严重烧伤后小鼠脾脏T淋巴细胞跨膜信号转导的改变与IL－2、IL－10分泌

目的 探索严重烧伤后小鼠脾脏T淋巴细胞功能改变及IL-2、IL-10分泌规律。并从T淋巴细胞活化跨膜信号转导途径寻找导致其改变的原因。方法 检测T淋巴细胞表面抗原受体TCRα/β，辅助刺激分子CD28及参与跨膜信号转导的G蛋白、蛋白酪氨酸激酶(PTK)、蛋白激酶C(PKC)的活性改变，观察伤后不同时相T淋巴细胞增殖转化功能及IL-2、IL—10分泌活性。分析各信号转导分子改变与T淋巴细胞功能活性改变之间的关系。结果 烧伤后T细胞膜表面分子TCRα/β、CD28表达阳性率降低，GTPase活性和膜PTK活性均受抑，但于伤后168h恢复，转膜PKC活性出现先降低后升高的双相改变，且与IL—10水平密切相关。结论 烧伤后T细胞膜表面分子TCRα/β、CD28和跨膜信号转导酶活性的改变是导致伤后IL-2分泌降低、T细胞功能受抑和IL-10分泌先降低后升高双相改变的重要原因。     

不同程度烫伤应激对大鼠皮下移植瘤生长的影响

目的：探讨应激反应对大鼠皮下移植瘤生长的影响。方法：将大鼠乳腺癌细胞Walker-256癌细胞株注入Wistar幼鼠腹腔,5d后抽取腹水,浓缩,经Wistar大鼠腹股沟皮下接种,建立Wistar大鼠皮下移植瘤模型。选取24只荷瘤大鼠,随机分为实验对照组（未烫伤）、轻度烫伤组（10％TBSA,100℃水中烫伤5s）、重度烫伤组（15％TBSA,100℃水中烫伤10s）,每组8只。烫伤后12h尾静脉取血,ELISA法检测血自细胞介素-18（IL-113）水平,放射免疫法测定血清皮质醇水平;烫伤后1、7、13d测定皮下肿瘤体积,伤后13d进行肿瘤的病理学观察。结果：烫伤后大鼠血浆IL-1G水平较实验对照组[（5．01±2．51）pg／m1]明显升高（P〈O．01）,重度烫伤组[（155．78±18．30）pg／ml]较轻度烫伤组[（94．12±15．31）pg／m1]升高更加明显（P〈O．01）;烫伤后大鼠血清皮质醇水平也较实验对照组[（60．51±16．70）μg／L]明显升高（P〈O．01）,重度烫伤组[（115．78±17．42）μg／L]较轻度烫伤组[（87．19±13．28）μg／L]升高更加明显（P〈O．05）。烫伤后1d,各组间肿瘤体积差异无统计学意义（P〉0．05）;烫伤后7d和13d,对照组与轻度烫伤组肿瘤体积差异无显著性（P〉0．05）,重度烫伤组肿瘤体积明显大于实验对照组和轻度烫伤组（P〈0．05）。病理学观察显示,烫伤组肿瘤细胞密度均较实验对照组大;各组均有纤维组织增生和炎细胞浸润,尤以重度烫伤组为甚。结论：重度烫伤后应激反应促进肿瘤的生长。     

血清IL-1β和IL-6表达水平与膝骨关节炎病程关系的研究

目的探讨膝骨关节炎患者血清IL-1β和IL-6表达水平与病程发展的关系。方法85例骨关节炎患者,用膝关节X射线检测和Kellgren／Lawrence（K／L）评分法则分为轻度（28例）、中度（37例）和重度（20例）组,同时选取年龄性别匹配的85例健康人作为正常对照,用双抗体夹心ELISA法测定各组血液中IL-1β和IL-6的表达水平,T—TEST比较各组间差异,Logistic回归分析IL-1β和IL-6表达水平与关节炎病程发展的相关性。结果轻、中、重三组患者血清中IL-1β的浓度分别为（6．95±3．75）pg／ml、（8．63±3．30）pg／ml、（13．53±9．23）pg／ml,明显高于对照组（4．08±1．84）pg／ml,表达水平随着病情分级逐渐加重而呈现出逐渐增高的趋势（P〈0．01）;同时,轻、中、重三组患者血清中IL-6的表达量分别为（41．72±18．29）pg／ml、（54．41±26．14）pg／ml、（74．28±18．26）pg／ml,明显高于对照组（25．04±10．39）pg／ml,表达水平随病程加重而逐渐增高（P〈0．01）。回归分析表明,IL-113和IL-6都是膝骨关节炎病程发展的危险因素（OR值分别为1．32和1．07,P〈0．001）。结论IL—1β和IL-6表达水平可作为判断膝骨关节炎临床病情和预后的免疫学指标;对IL-1β和IL-6的研究将有助于进-步在分子水平阐明膝骨关节炎的发病机制,为临床诊断和治疗提供新的思路。     

