抗肿瘤抗生素力达霉素的发酵工艺

目的:中试规模验证力达霉素发酵工艺的可行性.方法:采用微生物法、HPLC法和精原细胞法分析力达霉素中试发酵液及其发酵提取物,以力达霉素的生物效价为指标考察其发酵工艺.结果:5批200L发酵罐,平均每罐发酵液的微生物效价为450μg·mL-1,可获得力达霉素纯品5.7 g.结论:多批中试结果表明:力达霉素目前使用发酵工艺较稳定,可以为进一步的分离纯化提供优质足量的发酵液,满足工业生产和进一步深入研究的需要.     

凝胶过滤色谱和Bradford法测定发酵类抗生素中蛋白残留量

目的以发酵类抗生素盐酸林可霉素为例,建立一个快速、简单、灵敏度高的可用于发酵类抗生素中蛋白残留量控制的方法.方法利用凝胶过滤色谱(GFC)首先将蛋白质与抗生素分离,收集蛋白组分,再利用蛋白检测方法Bradford法(考马氏亮兰染色法)对残留的蛋白进行定量;色谱柱为SuperdexTM Peptide HR 10/30;检测波长为214 nm;流速为1 mL·min-1;流动相为0.01 mol·L-1磷酸盐缓冲液;进样量为500 μL.结果本方法蛋白(BSA)的平均回收率大于90%,蛋白浓度在0-12 μg·mL-1之间符合曲线方程y=-0.002 4x2 0.064 2x 0.002 9,r2＝0.999 9; 检测限为3 ng·mL-1(相当于盐酸林可霉素中蛋白的残留量为7×10-7).结论本方法简便,快速,灵敏,可以用于控制发酵类抗生素中蛋白的残留量.     

中药克癀胶囊药用原料的固态发酵生产工艺研究

目的根据生产需要进行固态发酵工艺的研究。方法以发酵物中人参皂苷Rg1含量为评价发酵工艺的指标,采用L9(34)正交设计试验筛选较优的发酵工艺条件。结果最佳发酵工艺条件为起始含水量50%,相对湿度90%,搅拌速度15 r.min-1,温度33℃发酵7 d。结论工艺合理可行,质量可控。     

HPLC法测定槲寄生胶囊中总黄酮醇苷的含量

目的 建立HPLC法测定槲寄生胶囊中总黄酮醇苷含量.方法 采用Kromasil C18(4.6×250 mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(55:45);流速:1.0mL·min-1;测定检测波长为360nm.结果 槲皮素在浓度4.067μg·mL-1～40.67μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9998):山萘素在浓度0.871μg·mL-1～8.71μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9998);异鼠李素在浓度0.616μg·mL-1～6.16μgmL-1范围内线性关系良好(r=0.9996).结论 本方法简便、准确、专属性强,可测定槲寄生胶囊中总黄酮醇苷的含量.     

多波长系数法测定散利痛片中3组分的含量

目的 建立简单快速测定散利痛片中对乙酰氨基酚、咖啡因、异丙安替比林含量的方法.方法 建立多波长系数法同时测定散利痛片中对乙酰氨基酚、咖啡因、异丙安替比林3组分的含量.结果 对乙酰氨基酚、咖啡因、异丙安替比林线性范围分别为4.00～14.0 μg·mL-1 (r=0.999 4),0.806～2.82 μg·mL-1(r=0.999 3),2.40～8.40 μg·mL-1 (r=0.999 2),平均回收率分别为100.1%,100.4%,101.1%,RSD分别为1.4%,1.6%,1.2%(n=9).结论 本法方便、快速、准确,适用于散利痛片生产过程中的快速质量控制.     

HPLC法测定利通淋胶囊中总黄酮醇苷的含量

目的建立HPLC法测定利通淋胶囊中总黄酮醇苷含量。方法采用Kromasil C18(4.6×250mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(55∶45);流速:1.0mL.min-1;测定检测波长为360nm。结果槲皮素在浓度4.067μg·mL-1~40.67μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9998);山奈酚在浓度0.871μg·mL-1~8.71μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9998);异鼠李素在浓度0.616μg·mL-1~6.16μg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9996)。结论本方法简便、准确、专属性强,可测定利通淋胶囊中总黄酮醇苷的含量。     

