乌司他丁对A549细胞在缺氧条件下ENaC-α表达影响的研究

目的:研究乌司他丁对缺氧A549细胞ENaC-αmRNA和蛋白表达水平的影响.方法:将A549细胞分组为缺氧对照组和乌司他丁组,分别在3%O2和0%O2的缺氧条件下,用1 250、2 500、5 000 U/ml浓度乌司他丁作用A549细胞,用RT-PCR半定量ENaC-α mRNA表达最,用Westem blot半定量ENaC-α蛋白浓度.结果:在不同缺氧程度下,乌司他丁组的ENaC-αmRNA和蛋白表达均高于对照组,呈浓度依赖方式.结论:乌司他丁能够对抗缺氧对ENaC-α表达的抑制作用,提示乌司他丁在急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)的治疗过程中具有缓解肺水肿、减轻肺损伤的作用.     

乌司他丁对胃癌细胞c-met基因表达及增殖的影响研究

目的：观察乌司他丁对胃癌细胞c-met基因表达及增殖的影响，为乌司他丁用于胃癌的治疗提供理论依据。方法：取对数生长期人胃癌BGC-823细胞，随机分为空白组、对照组和乌司他丁组。空白组加入RPMI1640培养液3ml，对照组培养液中加入奥沙利铂（L-OHP）至终浓度为1mmol／L（对照1组）和0.5mmol／L（对照2组），乌司他丁组培养液中加入乌司他丁至终浓度为320U/ml（乌司他丁1组）和160U／ml（乌司他丁2组），分别置于培养箱中培养48h。采用RT-PCR检测胃癌细胞c-met mRNA的表达情况；ELISA检测细胞抑制率；活细胞计数计算细胞倍增时间，以评估乌司他丁对胃癌BGC-823细胞增殖的抑制情况。结果：乌司他丁组与空白组及对照组比较，c-met mRNA的表达均有显著性差异（P〈0．05或P〈0．01）；乌司他丁1组与2组间比较，差异有显著性（P〈0.05）。细胞倍增时间及细胞抑制率比较，乌司他丁组与空白组间均有显著性差异（P〈0．05或P〈0．01），与对照组亦有非常显著性差异（P〈0．01）；乌司他丁1组与2组间比较，也有显著性差异（P〈O．05）。结论：乌司他丁可以明显抑制人胃癌BGC-823细胞原癌基因c-met mRNA的表达；乌司他丁可以明显延长人胃癌细胞的倍增时间，对细胞增殖具有明显的抑制作用，剂量增加，抑制作用越明显。     

乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响

目的:观察乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响,从而进一步了解乌司他丁抑制炎症反应的作用机制。方法:创伤失血性休克患者60例随机分为对照组(n=30)和乌司他丁组(n=30),乌司他丁组在麻醉诱导后切皮前静注乌司他丁30万U,对照组采用等量生理盐水。于麻醉诱导后切皮前,切皮后2h、4h,术后第1天、第2天、第3天采集动脉血,以流式细胞仪检测TLR4的表达变化,用ELISA试剂盒检测血浆TNF-α和IL-6浓度。结果:两组各时点CD14+单核细胞表面TLR4表达以及TNF-α、IL-6均较麻醉诱导后切皮前增加(P<0.05);乌司他丁组各指标值均较对照组上升幅度低(P<0.05)。结论:乌司他丁可有效抑制单核细胞表面TLR4的表达,抑制炎症因子的释放,对创伤失血性休克患者有一定的保护作用。     

乌司他丁对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的保护作用。方法SD大鼠72只随机分为假手术组、缺血再灌注组和乌司他丁组。分别检测胰腺缺血再灌注0h、6h、12h及24h血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）的变化。结果缺血再灌注组的各时点上TNF-α含量明显高于假手术组和乌司他丁组（P〈0．05）；缺血再灌注组和乌司他丁组在6h、12h、24h的IL-1β含量较假手术组明显增加（P〈0．05），但乌司他丁组增高水平明显低于缺血再灌注组（P〈0．05）。结论乌司他丁可以抑制大鼠胰腺缺血再灌注损伤所致的急性炎性反应，对大鼠胰腺缺血再灌注损伤有保护作用。     

