异种肝细胞移植对大鼠药物性肝衰存活率和肝功能的影响

目的　观察异种肝细胞移植对大鼠药物性肝衰的存活率和肝功能的影响。方法　豚鼠为供体 ,海藻酸钠 氯化钡法微囊化。SD大鼠为受体 ,氨基半乳糖腹腔内一次性注射制作肝衰模型。 4 8h后将微囊化豚鼠肝细胞 (1 5× 10 7个 )移植于大鼠脾脏内。豚鼠裸肝细胞 (1 5× 10 7个 )移植及生理盐水 1 2ml脾脏注射为对照。移植后观察受体大鼠 14d存活率和肝功能的改变。结果　微囊化肝细胞移植组存活率 80 % ,明显高于生理盐水组 (2 5 % )和裸肝细胞移植组 (70 % ) (P <0 0 1与P <0 0 5 )。微囊化肝细胞移植组 14d总胆红素 (0 6 8± 0 0 5 μmol/L)和ALT(5 5± 6 7U/L) ,明显低于生理盐水组 (0 82± 0 0 7μmol/L和 91 0± 8 0U/L)和裸肝细胞组 (0 76± 0 0 6 μmol/L和 74 0±7 1U/L) (P <0 0 5和P <0 0 1)。总蛋白 (117 0± 8 4 g/L)和球蛋白 (6 6 0± 5 6 g/L) ,明显高于对照组 (78 0± 6 9g/L和 4 3 0± 6 2 g/L)、(96 0± 7 4 g/L和 5 2 0± 6 9g/L) (P <0 0 5与P <0 0 1)。结论　药物性肝衰大鼠脾内移植微囊化异种肝细胞有显著逆转肝功能和提高生存率的作用。     

预缺血对皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用

目的　研究预缺血 (IPC)对大鼠腹部皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用 ,并探讨其机制。方法　SD大鼠 2 0只 ,随机分成实验组和对照组 ,每组 10只 ;实验组在缺血前 ,先做预缺血处理 ;对照组皮瓣形成后 ,不做预缺血处理 ;然后两组均以血管夹持续阻断血流 8h ,松夹后恢复血流。术后第7d判断皮瓣成活情况。另外 ,两组在缺血前、缺血 8h及再灌注 3 0min ,分别抽取股静脉血 0 5ml,检测血清中超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量。结果　 ( 1)实验组皮瓣平均存活率80 2 1%± 15 73 % ,明显高于对照组 5 2 80 %± 18 91% (P <0 0 1)。 ( 2 )实验组和对照组血清SOD活性及MDA含量在缺血前和缺血 8h ,差异无显著性意义。但在再灌注 3 0min ,实验组SOD活性平均为 ( 91 84± 7 85 )NU/ml,对照组为 ( 83 4 5± 9 71)NU/ml,差异有显著性意义 (P <0 0 5 ) ;实验组MDA含量平均为 ( 8 76± 1 0 4 )nmol/ml,对照组为 ( 9 71± 0 99)nmol/ml,差异也有显著性意义 (P <0 0 5 )。结论　IPC能提高大鼠腹部皮瓣的存活率 ,其机制与IPC能减轻氧自由基介导的缺血再灌注损伤有关。     

儿茶素和漆黄素对柠檬酸铁诱导大鼠原代肝细胞损伤的保护作用

目的　分别从中药苞蔷薇根和叶中提取获得 (+ ) 儿茶素 (CAT )和漆黄素 (FIS)两种黄酮 ,研究其对柠檬酸铁致肝细胞铁超载的药理作用。方法　原代大鼠肝细胞加入 50μmol·L- 1柠檬酸铁诱导肝细胞铁超载。致损伤前加入CAT及FIS或损伤后 2 4h ,加入CAT及FIS ,继续培养 2 4h后 ,测定培养液中的超氧化物歧化酶 (SOD )、乳酸脱氢酶(LDH )、谷草转氨酶 (AST)、谷丙转氨酶 (ALT)活性和白蛋白 (ALB)含量。培养 48h后 ,用MTT法测肝细胞的存活率。结果　在致损伤前加入CAT或FIS ,仅见CAT 5× 10 - 5mol·L- 1和FIS 5× 10 - 5 mol·L- 1对大鼠原代肝细胞的恢复作用与模型对照组相比差异有显著性 (P <0 0 5或P <0 0 1)。在致损伤后加入CAT或FIS ,可见CAT 5× 10 - 5 、5× 10 - 6 、5× 10 - 7mol·L- 1组 ,FIS 5× 10 - 5 、5× 10 - 6 、5×10 - 7mol·L- 1组均可不同程度的提高培养液中的SOD活性 ,降低LDH水平 ,抑制ALT、AST的释放 ,提高ALB的含量 ,提高培养液中肝细胞的存活率 ,与模型对照组比 ,差异有显著性 (P <0 0 1,P <0 0 5)。FIS 5× 10 - 5 mol·L- 1组与正常对照组相比 ,对于提高SOD活性、ALB含量 ,差异无显著性 (P >0 0 5)。结论　CAT、FIS对柠檬酸铁所致大鼠原代肝细胞的损伤具有保护作用     

