中国人食管鳞癌10q23微卫星不稳定和杂合性缺失初步探讨

食管癌是较常见的恶性肿瘤之一,早期诊断和积极治疗十分重要.食管癌在癌变发展的不同阶段均有原癌基因的激活和抑癌基因的失活.近年主要集中于研究癌基因c-myc、c-erbB-2、cyclin D1及抑癌基因Rb、p53、p16、APC/MCC等,但尚未发现与食管癌高度相关的特征性基因[1].     

p53突变与食管癌发生、预后的研究进展

食管癌是我国最常见的癌症之一,五年生存率低于30％^[1],其发生和发展的确切机制仍未阐明。已有研究探讨了食管癌中癌基因和抑癌基因的改变^[2]。p53基因是最重要的抑癌基因之一,也是各种人类肿瘤包括食管癌中最常见有突变的基因之一。野生型p53具有抗细胞增生的功能,p53基因突变可损害其DNA结合性和转录因子功能,使其控制细胞周期和细胞增殖的正常功能受到抑制。     

p73基因在食管癌中的转录表达及其意义

目的：检测p73 mRNA在食管癌中的表达情况，探讨p73基因在食管癌发生、发展中的角色和作用机制。方法：采用逆转录多聚酶链反应技术（RT－PCR）检测37例食管鳞状细胞癌肿瘤组织、癌旁组织、区域淋巴结和相应正常食管组织中p73 mRNA的转录表达，并探其与食管癌临床病理特性的关系。结果：37例食管肿瘤组织中有21例（15．8％）p73 mRNA过度表达，其过度表达率显著高于相应的癌旁组织、区域淋巴结和正常组织（P＜0．05），但与食管癌TNM分期、细胞分化程度和病理类型均无明显关系（P＞0．05）。结论：食管肿瘤组织中存在p73基因的过度转录表达，可能参与了调控食管癌的发生过程，它的存在并没有阻止食管癌的进展，在食管癌中可能没有担当起主要的抑癌作用。     

p53在食管癌中的研究进展

食管癌的发生、发展是多因素、多步骤相互作用的复杂过程。目前研究表明 p53基因是最为广泛的肿瘤抑癌基因之一，在人类癌症中约有一半是由于该基因发生突变失活而造成的。由于 p53基因突变、细胞调控异常，可能导致肿瘤的形成。近年来研究证实：食管鳞癌中普遍存在着 p53的突变，因此把 p53基因作为食管癌的中介生物标志物。p53基因在食管鳞癌的发生、发展中扮演着重要的角色。本文就近年来 p53基因在食管癌发生、发展方面的研究进展作如下综述。     

Livin蛋白在食管癌中的表达及与p53蛋白相关性研究

目的：探讨凋亡抑制蛋白Livin在食管癌组织中的表达及其与p53蛋白之间的关系。方法：采用免疫组织化学S-P法检测Livin蛋白和p53蛋白在食管癌组织和癌旁正常食管组织中的表达情况。结果：Livin在食管癌组织中的表达明显高于癌旁正常食管组织（P〈0.01）。Livin表达与癌组织浸润深度和淋巴结转移呈正相关（P〈0.05）,而与癌组织分化程度无关（P〉0.05）。p53在食管癌组织中表达明显高于癌旁正常食管组织（P〈0.01）。在食管癌组织中Livin与p53表达无关（P〉0.05）。结论：Livin在食管癌组织中异常表达,有望成为食管癌诊断和基因治疗的新靶点。抑癌基因p53的失活与凋亡抑制基因Livin在食管癌的发生方面无相互促进作用。     