乌司他丁对羊水栓塞大鼠肺部损伤的影响及机制

目的探讨乌司他丁对羊水栓塞大鼠肺部损伤的影响及机制。方法取晚期妊娠 SD 雌鼠 60 只,实验分为3组,每组20只: 对照组股静脉注入生理盐水;羊水栓塞组：股静脉按0.25 mL/100 g 注入羊水胎粪液;乌司他丁组：在羊水栓塞组的基础上,腹腔注射乌司他丁10×104 U/kg。8 h后酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-8、IL-1β及IL-6的含量。光镜分析小鼠肺组织病理及湿干比(W/D)变化。RT-PCR、Western blot检测大鼠肺组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达情况。结果与对照组相比,羊水栓塞组肺泡灌洗液TNF-α、IL-8、IL-1β及IL-6明显升高(P<0.05),乌司他丁组以上指标较羊水栓塞组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。肺组织病理学显示：羊水栓塞组大鼠肺组织可见不同程度水肿, 局部血管丰富, 可见少量出血, 支气管及血管的周围有大量炎症细胞浸润;乌司他丁组肺组织病理改变较羊水栓塞组减轻;对照组大鼠肺组织则无明显改变。与对照组相比,羊水栓塞组W/D值明显升高(P<0.05),乌司他丁组较羊水栓塞组降低,差异有统计学意义(P<0.05);羊水栓塞组肺组织MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),乌司他丁组肺组织MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达较羊水栓塞组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乌司他丁可能通过降低肺组织MMP-2、MMP-9表达水平,减轻炎症反应,对羊水栓塞后肺组织损伤有一定的保护作用。     

乌司他丁对脂多糖诱导的巨噬细胞NO释放和iNOSmRNA表达的影响

目的 探讨乌司他丁对脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞一氧化氮(NO)释放和诱生型一氧化氮合酶(iNOS mRNA)表达的影响。方法 应用LPS激活RAW264.7细胞株,与不同浓度组乌司他丁(100～10000U/ml)共同孵育,Griess试剂法测定NO释放量;实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析iNOS mRNA的表达。结果 高浓度的乌司他丁(1000～10000U/ml)能抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO的表达(P<0.05),下调iNOS mRNA含量(P<0.05);低浓度乌司他丁(100U/ml)对LPS诱导的RAW 264.7细胞NO、iNOS mRNA表达与LPS单独处理组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 高浓度乌司他丁抑制LPS诱导的巨噬细胞NO释放和iNOS mRNA表达,这种抑制与浓度相关。     

乌司他丁通过上调PPAR-γ抑制低氧诱导的肺血管平滑肌细胞表型转换

目的探讨乌司他丁对低氧诱导的肺血管平滑肌细胞（PASMCs）表型转化的影响及其分子机制。方法体外培养SD大鼠 PASMCs,随机分组4组：正常组（N组）,常氧+乌司他丁组（NU组）,低氧组（H组）,低氧+乌司他丁组（HU组）,各组培养24 h后 采用免疫荧光检测SM-α-actin和Calponin表达水平,应用CCK-8法、3H-TdR和Transwell小室检测各组PASMCs增殖和迁移。 并分别利用Western blotting和荧光素酶报告质粒检测PPAR-γ蛋白表达和转录活性。采用PPAR-γ抑制剂GW9662进行预处理 干预乌司他丁对低氧诱导的PASMCs表型转化的影响,分析干预后PASMCs增殖和迁移改变。结果低氧条件下,乌司他丁能 促进PASMCs 中SM-α-actin 和Calponin 的表达（P<0.05）,抑制PASMCs 的增殖和迁移能力（P<0.05）,同时乌司他丁上调 PPAR-γ的表达（P<0.05）。采用GW9662预处理后,乌司他丁对低氧诱导的PASMCs表型转换的抑制作用显著下降（P<0.05）。 结论乌司他丁通过上调PPAR-γ抑制低氧诱导的PASMCs表型转换。     

乌司他丁联合参麦注射液治疗急性胰腺炎相关肺损伤的临床研究

目的 观察乌司他丁联合参麦注射液对急性胰腺炎相关急性肺损伤的临床治疗效果.方法 选取急性胰腺炎相关肺损伤患者60例,随机分为乌司他丁＋参麦组（US组）、乌司他丁组（U组）和对照组（C组）,每组20例.C组给予常规治疗,U组在常规治疗基础上每日静脉滴注乌司他丁（6000U/kg）,US组在常规治疗基础上每日静脉滴注乌司他丁（6000U/kg）和参麦注射液（0.6ml/kg）.分别于治疗前、治疗后第3、7天行动脉血气分析,计算氧合指数,测定血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度.结果 与C组比较,U组和US组治疗后3和7天血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度下降,治疗后7天氧合指数升高（P＜0.05）;与U组比较,US组治疗后7天血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度下降,氧合指数升高（P＜0.05）.结论 乌司他丁联合参麦注射液能进一步抑制炎性介质释放,减轻急性胰腺炎相关肺损伤.     