肺炎支原体肺炎患儿支气管肺泡灌洗液白细胞介素-4、白细胞介素-6、干扰素-γ水平与病情和肺功能的关系

目的:分析肺炎支原体肺炎(MPP)患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)水平与病情和肺功能的关系。方法:选取徐州市儿童医院2019年5月至2020年10月收治的109例MPP患儿(研究组)和102例急性支气管异物患儿(对照组),均实施支气管肺泡灌洗术。研究组MPP患儿根据病情分为轻症组(85例)和重症组(24例),并根据患儿肺功能损伤程度分为肺功能正常组(26例)、轻度损伤组(32例)、中度损伤组(30例)和重度损伤组(21例)。取入组患儿BALF,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-4、IL-6、IFN-γ水平并进行比较;比较研究组不同病情、不同肺功能损伤患儿BALF中IL-4、IL-6和IFN-γ水平:两组间比较采用成组设计资料t检验;多组间整体比较采用方差分析后组间两两比较采用LSD-t检验。应用Pearson相关分析研究组患儿BALF中IL-4、IL-6、IFN-γ水平与肺功能的关系。结果:研究组患儿BALF中IL-4、IL-6、IFN-γ水平均高于对照组[IL-4:(142.4±24.7)pg/ml vs.(73.2±13.0)pg/ml,t=25.159、P<0.001;IL-6:(56.4±10.3)pg/ml vs.(11.2±2.3)pg/ml,t=43.399、P<0.001;IFN-γ:(90.2±16.3)pg/ml vs.(41.8±6.8)pg/ml,t=27.857、P<0.001]。研究组中重症组患儿BALF中IL-4、IL-6、IFN-γ水平分别为(200.7±36.7)pg/ml、(103.3±16.8)pg/ml和(113.5±21.9)pg/ml,均显著高于轻症组[(125.9±22.4)pg/ml、(43.1±7.8)pg/ml和(83.6±14.1)pg/ml](IL-4:t=12.378、P<0.001,IL-6:t=25.010、P<0.001,IFN-γ:t=8.035、P<0.001),差异有统计学意义。研究组中肺功能正常组患儿BALF中IL-4、IL-6和IFN-γ水平分别为(81.6±15.5)pg/ml、(20.4±4.2)pg/ml和(74.7±11.9)pg/ml,轻度损伤者分别为(102.5±19.9)pg/ml、(48.9±8.2)pg/ml和(89.2±11.1)pg/ml,中度损伤者分别为(145.7±25.2)pg/ml、(60.2±10.2)pg/ml和(95.4±12.8)pg/ml,重度损伤者分别为(273.7±42.1)pg/ml、(106.9±17.6)pg/ml和(103.2±13.2)pg/ml。肺功能轻度、中度、重度损伤组患儿BALF中IL-4、IL-6和IFN-γ水平均高于肺功能正常组(P均<0.05),肺功能中度、重度损伤组患儿以上指标水平均高于肺功能轻度损伤组(P均<0.05),肺功能重度损伤患儿均高于肺功能中度损伤者(IL-4:t=13.581、P<0.001,IL-6:t=11.956、P<0.001,IFN-γ:t=2.117、P=0.039),差异均有统计学意义。研究组患儿BALF中IL-4、IL-6、IFN-γ水平与1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、呼气流量峰值(PEF)均呈负相关(IL-4与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、PEF相关性:r=-0.834、P=0.025,r=-0.810、P=0.009,r=-0.901、P=0.002;IL-6与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、PEF:r=-0.816、P=0.003,r=-0.795、P=0.012,r=-0.743、P=0.007;IFN-γ与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、PEF:r=-0.756、P=0.012,r=-0.738、P=0.010,r=-0.725、P=0.017)。结论:MPP患儿BALF中IL-4、IL-6和IFN-γ水平均偏高,且3个指标水平与病情、肺功能均有关。     

