麦冬与山麦冬饮片及标准汤剂的薄层色谱鉴别

目的:2015年版《中国药典》收录含麦冬的成方制剂92种,但缺乏有效鉴别麦冬复方制剂的方法,且麦冬与山麦冬外形相似,应用中易混淆。笔者拟建立鉴别麦冬制剂、区分麦冬与山麦冬饮片和标准汤剂的薄层色谱法(TLC)。方法:收集麦冬和山麦冬饮片,制备二者的标准汤剂。采用TLC对麦冬与山麦冬饮片、标准汤剂以及含麦冬复方汤剂进行定性鉴别,选择三氯甲烷-甲醇-水(65∶35∶10)的下层溶液为展开剂,10%硫酸乙醇溶液为显色剂。结果:所得薄层色谱分离度良好,麦冬饮片、标准汤剂和复方汤剂有相同的特征条带,即紫外光灯(365 nm)下的2条亮白色荧光条带,而山麦冬饮片及其标准汤剂并未显示该条带;经高分辨质谱鉴定,上述2条特征条带对应的成分均为含皂苷的混合物(包含麦冬皂苷Ra,Tb,麦冬皂苷D',麦冬皂苷C,短葶山麦冬皂苷C和龙脑苷)。结论:该方法特征性强、灵敏度高,能用于麦冬饮片和标准汤剂的特征鉴别、复方汤剂中麦冬药味的鉴别,并能区分麦冬与山麦冬,为麦冬及含麦冬复方制剂的定性鉴别提供了可靠的检测方法。     

药用植物湖北麦冬和山麦冬减数分裂及花粉发育的比较研究

目的:比较湖北麦冬和山麦冬减数分裂及花粉发育的差异,探讨湖北麦冬不育的细胞学实质.方法:采用常规压片法,观察湖北麦冬和山麦冬的减数分裂行为及花粉发育过程.结果:山麦冬花粉母细胞减数分裂过程基本正常,染色体能正常配对和分离.湖北麦冬花粉母细胞减数分裂过程中染色体行为异常,多表现为中期出现少数染色体及断片游离在纺锤体外面,在后期出现染色体桥、断片和落后染色体,在末期出现单个染色体游离在细胞核外形成微核的现象.湖北麦冬花粉发育异常,花粉畸形率为95.81%(2 066个).山麦冬花粉发育基本正常,花粉畸形率为3.44%(2 949个).结论:湖北麦冬减数分裂及花粉发育的异常是引起花粉败育的重要原因.     

阔叶山麦冬块根化学成分研究

目的:研究阔叶山麦冬根部的化学成分。方法:对阔叶山麦冬块根乙醇提取物的氯仿和正丁醇萃取部分进行化学成分研究。结果:从阔叶山麦冬块根中分离得到了6个化合物,经鉴定分别为:β-胡萝卜苷(I)、棕榈酸(II)、鲁斯可皂苷元(III)、阔叶山麦冬皂苷C(IV)、阔叶山麦冬皂苷D(V)和25(S)-鲁斯可皂苷元-1-O-β-D-吡喃木糖-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(VI)。结论:以上化合物均为首次从该植物中分离得到。     

麦冬内生真菌与麦冬生长周期

目的：研究不同生长阶段麦冬根部的内生真菌。方法：采集不同生长阶段的麦冬根段，切片染色法观察麦冬根内真菌显微结构及真菌侵染的特征，分析麦冬内生真菌与麦冬发育的关系。结果：麦冬根内含有丰富的内生真菌，苗期根内逐渐出现菌丝并形成大量菌丝团，块根发生初期菌丝连续分枝形成丛枝，块根生长和块根膨大期内存在大量泡囊。结论：麦冬根内的真菌为丛枝菌根真菌，不同生长阶段，根内出现内生真菌的菌丝、丛枝、泡囊，显示内生菌可能与麦冬生长、活性成分的合成有关。     