尿胰蛋白酶抑制剂乌司他丁抗肺癌作用研究

目的 探讨尿胰蛋白酶抑制剂(urinary trypsin inhibitor,UTI)对人肺癌细胞系A549细胞体内外抗肿瘤作用.方法 选用尿胰蛋白酶抑制剂乌司他丁(ulinastatin),设置乌司他丁 0、100、200、400 U/mL四个浓度组及CTX3 μg/mL阳性对照组,采用MTT比色法检测乌司他丁对A549细胞增殖抑制作用,采用侵袭小室法检测乌司他丁对A549细胞的侵袭抑制作用.建立人肺腺癌(A549)细胞裸鼠异种抑制瘤模型,设置乌司他丁 0万单位、2.5万单位、5万单位组、10万单位组及CTX 0.1 g阳性对照组,通过绘制移植瘤生长曲线、统计分析瘤重和肺转移灶,检测乌司他丁对裸鼠体内肺腺癌抑制增殖和转移的作用.结果 增殖抑制率分别为0%、17.82%、25.46%、42.73%、57.46%,显示乌司他丁对人肺癌细胞系A549细胞具有增殖抑制作用;侵袭指数分别为16.44%、13.06%、11.73%、7.63%、8.12%,表明乌司他丁能有效抑制人肺癌细胞系A549细胞的侵袭;瘤重抑制率分别为0%、56.19%、61.11%、68.53%、89.17%;抗肺转移率分别为0%、75.36%、85.51%、90.75%、86.94%,显示乌司他丁能有效抑制裸鼠肺癌移植瘤的生长及转移.结论 乌司他丁对人肺癌细胞系A549细胞具有体内外抗肿瘤作用,该作用表现为抑制肿瘤增殖并突出表现于抑制肿瘤转移.     

连续性肾脏替代治疗联合乌司他丁对脓毒血症患者血清炎性因子的影响

目的:观察连续性肾脏替代治疗(CRRT)联合乌司他丁对脓毒血症炎性因子的影响。方法:选取我院收治的脓毒血症患者89例,随机分为对照组(常规治疗)和CRRT组(常规治疗+CRRT),乌司他丁组(常规治疗+CRRT+乌司他丁),通过检测三组治疗前后的炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素1β(IL-1β)及炎症指标降钙素原(PCT),比较三组的临床疗效。结果:治疗后乌司他丁组及CRRT组IL-6、TNF-α、CRP、IL-1β、PCT和CRP均呈下降趋势(P <0. 05),且乌司他丁组下降更加明显,对照组较前下降不明显。结论:在常规治疗基础上,CRRT治疗后能显著清除炎性因子,加用乌司他丁后效果更加明显。     

乌司他丁对老年患者全麻开胸手术炎症反应及S100β蛋白的影响

目的:探讨乌司他丁对老年患者全麻开胸手术炎症反应及S100β蛋白的影响.方法:择期普通开胸手术老年患者100例,随机分为对照组和乌司他丁组,每组50例.乌司他丁组在麻醉后静脉泵注乌司他丁2×104U·kg-1,对照组则以等量的生理盐水泵注.术前、术后4h及24h取静脉血2 mL,用ELISA法测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)以及S100β蛋白的质量浓度.结果:对照组和乌司他丁组在术后血浆TNF-α、IL-6水平均较手术前明显升高(P＜0.05),但乌司他丁组升高的水平显著低于对照组(P＜0.05).术前和术后24h,对照组和乌司他丁组S100β蛋白质量浓度差异无统计学意义;术后4h,乌司他丁组S100β蛋白质量浓度显著低于对照组.结论:乌司他丁可明显抑制老年开胸患者术后炎症因子的过度释放,降低血浆S100β蛋白上升的水平,减轻中枢神经系统的损伤.     

