胃癌、癌旁组织中抑癌基因和凋亡调节基因表达及其内在关系

目的 研究胃癌、癌旁组织中抑癌基因ｐ５３、ｐ１６和关键性凋亡调节基因ｂｃｌ－２蛋白的表达及其内在的关系,进一步探讨胃癌发病可能的分子机制。方法 术中取３０例胃癌患者的癌组织,癌旁组织各２块,石蜡包埋,切片分别作ＨＥ染色病理检查及免疫组织化学检查ｐ５３、ｐ１６、ｂｃｌ－２基因蛋白表达。结果 ｐ５３、ｐ１６和ｂｃｌ－２表达与胃癌分期、分化程度及有无淋巴结转移均无显著关系（Ｐ〉０．０５）,但ｂｃｌ－２与     

幽门螺杆菌cagA基因株与胃癌p53,bcl—2表达的研究

目的　通过研究幽门螺杆菌（Ｈｐ）及细胞毒蛋白相关基因Ａ 株〔ｃａｇＡ（＋ ）株〕感染与胃癌组织ｐ５３、ｂｃｌ２ 表达的相互关系，以探讨Ｈｐ 的可能致癌机制。　方法　聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测９２ 例胃癌和２４ 例浅表胃炎组织石蜡标本Ｈｐ 和ｃａｇＡ（＋ ）株感染。用免疫组化方法检测全部标本的ｐ５３、ｂｃｌ２ 表达。　结果　（１）Ｈｐ 感染在胃癌和浅表胃炎病例间差异无显著性（７９４％ 及６６７％ ，Ｐ＞ ００５），而ｃａｇＡ（＋ ）株感染前者高于后者（９３２％ 及５００％ ，Ｐ＜ ００１）；（２）ｐ５３、ｂｃｌ２ 的表达在Ｈｐ（＋ ）与Ｈｐ（－ ）组之间差异无显著性，而ｃａｇＡ（＋ ）株感染组均显著高于ｃａｇＡ（－ ）株组（Ｐ＜００１）。　结论　胃癌的发生可能与不同Ｈｐ 菌株感染有关。产生细胞毒素的Ｈｐ 菌株〔ｃａｇＡ（＋ ）株〕与胃癌关系更密切，它可能是导致ｐ５３ 基因突变和ｂｃｌ２基因过度表达的原因之一。     

胃粘膜中增殖细胞核抗原及p53,K—ras,bcl—2基因蛋白的表达

为了解胃粘膜癌变过程中多基因蛋白的表达及意义，应用免疫组化技术检测１０７例内镜活检胃粘膜组织中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）及ｐ５３、Ｋ－ｒａｓ，ｂｃｌ－２基因蛋白。结果各基因蛋白阳性率随病变程度加重而增加。Ⅲ型肠化生者增殖细胞核抗原标记指数（ＰＣＮＡ ＬＩ）及Ｋ－ｒａｓ、ｂｃｌ－２基因蛋白阳性率较之Ⅰ、Ⅱ型肠化亦有增高趋势但未见统计学差异（Ｐ≥０．０５）。１２例Ⅲ型肠化中有９例出现Ｋ－ｒａｓ和ｂｃｌ     

胃癌癌旁组织中p53、p16和bcl-2蛋白表达及其关系的探讨

目的：研究胃癌癌旁组织中抑癌基因和抗凋亡基因蛋白的表达及其内在关系。方法：胃镜及外科手术中取４０例 胃癌患者的癌组织和癌旁组织各两块,石蜡包埋,切片ＨＥ染色作病理及免疫组织化学检查ｐ５３、ｐ１６和ｂｃｌ－２基因蛋 白表达。结果：ｐ５３在胃癌组织中阳性表达率４２．５％,癌旁组织１２．５％,有显著性差异（Ｐ＜０．０１）,其表达强度也有显著 性差异（Ｐ＜０．０１）;ｐ１６在癌旁组织阳性表达率为６０％,显著高于胃癌组织３７．５％（Ｐ＜０．０５）,其表达强度也有显著性差 异（Ｐ＜０．０５）;ｂｃｌ－２在胃癌组织和癌旁组织阳性表达率无显著性差异（６７．５％比４７．５％,Ｐ＞０．０５）,其表达强度也无显 著性差异（ｐ＞０．０５）。ｐ５３与ｐ１６、ｐ１６与ｂｃｌ－２表达之间均无显著相关性（Ｐ＞０．０５）,而ｐ５３与ｂｃｌ－２表达之间存在显著相 关性（Ｐ＜０．０５）。结论：在胃癌发生发展过程中,抑癌基因（ｐ５３、ｐ１６）４抗凋亡基因（ｂｃｌ－２）之间存在既独立又协同的作 用。     