褪黑素对海马神经元保护作用的机制

目的　探讨褪黑素对海马神经元保护作用的可能机制。方法　以 6～ 8个月龄沙鼠制成脑缺血再灌注动物模型。腹腔注射褪黑素并以生理盐水 (NS)作对照 ,72h后检测海马组织中乳酸脱氢酶(LDH)及一氧化氮 (NO)含量。结果　褪黑素小剂量组LDH为 (35 .49± 7.2 8) μmol/mg ,NO为 (13 .11±3.5 8) μmol/mg ;褪黑素大剂量组分别为 (31.39± 6 .89) μmol/mg ,(10 .72± 2 .43) μmol/mg二组均显著低于生理盐水组的 (4 6 .6 1± 12 .5 9) μmol/mg和 (17.2 8± 3.2 1) μmol/mg。 结论　褪黑素可能是通过减少缺血再灌注后海马区NO的含量而发挥对神经元的保护作用     

支气管哮喘氧自由基损伤的实验研究

目的　探讨氧自由基在支气管哮喘发病中的作用。方法　通过支气管哮喘动物模型复制 ,分别测定哮喘组、β2 受体激动剂治疗组 (美喘清组 )、类固醇激素治疗组 (甲强组 )及正常对照组(对照组 )的小鼠肺组织超氧化物歧化酶 (SOD)和脂质过氧化物 (LPO)含量变化。结果　哮喘组、美喘清组、甲强组SOD分别为 ( 92 86± 9 2 9)U/ml、( 94 73± 10 2 5 )U/ml、( 10 1 78± 10 18)U/ml,前二组明显低于正常对照组的 ( 10 8 3 0± 2 1 67)U/ml,甲强组与对照组相比则无差异。三组LPO分别为 ( 3 81± 0 69)nmol/ gwwt、( 3 78± 0 71)nmol/ gwwt、( 3 0 3± 0 64)nmol/gwwt,前二组明显高于正常对照组的 ( 2 69± 0 5 7)nmol/ gwwt ,甲强组与对照组相比亦无差异。美喘清组与哮喘组SOD、LPO之间无显著差异。甲强组SOD明显高于哮喘组 ,LPO明显低于哮喘组。结论　氧自由基损伤参与了支气管哮喘病理过程 ,类固醇激素可以有效地降低氧自由基的产生 ,β2 受体激动剂无此作用。     

大蒜素对大鼠急性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的　研究大蒜素 (allicin)对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法　采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型 ,于缺血 3h再灌注 2 4h后测定大鼠脑组织中超氧化物歧化酶 (SOD)和髓过氧化物酶 (MPO)的活性、丙二醛 (MDA)、谷胱甘肽 (GSH)及血浆中一氧化氮 (NO)含量。结果　大蒜素 10、2 0mg·kg-1能将SOD活性从2 0 5 87± 16 5 2分别提高到 2 5 9 77± 19 6 5和 2 84 5 4±2 1 79,将MDA从 38 6 9± 0 10分别降至 2 8 6 8± 1 37和2 0 97± 0 4 4 ,将GSH含量从 2 8 31± 0 6 4分别提高到36 19± 1 12和 4 7 96± 0 4 4 ,将NO含量从 2 9 7± 0 4 9分别降至 2 7 38± 1 4 6和 2 3 0 0± 0 71,将MPO从 0 2 9±3 0 6× 10 -2 分别降至 0 2 6± 2 13× 10 -2 和 0 2 3± 7 5 2×10 -2 。结论　大蒜素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有明显保护作用 ,其机制可能与提高抗氧化酶活性 ,抗脂质过氧化损伤及抗炎作用有关     

卵巢过度刺激综合征动物模型制备

目的　构建卵巢过度刺激综合征 (ovarianhyperstimulationsyndrome ,OHSS)的大鼠模型。方法　 18只雌性Wistar大鼠 ,2 2日龄 ,体重 4 2 0～ 5 0 0 g ,随机分成超排卵组 1、组 2和对照组。卵巢过度刺激组从 2 2～ 2 5日龄连续 4d皮下注射马促性腺激素 (eCG) 10IU(0 1ml生理盐水稀释 ) ,在第 2 6日龄皮下注射绒毛膜促性腺激素 (hCG) 30IU、10 0IU ;对照组从第 2 2～ 2 6日龄连续 5d注射生理盐水。在hCG注射 4 8h后 (即 2 8日龄 )尾静脉注射 1%EB(Evensblue)染料 0 1ml,6 0min后腹腔灌注 5ml生理盐水 ,回收灌注液并置一个含有 5 0 μl0 1NNaOH的试管中 ,双侧卵巢分别称重后 ,把左侧卵巢置于 4ml甲酰胺中萃取EB。结果　卵巢过度刺激综合征组卵巢重量组 1为 (4 0 0 5 0±5 1 0 6 )mg ;组 2 (4 2 1 83± 88 93)mg ,显著高于对照组的 (32 82± 5 2 0 )mg(P <0 0 1)。卵巢EB浓度组 1为 (73 18± 11 38)ng/mg ;组 2 (73 2 6± 18 4 4 )ng/mg ,显著高于对照组 (35 87± 5 14 ) ng/mg(P <0 0 1)。组 1腹腔EB浓度 (13 994± 0 4 5 6 ) μg/ml,组 2 (4 15 4± 1 0 90 ) μg/ml,显著高于对照组 (0 333± 0 0 82 ) μg/ml(P <0 0 1)。 结论　利用适当日龄Wister大鼠构建OHSS动物模型成功。     