白介素4及CD40抗体作用下肾小管上皮细胞钙调神经磷酸酶活性及其与RANTES分泌的关系

目的观察小鼠肾小管上皮细胞(TEC)在白介素4(IL-4)及CD40激活状态下钙调神经磷酸酶(CaN)活性,并进一步探讨其与趋化因子RANTES分泌的关系。方法取Ⅱ级6～7周的雌性DBA小鼠,分离肾小管上皮细胞进行培养、刺激。采用RT-PCR检测RANTESmRNA表达;ELISA检测培养上清中RANTES含量;流式细胞仪检测CD40表达。结果(1)常规培养TEC可表达一定量的CD40;用IL-4刺激TEC24h,细胞表面CD40平均荧光强度(MFI)显著高于对照组(7.92±0.56vs4.33±0.30,P<0.001)。(2)常规培养TEC中有一定量的CaN活化(8.98±0.56)nmol/mg.pro;用IL-4、CD40抗体(mAb)及IL-4 CD40mAb刺激细胞,3组CaN活性均显著高于对照组(P<0.05)。(3)常规培养TEC仅分泌极少量的RANTES;在IL-4刺激或CD40mAb激活后TECRANTES蛋白分泌增高,分别为(43.61±13.73)pg/ml和(73.77±4.28)pg/ml,显著高于对照组(14.78±2.20)pg/ml(P<0.001)。(4)常规培养TEC微量表达RANTESmRNA;用IL-4、CD40mAb及IL-4 CD40mAb刺激细胞24h,各刺激组RANTESmRNA表达显著高于对照组(P<0.05)。(5)在IL-4、CD40mAb及IL-4 CD40mAb刺激下,FK506对TEC分泌RANTES蛋白及mRNA有显著抑制作用(P均<0.05)。结论Th2细胞因子IL-4及CD40-CD40配体(CD40L)共刺激信号可通过活化TECCaN,调控RANTES基因表达及分泌、     

树突状细胞疫苗对胃癌术后患者外周血白细胞介素12水平及Th1/Th2平衡的影响

目的探讨胃癌患者术后应用树突状细胞(dendritic cells,DCs)疫苗治疗后机体免疫功能的变化.方法采用外周血单个核细胞及自体肿瘤抗原在体外制备DCs疫苗.采用临床随机对照研究将50例胃癌患者分为2组,常规治疗组在胃癌术后予以化疗,疫苗治疗组术后化疗2周后开始进行DCs疫苗皮下注射,共注射4次.在治疗前后相应各时相点采取患者外周血检测白细胞介素12(IL-12)、IL-4及干扰素γ(IFN-γ)的水平.结果疫苗治疗组患者DCs注射前及注射后2周、4周和8周的外周血IL-12的水平分别为(37±4)pg/ml、(68±6)pg/ml、(96±12)pg/ml和(59±9)pg/ml;IFN-γ的水平分别为(61±12)pg/ml、(134±19)pg/ml、(145±20)pg/ml和(111±15)pg/ml;IL-4的水平分别为(55±7)pg/ml、(49±6)pg/ml、(46±5)pg/ml和(50±8)pg/ml.而常规治疗组患者外周血IL-12、IFN-γ及IL-4的水平分别为(39±7)pg/ml、(45±9)pg/ml、(44±10)pg/ml、(44±6)pg/ml;(63±10)pg/ml、(61±13)pg/ml、(62±11)pg/ml、(61±7)pg/ml;(52±11)pg/ml、(55±9)pg/ml、(53±10)pg/ml、(55±8)pg/ml.疫苗治疗组患者外周血IL-12及IFN-γ水平在疫苗治疗后明显提高,与同期正常对照组相比差异有显著意义(P<0.05).结论 DCs疫苗可提高胃癌患者术后外周血IL-12的水平,并促进 T 细胞向Th1方向发展,临床应用无明显不良反应.     