胃粘膜中增殖细胞核抗原及p53、K-ras、bc1-2基因蛋白的表达

为了解胃粘膜癌变过程中多基因蛋白的表达及意义，应用免疫组化技术检测１０７例内镜活检胃粘膜组织中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）及ｐ５３、Ｋ－ｒａｓ、ｂｃ１－２基因蛋白。结果各基因蛋白阳性率随病变程度加重而增加。Ⅲ型肠化生者增殖细胞核抗原标记指数（ＰＣＮＡＬＩ）及Ｋ－ｒａｓ、ｂｃ１－２基因蛋白阳性率较之Ⅰ、Ⅱ型肠化亦有增高趋势但未见统计学差异（Ｐ≥０．０５）。１２例Ⅲ型肠化中有９例出现Ｋ－ｒａｓ或ｂｃ１－２蛋白异常表达（７５．０％），显著高于Ⅰ、Ⅱ型肠化（２３．８％）（Ｐ＜０．０５）。在肠型及胃型胃癌ｐ５３表达率为５３．３％、３７．０％（Ｐ＞０．０５）；Ｋ－ｒａｓ为４０．０％、７．４％（Ｐ＜０．０５）；ｂｃ１－２为９３．３％、５９．３％（Ｐ＜０．０５）。１５例肠型胃癌中有９例同时存在２种或２种以上蛋白异常表达（３例ｐ５３与ｂｃ１－２表达异常，２例ｂｃ１－２与Ｋ－ｒａｓ表达异常，４例ｐ５３与ｂｃ１－２、Ｋ－ｒａｓ异常表达），高于胃型胃癌（Ｐ＜０．０５）。结果提示以上基因产物的表达异常与胃粘膜癌变相关，Ⅲ型肠化属于胃癌癌前病变范畴，肠型胃癌发生发展的分子机制与胃型胃癌显著不同。     

急性白血病bcl-2、p53基因蛋白细胞表达水平及与化疗效果的关系

为探讨ｂｃｌ－２、ｐ５３基因蛋白在急性白血病（ＡＬ）细胞表达水平、相互关系及对化疗药耐受的影响，采用免疫组化方法检测ｂｃｌ－２及ｐ５３蛋白阳性水平，临床及体外实验以细胞凋亡为指标观察ｂｃｌ－２蛋白与ＡＬ对ＤＮＲ的耐受。结果：ｐ５３和ｂｃｌ－２蛋白在４６例ＡＬ细胞的阳性率分别为２１７％和６３０％（Ｐ＞００５），与细胞类型、病情有关。ｂｃｌ－２阳性在耐药组多于在缓解组（８８５％、３５０％，Ｐ＜００１）。两种蛋白均阳性的８例均不缓解，均阴性者的缓解率为１１／１３。１例ｂｃｌ－２低表达ＡＬ细胞与ＤＮＲ（１０ｍｇ／Ｌ）共育后有明显的细胞凋亡，４例高表达者加大药物剂量才发生。结果提示，成人ＡＬ细胞有ｂｃｌ－２和ｐ５３蛋白异常表达，且与ＡＬ类型、病情及耐药有关，联合检测基因蛋白更有助于对化疗效果的预测。克服ｂｃｌ－２所致的耐药应设法下调ｂｃｌ－２的表达     

幽门螺杆菌感染患者胃癌及癌旁组织中p53,p16和bc1—2基因的表达

研究幽门螺杆菌（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）感染胃癌得胃粘膜病变中抑癌基因ｐ５３、ｐ１６和关键性凋亡调节基因ｂｃ１－２蛋白的表达,进一步探讨Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ在胃癌发生、发展过程中作用的分子机制。方法：胃镜检查及外科手术中取４０例胃癌患者的癌组织和癌旁２ ｃｍ处组织各２块,石蜡包埋,切片ＨＥ染色作病理诊断及免疫组化检查ｐ５３、ｐ１６及ｂｃ１－２蛋白的表达。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ阳性由快速尿素酶试验结合病理染色／＾１     

白血病细胞p53和bcl—2表达与化疗药诱导凋亡的关系

目的 探索ｐ５３和ｂｃｌ－２表达及化疗药物体外诱导白血病细胞凋亡与患者化疗疗效的关系。方法 用免疫组化法测定４２例急性白血病患者骨髓细胞ｐ５３和ｂｃｌ－２表达水平;用Ｔｃｌ－２表达水平;用ＴｄＴ介导的脱氧核苷酸切口和末端标记法（Ｔｕｎｅｌ法）、Ｗｒｉｇｈｔ－Ｇｉｅｍｓａ梁色及超微结构观察等方法检测化疗药物诱导的白血病细胞凋亡。结果 ４２例急性白血病患者ｐ５３和ｂｃｌ－２总体表达水平显著高于对照组。     

