蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血SD大鼠AQP-4、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达影响随机平行对照研究

[目的]观测蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠AQP-4、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达影响。[方法]使用随机平行对照方法,45只SD大鼠常规饲料喂养3d,称重后随机数字表法分为5组,假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀低、中、高剂量组(简称"ZL低、中、高剂量组"),9只/组。按指标检测时间分为12h、48h、72h三个亚组,3只/组。自体尾部血注入法复制脑出血大鼠模型。灌胃干预:蛭龙活血通瘀胶囊按人体用量(3.6g/d)5倍、10倍、20倍定为低、中、高剂量。RT-PCR法检测AQP-4、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达。[结果]AQP-4 mRNA:假手术组有微量表达,12h、48h及72h表达无明显差异(P0.05);模型组及ZL低、中、高剂量组各时点均明显高于假手术组(P0.01);模型组呈进行性升高,72h最为显著;ZL各剂量组表达均低于模型组(P0.01);各时间点低、中剂量组均高于ZL高剂量组(P0.01)。MP-9 mRNA:假手术组有少量表达,术后12h、48h及72h表达无明显差异(P0.05);模型组及ZL低、中、高剂量组各时点均明显高于假手术组(P0.01);模型组术后48h上升明显并达到高峰,72h略有下降,ZL各剂量组均低于模型组(P0.01);ZL低、中剂量组在各时点均明显高于高剂量组(P0.01)。TIMP-1 mRNA:假手术组仅有微量表达,术后12h、48h及72h无明显差异(P0.05);模型组及ZL低、中、高剂量组各时点均明显高于假手术组(P0.01);模型组48h上升明显并达到高峰,72h略有下降;ZL各剂量组各时点均高于模型组(P0.01);ZL低、中剂量组各时点均明显高于高剂量组(P0.01)。[结论]蛭龙活血通瘀胶囊可明显降低脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9 mRNA,升高TIMP-1 mRNA,呈量效关系,ZL高剂量组作用最为明显。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血后脑水肿的影响

目的观察蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠脑出血后脑含水量、血脑屏障超微结构、血脑屏障通透性的影响。方法将195只大鼠随机分为假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀胶囊高、中、低剂量组,各组又分为12 h、48 h、72 h三个亚组,采用自体尾部血注入法制备脑出血大鼠模型,采用干湿重法检测脑含水量,伊文思蓝法对各组进行血脑屏障通透性检测,电子显微镜下观察血脑屏障超微结构的变化。结果与模型组比较,ZL低、中、高剂量组脑含水量均明显降低,差异具有统计学意义,低剂量组12h(P0.05),其余各时间点各药物组(P0.01);ZL低、中、高剂量组大鼠脑组织EB含量均有明显降低,差异具有统计学意义(P0.01)。ZL各剂量组之间比较,以高剂量组为对照,低、中剂量组在12h、48h及72h具有显著性差异(P0.01)。电镜超微结构观察发现血管周围水肿程度较为轻微,血脑屏障的结构得到明显改善。结论蛭龙活血通瘀胶囊能够明显减轻脑出血大鼠脑水肿,保护血脑屏障组织结构,避免其通透性破坏,改善血脑屏障功能,该作用存在一定的量效关系,ZL高剂量组作用最为明显。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠HIF-1α与Bcl-2蛋白表达的影响

