五味子乙素逆转膀胱肿瘤多药耐药的实验研究

目的研究五味子乙素对膀胱肿瘤T24/ADM细胞多药耐药的逆转作用。方法 MTT法测定半数抑制浓度IC50和逆转倍数RI,流式细胞仪测定细胞内罗丹明的浓度。结果五味子乙素可以明显增加阿霉素对膀胱肿瘤T24/ADM细胞的细胞毒作用（P〈0.05）,逆转指数为4.11,五味子乙素明显抑制了细胞内罗丹明的外排（P〈0.05）。结论五味子乙素明显抑制了膀胱肿瘤细胞的多药耐药,其机制可能与其抑制P-gp蛋白的外排有关。     

化痰散结方对 MCF-7／ADM裸鼠移植瘤逆转耐药机理研究

目的：探究化痰散结方对乳腺癌MCF-7/ADM移植瘤的逆转耐药机制。方法制备荷瘤小鼠模型;设立生理盐水空白对照组、阿霉素组、阿霉素＋维拉帕米组、阿霉素＋中药低中高剂量组,观察肿瘤组织内阿霉素蓄积情况,用流式细胞仪（ FCM ）检测各组移植瘤耐药细胞P糖蛋白（ P-gp）表达情况。结果中药组及维拉帕米组均能减轻瘤重,提高抑瘤率,与生理盐水组及阿霉素组比较均有统计学意义（P＜0．05）,中药组及维拉帕米组均能够降低P-gp含量、提高细胞内阿霉素浓度,其中高剂量中药组对细胞内阿霉素、P-gp的影响较维拉帕米组差异有显著性（ P＜0．05）。结论化痰散结方能逆转阿霉素耐药,增减肿瘤组织中阿霉素含量,并呈剂量依赖性,同时降低P-gp的表达。     

抗癌药物对乳腺癌细胞Bcl—2、p53、Ki—67表达的影响及相互关系

目的 研究抗癌药物对乳腺癌细胞Bcl-2、p53、Ki-67表达的影响及相互关系。方法 取病理诊断为乳腺癌的手术切除标本,体外分离细胞作培养,应用四甲基偶氮唑盐（MTT）法分析多柔比星（ADM）、丝裂毒素（MMC）、5－氟脲嘧啶（5－FU）、顺铂（DDP）、长春新碱（VCR）5种化疗药物对乳腺癌细胞的相对抑制率,通过免疫细胞化学染色法和图像定量法分析乳腺细胞Bcl-2、p53、Ki-67的表达改变。结果 乳腺癌细胞在0.1XPPC药物浓度体外处理24h后出现形态改变,化疗药物对乳腺癌细胞的相对抑制率依次为VCR＞5－FU＞ADM＞MMC＞DDP,各用药组乳腺癌细胞Bcl-2、p53、Ki-67表达均有不同程度改变,与未用药组比较P＜0.001,等级相关分析P＜0.01和P＜0.05。结论 化疗药物主要通过诱导乳腺癌细胞凋亡、抑制细胞增殖等作用,而选择性地抑制和调控过度激活表达的癌基因。     

微波热疗对人乳腺癌阿霉素细胞MCF-7多药耐药蛋白及耐药性的影响

目的探讨微波热疗对人乳腺癌阿霉素细胞MCF-7和阿霉素耐药细胞MCF-7/ADM的多药耐药蛋白表达和耐药性的影响。方法应用Real-TimePCR法检测微波热疗对P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响和高效液相色谱法(HPLC)检测微波热疗对细胞内阿霉素浓度的影响。结果MCF-7/ADM细胞在微波热疗后4h和24h,P-gp、MRP表达量明显下降(P<0.01)。微波热疗以后肿瘤细胞内阿霉素(ADM)浓度有明显上升(P<0.01)。结论微波热疗抑制了耐药蛋白的表达,增加了细胞内的药物浓度,热疗可能是逆转化疗耐药从而提高化疗效果的一种有效手段。     

