人脑神经生长因子的分离和纯化及其生物学活性的鉴定

人胎脑经离心、透析和离子交换纤维素层析等方法,分离纯化２．５Ｓ神经生长因子（ＮＧＦ）。根据７ＳＮＧＦ和其活性亚单位β－ＮＧＦ的等电点的不同,分离得到２．５Ｓ的ＮＧＦ。用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺电脉测得其分子量约１３．３。用等电聚焦电泳测得其等电点分别为９．０、９．２和９．３５。在ＰＣ１２细胞的培养过程中,加入ＮＧＦ的提取物可以促进ＰＣ１２细胞的突起生长。     

小鼠2.5S神经生长因子的分离纯化及其中试研究

２．２纯度及其鉴定纯化的２．５ＳＮＧＦ样品，经１２０ｇ／ＬＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳、硝酸银染色，形成一条稍宽的着色带，分子质量１３．５Ｋｕ（图１），凝胶薄层扫描纯度＞９５％；薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳出现３条带，ｐＩ值分别为８．７，９．０，９．２；抗...     

神经生长因子活性鉴定的简便方法

本文介绍了一种对ＮＧＦ进行活性鉴定的简便方法，通过对５组小鼠颌下腺ＮＧＦ粗提物及阳怀对照（胎脑神经生长因子注射液和神经肽）的活性鉴定，结果表明，此方法不需要复杂的设备仪器就儿地对ＮＧＦ进行活性鉴定，比放射免疫结合受体测定及酶联免疫等方法稳定和简易。     

大肠杆菌表达rhIL—8的纯化和生物学活性鉴定

应用钙盐沉淀法将ｈＩＬ－８重组质粒ｐＨＮＰ１０１转化感觉态大肠杆菌ＨＢ１０１，转化菌经扩增培养，其包涵体及胞浆内均发现有重组蛋白的表达（约１０：１），表达蛋白经初步分离，肝素柱，离子交换柱和凝胶柱进一步纯化，获得了高纯度的ｒｈＩＬ－８（〉９５％），纯化的ｒｈＩＬ－８在新西兰兔体内白细胞动员试验中显示了较高的生物学活性。     

神经生长因子的提取和鉴定

目的：制备具有生物学活性的神经生长因子(NGF)。方法：以小鼠领下腺为原料，采用CM52多次洗脱的方法分离神经生长因子，SDS-PAGE电泳检测NGF的分子质量和纯度，采用鸡胚背根神经节培养方法检测NGF的生物活性。结果：经CM52多次洗脱的方法的NGF在SDS-PAGE电泳显示为一条分子质量14kDa的区带，生物学活性良好。结论：本方法可用于NGF的制备。     

大肠杆菌表达rhIL—8的纯化和生物学活性鉴定

高志昕应用钙盐沉淀法将ｈＩＬ一８重组质粒ＰＨＮＰ１０１转化感受态大肠杆菌ＨＢ１０１，转化菌经扩增培养，其包涵体及胞浆内均发现有重组蛋日的表达（约１０：１）。表达蛋白经初步分离，肝素柱、离子交换柱和凝胶柱进一步纯化，获得了高纯度的ｒｈＩＬ—８（＞９５％）。纯化的中ＩＬ—８在新西兰免体内白细胞动员试验中显示了较高的生物学活性硕士研究生＊导师脉采血，计数其外周血白细胞总数。对照组静脉注射等体积灭菌生理盐木，并于相同的时间点干血检查。２结果２．１重组质拉ｐＨＮＰ１０１转化ＨＢ１０１细菌：转化菌可在含１００ｍｇ／Ｌ氨苄青霉素的琼脂平板上生长并形成定落．空日质粒转化细菌则不能生长。２．２纯化ｒｈＩＬ——８的ＳＤＳ—ＰＡＧＥ：成熟ｈＩＬ——８是一低分子蛋曰，分子量约为１０ｋｕ．初步分离的ｒｈＩＬ——８经纯化后其纯度逐步提高（＞９５％），于电泳图谱上１０ｋｕ处显示单一条带（附图）。２．３纯化ｒｈＩＬ——８的ＥＬＩＳＡ检测；ｈＩＬ——８ＥＬＩＳＡ检测结果显示上述纯化后的蛋白为特异性ｒｈＩＬ——８，其含量约为２５ｍｇ／Ｌ。２．４ｒｈＩＬ——８快速募集白细胞进人外周血循环：在静注，ｒｈＩＬ——８（１０μｇ／ｋｇ）５ｍｉｎ后，兔外     

肉苁蓉多糖的分离、纯化和鉴定

目的 分离、纯化和鉴定壮阳中药肉苁蓉Cistanche deserticola中的多糖成分。方法 经脱脂、沸水抽提、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白得到的粗多糖，再经DEAE－Sephadex A-50离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶柱层析得到纯净的肉苁蓉多糖（CDPS），用红外光谱和紫外光谱分析鉴定该多糖。结果 红外光谱分析具有典型的多糖特征吸收峰，紫外光谱分析未见核酸和蛋白质的特征吸收峰。结论 本实验所提取的肉苁蓉多糖为单一、纯净的多糖。     

红曲菌株的分离纯化和鉴定

[目的]对红腐乳中的红曲菌进行分离纯化和鉴定。[方法]根据红曲菌嗜酸、耐乙醇的生长特性,用含乙醇的麦芽汁、含乳酸的大米培养基分离红腐乳汁中的红曲菌,并用对数稀释平板法进行纯化。纯化后的红曲菌显微观察确定其属别。依照其在MEA培养基上25℃培养的菌落形态特征鉴定到种。[结果]从红腐乳中分离的两个菌株经鉴定M-1属丛毛红曲菌(M.pilo-sus),M-3属红曲红曲菌(M.anka)。[结论]红腐乳中分离的纯培养为红曲属真菌。     