麦冬与山麦冬的薄层色谱及紫外光谱鉴别

目的:研究建立区分麦冬与山麦冬的鉴别方法。方法:用薄层色谱和紫外光谱鉴别。结果:麦冬和两种山麦冬药材的薄层色谱图和紫外光谱图均有区别。结论:方法简便、可靠,可用于麦冬和山麦冬药材的鉴别。     

山麦冬多糖对免疫低下小鼠的保护作用

目的:研究山麦冬多糖对免疫低下小鼠的保护作用.方法:采用小白鼠60Co-γ射线全身照射和注射环磷酰胺,形成免疫损伤模型,观察山麦冬多糖对模型小鼠的免疫活性的影响.结果:与模型小鼠比较,山麦冬多糖高剂量组(1600mg/kg)和低剂量组(400mg/kg)对由60Co-γ射线和环磷酰胺造成的小鼠免疫器官损伤有一定的恢复作用,能显著增强免疫低下小鼠的胸腺和脾脏重量,还能升高注射环磷酰胺小鼠外周血的白细胞数.小鼠体内实验表明,山麦冬多糖还对小鼠原发性肝癌实体瘤有一定的抑制作用.结论:山麦冬多糖对免疫低下小鼠有保护作用.     

麦冬与山麦冬的组织学鉴别研究

目的:研究建立区分麦冬与山麦冬的组织学鉴别方法。方法:用现代显微鉴别技术对麦冬和山麦冬药材的组织结构进行鉴别对比。结果:麦冬和二种山麦冬药材的组织显微图谱均有区别。结论:方法简便、可靠,可用于麦冬类药材的鉴别。     

短葶山麦冬化学成分的研究

短葶山麦冬为百合科山麦冬属植物短葶山麦冬L iriop e muscari (D ecn.) Bailey的干燥块根,是《中华人民共和国药典》1995年版新增品种山麦冬的原植物之一[1]。长期以来,在市场上尤其是在福建省泉州、惠安、仙游等地作为麦冬Oph iopogon japon icus(L. f.) K er-G aw l.的替代品使用[2]。国内外学者对该植物化学成分研究报道甚少,仅有的文献集中在研究小组对其皂苷部分的研究上[2]。已有的研究资料[3]表明,山麦冬属植物须根中的总皂苷远高于其块根,为了全面反映该种植物的活性物质基础,并对其作为麦冬替代品做出初步的阐释,同时也为进一…     

阔叶山麦冬的化学成分研究

对阔叶山麦冬乙醇提取物的氯仿和正丁醇萃取部分进行了化学成分研究。从阔叶山麦冬中初步分离得到了7个化合物,经鉴定分别为:羽扇烯酮(Ⅰ)、羽扇豆醇(Ⅱ)、熊果酸(Ⅲ)、β-谷甾醇(Ⅳ)、薯蓣皂苷元(Ⅴ)、阔叶山麦冬皂苷A(Ⅵ)和阔叶山麦冬皂苷B(Ⅶ)。化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅴ为首次从该属植物中分得,化合物Ⅲ和Ⅳ为首次从该植物中分得。     

短葶山麦冬种植基地和药材中有机氯农药及重金属残留分析

目的:对福建泉州短葶山麦冬种植基地土壤、灌溉用水及其药材中的有机氯农药与重金属残留量进行分析评价,为山麦冬安全规范化生产提供参考依据.方法:采用GC法测定有机氯农药残留量,用ICP法测定铅(Pb)、镉(Cd)、铜(Cu)、铬(Cr)、砷(As)含量.结果:泉州短葶山麦冬种植土壤、灌溉用水和药材中的有机氯农药与重金属残留存在一些差异,但均低于国家限量标准.结论:泉州短葶山麦冬种植基地土壤、灌溉用水和药材符合中药材GAP标准.     