Livin蛋白在食管癌中的表达及与p53蛋白相关性研究

目的:探讨凋亡抑制蛋白Livin在食管癌组织中的表达及其与p53蛋白之间的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法检测Livin蛋白和p53蛋白在食管癌组织和癌旁正常食管组织中的表达情况。结果:Livin在食管癌组织中的表达明显高于癌旁正常食管组织(P<0.01)。Livin表达与癌组织浸润深度和淋巴结转移呈正相关(P<0.05),而与癌组织分化程度无关(P>0.05)。p53在食管癌组织中表达明显高于癌旁正常食管组织(P<0.01)。在食管癌组织中Livin与p53表达无关(P>0.05)。结论:Livin在食管癌组织中异常表达,有望成为食管癌诊断和基因治疗的新靶点。抑癌基因p53的失活与凋亡抑制基因Livin在食管癌的发生方面无相互促进作用。     

p53 、MDR 基因在食管癌及癌旁组织中表达的分析

 目的 探讨食管癌和癌旁组织中p53、MDR基因的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化ABC法及逆转录酶-聚合酶链反应的方法，对50例食管癌和37例癌旁组织中p53、MDR基因的表达情况进行检测。结果 p53基因蛋白在食管癌中有显著表达为68％（34／50），癌旁组织中有表达为59％（22／37）；其中在癌旁正常组织中占54％（13／24），在癌旁非典型增生中占69％（9／13）。MDR基因在食管癌高、中、低分化中的表达水平有极显著意义，癌与正常组织有极显著意义。在不同年龄、性别、肿瘤大小上p53、MDR基因的表达无显著意义。结论 p53、MDR基因在食管癌中均呈高水平表达，癌旁组织中MDR有表达，p53基因突变早于组织形态学改变。     

p53基因在人食管诱发癌中的突变

目的：了解抑癌基因p53在人食管癌及其癌旁组织中的突变和致癌作用。方法：采用PCR-SSCP和DNA序列分析等方法对24例人食管鳞状细胞癌术后标本和21例移植到重度完全性免疫缺陷(severe：comlbined immunocleficient，SCID)小鼠并用或不用N-戊基-N-甲基亚硝基胺(N-amyrl-N-methylnitrosamine，AMN)处理的人食管正常组织标本，进行了p53基因外显子4～8的突变研究分析。结果：在食管癌组织及癌旁组织均检测出p53基因突变，其中食管癌组织标本中有18个突变，癌旁组织标本中有10个(10／17，58．8％)突变，主要的突变为G-A转换。在14例用AMN处理的人食管正常组织标本中出现6个(42．9％)突变；其中密码子283的突变为G-A转换。在人食管癌及其癌旁组织中p53基因的突变概率差异无统计学意义。结论：环境因素或内源性AMN可能是河南林县食管癌高发的主要原因之一。     

食管鳞癌中p16基因启动子区甲基化及其表达

 目的探讨食管鳞癌（ESCC）p16基因甲基化的状况及其表达与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。方法采用甲基化特异性PCR方法（MSP）分别检测75例食管癌组织、癌旁组织和切缘组织p16基因启动子区域CpG岛甲基化状态。采用Envision免疫组化法检测食管癌组织及癌旁组织的p16蛋白的表达。结果75例标本中，食管癌组织、癌旁组织和切缘细织p16基因甲基化率分别为41．3％（31／75）、13．3％（10／75）和6．67％（5／75）。癌组织和癌旁组织P16蛋白的阳性表达率分别为29．3％（22／75）和56．7％0（17／30）。31例癌组织p16基因甲基化阳性标本中有2例（6．4％）检测到P16蛋白的表达，而44例癌组织p16基因甲基化阴性标本中有20例（45．5％）检测到P16蛋白的表达。食管癌组织p16基因甲基化率显著高于癌旁组织和切缘组织（P〈0.01），P16蛋白表达与p16基因甲基化呈负相关。p16基因启动子区甲基化与食管癌的组织学分级、肿瘤部位无明显相关，与临床分期、淋巴转移密切相关。结论p16基因甲基化在食管癌发生发展中起着重要作用，食管鳞癌的分期和淋巴结转移与p16基因甲基化之间有密切关系。     