乌司他丁对胰腺炎手术患者脂氧素及核因子кB基因表达的影响

目的 探讨乌司他丁对胰腺炎手术患者脂氧素及核因子кB基因表达的影响.方法 选择胰腺炎大手术成人患者30例,随机分为乌司他丁组(A组)和对照组(B组).乌司他丁组于术前、术后第1、2、3 d分别给予乌司他丁30万U+生理盐水100 ml静脉滴注,各组于手术结束时、术后第1、2、3 d抽取患者静脉血2 ml分离单核粒细胞,利用凝胶电泳迁移率变化分析(EMSA)的方法 测定核因子кB(NF-кB)、TNF-ɑ、IL-6、IL-8的活性,并利用聚合酶链反应方法 (PCR)测定其基因表达.结果 乌司他丁组有防止术后产生全身炎症反应综合征的作用,该药能有效促进脂氧素和抑制核因子кB基因表达,抑制TNF-ɑ、IL-6、IL-8等炎症介质的释放,从而产生对抗手术侵袭和防止术后并发症的作用.结论 乌司他丁对胰腺炎手术患者脂氧素、核因子кB、TNF-ɑ、IL-6、IL-8都有抑制作用,从而防止术后产生全身炎症反应综合征的作用机制.     

乌司他丁对胰腺缺血-再灌注损伤大鼠血清炎性因子TNF-α和IL-1β的影响

目的探讨乌司他丁是否能抑制胰腺缺血再灌注损伤大鼠炎性因子的释放.方法SD大鼠72只随机分为假手术组、缺血再灌注组和乌司他丁组.分别检测胰腺缺血再灌注0、6、12h及24h血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）的变化.结果缺血再灌注组的各时点TNF-α含量明显高于假手术组和乌司他丁组（P〈0.05）;缺血再灌注组和乌司他丁组的IL-1β含量在6h、12h、24h较假手术组明显增加（P〈0.05）,但乌司他丁组增高水平明显低于缺血再灌注组（P〈0.05）.结论乌司他丁可以抑制胰腺缺血再灌注损伤大鼠炎性因子的释放,对大鼠胰腺缺血再灌注损伤有保护作用.     

乌司他丁对创伤失血性休克兔血浆磷脂酶A2水解产物及细胞因子的影响

目的评价蛋白酶抑制剂乌司他丁对创伤性休克的治疗效果,并观察乌司他丁对血浆磷脂酶A2水解产物及细胞因子的影响.方法30只新西兰白兔随机分为三组,对照组、创伤性休克组和创伤性休克乌司他丁治疗组,观察休克前后TXA2和PGI2,、TNF-a、IL-8的动态变化及乌司他丁对它们的影响.结果对照组TNF-a、IL-8的血浆浓度和TXA2/PGI2的比值在整个实验期呈现增高趋势,但没有统计学意义.创伤性休克组和创伤性休克乌司他丁治疗组休克后TXA2、TNF-α、IL-8的血浆浓度分别在不同的时点较休克前有显著增高,其中乌司他丁治疗组的TXA2、TNF-α、IL-8血浆浓度均明显低于休克组.光镜及电镜下观察肺组织,乌司他丁治疗组较休克组的病理损害亦显著减轻.结论在创伤性休克的发展过程中血浆磷脂酶A2水解产物及细胞因子起着重要作用,应用蛋白酶抑制剂乌司他丁有助于休克的改善及重要脏器的保护.     

乌司他丁对脂多糖诱导小鼠急性肾损伤的保护作用及其机制

目的 观察不同剂量的乌司他丁对脂多糖?(LPS)?诱导的小鼠急性肾损伤?(AKI)?的保护作用及可能机制.方法 通过腹腔注射LPS建立脓毒症AKI小鼠模型.将40只SPF级C57BL/6小鼠随机分为4组:对照组、LPS组、LPS+5000?U/kg乌司他丁组和LPS+50000?U/kg乌司他丁组,每组10只.观察各组...     

乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响

目的：观察乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响，从而进一步了解乌司他丁抑制炎症反应的作用机制。方法：创伤失血性休克患者60例随机分为对照组（n=30）和乌司他丁组（n=30），乌司他丁组在麻醉诱导后切皮前静注乌司他丁30万U，对照组采用等量生理盐水。于麻醉诱导后切皮前。切皮后2h、4h。术后第1天、第2天、第3天采集动脉血。以流式细胞仪检测TLR4的表达变化。用ELISA试剂盒检测血浆TNF-α和IL-6浓度。结果：两组各时点CD14^＋单核细胞表面TLR4表达以及TNF-α、IL-6均较麻醉诱导后切皮前增加（P〈0．05）；乌司他丁组各指标值均较对照组上升幅度低（P〈0．05）。结论：乌司他丁可有效抑制单核细胞表面TLR4的表达，抑制炎症因子的释放，对创伤失血性休克患者有一定的保护作用。     