地黄脱毒技术研究

从地黄种茎育出的无菌幼苗上切取下的茎尖,用组织培养方法可诱导成去病毒幼苗。本试验还研究出适宜地黄茎段苗消毒的消毒剂为0.05％HgCl_2。适宜于茎段苗生长的MS培养基的琼脂浓度为0.7％,pH为7。诱导茎尖成苗的培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L。繁殖脱毒苗所用的MS培养基为1/4大量元素 1/2微量元素,并用1/2食用白砂糖代替蔗糖,可使快繁成本降低48.7％。     

药用植物粉花绣线菊的组织培养的建立与快速繁殖研究

目的 建立了粉花绣线菊Spiraea japonicaL.f.愈伤培养系统和快速繁殖方法。方法 通过用SM、6,7-V、B5等3种不同的培养基对粉花绣线菊植株的茎尖、嫩叶、叶柄等不同部位进行愈伤组织诱导和成苗诱导。结果 通过本研究,建立了愈伤培养系统,实现了快速繁殖,结论 MS培养基诱导愈伤效果最好。在MS 2,4-D2.0mg/L KT0.3mg/L培养基中,幼叶、茎尖、叶柄等外植体均能诱导出愈伤组织,其中以茎尖外植体诱导的效果最好;茎尖外植体在MS 2mg/LBA 0.1mg/LNAA能长出丛生苗,将丛生苗转入培养基1/2MS 0.25mg/LBA 0.5mg/LNAA可生根成小苗。     

乌头离体培养和快速繁殖

目的建立乌头的快繁体系。方法利用组织培养的方法,设置18种、9种和12种不同激素处理组合的培养基分别诱导乌头不同外植体愈伤组织、诱导愈伤组织丛生芽的分化、诱导再生苗的生根。结果适合乌头茎尖和茎段愈伤组织诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA2.0mg/L PVP(或AC)3.0g/L;适合叶片愈伤组织诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA4.0mg/L PVP(或AC)3.0g/L;适合愈伤组织增殖与丛生芽诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA2.5mg/L LH200mg/L PVP3.0g/L和MS NAA0.1mg/L 6-BA2.0mg/L LH200mg/L PVP3.0g/L。适合诱导生根的培养基为:MS IBA1mg/L AC3.0g/L。结论以乌头茎尖、叶片、茎段及带或不带腋芽的茎段作为外植体进行离体培养,可以实现乌头种苗的工厂化快速繁殖。     

喜树愈伤组织的诱导与培养

目的：研究喜树叶片、茎段和带芽茎段的愈伤组织诱导效果以及愈伤组织继代培养条件。方法：以MS为基本培养基,附加不同质量浓度6-BA,NAA和2,4-D,通过正交试验研究愈伤组织继代培养的适宜条件。结果与结论：MS+6-BA 2 mg·L^-1+NAA 2 mg·L^{-1+2,4-D 2 mg·L-1的诱导效果较好,容易诱导出愈伤组织,其中叶片的诱导率可达80%以上。愈伤组织在MS+６-BA 1 mg·L-1+2,4-D 1 mg·L-1培养基上继代培养生长快速,疏松易分散,适合用于细胞培养。}     

黑果枸杞基茎丛生芽诱导及植株高效再生体系的建立

目的优化黑果枸杞Lycium ruthenicum离体培养方法及条件,探索有效增殖方式,筛选适宜的植株再生途径,建立其人工高效繁殖技术体系。方法以无菌实生苗带1～2个节的茎段为材料,采用MS、改良的MS1以及改良的MS2为基本培养基,通过单因素、完全组合及L_9(3~4)正交试验研究不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、腋芽萌发、基茎不定丛芽诱导及植株再生的影响。结果在MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L培养基中,可诱导出大量愈伤组织,但其再分化能力较弱,培养35 d后最高增殖系数仅为4.36;而在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+KT 0.5 mg/L中培养,随着腋芽萌发,茎段与培养基接触的节处开始膨大并出现不定芽点,萌发出基茎丛生芽,发生率达100%,培养45 d增殖系数最高可达到42.84;试管苗生根的适宜培养基为改良的MS1+NAA 1.0 mg/L,培养40 d后生根率达98.9%;试管苗经炼苗后移栽成活率90%以上。结论研究通过基茎丛生芽这一全新的增殖途径,成功建立了黑果枸杞体外高效再生体系,不仅大大提高了试管苗的产量及品质,也为枸杞属其他植物的体外快繁提供了另一思路。     