大鼠肝移植排斥反应时γ干扰素及白细胞介素10的表达及意义

目的 探讨大鼠肝移植排斥反应时γ干扰素(IFN-γ)及白细胞介素10(IL-10)的表达及意义.方法 采用改良的Kamada"二袖套法"制备大鼠原位肝移植模型,同系移植组供、受者均为SD大鼠;同种异体移植组的供者为Wistar大鼠,受者为SD大鼠;另设假手术组.术后7 d处死动物,观察移植肝脏的组织学变化,检测血清IFN-γ和IL-10的含量,以及移植肝脏内IFN-γ和IL-10 mRNA的表达.结果 同种异体移植组移植肝脏有较多坏死肝细胞,汇管区及中央静脉周围可见以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润,胆管上皮细胞可见胞浆空泡变性、核固缩或碎裂,整个肝小叶结构紊乱.同系移植组肝脏组织结构仅有轻度缺血再灌注损伤表现,汇管区有较少炎症细胞浸润,胆管上皮细胞结构和肝小叶结构基本正常.同种异体移植组血清IFN-γ为(386.7±14.4)Pg/ml,明显高于同系移植组的(159.8±16.5)pg/ml(P<0.05);同种异体移植组血清IL-10为(126.3±13.1)pg/ml,明显低于同系移植组的(288.3±17.1)pg/ml(P<0.05).同种异体移植组移植肝组织内IF-γ mRNA表达水平明显高于同系移植组(P<0.05),而IL-10 rnRNA表达水平明显低于同系移植组(P<0.05).结论 大鼠肝移植排斥反应时IFN-γ表达明显升高,IL-10表达明显降低;T_H1/T_H2型细胞因子的动态平衡可能在大鼠肝移植排斥反应中起着重要作用.     

体外转染小鼠白细胞介素12基因抑制膀胱癌EJ细胞的实验研究

目的将含有小鼠白细胞介素12（mIL-12）全长基因的质粒转染到膀胱癌EJ细胞中,观察脾细胞对转染mIL-12膀胱癌细胞的杀伤作用。方法用脂质体转染法将含有mIL-12全长基因质粒转染到EJ细胞中,ELISA法检测IL-12表达水平。在脾细胞作用0～2 d时ELISA法连续检测上清干扰素γ（INF-γ）水平变化。转染后40 h加入制备好的小鼠脾细胞悬液约1×10^6作用24 h后,MTT法检测对膀胱癌细胞的抑制率。结果转染后40、60 h检测到IL-12的高表达（375±15） pg／ml和（400±50）pg／ml,较未转染组9～15 pg／ml明显增高;在EJ细胞表面可以检测到IL-12的表达,而对照组则无;加入脾细胞悬液1 d后,脾细胞加转染后的EJ细胞组的抑制率为58．7％（P〈 0．025）,而脾细胞加未转染EJ细胞组、单纯EJ细胞组以及转染的EJ细胞组差异无统计学意义（P〉 0．05）。脾细胞加入转染后EJ细胞上清24 h的。INF-γ为（155±21）pg／ml,与未转染组（65±8）pg／ml比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论体外转染mIL-12基因到膀胱癌EJ细胞中能够表达IL-12,在小鼠脾细胞存在的条件下,通过一系列的免疫调节作用,诱导T细胞、NK细胞等产生INF-γ等细胞因子从而杀伤膀胱癌细胞。     