老年危重患者在外科手术后早期应用乌司他丁的临床研究

目的　探讨乌司他丁在外科老年危重患者手术后早期应用的临床治疗作用。方法　将 30 例术后收入外科重症监护病房(ICU)的老年患者(>60 岁)随机均分为乌司他丁组和对照组,两组均给予外科 ICU的常规治疗。乌司他丁组在入 ICU后第1天加用40万U乌司他丁,第2、3、4 天分别加用 20 万 U乌司他丁。比较两组术后7 d内的临床症状、全身炎症反应综合征(SIRS)的改善情况和营养、免疫情况。结果　乌司他丁组预防应激性溃疡、改善SIRS症状以及减少蛋白分解的能力优于对照组。结论　乌司他丁对老年危重患者手术后的恢复治疗有一定积极作用。     

乌司他丁联合甲基泼尼松龙对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁联合甲基泼尼松龙对大鼠肺缺血再灌注损伤时血清水通道蛋白-1(AQP 1)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为5组(n=8):正常对照组、模型对照组、甲基泼尼松龙组(30 mg/kg)、乌司他丁组(50 000 U/kg)及联合治疗组[甲基泼尼松龙(30 mg/kg)联合乌司他丁(50 000 U/kg)]。采用ELISA法检测血清AQP 1和TNF-α水平;考马斯亮蓝法检测肺泡灌洗液中蛋白质含量;检测肺湿/干质量并对肺进行形态学观察。结果与模型对照组相比,乌司他丁组或甲基泼尼松龙组血清AQP 1质量浓度明显增加,而TNF-α质量浓度明显降低,联合治疗组血清AQP 1与TNF-α的改变更为明显(P<0.01);乌司他丁组、甲基泼尼松龙组及联合治疗组的肺泡灌洗液中蛋白质含量及肺组织湿/干质量比值均明显降低(P<0.01)。结论乌司他丁联合甲基泼尼松龙对大鼠缺血再灌注急性肺损伤具有良好的治疗作用,其机制可能与提高血清AQP 1水平及降低TNF-α水平有关。     

谷氨酰胺联合乌司他丁对严重烧伤大鼠肠黏膜屏障及炎症因子的影响

目的:观察谷氨酰胺联合乌司他丁对严重烧伤所致肠黏膜损害和炎症因子的影响?方法:采用30 %体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型,随机分成烧伤组(B)?谷氨酰胺组(G)?乌司他丁组(U)?谷氨酰胺联合乌司他丁组(G+U),各组给予等氮?等热卡?等体积的营养液?G组每天给予30%总氮量的谷氨酰胺,U组于伤后每日静注乌司他丁,G+U组联合使用谷氨酰胺及乌司他丁?观察烧伤前及烧伤后第l~7天大鼠的氮平衡变化,同时检测烧伤后血浆D-乳酸?二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)活性及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α?白介素(interleukin,IL)6的含量?结果:烧伤后两组大鼠的氮平衡?D-乳酸?DAO?TNF-α及IL-6均显著高于烧伤前(P < 0.01);G组的氮平衡明显高于B组,而血浆D-乳酸?DAO 活性及TNF-α含量均明显低于B组(P < 0.05或P < 0.O1);U组TNF-α及IL-6含量显著低于B组(P < 0.05,P < 0.O1);G+U组D-乳酸?DAO ?TNF-α?IL-6均显著低于B组?结论:谷氨酰胺和乌司他丁联合使用具有协同作用,能有效减轻烧伤后肠道损伤,降低血浆炎症介质水平?     

乌司他丁对老年骨科手术患者术后短期认知功能的保护作用

目的探讨乌司他丁对老年患者术后早期认知功能障碍的影响及血清细胞因子差异。方法选取骨科60例择期行髋关节置换老年患者,在全麻下分别接受手术,术前1d及术后1d采用MMSE行认知功能评价。在麻醉诱导前（T1）、拔管前（T2）、术后6h（T3）、术后24h（T4）行血清S-100β浓度测定,术后3天测定血TNF-α、IL-6水平。结果术后24h乌司他丁组MMSE评分较术前降低分值为（-1.23±2.73）分,对照组为（-4.87±3.79）分,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。对照组T2～T4血清S-100β浓度高于T1,乌司他丁组T3、T4高于T1,乌司他丁组T3、T4血清S-100β浓度升高幅度低于对照组（P〈0.05）。两组术后3天TNF-αI、L-6均高于术前,但乌司他丁组升高幅度远低于对照组（P〈0.05）。结论乌司他丁对老年骨科手术患者术后认知功能具有保护作用,可能与其抑制外周细胞因子释放有关。