RP-HPLC法检测奈韦拉平原料药中有关物质

目的 建立RP-HPLC测定奈韦拉平原料药中已知杂质A、B、C和未知杂质的方法.方法 RP-HPLC法,以Gemini C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)(Phenomenex),乙腈-0.025mol·L-1磷酸二氢钾溶液(pH5.0)(20∶80)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长为220nm,柱温35℃,进样量50μL.结果 奈韦拉平杂质线性范围A为0.1203 μg·mL-1 ～0.6016μg·mL-1,r =0.9998;B为0.1198μg·mL-1～0.5992μg·mL-1,r =0.9999;C为0.1195μg·mL-1～0.5976μg·mL-1,r =0.9999.平均回收率A为98.87％,RSD=1.03％;B为100.43％,RSD=0.62％;C为99.19％,RSD =1.69％.结论 本方法准确、简便、快捷,可用于奈韦拉平有关物质的测定.     

HPLC同时测定参苓白术胶囊中的5种有效成分

目的 采用HPLC法同时测定参苓白术胶囊中5种有效成份的含量.方法 采用梯度洗脱法测定制剂中去氢土莫酸、猪苓酸C、茯苓酸、薯蓣皂苷元和尿囊素的含量.结果 5.27～105.40 μg· mL-1(r=0.9998)去氢土莫酸、4.30 ～ 86.00 μg·mL-1(r =0.9995)猪苓酸C、5.25 ～105.00μg·mL-1(r=0.9997)茯苓酸、4.26～85.20 μg· mL-1(r=0.9994)薯蓣皂苷元和6.91 ～ 138.20 μg· mL-1(r=0.9999)尿囊素与其峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为97.77％、97.27％、98.13％、96.93％、99.37％,RSD分别为1.42％、1.07％、0.96％、1.10％、0.56％(n=6).结论 所用方法简便、快捷、重复性好,可用于该制剂的质量控制.     

反相高效液相色谱法测定藓药膏中硝酸咪康唑和丙酸氯倍他索的含量

目的 建立藓药膏中硝酸咪康唑和丙酸氯倍他索的含量测定方法.方法 以十八烷基键合硅胶色谱柱,0.5％醋酸铵溶液-乙腈-甲醇(20∶40∶40)为流动相,检测波长为240nm,流速为1.0mL· min-1.结果 丙酸氯倍他索在0.005mg· mL-1～0.05mg·mL-1呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.8％;硝酸咪康唑在0.2mg· mL-1～2mg·mL-1呈良好的线性关系(r=0.9989),平均回收率为101.5％.结论 该方法简便、快速、可靠,可用于该产品的质量控制.     

顶空气相色谱法测定左乙拉西坦中有机溶剂残留量

目的建立左乙拉西坦中有机溶剂残留量的顶空气相色谱分析方法.方法选用大口径HP-快速GC残留溶剂柱为分离柱,FID检测器,外标法进行定量,并对分离条件、顶空平衡温度、平衡时间对残留有机溶剂测定的影响进行了研究.结果二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯的线性范围分别为0.133～1.326 μg·mL-1(r=0.999 7),4.330～43.296 μg·mL-1(r=1.000 0),0.009～0.087 μg·mL-1(r=0.999 7);平均回收率范围99.70%～102.46%,精密度RSD(n=6)为1.79%～3.05%;检测限分别为0.008,0.005,0.001 μg·mL-1.结论该方法快速、灵敏、准确.     

HPLC法测定复方炔雌醇甲羟孕酮胶囊中3种维生素的含量

目的建立一种同时测定复方炔雌醇甲羟孕酮胶囊中维生素A、维生素D2和维生素E含量的高效液相色谱方法。方法色谱柱为Kromasil C18柱,流动相为甲醇-乙腈(90∶10),检测波长为265nm。结果维生素A、维生素D2和维生素E检测质量浓度的线性范围分别为0.1¹.0mg·mL-1(r=0.999 7)、0.21.0mg·mL-1(r=0.999 7)、0.2⁵.0μg·mL-1(r=0.999 7)和0.55.0μg·mL-1(r=0.999 7)和0.5¹6mg·mL-1(r=0.999 9),平均回收率分别为99.6%,100.0%和100.9%,RSD分别为1.0%,1.1%和0.9%。结论该方法快速、准确、重复性好,可用于复方炔雌醇甲羟孕酮胶囊中3种维生素的含量测定。     