休克期切痂对烫伤大鼠外周血淋巴细胞凋亡及单核细胞抗原呈递功能的影响

目的观察不同时相点切痂对烫伤大鼠外周血淋巴细胞凋亡及单核细胞抗原呈递功能的影响。方法将136只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(8只)、单纯烫伤组(64只)、休克期切痂组(40只)、非休克期切痂组(24只)。对照组不作烫伤处理;其他组均造成30％TBSAⅢ度烫伤,其中后两组分别于伤后36、120 h行切痂植皮术。单纯烫伤组分别于伤后6、12、24、72、120、168、216、288 h处死;两个切痂组分别于伤后72～288 h、168～288 h(时间间隔同上)处死,留取血液标本检测淋巴细胞凋亡率、单核细胞主要组织相容性抗原(MHC)Ⅱ类分子阳性表达率、干扰素(IFN)γ及白细胞介素(IL)4浓度的变化,并行相关性分析。结果伤后6 h开始,单纯烫伤组淋巴细胞凋亡率迅速升高,24 h达峰值(18．19±1．42)％,之后迅速回落,于伤后72 h降至低谷(8．25±0．56)％,随着时间延长又逐渐升高,288 h时(17．81±1．99)％接近峰值,均明显高于对照组(P<0．05);伤后168～288 h两个切痂组淋巴细胞凋亡率明显低于单纯烫伤组(P<0．01)。单纯烫伤组伤后6 h单核细胞MHC-Ⅱ类分子阳性表达率急剧下降,伤后24 h已低于对照组[(37．2±2．4)％]的20％,之后逐渐升高,伤后288 h为(18．8±2．8)％,明显低于两个切痂组(P<0．01)。伤后6 h开始,单纯烫伤组血浆IFN-γ浓度迅速上升,24 h时达峰值(440．8±25．1)ng／L,之后逐渐回落,288 h降至低谷(51．3±37．0)ng／L;而IL-4水平则呈线性上升,于伤后288 h达峰值(78．1±2．8)ng／L;伤后72～288 h单纯烫伤组单核细胞MHC-Ⅱ类分子阳性表达率与休克期切痂组IFN-γ／IL-4比值呈明显的负相关(r= -0．96,P<0．05)。结论大鼠烫伤后切痂能明显抑制淋巴细胞凋亡,减缓IFN-γ／IL-4倒置的趋势,改善单核细胞抗原呈递功能。其中在单核细胞免疫功能恢复方面,休克期切痂较非休克期切痂效果显著。     

海水浸泡对烫伤大鼠创面炎性反应与愈合的影响

目的观察海水浸泡对烫伤大鼠创面炎性反应及愈合的影响。方法将144只雄性Wistar大鼠随机分为烫伤对照组和海水浸泡组,每组72只,均造成背部10%TBSA浅Ⅱ度烫伤。海水浸泡组大鼠伤后固定四肢,立即用盛海水的方盆浸泡双前肢以下部分,持续4h；烫伤对照组大鼠则用空方盆模拟浸泡过程。于伤后0(即刻,下同)、6、12、24h采用电解质分析仪测定血清中K~+、Na~+、Cl~-的浓度。于伤前及伤后0、6、12h采用酶联免疫吸附测定法检测血清中肿瘤坏死因子(TNF)α及白细胞介索(IL)6的含量。对两组大鼠创面行大体和组织病理学观察,并记录创面愈合时间。结果海水浸泡组大鼠血清中K~+、Na~+、Cl~-的浓度大多高于烫伤对照组。伤后6h海水浸泡组大鼠血清TNF-α、IL-6含量分别为(140±22)、(160±41)ng/L,均明显高于伤前值(29±15)、(62±17)ng/L及烫伤对照组(120±12)、(124±22)ng/L(P＜0．05)。与烫伤对照组比较,海水浸泡组大鼠创面水肿及局部组织炎性反应加重,创面再上皮化和表皮各层的分化延迟；海水浸泡组创面愈合时间为(16．3±1．6)d,明显迟于烫伤对照组(14．1±1．8)d(P＜0．05)。结论大鼠烫伤后经海水浸泡,可加重创面炎性反应,使创面愈合延迟。     

