关基因Bcl-2表达的影响.方法将105只健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(7只)、生理盐水组(49只)、地塞米松组(49只),分别对应缺血3、6、12、24、48、72、120h时间点(每个时间点组7只大鼠)行左侧大脑中动脉近端电凝术,建立持续性局灶脑缺血模型.术后1h生理盐水组静脉注射生理盐水,地塞米松组静脉注射地塞米松(0.5mg·kg-1·d-1).行常规HE染色,原位末端TUNEL法标记凋亡细胞,免疫组织化学法检测Bcl-2蛋白表达.结果持续性局灶脑缺血后细胞凋亡、Bcl-2蛋白表达主要分布在梗死灶的边缘区域,脑缺血2d出现细胞凋亡并持续到缺血5d.地塞米松组细胞凋亡出现时间提前到缺血1d,而且缺血2d、5d凋亡细胞数量比生理盐水组增加.脑缺血3h到5d梗死灶边缘区域都有Bcl-2蛋白表达.地塞米松处理组6h到5d Bcl-2蛋白表达细胞密度明显小于生理盐水组.结论持续性局灶脑缺血早期给予地塞米松可能促进梗死灶边缘区的细胞凋亡,此作用与其下调Bcl-2的基因表达有关.     

地塞米松磷酸钠对兔关节软骨细胞体外培养的影响

目的探讨地塞米松磷酸钠对体外培养兔关节软骨细胞的影响。方法兔关节软骨细胞常规培养后随机分为对照组和实验组,对照组用不合地塞米松磷酸钠的DMEM培养液培养,实验组则分别加入含不同浓度地塞米松磷酸钠的DMEM培养液,应用流式细胞术及免疫细胞化学法检测软骨细胞增殖情况及其合成Ⅱ型胶原能力,并应用透射电子显微镜观察软骨细胞超微结构的变化。结果实验各组软骨细胞进入S期、G2＋M期的细胞比率较对照组软骨细胞减少、进入G0／G1期的细胞比率增加,免疫细胞化学阳性信号的平均灰度值与对照组平均灰度值的差异均有显著性,电镜下见软骨细胞线粒体、粗面内质网数量减少。结论地塞米松磷酸钠可抑制软骨细胞的增殖,可能与抑制关节软骨细胞的Ⅱ型胶原和蛋白合的合成能力有关。