BCL—2,Fas基因蛋白在胃癌及癌前病变组织中的表达

探讨基因蛋白ｂｃｌ－２,Ｆａｓ的表达变化与胃癌及癌前病变之间的关系。方法采用免疫组化ＳＰ法,分别检测浅表性胃炎组织２０例,萎缩性胃炎３２例,肠化生３２例,胃癌３６例基因蛋白ｂｅｌ－２,Ｆａｓ的表达变化。结果Ｆａｓ基因蛋白的表达,浅表性胃炎组６５％（１３／２０）较肠化生组２１．８％（７／３２）及胃癌组１９．６％７／３６）明显增高（Ｐ＜０．００５）;ｂｃｌ－２基因蛋白表达,胃癌组织３３．３％（１２／３６）,其中高一中分化腺癌阳性表达５６．２５％（９／１６）较低分化腺癌１６．６％（２／１２）及未分化癌１２．５％（１／８）明显增高（Ｐ＜０．０５）,浅表性胃炎组无回例表达;胃炎与胃癌组之间Ｆａｓ和ｂｃｌ－２表达呈负相关,两者比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论ｂｃｌ－２基因的异常表达对胃癌及癌前病变的形成发挥一定作用;Ｆａｓ基因的过度表达诱导胃炎发生,而弱表达又为胃粘膜细胞癌变提供了条件;ｂｃｌ－２与Ｆａｓ基因的表达失衡可能与胃癌的发生有关。     

胃癌及癌旁组织中bcl—2蛋白表达及其与细胞凋亡的关系

目的：研究胃癌及癌旁组织中ｂｃｌ－２蛋白的表达状态及其与细胞凋亡之间的关系。方法：采用免疫组织化学方法及脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术对５０例胃癌及３３例癌旁组织中ｂｃｌ－２蛋白表达状态及凋亡细胞的密度和分布进行原位观察和比较。结果：胃癌组织中ｂｃｌ２蛋白的表达率、表达强度明显高于癌旁组织（Ｐ＜００５）。ｂｃｌ２蛋白在胃癌组织中的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移及临床分期无明显关系（Ｐ＞００５），与胃癌形态学分型及分化程度有关（Ｐ＜００５及Ｐ＜００１）。癌旁组织中的凋亡细胞指数高于胃癌组织（Ｐ＜００１）。ｂｃｌ２蛋白表达阴性胃癌及癌旁组织中凋亡细胞指数明显高于ｂｃｌ２阳性组（Ｐ＜００１）。结论：ｂｃｌ２蛋白对胃癌及癌旁组织中的细胞凋亡具有抑制性调控作用。在胃粘膜细胞恶性转化过程中可能存在细胞凋亡受抑制，ｂｃｌ２蛋白表达异常增加可能是细胞凋亡受抑的机制之一。细胞凋亡调控异常在胃癌发病中可能起重要作用     

胃幽门螺杆菌感染与抑癌基因失活的关系

目的探讨胃癌及癌前病变组织中幽门螺杆菌(H.pylori)感染与抑癌基因失活间的相互关系.方法运用DNA-PCR技术检测H.Pylori感染,采用PCR-RFLP,PCR-SSCP,RT-PCR及免疫组化技术分析182例胃癌及癌前病变及正常胃粘膜中抑癌基因APC,MCC,DCC,YNZ22及p53基因的杂合缺失、突变、mRNA及蛋白异常表达.结果胃癌及癌前病变组织中H.pylori的感染率(IM61.7%,Dys 63.3%,GC 42.3%)显著高于正常胃粘膜(17.5%,P＜0.05).但胃癌及癌前病变间H.pylori感染率无显著差别(P＞0.05),胃肠两型胃癌中H.pylori感染率分别为47.1%及42.2%,两者无显著差别(P＞0.05).胃癌及癌前病变组织中存在多种抑癌基因失活.H.pylori感染与癌前病变-肠化生中APC基因异常蛋白表达有关(Hp+43.2%vsHp-13.0%,P＜0.05).胃癌组织H.pylori感染阳性组中APC基因突变(50.0%)及蛋白表达(63.6%)、p53基因蛋白表达率(59.1%)显著高于阴性组(vs16.7%,P＜0.05;vs30.0%,P＜0.01;vs20.0%,P＜0.01).结论幽门螺杆菌感染及多种抑癌基因失活可能与胃癌的发生发展相关,H.pylori感染与APC,p53基因失活可能相关.     