目的:在不同时间点观察大鼠脑出血后Bcl-2和HIF-1α蛋白的表达情况及经蛭龙活血通瘀胶囊干预对其的影响,为蛭龙活血通瘀胶囊治疗脑出血提供参考。方法:将100只SD大鼠随机分为蛭龙活血通瘀胶囊高剂量组、蛭龙活血通瘀胶囊中剂量组、蛭龙活血通瘀胶囊低剂量组、模型组和假手术组各20只。采用自体血注入法制备脑出血大鼠模型,根据脑出血术后不同时间点,每组再继续分为术后6 h、1 d、3 d、7d 4个亚组,每亚组5只。术前1周开始灌胃,每天1次。蛭龙活血通瘀胶囊高剂量组、蛭龙活血通瘀胶囊中剂量组、蛭龙活血通瘀胶囊低剂量组予以等体积相应浓度的蛭龙活血通瘀胶囊灌胃,给药剂量分别为1.6 g·(kg·d)-1、0.8 g·(kg·d)-1、0.4 g·(kg·d)-1;模型组和假手术组均给予等体积的生理盐水灌胃。免疫组化法测定HIF-1α与Bcl-2蛋白的表达。结果:在相应时间点,蛭龙活血通瘀胶囊中剂量组、蛭龙活血通瘀胶囊高剂量组与蛭龙活血通瘀胶囊低剂量组比较,其HIF-1α与Bcl-2蛋白的表达均升高,差异有统计学意义(P0.05);在相应时间点与模型组比较,蛭龙活血高剂量组、蛭龙活血中剂量组、蛭龙活血低剂量组Bcl-2与HIF-1α蛋白的表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:蛭龙活血通瘀胶囊能明显促进HIF-1α与Bcl-2表达,HIF-1α与Bcl-2蛋白之间存在正相关性。在脑出血大鼠中,蛭龙活血通瘀胶囊可能有一定的脑保护作用,且存在量效关系。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠神经功能及脑水肿改善作用随机平行对照研究

[目的]观察蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠神经功能及脑水肿的改善作用。[方法]将120只大鼠随机分为假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀胶囊高、中、低剂量组,各组又分为12h、48h、72h三个亚组,采用自体尾部血注入法制备大鼠脑出血模型,各组进行神经行为学检测(NSS评分),HE染色光镜下观察脑组织形态学改变,检测脑组织含水量及脑系数。[结果]与模型组比较,蛭龙活血通瘀低剂量组术后72h,中剂量组术后48h、72h及高剂量组术后12h、48h、72h NSS评分具有显著差异(P0.01);蛭龙活血通瘀低、中、高剂量组脑含水量均明显降低,差异具有统计学意义,低剂量组12h(P0.05),其余各时间点各药物组(P0.01);在48h、72h时各药物组脑系数均具有显著性差异(P0.01)。[结论]蛭龙活血通瘀胶囊通过对脑出血大鼠脑水肿程度的改善起到明显的脑保护作用,该作用存在一定的量效关系,高剂量组的作用最为明显,脑保护的作用也最强。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠血清炎性因子的影响

目的:观察蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠脑组织病理形态及血清炎性因子的影响,探讨其防治脑出血的作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组、蛭龙活血通瘀组、盐酸法舒地尔组,每组10只。用大鼠脑立体定位仪将大鼠自体尾部血注入基底节区制备脑出血大鼠模型,药物干预3 d后,取大鼠脑组织行HE染色,在光学显微镜下观察血肿周围脑组织病理改变;经心脏采血,用ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)及白细胞介素6(IL-6)浓度水平。结果:①与假手术组比较,脑出血模型组血肿周围脑组织呈明显水肿,炎性细胞浸润及胶质细胞增生;与脑出血模型组比较,蛭龙活血通瘀组和盐酸法舒地尔组大鼠脑组织水肿程度明显减轻,病理形态得到明显改善;②与假手术组比较,脑出血模型组大鼠血清TNF-α、IL-1及IL-6浓度水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与脑出血模型组比较,蛭龙活血通瘀组、盐酸法舒地尔组大鼠血清TNF-α、IL-1及IL-6浓度水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);蛭龙活血通瘀组和盐酸法舒地尔组比较,差异无统计学意义(P&g...     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血后脑组织ROCK2、RhoA及p-MLC的影响

目的 观察蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠神经功能及脑组织ROCK2、Rho A、p-MLC表达的影响,探寻该药防治脑出血的作用机制。方法 将96只SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组、蛭龙活血通瘀组、盐酸法舒地尔组,各组又分为12 h、48 h、3 d、7 d四个亚组,取大鼠自体尾部血注入基底节区以制备脑出血模型,蛭龙活血通瘀组灌胃给药1. 2 g/(kg·d),盐酸法舒地尔组腹腔注射给药12 mg/(kg·d),假手术组、脑出血模型组灌胃生理盐水(3 ml/d)。在规定时点对各组大鼠进行NSS评分,采用蛋白质印迹试验(Western blot)检测脑组织ROCK2、p-MLC蛋白表达,实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)法检测大鼠脑组织ROCK-2、Rho A m RNA的水平。结果 与模型组比较,蛭龙活血通瘀组、盐酸法舒地尔组大鼠NSS评分在各时点均明显减少(P 0. 01),脑组织ROCK2、p-MLC蛋白表达在各时点均显著降低(P 0. 01),脑组织ROCK2、Rho A m RNA水平各时点均明显下降(P 0. 05)。结论 蛭龙活血通瘀胶囊可能通过抑制脑出血后脑内ROCK2、Rho A、p-MLC的表达,改善神经功能障碍,从而发挥脑保护作用。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠神经细胞凋亡与 Bax Bcl-2蛋白表达的作用研究