阿卡波糖补料发酵工艺的研究

目的:探索阿卡波糖的补料发酵工艺,以提高阿卡波糖的发酵水平.方法:在发酵的不同时间补入不同量的麦芽糖或麦芽糖与酵母提取物的复合料液.结果:单次补料,在48 h补入麦芽糖的效果最好,随着补糖量的增加,发酵单位逐渐提高,当补3%的麦芽糖时,发酵单位最高,48 h达到3 462 mg·L-1,比对照提高了21%.在发酵的36,48和60 h三次补入麦芽糖,每次补入1.2%,96 h发酵单位可达到3 644mg·L-1,比对照组提高了27.4%.在发酵的36,48和60 h三次补入麦芽糖(总量3.6%)和酵母提取物(总量0.125%),108 h发酵单位提高到3 768 mg·L-1,再增加酵母提取物的补入量,则引起菌体浓度增加,发酵单位显著降低.结论:在发酵的30～60 h,单次或多次补入3.0%～3.6%的麦芽糖可以显著提高阿卡波糖的发酵单位;在补麦芽糖的同时补入少量的酵母提取物有助于维持菌体的正常代谢,延长发酵周期和提高发酵单位,但酵母提取物补入量超过0.25%时,则明显刺激菌体的生长,而抑制阿卡波糖的生物合成.     

细胞黏附分子变异体6、黏蛋白1及血管内皮生长因子在三阴性乳腺癌中的生物学特征及其预后的意义

目的 探讨细胞黏附分子变异体6(cell adhesion molecule variant 6,CD44v6)、黏蛋白1(mucin-1,MUC1)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在三阴性乳腺癌中的生物学特征及其对预后评估的意义.方法 选取2014年2月至2016年3月在黄冈市中心医院确诊的65例三阴性乳腺癌患者和75例非三阴性乳腺癌患者为研究对象,空腹抽取静脉血3 mL,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清CD44v6、MUC1及VEGF表达水平.结果 三阴性乳腺癌患者的CD44v6(338.57±51.37)pg·mL-1和MUC1(156.32±34.71)pg·mL-1表达水平与非三阴性乳腺癌患者的CD44v6(327.68±51.14)pg·mL-1和MUC1(153.56±35.12)pg·mL-1表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);而三阴性乳腺癌患者的VEGF(86.91±32.46)pg·mL-1表达水平明显低于非三阴性乳腺癌患者(205.14±53.17)pg·mL-1表达水平,差异有统计学意义(P<0.01).三阴性乳腺癌患者的CD44v6、MUC1及VEGF表达水平与年龄、肿瘤大小、组织分级、临床分期和淋巴转移均无明显相关性(P>0.05).CD44v6与MUC1表达水平呈正相关(r=0.224,P=0.015),与VEGF表达水平无相关性(r=0.023,P=0.637),MUC1与VEGF表达水平呈正相关(r=0.271,P=0.008).结论 三阴性乳腺癌患者的血清VEGF表达水平较低,血清CD44v6和MUC1表达水平无明显变化,MUC1分别与CD44v6和VEGF呈正相关,但三者均与年龄、肿瘤大小、组织分级、临床分期和淋巴转移等预后指标无明显相关性,对预后评估无重要意义.     

卡马西平中残留溶剂的研究

目的:用气相色谱的顶空进样法建立卡马西平中的残留溶剂氯苯、甲醇和乙醇的测定方法.方法:使用配置顶空进样器的气相色谱仪,采用HP-INNOWAX(交联聚乙二醇),30m×0.32mm×0.25μm色谱拄,以氮气为载气,FID检测器,顶空进样.通过外标法计算残留溶剂的含量.结果:卡马西平中有残留溶剂甲醇、乙醇检出.标准曲线的线性范围:氯苯为0.07～3.62μg·mL-1(r=0.9992),甲醇为0.60～30.1μg·mL-1(r=0.9978),乙醇为1.00～50.08μg·mL-1(r=0.9986),定量限氯苯为0.1μg·mL-1,甲醇为0.7μg·mL-1,乙醇为0.4μg·mL-1;平均回收率氯苯为99.12%(RSD=2.52%,n=6),甲醇为97.51%(RSD=4.31%,n=6),乙醇为98.52%(RSD=3.12%,n=6).结论:本方法简便,灵敏度高,重复性好,结果准确.     