大黄对烫伤大鼠胃肠激素变化的影响

目的 了解严重烫伤大鼠早期血浆巾胃肠激素的变化及大黄对胃肠激素水平的影响.方法 88只Wistar大鼠随机分为正常对照组(8只)、烫伤对照组(40只,Ⅲ度烫伤后管饲蒸馏水)、烫伤治疗组(40只,Ⅲ度烫伤后管饲大黄水提液).于烫伤后6、12、24、48、72 h取大鼠腹腔静脉血,用放射免疫法检测血浆胃动素(MTL)、P物质、血管活性肽(VIP)、生长抑素(ss)的含量. 结果 (1)正常对照组大鼠MTL和P物质分别为(198±28)、(61±10)ng/L;烫伤对照组明显下降,最低值分别为(110±15)、(30±5)ng/L,而后缓慢上升,72 h达高峰,但仍未恢复正常(P<0.05);烫伤治疗组MTL和P物质下降趋势明显变缓,各时相点均高于烫伤对照组,伤后48 h已达正常水平,72 h分别为(232±32)、(73±11)ng/L,明显高于正常对照组(P<0.05).(2)止常对照组大鼠VIP和SS分别为(35±6)、(30±5)ng/L;烫伤对照组旱明显上升趋势,伤后6 h分别为(70±12)、(49±9)ng/L(P<0.01),而后缓慢下降但72 h时仍高于正常水平(P<0.05);烫伤治疗组VIP和SS上升趋势幅度较小,各时相点均低于烫伤对照组,48 h恢复至正常水平;VIP达最高值的时间推迟至伤后12 h. 结论 大黄对严重烫伤大鼠早期血浆中胃肠激素的分泌和释放有明显的调控作用.     

烫伤大鼠脾脏高迁移率族蛋白B1表达对调节性T淋巴细胞免疫功能的影响

目的 探讨严重烫伤大鼠延迟复苏后脾脏高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达对调节性T淋巴细胞(Treg)表型及其介导T淋巴细胞免疫功能的影响.方法 将104只Wistar大鼠按随机对照表法分为正常对照组8只、假烫组32只、烫伤组32只、丙酮酸乙酯(EP)治疗组32只.后2组大鼠造成30%TBSAⅢ度烫伤,伤后6 h腹腔注射林格液或EP液延迟抗休克,伤后12 h起每隔12 h给予4 mL林格液或EP液至伤后48 h;假烫组除于37℃模拟烫伤外其余处理同烫伤组.于伤后1、3、5、7 d处死各致伤组大鼠,另处死正常对照组大鼠,免疫磁珠法分离大鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg,ELISA法检测脾脏HMGBI含量及T淋巴细胞上清液中IL-2水平,采用流式细胞仪检测Treg表面分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)表达,同时检测T淋巴细胞增殖活性(数据以吸光度值表示).对数据进行多组间方差分析和2组独立样本间的t检验.结果 (1)烫伤组大鼠脾脏HMGBI含量伤后1～7 d显著高于假烫组,其中第1天达峰值[(46.7±8.3)ng/mg蛋白];EP治疗组大鼠脾脏HMGBI含量伤后1～7 d明显低于烫伤组.(2)与假烫组比较,烫伤组大鼠伤后1～5 d CTLA-4表达明显增强(t值分别为10.459、12.051、4.029,P<0.05或P<0.01);EP治疗组伤后1～7 d CTLA-4表达较烫伤组显著降低(t值分别为2.796、9.913、9.581、10.022,P<0.05或P<0.01).(3)与假烫组比较,烫伤组大鼠伤后1～7 d脾脏T淋巴细胞增殖活性明显受抑,其中伤后1 d达低谷(0.167±0.059);IL-2水平伤后1～7 d显著下降,其中伤后5 d达低谷(44±24)pg/mL.与烫伤组比较,EP治疗组伤后各时相点脾脏T淋巴细胞增殖受抑状态明显缓解,且IL-2水平明显上升.结论 严重烫伤后HMGB1产生可诱导Treg向成熟发展,从而介导T淋巴细胞增殖反应低下,免疫功能抑制.EP通过抑制HMGB1的合成与释放,改善烫伤延迟复苏大鼠的细胞免疫功能紊乱.     