肾上腺髓质素对内皮型一氧化氮合酶在肾肿瘤细胞中表达的影响

目的 观察肾上腺髓质素（adrenomedullin,ADM）对肾肿瘤细胞中内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）表达的影响.方法 将肾肿瘤细胞分为对照组、ADM作用组、肾上腺髓质素受体shRNA （adrenomedullin receptor shRNA,ADMR shRNA）作用组,每组又设置24、48、72h 3个时间梯度.细胞培养完成后提取细胞总蛋白,Western-Blot检测各组细胞总蛋白中eNOS的表达,观察ADM对其影响.结果 ADM作用组各时间梯度eNOS的表达均高于同时段对照组和ADMR shRNA作用组（P＜0.05）.结论 ADM通过其特异性受体诱导肾肿瘤细胞中eNOS表达升高.     

siRNA抑制Ki-67表达对乳腺癌MCF-7／ADR细胞阿霉素耐药性的研究

目的采用Ki-67RNA表达载体干扰沉默Ki-67基因,检测其对乳腺癌MCF-7／ADR细胞株耐-67mRNA及蛋白表达的影响,观察沉默艇-67基因前后乳腺癌细胞株对阿霉素敏感性改变。方法体外合成靶向艇-67siRNA表达载体,应用脂质体法瞬时转染尉-67高表达的乳腺癌细胞株MCF-7／ADR,应用RT-PCR和Western印迹法检测转染后Ki-67mRNA及蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖活性及转染前后细胞对阿霉素敏感性的变化。结果Ki-67siRNA载体转染后24h可显著抑制乳腺癌MCF-7／ADR细胞株的Ki-67mRNA和蛋白表达及细胞的增殖活性。Ki-67siRNA组阿霉素IC50值为（6．3±0．9）μg/ml。结论si—Ki-67能够有效抑制Ki-67基因的表达,降低乳腺癌细胞的增殖能力,沉默Ki-67表达能部分逆转阿霉素耐药现象。     

siRNA抑制Ki-67表达对乳腺癌MCF-7/ADR细胞阿霉素耐药性的研究

目的采用Ki-67 RNA表达载体干扰沉默Ki-67基因,检测其对乳腺癌MCF-7/ADR细胞株Ki-67 mRNA及蛋白表达的影响,观察沉默Ki-67基因前后乳腺癌细胞株对阿霉素敏感性改变。方法体外合成靶向Ki-67siRNA表达载体,应用脂质体法瞬时转染Ki-67高表达的乳腺癌细胞株MCF-7/ADR,应用RT-PCR和Western印迹法检测转染后Ki-67mRNA及蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖活性及转染前后细胞对阿霉素敏感性的变化。结果 Ki-67siRNA载体转染24h后可显著抑制乳腺癌MCF-7/ADR细胞株的Ki-67 mRNA、蛋白表达及增殖活性。Ki-67 siRNA组阿霉素IC₅₀值为（6.3±0.9）μg/ml。结论 Si-Ki-67能够有效抑制Ki-67基因的表达,降低乳腺癌细胞的增殖能力。沉默Ki-67表达能部分逆转阿霉素耐药现象。     

重组人白细胞介素-2对人胃癌细胞SGC7901/ADR多药耐药性的逆转研究

目的 本实验以阿霉素（adriamgcin,ADM）诱导的人胃癌SGC7901/ADR多药耐药细胞为对象,初步探讨IL-2对耐药性的逆转作用及其可能的机制.方法 采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定IL-2对敏感细胞SGC7901和耐药细胞SGC7901/ADR的非细胞毒性药物剂量;以非细胞毒性药物剂量的IL-2处理细胞,分别于0h,24h,48h后加入不同浓度的阿霉素,采用MTT法检测ADM对细胞的半数抑制浓度（IC50）,分析IL-2对两种细胞ADM敏感性的影响;运用流式细胞仪检测IL-2对SGC7901/ADR细胞内ADM浓度、细胞周期和细胞凋亡的影响;采用免疫细胞化学染色法检测IL-2作用前及作用后24h,48h耐药细胞P-糖蛋白（P-gp）的表达.结果 IL-2作用24h后及作用48h后均对耐药性有明显逆转（P〈0.01）,且具有时间依赖性;加入IL-2后细胞凋亡率均比加药前增加（P〈0.05）,但不同时间无显著性差异（P〉0.05）;IL-2作用24h和48h后P-gp表达分别降低为37.4和36.0（P〈0.01）,但两组间无显著性差异（P＞0.05）.结论 IL-2可抑制SGC7901/ADR细胞的增殖,促进细胞凋亡,细胞对ADM的敏感性增加,耐药性部分逆转,且具有时间依赖性和剂量依赖性;其机制主要是降低P-gp表达,且可促进细胞凋亡,有助于耐药性的逆转.     