食管癌及癌旁组织中p53、MDR基因表达的临床意义

目的 探讨食管癌和癌旁组织p53,MDR基因的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化，ABC法及逆转录酶-聚合酶链反应的方法，对50例食管癌和37例癌旁组织中p53,MDR基因的表达情况进行检测。结果 p53基因蛋白在食管癌中表达为68%（34/50），癌旁组织中表达59%（22/37），其中在正常组织中占54%（13/24），在非典型增生中占69%（9/13），MDR基因在食管癌高，中，低分化中的表达水平有极显著意义。癌与正常组织有极显著意义，在不同年龄，性别，肿瘤大小上p53,MDR基因的表达无显著意义。结论 p53,MDR基因在食管癌中均呈高水平表达，癌旁组织中MDR有表达，p53基因突变早于组织形态学改变。     

p53基因第72位密码子突变与食管鳞癌临床病理特征关系的研究

目的研究p53基因第72位密码子（p53 codon72）突变与人食管鳞癌临床病理特征的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度（PCR-RFLP）方法检测118例人食管鳞癌组织及癌旁正常食管黏膜组织的p53 codon72的突变及其差异，并分析其与食管鳞癌临床病理特征的关系。结果p53 codon72的Arg／Arg和Pro／Pro或Arg基因型在癌组织和癌旁正常食管黏膜组织的频率分别为11．0％和38．1％、4．2％和7.60A。p53 codon72Arg／Pro基因型在癌组织和癌旁正常食管黏膜组织分布差异具有显著性（χ^2=55.75，P〈0.01），p53 codon72突变与p53蛋白表达有关（χ^2=15．21，P〈0．01）；且p53 codon72的Pro等位基因与食管癌的TNM分期、分化程度和淋巴结转移均呈显著相关（P〈0．01）。结论抑癌基因p53第72位密码子突变在食管癌发生、发展中可能起重要作用。     

食管癌中p33ING 1p53蛋白的表达及临床意义

目的:探讨p33ING1、p53基因蛋白在食管癌中表达的临床意义及其相互关系.方法:采用免疫组织化学S-P法检测65例食管鳞状细胞癌组织中p33INGI(inhibitor of growth,ING1)、p53基因蛋白的表达.结果:食管癌中p33ING1蛋白阳性表达率为64.62%,食管癌中p33ING1表达与肿瘤的浸润、淋巴结的转移及分化有关;p53在食管癌中表达率为61.54%,食管癌中p53表达与肿瘤的浸润、淋巴结的转移及分化有关.p33ING1和p53在食管癌中表达呈负相关.结论:p33ING1是抑癌基因,在食管癌的发生、发展中可能起重要作用.p331NG1与野生型p53基因相互协同、相互依赖,抑制细胞生长,促进凋亡.检测食管癌患者p33ING1的水平,对p53介导的基因治疗有重要意义.     

食管癌化疗敏感相关基因及蛋白

随着食管癌发生、发展过程中分子生物学机制研究的不断深入,与食管癌化疗相关的基因、蛋白,如表皮生长因子受体(EGFR)、抑癌基因p53、剪切修复耦联因子1(ERCC1)、多药耐药相关蛋白(MRP)、P-糖蛋白(P-gp)等的研究取得了较大进展.检测这些基因和蛋白将有利于预测食管癌化疗敏感性并制定合理的个体化治疗方案.     

食管癌相关基因的研究进展

食管癌系我国高发癌症之一，严重威胁着人们的生命与健康。分子生物学的研究成果已充分表明，人体癌症的发生是由癌基因，生长因子及其受体的活化以及抑癌基因的失活或丢失之故。从而提出癌症的发生是一种基因异常变化的疾患。癌基因和抑癌基因已成为肿瘤遗传学和分于遗传学的热点，目前已发现100多种癌基因和数十种抑癌基因。科学工作者对食管癌中的癌基因、抑癌基因进行了大量的研究，本文就研究较多的基因予以综述。癌基因ras基因是大鼠肉瘤中分离出来的癌基因。该基因簇由3个密切相关的基因组成，即H－＿，K－＿和N一，每个均编码一个…     

食管癌前细胞DNA含量及多基因表达的定量检测

目的 探讨食管癌高发区人群食管上皮癌变过程中的早期分子改变及早期癌变机理。方法 自食管癌高发区采集食管黏膜上皮细胞,碘化丙啶（propidium lodide,PI)染色进行DNA含量及倍体测定;对各基因蛋白进行间接免疫荧光标记,采用流式细胞仪（flow cytometry,FCM)进行定量检测。结果 DNA含量在癌形成时明显增高,二倍体细胞显著减少,而异倍体细胞明显增多,在癌细胞组异倍体率为84．2％;同时p53蛋白有明显积聚,而抑癌基因p16有明显缺失。在癌细胞组p53及cyclin D1蛋白表达的阳性率均为100％（5／5、6／6）。结论 在癌形成早期,DNA含量及异倍体率增加,癌基因cyclin D1表达增高,抑癌基因p16缺失及p53蛋白积聚。食管上皮癌形成时已有多个分子事件发生。     