Downregulation of glucocorticoid receptors of liver cytosols and the role of the inflammatory cytokines in pathological stress in scalded rats

Preliminary experiments indicated that target cells were resistant to glucocorticoid (GC) after pathological stress. This study was designed to investigate the alterations in plasma corticosterone level and GC receptor (GR) of liver cytosols, to assess the relative inflammatory cytokines contribution to GC resistant, and to observe the action of alpha-melanocyte-stimulating hormone (alpha-MSH) on the potential implications of glucocorticord regulatory effects in burned rats. Male Wistar rats (weight range, 180-200g) received a 35% total body surface area immersion scald and were randomly divided to receive either tumor necrosis factor alpha (TNFalpha), interleukin-1beta (IL-1beta), polyclonal antibody (pAb), alpha-MSH, Ac-D-Lys-L-Pro-D-Val (KPV peptide), or saline (control).The binding capacity (Rt) of the steroid-binding sites was measured by radioligand binding assay, using [3H]dexamethasone as the ligand. We examined plasma levels of IL-1beta, TNFalpha, IL-10, and corticosterone following scald challenge in rats. The Rt of GR (208.45+/-30.78fmol/mg of protein) in hepatic cytosol in rats, 12h later the scald was significantly lower than that (306.71+/-27.96fmol/mg of protein) of the control group (P<0.01). The injections of anti-rat TNFalpha (257.80+/-12.82fmol/mg of protein), IL-1beta antibody (254.46+/-21.21fmol/mg of protein), alpha-melanocyte-stimulating hormone (278.32+/-7.76fmol/mg of protein) and KPV peptide (263.46+/-17.46fmol/mg of protein) might prevent the Rt of GR from decreasing in hepatic cytosols of rats with scald, respectively (all of P<0.05) in vivo. Scald-induced robust increases in plasma IL-1beta (214.08+/-27.25pg/ml), TNFalpha (111.18+/-23.97pg/ml), IL-10 (177.50+/-15.79pg/ml) and corticosterone (2680+/-443.23ng/ml) levels after 12h. The administration of TNFalpha, IL-1beta pAb, alpha-MSH and KPV might attenuate these increases. These studies suggest that pro-inflammatory cytokines are involved in downregulation of GRs and thus alpha-MSH and KPV might increase the level of GR in rats with immersion scald.     

早期应用冬眠合剂对严重烫伤大鼠小肠的保护作用

目的 了解早期应用冬眠合剂对严重烫伤大鼠小肠的保护作用.方法 将66只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假伤组6只、烫伤组30只、烫伤+冬眠合剂组30只.麻醉后,将后2组大鼠造成30%TBSAⅢ度烫伤,假伤组37℃水浴模拟烫伤.3组大鼠伤后均立即腹腔注射乳酸钠林格液(2 mL·kg-1·%TBSA-1)复苏;同时烫伤+冬眠合剂组皮下注射冬眠合剂(50 mg/mL哌替啶、25 mg/mL氯丙嗪、25 mg/mL异丙嗪各1 mL加入125 mL生理盐水中)12 mL/kg,假伤组和烫伤组注射生理盐水12 mL/kg.分别于伤后3、6、12、24、48 h取烫伤组与烫伤+冬眠合剂组大鼠各6只(假伤组伤后3 h取材),采集血液和小肠组织标本.观察烫伤组与烫伤+冬眠合剂组大鼠伤后24 h、假伤组伤后3 h小肠组织病理变化,并用免疫组织化学法检测小肠组织胞间黏附分子1(ICAM-1)和CD68的表达.采用ELISA法测定各组大鼠血浆D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)、IL-1β、TNF-α、IL-10水平.数据行单因素方差分析.结果 (1)伤后24 h,烫伤组大鼠小肠黏膜轻度出血,炎症细胞浸润、上皮细胞脱落;烫伤+冬眠合剂组较烫伤组肠绒毛排列规则,无明显充血、水肿表现.(2)烫伤组小肠ICAM-1和CD68阳性表达率分别为(1.69±0.27)%和(0.80±0.09)%,均显著高于假伤组的(0.77±0.10)%和(0.30±0.05)%(F值分别为77.303、66.933,P<0.05或P<0.01)与烫伤+冬眠合剂组的(0.53±0.09)%和(0.32±0.06)%(F值同前,P值均小于0.01).(3)烫伤+冬眠合剂组大鼠伤后12、24 h D-乳酸水平明显低于烫伤组(F值分别为20.936、19.854,P值均小于0.01).烫伤+冬眠合剂组DAO水平于伤后3、12 h显著低于烫伤组(F值分别为21.930、11.342,P值均小于0.05).(4)烫伤组各时相点IL-1β、TNF-α水平均明显高于假伤组(P值均小于0.01),烫伤+冬眠合剂组伤后6、12、24 h IL-1β、TNF-α水平均低于烫伤组(F值分别为96.517、17.365、79.715与21.328、17.682、28.424,P<0.05或P<0.01);烫伤+冬眠合剂组各时相点IL-10水平均高于烫伤组,并在6、24 h时差异具有统计学意义(F值分别为8.668、19.634,P<0.05或P<0.01).结论 早期应用冬眠合剂可减轻严重烫伤大鼠小肠黏膜水肿和损害,该机制可能与其降低肠道ICAM-1的表达和血液炎症介质水平、减少肠道局部炎症细胞数量有关.     