环孢霉素A和苦参碱联合逆转T24/ADM细胞的耐药性

目的观察环孢霉素A（Cyclosporine A,CsA）和苦参碱（Matrine,MAT）联合对膀胱肿瘤T24/ADM细胞耐药性的逆转作用。方法以T24/ADM细胞为靶细胞,MTT法检测CsA对T24/ADM细胞的细胞毒效应及逆转作用。采用MTT法、流式细胞术分析CsA和MAT联合对T24/ADM细胞的逆转作用,观察CsA和MAT联合对T24/ADM细胞生长的抑制作用及检测T24/ADM细胞膜P-gp的表达情况。结果 CsA在非毒性剂量浓度4μg/ml以下能逆转细胞耐药。CsA和MAT单独应用均对T24/ADM细胞的耐药性有较强的抑制效应,两者联合呈协同效应。与T24/ADM耐药细胞组比较,T24/ADM＋MAT组p-gp表达量降低（P〈0.01）,而T24/ADM＋CsA组p-gp表达量无明显变化（P〉0.05）,但两者联合应用时作用大于两者单独作用之和。结论 CsA和MAT联合可协同逆转膀胱肿瘤T24/ADM细胞的耐药性,其作用机制可能为下调T24/ADM细胞膜P-gp的表达水平。     

Disulfiram（DS)联合Cu对耐药白血病细胞的作用及与JNK通路关系的研究

目的 白血病细胞对化疗耐药是导致白血病治疗失败的根本原因,为研究disulfiram(DS) 联合Cu(DS/Cu)对耐药白血病细胞株 HL60/ADM的逆转耐药作用及与JNK通路的关系。方法 MTT法检测DS/Cu对HL60/ADM细胞的增殖抑制作用;选取DS/Cu对HL-60/ADM无明显杀伤作用的IC20值作为逆转浓度,MTT法检测IC20浓度DS/Cu联合不同浓度ADM处理24h后的IC50值;流式细胞仪检测阿霉素、DS/Cu单药及DS/Cu与阿霉素联合处理HL-60/ADM 24h凋亡细胞比例的变化;Western blotting 检测c-jun表达的变化。结果 DS/Cu对HL60/ADM细胞具有显著的增殖抑制作用,处理24hIC50为(1.11±0.025)uMMOL/L。HL-60/ADM细胞经IC20浓度（0.63umol/L） DS/Cu处理24h后,ADM的IC50值从(7.69± 1.87)降到(0.48±0 .021)ug/mL,逆转倍数为15.95倍（P=0.003）。0.63umol/L的DS/ Cu、1.25ug/mL的阿霉素单药及上述浓度的DS/Cu联合阿霉素作用HL60/ADM细胞24h后,联合组凋亡细胞比例较DS/Cu或阿霉素单药组均显著增多（P<0.05）。Western blotting显示阿霉素联合DS/Cu作用24h后c-jun表达水平显著增加。结论 DS/Cu在体外对HL60/ADM细胞具有杀伤作用,IC20浓度的DS/Cu能够有效逆转HL60/ADM细胞的耐药,活化JNK通路是其机制之一。     