Hp感染与老年胃癌及癌前病变中bcl-2、p16、c-myc基因表达的关系

目的　研究幽门螺杆菌 (Hp)感染的老年胃癌及癌前病变 bcl- 2、 p1 6、 c- myc基因蛋白的表达。方法　 bcl- 2、 p1 6、 c- myc蛋白检测采用免疫组化方法 ,快速尿素酶法和 HE染色确定 Hp感染。结果　 c- myc在胃癌中阳性表达率显著高于异型增生 (P<0 .0 5)。 bcl- 2在异型增生组织中的阳性表达率与胃癌、肠上皮化生相比无显著性差异 (P>0 .0 5)。bcl- 2与胃癌类型、分化程度显著相关 (P<0 .0 5)。Hp阳性组 bcl- 2、c-myc阳性表达率均高于 Hp阴性组 ,两者之间有显著性差异 (P<0 .0 5)。 p1 6在慢性胃炎中阳性表达率显著高于胃癌 (P<0 .0 5)。 Hp阳性萎缩性胃炎 p1 6阳性表达率低于 Hp阴性组 (P<0 .0 5)。结论　 Hp感染可以引起抑癌基因 p1 6表达低下 ,c- myc、bcl- 2基因蛋白表达增加 ,Hp可能为促癌剂在胃癌的发生发展中起一定作用。     

幽门螺杆菌感染与老年胃癌及癌前病变PCNA、Bcl-2、p16蛋白表达的关系

目的　探讨幽门螺杆菌 ( Hp)感染老年胃癌及癌前病变患者增殖细胞核抗原 ( PCNA)、p1 6和关键性凋亡调节基因 Bcl- 2蛋白的表达。方法　免疫组化方法测定 PCNA、Bcl- 2、p1 6蛋白表达。快速尿素酶法和 HE染色检测 Hp感染。结果　从浅表性胃炎到胃癌 PCNA指数呈递增趋势 ,各组间均有显著性差异 ( P<0 .0 5)。浅表性胃炎和萎缩性胃炎组中 Hp阳性患者与 Hp阴性者的 PCNAL I相比有显著性差异 ( P<0 .0 5)。Hp阳性组肠上皮化生、异型增生组织中 Bcl- 2的阳性表达率显著高于 Hp阴性组 ( P<0 .0 5)。 p1 6在慢性胃炎中阳性表达率显著高于胃癌、肠上皮化生和异型增生 ( P<0 .0 5)。 Hp阳性萎缩性胃炎组织的 p1 6阳性表达率低于 Hp阴性组 ( P<0 .0 5)。结论　在老年胃癌发生的早期即存在 p1 6基因表达低下 ,PCNA、Bcl- 2蛋白表达增加     

胃黏膜病变中突变型p53、Mdm2和PCNA蛋白表达及与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨胃黏膜病变中突变型p53、Mdm2、增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达及其与幽门螺杆菌（Hp）感染的关系。方法应用免疫组化PV-9000法染色及Giemsa染色检测胃黏膜病变中突变型p53、Mdm2、PC-NA蛋白的表达和Hp感染情况。结果在慢性浅表性胃炎（csG）、慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生（CAG伴IM）、不典型增生（Bys）及胃癌（GC）中,突变型p53、Mdm2、PCNA阳性表达随病变发展而逐渐升高,突变型p53在CSG组高于GC组,GC组高于CAG伴IM组（P均〈0．05）。不同胃黏膜病变之间Mdm2比较均有统计学差异（P〈0．05）。在同一病变中Hp阳性者突变型p53、Mdm2、PCNA阳性表达一般高于Hp阴性者,突变型p53在CAG伴IM组Hp阳性与阴性者间有统计学差异（P〈0．05）,PCNA和Mdm2在Dys组Hp阳性与阴性者有统计学差异（P〈0．05）。GC组中突变型p53、Mdm2、PCNA蛋白表达无相关关系。结论突变型p53、Mdm2和PCNA蛋白的表达及Hp感染共同参与胃黏膜病变的发生、发展。     