胰岛素对烫伤大鼠肝脏氧自由基损伤的保护作用

目的 了解大鼠严重烫伤后早期应用胰岛素对肝脏氧自由基损伤的保护作用.方法 雄性SD大鼠84只,随机分为正常组、盐水组、胰岛素组,每组各28只.后2组大鼠在背部造成30%TBSAⅢ度烫伤,伤后立即腹腔注射等渗盐水40 ml/kg或皮下注射胰岛素3 U/kg.伤后6、12、24、48 h,检测盐水组和胰岛素组大鼠肝脏总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)及血清丙氨酸转氨酶(ALT)含量,同时检测肝脏胞间黏附分子1(ICAM-1),光学显微镜下观察肝细胞形态学改变.正常组大鼠亦作相应检测.结果 与正常组比较,盐水组大鼠伤后6 h肝脏T-AOC、SOD明显降低,ROS明显升高(P＜0.05或P＜0.01);伤后12～48 h血清ALT及ICAM-1均高于正常组(P＜0.01).伤后24 h,胰岛素组大鼠肝脏T-AOC、SOD分别为(386±75)、(210±39)U/g,较盐水组(124±18)、(111±9)U/g明显升高(P＜0.01);ROS为(154±29)U/g,较盐水组(351±41)U/g明显降低(P＜0.01).伤后48 h,胰岛素组大鼠血清ALT及肝脏ICAM-1与盐水组比较呈下降趋势(P＜0.01).组织病理学结果显示,胰岛素可减轻烫伤后肝细胞损伤程度.结论 严重烫伤后早期用胰岛素干预,可增强大鼠肝脏抗氧化损伤能力,对肝脏有保护作用.     

内毒素/脂多糖对烫伤大鼠休克期肝脏脂肪代谢的影响

目的观察内毒素/脂多糖(LPS)对烫伤大鼠休克期肝脏脂肪代谢的影响。方法采用30%TBSAⅢ度烫伤大鼠模型,随机分为单纯烫伤组(烫伤组)和烫伤后LPS攻击组(攻击组),另设假烫对照组(对照组),每组20只。攻击组大鼠于烫伤后2h腹腔注射LPS,3.0mg/kg.伤后24、48h分别检测3组大鼠血浆LPS、肿瘤坏死因子(TNF)α、游离脂肪酸(FFA)含量和肝组织内腺苷三磷酸(ATP)、甘油三酯(TG)及丙二醛(MDA)含量,并进行肝组织形态学观察。结果对照组大鼠假烫后24、48h,血浆FFA水平分别为(0.4±0.3)、(0.5±0.3)mmol/L,烫伤组分别为(0.9±0.3)、(1.2±0.5)mmol/L,攻击组大鼠伤后增加至(2.3±0.3)、(2.5±0.4)mmol/L,后两组之间比较差异有统计学意义(P<0.01).伤后48h,烫伤组和攻击组的肝组织TG含量分别为(242±27)mmol/g和(530±30)mmol/g,ATP含量分别为(6.0±2.4)μmol/g和(1.7±0.5)μmol/g,组间比较差异有统计学意义(P<0.01).组织形态学检查见,烫伤组大鼠肝细胞脂肪变性和线粒体损伤程度明显轻于攻击组,对照组肝细胞形态正常。结论烧伤后早期LPS打击可引发脂源性能量利用障碍,并加剧肝脏脂肪变性。