薏苡仁提取物联合新辅助化疗对局部晚期乳腺癌组织Survivin及Ki-67表达的影响

[目的]探讨薏苡仁提取物康莱特（KLT）联合新辅助化疗对局部晚期乳腺癌（locally advanced breast cancer,LABC）患者乳腺癌组织Survivin和Ki-67表达的影响及意义。[方法]选择2011年1月至2013年10月在我院就诊并确诊为LABC的患者90例,随机分为化疗组（Che组）及KLT联合化疗组（Che＋KLT组）各45例,治疗3个疗程后比较两组的肿瘤缓解率,并应用免疫组化SABC法检测两组患者治疗前后组织中Survivin和Ki-67的表达水平,采用统计学方法对两组数据进行分析比较。[结果]两组患者比较,Che组的缓解率为71.1%,Che＋KLT组的缓解率为86.7%,两组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。尤其是PCR率,Che＋KLT组为28.9%,较Che组的17.8%差异更为明显,且有统计学意义（P〈0.01）。Survivin表达率Che组由治疗前的68.9%下降到48.9%,Che＋KLT组由治疗前的66.7%下降到33.3%,两组治疗前后比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;Ki-67阳性表达率Che组由治疗前的80.0%下降到53.3%,Che＋KLT组由治疗前的73.3%下降到40.0%,两组治疗前后比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。治疗后Che＋KLT组Survivin、Ki-67的表达率与Che组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。[结论]KLT可能通过协同新辅助化疗下调乳腺癌患者Survivin和Ki-67表达而抑制肿瘤细胞,提高肿瘤缓解率。     

p16~(INK4A)、p14~(ARF)和Ki-67在宫颈癌中的表达特点

目的:研究p16INK4A、p14ARF蛋白和Ki-67在宫颈癌患者中的表达水平,探讨它们之间的相互关系及临床意义。方法:采用免疫组化法对55例宫颈癌标本,40例宫颈上皮内瘤变(CIN)标本和45例正常宫颈标本进行p16INK4A、p14ARF和Ki-67检测。根据细胞核中出现棕褐色染色为阳性细胞的比例分为(-)、(+)、(++)、(+++)。对比各组的阳性表达。结果:随着CIN分期的增高和宫颈癌的发生,p16INK4A、Ki-67的表达有逐渐增高的趋势,宫颈癌患者(-)、(+)、(++)、(+++)的比例与正常宫颈标本比较,差异有统计学意义(P<0.01),CINⅢ期和宫颈癌患者(++)、(+++)的比例与CINⅠ期比较,差异有统计学意义(P<0.01);宫颈癌发生p14ARF的表达有逐渐增高的趋势,但在CIN期(+++)的表达增高不明显,宫颈癌患者p14ARF的表达于正常宫颈标本比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:p16INK4A、p14ARF和Ki-67与宫颈癌的形成及进展密切相关。     

蜂毒多肽对人膀胱癌T24细胞增殖的抑制作用

目的探讨蜂毒多肽对人膀胱癌T24细胞的增殖及细胞周期的影响。方法以浓度为0.1、1.0、10.0、100.0μg/ml的蜂毒多肽作用于体外培养的人膀胱癌T24细胞,应用四甲基偶氮唑盐（MTT）的培养增殖抑制作用,用流式细胞仪检测蜂毒多肽对细胞增殖核抗原（PCNA）表达及对该细胞周期的影响。结果蜂毒多肽能够在体外抑制人膀胱癌T24细胞的增殖活性;抑制PCNA的表达,呈剂量依赖性,各浓度组PCNA量均较对照组降低（P〈0.05或P〈0.01）;干扰细胞周期,各浓度组G0/G1期均低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,S期高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,浓度10.0μg/ml和100.0μg/ml组G2/M期均高于对照组（P〈0.01）。结论蜂毒多肽可抑制膀胱癌T24细胞的增殖,其作用机制可能与PCNA的表达抑制及细胞周期受到干扰有关。     