抑癌基因p16INK4a与p53抑制白血病细胞株生长作用的比较

 目的 比较野生型p16INK4a、p53抑癌基因的表达对白血病细胞株K562和HL60的生长抑制。方法 采用脂质体介导野生型p16INK4a、p53抑癌基因转染K562、HL60细胞并进行G418筛选，免疫印渍检测p16INK4a、p53基因的表达，通过细胞生长曲线检测细胞活力，流式细胞仪进行细胞DNA周期分析及细胞凋亡分析，采用联苯胺氧化试验检测K562细胞的分化。结果 转染后p53、p16INK4a在K562及HL60细胞中表达；与对照细胞相比，实验组细胞生长受到明显的抑制，G1期细胞数增加，S期细胞减少。与p16INK4a相比，抑癌基因p53使细胞表达Annexin V增加，显示出更强的致凋亡现象，尤其在HL60细胞株。结论 抑癌基因p16INK4a、p53能有效抑制白血病细胞株的生长，可能更适合复发、难治性白血病的基因治疗。     

重组人p53腺病毒制品在肿瘤治疗中的研究进展

重组人p53腺病毒（Ad—p53）由正常人肿瘤抑癌基因p53和重构的Ⅴ型腺病毒基因重组而成。重组人p53腺病毒（Ad—p53）制品目前已经在临床上对头颈部肿瘤、肝癌、卵巢癌、食管癌、乳腺癌、软组织肉瘤等病种的治疗取得了突破性的进展,结合其他肿瘤治疗方式（如手术、放疗、化疗）对肿瘤治疗效果会更好。     

p53基因在人食管诱发癌中的突变

目的 :了解抑癌基因p5 3在人食管癌及其癌旁组织中的突变和致癌作用。方法 :采用PCR SSCP和DNA序列分析等方法对 2 4例人食管鳞状细胞癌术后标本和 2 1例移植到重度完全性免疫缺陷 (severecombinedimmunodefi cient,SCID)小鼠并用或不用N -戊基 -N -甲基亚硝基胺 (N amyl N methylnitrosamine ,AMN)处理的人食管正常组织标本 ,进行了p5 3基因外显子 4～ 8的突变研究分析。结果 :在食管癌组织及癌旁组织均检测出p5 3基因突变 ,其中食管癌组织标本中有 18个突变 ,癌旁组织标本中有 10个 ( 10 /17,5 8 8% )突变 ,主要的突变为G A转换。在 14例用AMN处理的人食管正常组织标本中出现 6个 ( 4 2 9% )突变 ;其中密码子 2 83的突变为G A转换。在人食管癌及其癌旁组织中p5 3基因的突变概率差异无统计学意义。结论 :环境因素或内源性AMN可能是河南林县食管癌高发的主要原因之一     

p73基因蛋白表达与肺癌临床病理学特征及预后关系的探讨

癌基因的激活和抑癌基因的失活导致了肿瘤的发生和发展,其中p53基因是迄今为止发现的与人类肿瘤相关性最高的抑癌基因,作为第一个被发现的p53基因家族的成员一p73基因,与p53基因共同组成了一个抑癌基因的家族.自1997年被发现以来,倍受研究者的关注.本研究采用免疫组织化学染色方法检测了65例肺癌组织、癌旁组织和正常肺组织中p73基因蛋白的表达,以探讨p73基因与肺癌发生、发展的关系.     

抑癌基因在鼻咽癌中研究进展

鼻咽癌（NPC）是一种多基因遗传性疾病,其发生发展涉及多个癌基因与抑癌基因的共同参与,这些癌基因的激活与抑癌基因的失活以及它们之间相互作用的失衡是鼻咽癌发生发展的分子基础。全文对抑癌基因p16、p53、nm23和PTEN在鼻咽癌中研究进展作一综述。