目的：通过观察大鼠脑出血后神经细胞凋亡与Bax、Bcl-2蛋白表达的动态变化及蛭龙活血通瘀胶囊的干预作用。探讨蛭龙活血通瘀胶囊可能的脑保护作用。方法：将大鼠随机分为假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀胶囊低、中、高剂量组。采用自体血注入法制备脑出血大鼠模型。采用TUNEL法测定凋亡细胞的表达,免疫组化法测定Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果：与模型组比较,蛭龙活血通瘀胶囊低、中、高剂量组的Bax蛋白及凋亡细胞表达明显下降,而Bcl-2蛋白的表达明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。与低剂量组比较,中、高剂量组各时间点的Bax蛋白及凋亡细胞表达均明显下降,而Bcl-2蛋白的表达明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：蛭龙活血通瘀胶囊能明显促进Bcl-2表达,抑带】Bax表达,减少细胞凋亡,对脑出血大鼠具有明显的脑保护作用,且存在一定量效关系。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠神经功能评分与脑水肿的影响

目的:探讨大鼠脑出血后神经功能缺损评分、血肿周围脑组织形态学和含水量的动态变化及蛭龙活血通瘀胶囊的干预作用.方法:将75只大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组(简称模型组)、蛭龙活血通瘀胶囊高剂量组(简称“高剂量组”)、蛭龙活血通瘀胶囊中剂量组(简称“中剂量组”)、蛭龙活血通瘀胶囊低剂量组(简称“低剂量组”)各15例.采用自体血注入法制备脑出血大鼠模型.采用Zea Longa5分制法进行神经功能缺损评分,在光镜下观察各组大鼠脑组织形态学改变,干湿重法测脑组织含水量.结果:蛭龙活血通瘀胶囊低、中、高剂量组较模型组神经功能缺损评分降低,神经细胞肿胀程度减轻.与模型组比较,低、中、高剂量组脑含水量均明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01).与低剂量组比较,中、高剂量组脑含水量均明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:蛭龙活血通瘀胶囊能明显减轻脑水肿,改善脑出血大鼠神经功能缺损症状,且存在一定量效关系.     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠神经细胞凋亡与HIF-lα PAR-l蛋白表达的作用研究

目的：通过观察大鼠脑出血后神经细胞凋亡与缺氧诱导因子-1仅（HIF-la）、蛋白酶激活受体-1（PAR-1）表达的动态变化及蛭龙活血通瘀胶囊的干预作用,探讨蛭龙活血通瘀胶囊可能的脑保护作用。方法：将大鼠随机分为假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀胶囊低、中、高剂量组。采用自体血注入法制备脑出血大鼠模型。采用TUNEL法测定凋亡细胞的表达,免疫组化法测定HIF-1仪、PAR-1蛋白的表达。结果：与模型组比较,蛭龙活血通瘀胶囊低、中、高剂量组的凋亡细胞与PAR-1蛋白表达明显下降,而HIF-10t蛋白的表达明显升高,差异有统计学意义（P〈O．01）。与低剂量组比较,中、高剂量组各时间点的凋亡细胞与PAR-l蛋白表达均明显下降,而HIF-1仪蛋白的表达明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：蛭龙活血通瘀胶囊能明显抑制PAR-l活化,促进HIF-lOt表达,抑制细胞凋亡,对脑出血大鼠具有明显的脑保护作用,且存在一定量效关系。     