子宫富于细胞性平滑肌瘤雌、孕激素受体及Ki-67的表达及临床意义

目的 分析评价子宫富于细胞性平滑肌瘤中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、Ki-67的表达及临床意义.方法 收集2010～2014年湖北省妇幼保健院41例子宫富于细胞性平滑肌瘤、12例普通型子宫平滑肌瘤、5例恶性潜能未定子宫平滑肌瘤及10例子宫平滑肌肉瘤患者的子宫组织标本,采用免疫组化法检测各子宫组织中ER、PR以及Ki-67的表达水平.结果 ER在普通型子宫平滑肌瘤（83.3％）、富于细胞性平滑肌瘤（90.2％）以及恶性潜能未定型平滑肌瘤的阳性表达率（80.0％）逐渐下降,差异无统计学意义（P＞0.05）.ER在普通型子宫平滑肌瘤、富于细胞性平滑肌瘤以及恶性潜能未定型平滑肌瘤的阳性表达率均显著高于子宫平滑肌瘤肉瘤（10.0％）的表达,差异有高度统计学意义（P＜0.01）.PR在普通型子宫平滑肌瘤（100.0％）、富于细胞性平滑肌瘤（97.6％）以及恶性潜能未定型平滑肌瘤的阳性表达率（80.0％）逐渐下降,但差异无统计学意义（P＞0.05）.PR在普通型子宫平滑肌瘤、富于细胞性平滑肌瘤以及恶性潜能未定型平滑肌瘤的阳性表达率均显著高于子宫平滑肌瘤肉瘤（20.0％）,差异有高度统计学意义（P＜0.01）.Ki-67在普通型子宫平滑肌瘤[（0.020±0.009）个/10 HPF]、富于细胞性平滑肌瘤中[（0.039±0.011）个/10 HPF]的表达量比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.Ki-67在普通型子宫平滑肌瘤、富于细胞性平滑肌瘤中的表达均显著低于恶性潜能未定型平滑肌瘤[（0.231±0.077）个/10 HPF]和子宫平滑肌肉瘤中[（0.320±0.103）个/10 HPF]的表达,差异有高度统计学意义（P＜0.01）.子宫富于细胞性平滑肌瘤组织中ER和PR表达没有明显的相关性（P＞0.05）,两者与Ki-67呈显著正相关（r=0.399、0.452,P＜0.05）.结论 子宫富于细胞性平滑肌瘤组织中ER和PR高表达,ER和PR的表达与Ki-67呈正相关.ER、PR和Ki-67的表     

丹参酮ⅡA对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤磷酸化NMDA受体1表达及细胞内游离钙浓度的影响

目的：观察丹参酮ⅡA（TanⅡA）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）脑皮质神经细胞S897位点磷酸化的NMDA受体-1亚基（phospho-NR1 S897）表达以及细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）的影响,探讨TanⅡA对HIBD的保护作用机制。方法：7日龄新生SD大鼠240只随机分为正常对照组、HIBD组及HIBD＋TanⅡA组,按Rice-Vannucci方法制作HIBD动物模型,时间点选择HIDB后3,6,12和24 h（各组各时间点n=10）。TanⅡA按1μg/g每12 h腹腔注射1次。应用Fura-2 AM标记和日立F-4500型荧光扫描仪测定[Ca^2＋]i。应用免疫荧光组化染色方法测定phospho-NR1 S897的表达。结果：（1）与正常对照组比较,HIBD组损伤侧脑细胞[Ca^2＋]i绝对值和损伤侧与对侧的[Ca^2＋]i比值明显升高,各时间点的差异均具有统计学意义（P〈0.05）;与HIBD组比较,HIBD＋TanⅡA组各时间点的[Ca^2＋]i升高的程度均有所减轻,其中24 h损伤侧与对侧的[Ca^2＋]i比值较HIBD组降低24.9%,差异具有统计学意义（P〈0.05）。（2）正常对照组大脑皮质有大量均匀分布的phospho-NR1 S897染色阳性细胞。与正常对照组比较,HIBD组各时间点损伤侧脑皮质区phospho-NR1 S897阳性表达细胞数和绿色荧光强度均明显降低,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。与HIBD组比较,HIBD＋TanⅡA组各时间点的损伤侧脑皮质区phospho-NR1 S897阳性表达细胞数和绿色荧光强度均升高,其中HIBD后3 h和24 h的差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：TanⅡA可以减轻HIBD导致的脑皮质区phospho-NR1 S897表达减弱的程度,并降低HIBD导致的[Ca^2＋]i升高的程度,提示TanⅡA对脑细胞的保护作用可能是通过影响NMDA受体的表达,减少细胞内游离钙聚集而达到的。     