银杏磷脂胶囊的制备与质量控制

目的制备银杏磷脂胶囊,并建立其质量控制方法.方法在银杏叶提取物中加入大豆卵磷脂,控制萃取压力10MPa、温度50℃,用二氧化碳进行萃取1 h,制备成银杏磷脂胶囊.采用薄层色谱法进行定性鉴别、高效液相色谱法测定总黄酮醇苷的含量.结果薄层色谱法在与对照品溶液相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点.总黄酮醇苷(槲皮素、山奈素和异鼠李素)的线性范围分别为7.53～120.51 μg·mL-1(r=0.9998)、7.46～119.36 μg·mL-1(r=0.999 5)、5.05～80.77 μg·mL-1(r=0.9996).平均回收率分别为101.5%,RSD为1.4%.结论制备工艺简洁、收得率高,同时减少了环境污染;质量控制方法快速、准确、重复性好,可作为银杏磷脂胶囊的质量控制方法.     

HPLC同时测定氯强滴眼液中氯霉素及醋酸泼尼松龙的含量

目的 建立HPLC法测定氯强滴眼液中氯霉素及醋酸泼尼松龙的含量.方法 色谱柱C18柱(4.6mm×260mm),流动相 甲醇:水(60:40),流速1.0mL·min-1,检测波长270nm,进样量10μL.结果 氯霉素和醋酸泼尼松龙分别在50μg·mL-1～200μg·mL-1和25μg·mL-1～100μg·mL-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系.(r=0.9982和r=0.9979)平均回收率:氯霉素为l00.3%,醋酸泼尼松龙为100.3%(n=9).结论 本法简便快速,定量准确,可用于氯强漓眼液中氯霉素及醋酸泼尼松龙的含量测定.     

手性毛细管柱气相色谱法测定冰硼散中冰片的含量

目的 建立手性毛细管柱气相色谱法同时测定冰硼散中异龙脑、左旋龙脑、右旋龙脑的含量.方法 采用气相色谱法、手性毛细管柱;柱温为120℃;进样口温度200℃;检测器温度220℃.结果 右旋龙脑在0.01～0.39 mg· mL-1与峰面积线性关系良好,r=0.999 9;左旋龙脑在0.01～0.38 mg·mL-1与峰面积线性关系良好,r=1.000 0;异龙脑在0.01～0.40 mg·mL-1与峰面积线性关系良好,r=1.000 0.结论 该方法快速,准确,精密度高,可测定以各种“冰片”投料生产的冰硼散中冰片的含量.     

RP-HPLC法同时测定熟地黄中5个核苷类成分的含量

目的:建立同时测定熟地黄中次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷5个核苷类成分的RP-HPLC法。方法:采用Dia-monsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.04 mol·L-1磷酸二氢钾溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm;柱温30℃。结果:次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷浓度分别在1.0～16.0μg·mL-1(r=0.9999)、5.0～80.0μg·mL-1(r=0.9999)、1.0～16.0μg·mL-1(r=0.9997)、1.25～20.0μg·mL-1(r=0.9999)、1.0～16.0μg·mL-1(r=0.9999)范围内线性良好。加样回收率为98.1%～101.0%。结论:该方法可以用于熟地黄中次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷的含量测定。     

注射用盐酸帕洛诺司琼的制备、质量控制及稳定性考察

目的:制备注射用盐酸帕洛诺司琼,建立其质量控制方法并考察其稳定性.方法:制备注射用盐酸帕洛诺司琼;采用高效液相色谱法测定其含量及有关物质,并对制剂进行稳定性试验.结果:本品处方以10%甘露醇作为填充剂,用磷酸二氢钠调节溶液pH值为4.5～6.0;盐酸帕洛诺司琼在 12.00 μg·mL-1～150.01 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好(r＝0.999 9),恒温加速试验6个月及长期留样18个月时主药含量及有关物质未见明显变化.结论:该制剂处方工艺可行,质量可控,稳定性良好;所建立的含量测定方法重复性好,专属性强,结果准确可靠.     

RP-HPLC法同时测定消痤灵搽剂中3种成分的含量

建立高效液相色谱法同时测定消痤灵搽剂中3种成分含量的方法.采用Hypersil BDS C18色谱柱,甲醇-0.042mol·L-1磷酸二氢钾(42:58,内含0.75%三乙胺,用20%磷酸调节pH 2.4)为流动相,流速为1.0mL·min-1,检测波长为240nm.甲硝唑、氯霉素、水杨酸分别在12.9～257.8цg·mL-1(r=0.9999)、14.9～298.1цg·mL-1(r=0.9999)、5.7～114.0цg·mL-1(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=9)分别为100.7%、99.7%、98.7%.该方法简便、准确、重复性好,可同时测定消痤灵搽剂中3种成分的含量.