丽江山慈姑的组织培养及育种技术研究

目的 建立药用植物丽江山慈姑的组织培养和快速繁殖体系。方法 对丽江山慈姑的球茎、地上茎、叶片及根尖等不同部位进行丛生芽及原球茎的诱导，筛选适合生根的培养基配方。结果 通过研究，筛选出了丽江山慈姑原球茎的诱导、增殖及生根培养基配方，建立了丽江山慈姑的快速繁殖体系，实现了大规模的组培生产。结论 在MS培养基上，丽江山慈姑球茎和地上茎诱导丛生芽效果较好，MSF 6—BA 2mg/L NAA0．5mg/L的激素配比既能使丽江山慈姑快速增殖，又能诱导出原球茎，适合大规模生产，在1／2MS IBA0．5mg/L NAA0．2mg/L的培养基上，丽江山慈姑原球茎生根效果较好。     

绞股蓝快速繁殖技术研究

以绞股蓝茎切段为材料,采用N6和Ms培养基均能诱导获得无菌苗,继代繁殖时,N6培养基较Ms更佳,最适激素配比为BA0.8mg/L,IAA0.5mg/L。生根培养基为N6培养基附加KT0.5mg/L,IAA0.1mg/L,它既可以促进种苗生根又有利于分生壮苗。移栽后试管苗极易成活。     

栝楼的组培快繁技术研究

目的:探讨栝楼组织培养及种苗快速繁殖技术。方法:通过茎尖、带芽茎段、茎段和叶片诱导丛生芽及愈伤组织。结果:栝楼2年生块茎幼苗的茎尖和带芽茎段在MS 2 mg/L BA 0.5~0.05 mg/L NAA培养基上可诱导丛生芽,并在生根培养基MS 0.1 mg/L NAA 0.2 mg/L IBA中生根,经驯化移栽可实现快速繁殖。无芽茎段和叶片用含4 mg/L BA和0.5 mg/L NAA的MS培养基可诱导愈伤组织,由茎段来的愈伤组织经6周后分化为无根苗。结论:栝楼茎尖和带芽茎段的组织培养,可在短期内大量繁殖栝楼雌雄种苗,具有成本低,效益高的特点。     

氮素形态对喜树幼苗喜树碱含量及喜树碱代谢相关酶类的影响

目的：探讨氮素形态对喜树幼苗喜树碱含量及其生物合成途径中色氨酸合酶(TSB)和色氨酸脱羧酶(TDC)活性的影响。方法：在温室内对砂培喜树幼苗进行5 种NH⁺₄-N/NO^-₃-N比例的处理，用HPLC检测了幼叶中喜树碱含量和TSB活性以及茎皮中TDC活性的动态变化过程。结果：喜树碱含量与氮素形态有明显的关系，NH⁺₄-N/NO^-₃-N为25∶75时最有利于喜树碱在幼叶中的合成和积累(最高值达5.69‰)，且在处理的前30 d呈上升趋势而随后下降。幼叶中TSB 活性与氮素形态关系不十分明确。NH⁺₄-N/NO^-₃-N为25∶75时茎皮的TDC活性最大，并且TDC活性的变化与幼叶的喜树碱含量相关。结论：适宜的氮素形态比例对喜树幼苗中喜树碱的积累极为重要，短期NH⁺₄-N/NO^-₃-N为25∶75的处理可通过上调茎皮中TDC活性诱导幼叶中高含量的喜树碱。     

溪黄草离体培养和快速繁殖

目的：探讨溪黄草Isodon serra (Maxim).Kudo离培养的过程,为优良品种的快速繁殖奠定基础。方法：以溪贡草无菌苗的带节茎为外植体,采用MT基体培养基,附加不同植物激素进行试验。结果：培养基中附加激素BA有利于芽的发生;适宜的BA浓度为1mg/L,出芽率高达100％,且出芽数量多;基本培养基以完全的MT成分为好;生根据培养选择MT＋0．2mg/L NAA,生根率为100％,试管苗移栽,成活率为90％,结论,通过溪黄草离体培养的研究,获得了较高的植株再生频率,建立了有效的组织培养再生体系。