慢性支气管哮喘患者外周血CD8~(+) T细胞平衡及其与细胞因子的关系

目的探索CD8+CD28+杀伤性T细胞和CD8+CD28-抑制性T细胞及其所构成的平衡在慢性支气管哮喘发病机制中的作用。方法选取稳定期慢性支气管哮喘患者25例为实验组,同时选取慢性支气管炎及健康志愿者各25例作为对照组。采集外周血并采用多色流式细胞仪检测CD8+CD28+及CD8+CD28-T细胞的含量,并检测细胞因子γ干扰素(IFN-γ)及白介素4(IL-4)含量。结果与慢性支气管炎及健康志愿者比较,慢性支气管哮喘患者的CD8+CD28-抑制性T细胞含量明显降低(P0.05),而CD8+CD28+杀伤性T细胞以及CD8+CD28+/CD8+CD28-T细胞平衡含量明显升高(P0.05)。慢性支气管哮喘患者CD8+CD28+杀伤性T细胞内IFN-γ明显降低,而CD8+CD28-抑制性T细胞内IL-4含量明显升高(P0.05)。结论 CD8+CD28-T细胞含量降低导致免疫抑制不足可能是慢性支气管哮喘的重要机制,CD8+CD28+T细胞过度分泌IL-4诱导Tc2类免疫反应可能是慢性哮喘发作的关键环节。     

宫颈液基细胞学检查及上皮内瘤变中Ki-67和PTEN表达的临床意义

目的：探讨宫颈液基细胞学检查（TCT）及上皮内瘤变中Ki-67和PTEN表达的临床意义。方法：收集液基细胞检查患者1 330例,其中,有非典型鳞状细胞以上病变61例,经活检证实24例为上皮内瘤变,包括低度上皮内瘤变（CINⅠ）11例,高度上皮内瘤变（CINⅡ～CINⅢ）13例。同时选取20例宫颈炎作为对照,分别进行超敏TMHRP法免疫组织化学染色,检测Ki-67和PTEN表达情况。结果：对照组Ki-67阳性率5%,PTEN阳性率100%;低度上皮内瘤变（CINⅠ）Ki-67阳性率18.2%,PTEN阳性率72.7%;高度上皮内瘤变（CINⅡ～CINⅢ）Ki-67阳性率76.9%,PTEN阳性率15.4%。对照组与低度上皮内瘤变比较差异无统计学意义（P〉0.05）,低度上皮内瘤变与高度上皮内瘤变比较差异有统计学意义（P〈0.05）,在上皮内瘤变中,Ki-67和PTEN表达呈负相关。结论：宫颈液基细胞学检查及上皮内瘤变中Ki-67和PTEN联合检测可作为宫颈良性病变鉴别的重要标志物,对上皮内瘤变风险评估具有重要的生物学意义,可以更好地指导临床治疗。     