光气致小鼠肺水肿及肝脏过氧化损伤的实验研究

目的　探讨小鼠光气染毒剂量与肺水肿形成的关系及其对肝脏的过氧化损伤。方法　 5 0只小鼠 ,雌雄各半 ,随机分为 5组。正常对照组小鼠放置染毒柜中 5min ,染毒组小鼠分别给予 3 2、3 9、46、5 3mg L的光气 (各 10只 ) ,染毒时间为 5min。染毒后 4h ,测定各组小鼠肺脏的湿干比、肝脏的丙二醛 (MDA)含量、总超氧化物歧化酶 (T SOD)活力及进行肝脏HE染色。结果　随着光气染毒剂量的增加 ,小鼠肺脏的湿干比增加 ;当染毒剂量为 3 2mg L ,肝脏的MDA含量[(2 10 3 1± 44 61) μmol g]和T SOD活力 [(3 2 5 1± 6 10 )U g]比正常组 [(15 7 2 1± 18 17) μmol g ,(2 2 3 8± 6 0 2 )U g]升高 (P <0 0 5 ) ;光镜下 ,光气染毒的肝组织肝细胞呈现空泡样变性。结论　光气染毒可造成小鼠肺水肿 ,引起肝脏过氧化损伤。     

一氧化氮供体预处理对乳鼠心肌细胞的延迟保护作用及其机制

目的　探讨一氧化氮模拟预处理延迟保护作用的机制。方法　体外培养新生大鼠心肌细胞 ,实验分为 :①阴性对照组 (Normal组 ) ;②SNAP组 :一氧化氮 (nitricoxide ,NO)供体S 亚硝基 N 乙酰青霉胺 (S nitroso N acetyl 1 ,1 penicil lamine ,SNAP ,5 0 0 μmol·L-1 )与心肌细胞共育 2 4h ;③Che +SNAP组 :蛋白激酶C拮抗剂白屈菜季铵碱 (chelerythrinechlo ride ,Che ,1 0 μmol·L-1 )处理心肌细胞 30min后 ,加入SNAP与心肌细胞共育 2 4h ;④PDTC +SNAP组 :核因子κB(NF κB)特异性阻断剂PDTC(1 0 0 μmol·L-1 )处理心肌细胞 30min后 ,加入SNAP与心肌细胞共育 2 4h ;⑤缺氧复氧损伤组 (H/R组 ) :心肌细胞缺氧 6h ,复氧 3h。②～④组部分取细胞爬片以免疫组织化学法观察SNAP对热休克蛋白 70 (HSP70 )表达的影响 ;其余细胞经历H/R损伤后 ,检测心肌细胞存活率及乳酸脱氢酶 (LDH)活性。结果　在正常心肌细胞免疫组织化学法未检测到HSP70的表达 ,心肌细胞经过H/R损伤后 ,可检测到少量HSP70阳性细胞 ,其阳性染色A值为 94 6± 9 1 ,心肌细胞培养上清LDH活性为 (2 1 90 5± 1 5 1 7)U·L-1 ,细胞存活率为 5 1 7%± 4 6 % ,细胞损伤较正常组加重 (P <0 0 1 ) ;SNAP处理细胞后 2 4h ,HSP70阳性细胞数增多 ,     

硝普钠对门脉高压兔肝血流阻断后肝内NO,NOS,MDA及SOD的影响

目的 :观察实验性门脉高压家兔肝血流阻断前预注硝普钠 (SNP)对肝组织一氧化氮 (NO)及其合成酶 (NOS)的影响。方法 :门脉高压模型家兔2 4只 ,随机平均分为 3组。肝门阻断前 10min按组分别静脉注射氯化钠注射液 3mL ,硝普钠 (SNP)5.0 μg·kg- 1·min- 1和左旋硝基精氨酸甲酯 (L NAME) 10mg·kg- 1,计 75min ,当肝血流恢复 6 0min后测定肝组织NO ,NOS ,丙二醛 (MDA)及超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果 :SNP组 ,L NAME组与对照组NO分别为 (2 .2± 0 .5) ,(1.15± 0 .2 7)和 (1.6 4± 0 .2 8) μmol·g- 1Pro(P <0 .0 5和P <0 .0 1)。MDA分别为 (1.14± 0 .12 ) ,(1.70± 0 .2 9)和(1.4 3± 0 .2 2 )nmol·mg- 1Pro(P <0 .0 1)。结论 :硝普钠是一有效的外源性NO供体