虫草真菌多糖的分离纯化及鉴定

<正> 1.材料1·1 菌种:菌株A(本实验室保存菌株)。1·1·1 培养基 黄豆粉培养基:蚕蛹粉15％蛋白胨3.5％ 酵母浸汁1.5％ Na_2HPo_4 1％ 黄豆粉30％ MgSo_41％ 葡萄糖3％自来水配制调 PH7.2 15Pa灭菌20分钟1·1·2 培养条件:26℃200rpm振荡培养5天。1·2 试剂:山梨糖、半乳糖、葡萄糖(北京化工厂产品)甘露糖(上海试剂工厂产品)薄层层折硅胶G     

人载脂蛋白H的分离、纯化和鉴定

 目的 探索一种相对简便而高效的方法,从人血浆中分离、纯化载脂蛋白H。方法 用高氯酸预处理血浆,以离子交换色谱和亲和色谱相结合的方法进行蛋白质的分离和纯化。用SDS-聚丙烯凝胶电泳和Western blot对纯化产品进行鉴定。用BCA蛋白质定量测定试剂盒测定获得载脂蛋白H的量。结果 连续分离、纯化3次,每次获得的产品纯度均大于98%,且经Western blot分析均能与抗β₂-Glycoprotein I单克隆抗体呈阳性反应。3次纯化共获得apoH 12.56 mg,平均21 mg/L。结论 本方法重复性好、可靠性高,较传统方法更为简便和经济。     

组织DNA分离、纯化与鉴定的质控和优化

分子生物学是生命科学的带头学科,其理论与实验技术已广泛地渗透到生命科学的各个领域，在医学基础理论和临床应用中正显示出日益重要的意义。为此学习和掌握分子生物学基本技术已成为从事和即将从事生命科学工作者的追切需要与愿望．2002年生物化学暨分子生物学教研室对本科实验教学进行了大幅度的改革,除保留了8学时的生物化学实验内容外,增添了28学时的新近发展起来的分子生物学新技术，其中组织DNA提取纯化与鉴定技术就是一个既具备综合性,又能够为学生创造一个设计思路的大实验。通过两年的运转，不断地对其技术进行优化,对实验条件进行质控,使这项新技术不断完善、稳定,为实验教学提供了一个较高的技术平台。     

酸性成纤维细胞生长因子的分离纯化及活性鉴定

目的：从牛脑中分离纯化酸性成纤维细胞生长因子（aFGF)并鉴定生物活性，方法：根据DenisGOSPODAROW-ICZ的方法，新鲜牛脑匀浆，三步硫酸铵盐析。最后沉淀物溶解透析后予离子交换层析及琼脂糖胶亲和层析，促3T3细胞DNA合成率鉴定生物活性。结果：用1.0mol/LNaCl的缓冲液洗脱得到分子量为13600的多肽，得率为610μg/kg牛脑，氨基酸组成分析与已知的aFGF相同，促3T3细胞DNA合成的最低浓度为0.5ng/ml，最大效应浓度50ng/ml，ED50值为8ng/ml。结论：aFGF具有强烈的促细胞增殖作用。     

人胎盘绒毛叶神经生长因子纯化与活性鉴定的初步研究

人胎盘绒毛叶匀浆上清,在不同的pH值情况下,依次通过两个离子交换纤维素层析柱和SephadexG-100柱,分离纯化了神经生长因子(NGF)。其分子量约14500,3种主要组分的等电点分别为9.15、9.45和9.65。一个胎盘绒毛叶可获得1.0μg NGF提取物。用血浆凝血块法测NGF提取物的活性表明:纯化后的NGF比活力显著提高。     

小鼠颌下腺神经生长因子的制备和活性鉴定

制备具有生物活性的ＮＧＦ。方法以小鼠颌下腺为原料，采用ＦＰＬＣ分离神经生长因子，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳检测ＮＧＦ的分子质量和纯度，采用脊髓和脊根神经培养方法检测ＮＧＦ的生物活性。     

云芝多糖组分的分离,鉴定及生物学活性的初步研究

通过Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ层析将云芝多糖分成三人不同组份，其含量分别为全组分的８３．６％，８．６％和５．１％。三个组分的糖的含量分别为６５．９％，５７．８％和６４．１％。高压液相层析结果显示三组份均为单一对称峰，平均分子量分别为１１８８９５８，７９１１２８和５４７７０８。对其生物学活性的研究发现三个组分对叔丁基脂氢化氧物化引起的小鼠腹腔巨噬细胞损伤显示类似程度的保护作用。     

龙葵多糖的分离、纯化和鉴定(Ⅱ)

首次从中草药龙葵Ｓｏｌａｎｕｍ ｎｉｇｒｕｍ Ｌ．的稀碱提取液中分离得到２种多糖ＳＮＬ－３,ＳＮＬ－４。分别经琼脂糖凝脉电泳、凝胶柱层析法分析,证实均为单一组分。ＳＮＬ－３,ＳＮＬ－４经酸水解、Ｓｍｉｔｈ降解、红外等确知,ＳＮＬ－３由Ｄ－木糖（７５．７％）、Ｄ－甘露糖（９．２％）、Ｄ－葡萄糖（４．９％）和Ｄ－半乳糖（１０．２％）组成,分子量为２３７００;ＳＮＬ－４由Ｄ－木糖（８９．４％）、Ｄ－甘露