白藜三醇抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用机制

目的 探讨植物雌激素白藜三醇（RV）对大鼠血管平滑肌细胞增殖的调控及可能机制.方法 用植块贴壁法体外培养大鼠血管平滑肌细胞,使用Western blotting检测各组雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）、P38、P-P38、C-myc蛋白的表达水平.实验分为6组（每组n=6）：正常对照组（NC组）,含10% 胎牛血清（FBS）的DMEM; RV干预组（RV组）,50 μmol/L RV干预24 h; 血管紧张素Ⅱ组（AngⅡ组）,1 μmol/L AngⅡ干预12 h;RV＋ AngⅡ组,1 μmol/L AngⅡ干预12 h,然后加入50 μmol/L RV干预24 h;RV＋ICI182780组,1 μmol/L ICI182780干预2 h,然后加入50 μmol/L RV干预24 h;RV＋ICI182780＋AngⅡ组,1 μmol/L ICI182780干预2 h,然后加入1 μmol/L AngⅡ干预12 h,最后加入50 μmol/L RV干预24 h.结果 各组P38蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）;ERα、ERβ蛋白的表达：RV组ERα、ERβ蛋白的表达水平较正常对照组增高（P＜0.01）,而RV＋ICI182780组与RV组比较表达降低（P＜0.01）;C-myc蛋白的表达：RV组与NC组比较表达降低（P＜0.01）,AngⅡ组与NC组比较表达增高（P＜0.01）,AngⅡ组与RV组比较表达增高（P＜0.01）,RV＋AngⅡ组与RV组比较表达增高（P＜0.01）,RV＋ICI182780＋AngⅡ组与RV＋AngⅡ组比较表达降低（P＜0.05）;P-P38蛋白的表达：RV组与NC组比较表达降低（P＜0.01）,AngⅡ组与NC组比较表达增高（P＜0.01）,AngⅡ组与RV组比较表达增高（P＜0.01）,RV＋AngⅡ组与RV组比较表达增高（P＜0.01）,RV＋ICI182780＋AngⅡ组与RV＋AngⅡ组比较表达降低（P＜0.01）.结论 白藜三醇可以抑制C-myc的表达,抑制P38的磷酸化,此作用可被ICI182780阻断,说明白藜三醇可能是通过ER进而抑制C-myc的表达和P38的磷酸化发挥抗平滑肌细胞增殖的作用.     

VEGF-A和 Ki67在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的：观察血管内皮生长因子A（VEGF-A）和细胞核增殖抗原（Ki67）在膀胱移行细胞癌中的表达,研究VEGF-A与膀胱移行细胞癌中淋巴管密度（ LVD）和微血管密度（ MVD）是否有关。方法采用免疫组织化学方法观察VEGF-A及Ki67在60例膀胱移行细胞癌组织中的表达,用D2-40标记淋巴管, CD34标记微血管,进行淋巴管和微血管的计数。结果 VEGF-A阳性组的LVD和MVD与阴性组的LVD和MVD比较均有显著性差异（P＜0．05）。淋巴结转移组的LVD和MVD与未转移组的LVD和MVD比较均有显著性差异（P＜0．05）。 Ki67阳性表达率与淋巴结转移有关（P＜0．05）。结论在膀胱移行细胞癌的淋巴管生成和微血管生成中VEGF-A发挥重要作用。 Ki67可作为膀胱移行细胞癌转移趋势的有效指标。     

趋化因子FKN对人外周血单个核细胞IL-8表达的影响及ERK、PI3K和NF-κB在其中的作用

目的：通过研究趋化因子Fractalkine（FKN）对人外周血单个核细胞IL-8表达的影响,以及信号分子细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases,ERK）、磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K）、核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）在其中的作用,探讨FKN促进动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的机制。方法利用密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞;将提取的单个核细胞分为：空白对照组、FKN组、PD98059（ERK阻断剂）组、LY294002（PI3K阻断剂）组、PDTC（NF-κB阻断剂）组、FKN＋PD98059组、FKN＋LY294002组、FKN＋PDTC组;分别于培养12 h和24 h后收集细胞培养上清,应用ELISA检测各组单个核细胞中IL-8的表达情况。结果（1）细胞培养12 h或24 h后,PD98059组、LY294002组和PDTC组与空白组比较,IL-8表达有减少趋势,但差异无显著性意义（P＞0.05）。（2）FKN组较空白组IL-8表达明显减少（P＜0.05）,FKN＋PD98059组和FKN＋LY294002组较FKN组IL-8表达明显增加（P＜0.05）,FKN＋PDTC组较FKN组、FKN＋PD98059组和FKN＋LY294002组IL-8表达均明显减少（P＜0.05）。（3）细胞培养24 h后,各组IL-8表达均较12 h明显减少（P＜0.05）。结论趋化因子FKN可能通过ERK、PI3K信号途径抑制单个核细胞IL-8的表达,而通过NF-κB途径促进IL-8的表达,FKN对单个核细胞IL-8的表达具有双向调节作用,但以抑制作用为主。