活血利水法对大鼠缺血性脑水肿脑组织内AQP-1和AQP-9表达的影响

目的观察活血利水法对缺血性脑水肿大鼠脑组织内水通道蛋白-1（AQP-1）和水通道蛋白-9（AQP-9）表达变化的影响。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,随机分为假手术组、模型组、活血利水方低剂量组、活血利水方高剂量组和甘露醇联合川芎嗪组,分别给予相应的药物灌胃;分别于再灌注1、3、7d 3个时间点将大鼠麻醉后采用心脏灌流内固定法取脑,用免疫组化法测定AQP-1和AQP-9表达。结果模型组各时间点AQP-1和AQP-9表达均显著升高。各药物组AQP-1和AQP-9表达均显著降低,1d时甘露醇联合川芎嗪组作用效果最佳,7d时活血利水高剂量组作用效果最佳。结论活血利水法可通过减低脑组织AQP-1和AQP-9的表达来减轻脑水肿程度,抵抗脑缺血再灌注的损伤。     

电针对颅脑损伤大鼠脑组织中AQP-4表达的影响

目的:对大鼠颅脑损伤后,于不同时间点开始介入电针治疗,观察其脑组织中AQP-4的表达和右侧前后肢回缩力变化与电针介入时间的关系,探索电针治疗颅脑损伤的最佳时间窗。方法:选用70只SD大鼠,随机分为空白组、模型对照组、电针治疗组(电针1组,电针2组),使用e CCI仪器在大鼠颅脑左侧开颅打击制备TBI(traumatic brain injury)模型。取大鼠"百会、关元",右侧前肢"曲池、合谷",右侧后肢"足三里、涌泉",电针1组于造模后4 h介入电针治疗,电针2组于第8天介入电针治疗,每组治疗各7 d。(1)造模后8 d、15 d和22 d分别测试并评价大鼠右侧前后肢肢体回缩力。(2)造模后8 d和15 d取大鼠创伤脑组织,一部分进行HE染色及免疫荧光染色,观察脑组织形态结构及脑组织中AQP-4蛋白的表达;一部分采用实时荧光定量PCR技术检测AQP-4mRNA的表达。结果:造模后8 d、15 d和22 d三个时间点电针1组前后肢肢体回缩力比电针2组、模型组恢复的好,比空白组稍差。光镜下,空白组脑组织形态结构正常;电针治疗组比模型组好,电针1组比电针2组好。脑组织中AQP-4蛋白的含量以及mRNA的表达,空白组、模型组、电针治疗组各组比较均有统计学差异(P0.01),其中电针1组升高最明显。结论:电针治疗TBI早期介入效果更佳,其机制可能是通过提高脑组织中AQP-4的表达,减轻脑水肿,达到保护神经元的作用。     

清肺消炎丸对COPD大鼠肺组织MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的：观察清肺消炎丸对COPD大鼠肺组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达的影响。方法：将30只Wistar大鼠,随机分为3组,正常对照组、COPD模型组和清肺消炎丸组,除正常对照组外,采用烟熏及内窥镜下气管滴入内毒素方法制作COPD模型,造模成功后分别治疗7d,观察各组肺组织中MMP-9和TIMP-1表达变化。结果：模型组大鼠肺组织MMP-9和TIMP-1的表达与空白组相比明显增强（P〈0.05）,中药治疗组大鼠肺组织MMP-9和TIMP-1水平比模型组减低（P〈0.05）。结论：清肺消炎丸具有抑制COPD大鼠肺组织中MMP-9及TIMP-1的表达,改善MMP-9/TIMP-1比例失衡,从而防治该病气道重塑的作用。     

脑泰方对局灶性脑缺血大鼠血清MMP-9、PA及TIMP-1表达的影响

目的研究脑泰方治疗对局灶性脑缺血大鼠血清中基质金属蛋白酶9（MMP-9）,MMP-9前体纤溶酶原激活物（plasminogen activator,PA）及内源性抑制剂1（TIMP1）的作用。方法随机将SD大鼠分为假手术组、空白对照组、脑泰方低、中、高剂量组（3,9,27g/kg）,marimastat（BB-2516）组（6.25mg/kg）ig。各组大鼠预处理ig给药连续3d,每日1次,后采用大脑中动脉栓塞法（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）行大鼠局灶性脑缺血模型制备,术后连续ig给药3d。采用ZeaLonga神经学评分标准记录动物的行为活动,采用ELISA法检测血清中MMP-9、PA及TIMP1的表达。结果脑泰方高剂量组神经学评分较空白对照组有显著降低（P〈0.05）;脑泰方高、中、低剂量组血清中MMP-9、PA的表达显著降低（P〈0.05）,脑泰方高、中、低剂量组TIMP1表达明显升高（P〈0.05）。结论脑泰方对局灶性脑缺血导致的血脑屏障损伤有一定保护作用。     