结肠癌组织中p53和凋亡相关基因bcl-2、bax的表达及其临床意义

组织芯片已广泛应用于恶性肿瘤的相关研究，但用于研究相关癌基因在结肠癌中表达变化的报道尚较少。目的：研究结肠癌、结肠腺瘤和癌旁结肠黏膜组织中p53和凋亡相关基因bcl-2、bax的表达及其临床意义。方法 取85例结肠癌、18例结肠腺瘤和9例癌旁结肠黏膜组织分别制成72点和104点两块组织芯片，以免疫组化方法检测芯片中p53、bel-2和bax的表达。结果：p53、bcl．2和bax在结肠癌、结肠腺瘤和癌旁结肠黏膜组织中的表达有显著差异（P〈0．01），p53、bel-2在结肠癌中的表达高于结肠腺瘤和癌旁结肠黏膜组织，bax在结肠癌中的表达低于结肠腺瘤和癌旁结肠黏膜组织。p53和bax在不同组织学分化程度结肠癌中的表达有显著差异（P〈0．01，P〈0．05），但两者之间无相关性（L=-0．081，P〉0．05），p53与bcl-2的表达呈正相关（rs=0．245，P〈0．01）。bcl-2的表达与结肠癌临床病理参数无关。结论：p53异常表达可能是结肠癌发生中的较晚期事件，bcl-2高表达和bax低表达可能参与了结肠癌的形成过程。bax低表达的结肠癌细胞更具有恶性分化潜能。     

胃癌及癌前病变中p53蛋白的检测及意义

探讨p53蛋白表达与胃癌及癌病变的相互关系,方法：用免疫组化染色示检测33例肠化,26例异型增生和26例胃癌组织中p53蛋白的表达。结果：p53蛋白在胃癌组织中表达率最高（61．5％）,在异型增生和肠化组织中的表达率分别为34．6％和12．1％,组间有显著差异,各期胃癌组织中p53蛋白的表达无显著差异,结论：p53蛋白在胃癌前病变中已有阳性表达,在肠化、异型增生及胃癌组织中,其表达率依次增高,p53蛋白积累主要发生在癌前病变晚期及胃癌早期,其表达与胃癌发生密切相关。     

幽门螺杆菌感染与C-myc基因和P53基因表达与胃癌的相关性研究

目的探讨幽门螺杆菌（Hp）感染情况与C-myc基因及P53基因的表达与胃癌的相关性。方法用w—s染色法观察不同胃病黏膜组织中Hp感染情况，采用免疫组化检测技术检测不同胃病组织的C-myc基因和P53基因表达产物。结果胃癌及癌前病变组Hp感染率明显高于慢性浅表性胃炎组（P〈0．01），C-myc基因和P53基因的表达也显著高于慢性浅表性胃炎组（P〈0．01）。Hp感染阳性组的C-myc基因和P53基因表达明显高于Hp感染阴性组（P〈0．01）。结论Hp感染可能通过激活C-myc基因，同时使P53基因失活从而诱发胃黏膜的癌变。     

萎缩性胃炎中P53和PCNA的表达

目的了解Ｐ５３，ＰＣＮＡ在胃粘膜癌前病变中的表达意义．方法慢性萎缩性胃炎（ＣＡＧ）８９例，慢性浅表性胃炎（ＣＳＧ）２０例和胃腺癌２０例，作ＳＰ法观察Ｐ５３和ＰＣＮＡ的表达．结果Ｐ５３在ＣＳＧ和ＣＡＧ的单纯型、增生型和肠化型中不表达，异型性型中阳性表达率为１９０％（４／２１）．ＰＣＮＡ在ＣＳＧ和ＣＡＧ的单纯型、增生型、肠化型中无显著性差异（Ｐ＞００５）；而ＣＡＧ的异型性阳性细胞明显增多（Ｐ＞００１）．结论Ｐ５３表达与胃粘膜向癌的演变有关．ＰＣＮＡ随细胞增生活跃程度递增．二者结合对胃癌前病变的诊断、分级、治疗、预后有辅助价值．     

叶酸对胃癌前病变bcl-2、bax及p53 基因的影响

目的研究叶酸治疗对胃癌前病变组织中bcl-2、bax及p53基因表达的影响.方法胃镜活检经病理证实为胃癌前病变患者38例,利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测胃癌前病变组织bcl-2、bax基因表达率,利用流式细胞仪检测组织p53蛋白表达率.将患者随机分为治疗组(叶酸10mg,每天三次)与对照组(硫糖铝1.0,每天四次)各19例,治疗结束复查组织中bcl-2,bax基因表达率及p53蛋白表达率.结果治疗组治疗后bcl-2基因表达率降低(P<0.05),bax基因表达率无明显变化(P>0.05),p53蛋白表达率增高(P<0.05),对照组治疗后各项指标无明显变化(P>0.05).结论叶酸干预可促进胃癌前病变组织中p53基因的表达,抑制bcl-2基因的表达,而对bax基因表达无明显影响.