中风康对局灶性脑缺血大鼠脑组织MMP-9的影响

脑梗塞是严重危害人类健康的常见病、多发病,致残率、病死率较高,目前尚缺乏理想的治疗药物.中风康是根据中医理论及多年临床实践研制的治疗脑梗塞的有效方药,课题组前期的研究显示,该药对脑梗塞各期患者均有较好的疗效,且可改善局灶性脑缺血大鼠血脑屏障的超微结构.近年来有学者报道,基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在脑缺血后血脑屏障损伤和血管源性脑水肿的发生中发挥着重要作用[1].为了进一步阐明中风康是否通过调节MMP-9,从而发挥维护血脑屏障,减轻脑水肿的作用,笔者动态观察了该药对局灶性脑缺血大鼠脑组织含水量和脑组织MMP-9的影响,现报道如下.     

参龙健脑胶囊对脑缺血大鼠脑组织谷氨酸及N-甲基-D-天冬氨酸受体表达的影响

目的观察参龙健脑胶囊对脑缺血损伤大鼠脑组织谷氨酸（Glu）、N-甲基D-天冬氨酸受体（NMDAR）表达的影响,探讨其神经保护机制。方法结扎双侧颈总动脉制备缺血性脑损伤大鼠模型,模型成功后随机分为假手术组、模型组、脑复康组及参龙健脑胶囊低、高剂量组,参龙健脑胶囊低、高剂量组和脑复康组分别按照0.40、1.20、0.45 g/kg剂量给药,每日灌胃1次,连续28 d。采用比色法观察Glu在大鼠脑组织中的含量,免疫组化方法观察NMDAR亚单位NR1在海马区的表达。结果与模型组大鼠比较,参龙健脑胶囊组大鼠脑组织中Glu含量明显降低（P〈0.01,P〈0.05）,海马区NR1表达减少（P〈0.01）。结论参龙健脑胶囊对缺血性脑损伤的保护作用可能与其抑制脑缺血后脑组织中Glu的释放、减少NR1的表达密切相关。     

金天格胶囊对骨关节炎大鼠MMP-3和TIMP-1的影响

目的:观察金天格胶囊对骨关节炎大鼠血清、关节液、关节软骨中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制酶-1(TIMP-1)的影响.方法:选取成年雄性SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、阳性药组(仙灵骨葆组)、金天格胶囊大剂量组、金天格胶囊中剂量组、金天格胶囊小剂量组.除假手术组外大鼠双侧膝关节腔内注射木瓜蛋白酶20μL,而假手术组注射同等生理盐水.造模2周后连续灌胃给药4周;末次灌胃后次日处死动物,时关节软骨、关节液及血清中MMP-3、TIMP-1的含量进行检测.结果:金天格胶囊大剂量组、金天格胶囊中剂量组、金天格胶囊小剂量组均能明显降低关节液、关节软骨中MMP-3含量,升高关节软骨中TIMP-1含量,降低关节液、关节软骨中MMP-3/IMP-1的比值(P＜0.01或P＜0.05),对血清MMP-3、TIMP-1含量及MMP-3/TIMP-1比值无明显影响(P＞0.05).结论:金天格胶囊保护关节软骨的作用可能是通过提高关节软骨中TIMP-1的活性,降低关节液中MMP-3的活性,使关节软骨MMP-3/TIMP-1的比值减小,从而抑制MMP-3对关节软骨基质蛋白多糖的裂解活性,进而起到保护关节软骨的作用.     

平喘颗粒对哮喘小鼠肺组织MMP-9和TIMP-1水平的影响

目的 观察平喘颗粒对哮喘小鼠肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)水平的影响.方法 40只BALB/c小鼠,随机分为4组,分别是对照组、哮喘组、平喘颗粒组、普米克令舒组,每组10只.对照组腹腔注射及雾化吸入等体积生理盐水代替OVA激发,其他3组腹腔注射及雾化吸入卵清蛋白(O...