hTERC基因表达在宫颈癌筛查中的意义

目的:探讨宫颈病变脱落细胞中人类染色体端粒酶基因(hTERC)的表达及hTERC基因检测在宫颈癌筛查中的临床意义。方法:收集宫颈病变患者的宫颈脱落细胞标本129例,依据组织病理学结果分为3组:宫颈上皮内瘤变低度病变组(CINⅠ)、高度病变组(CINⅡ/Ⅲ)、宫颈癌组(SCC);同时选择健康妇女的宫颈脱落细胞标本20例作为对照组建立实验室阈值;应用荧光原位杂交技术(FISH)检测两组标本hTERC基因的扩增情况,最终以病理学诊断为金标准,比较FISH检测结果。结果:研究各组中CINⅠ,CINⅡ/Ⅲ,SCC的hTERC基因阳性表达率分别为7.31%,56.25%,75.00%,hTERC基因扩增比例随病变进展而增加;研究组与对照组hTERC基因阳性表达率差异有统计学意义(P0.05);研究各组两两比较,hTERC基因阳性表达率低度病变组与高度病变组、宫颈癌组差异有统计学意义(P0.05),而高度病变组与宫颈癌组的差异无统计学意义(P0.05)。结论:FISH方法检测hTERC基因可用于筛查宫颈高度病变及宫颈癌,其阳性扩增信号多倍体型可能是宫颈病变进展的预测性指标。     

hTERC基因表达在宫颈病变中的临床意义

目的探讨应用荧光原位杂交(FISH)技术检测人类染色体端粒酶(hTERC)基因异常扩增在子宫颈病变中的临床意义。方法选择经过液基细胞学(TCT)检查的112例患者为研究对象,根据组织学结果分组,CIN73例、宫颈癌19例、正常20例,用FISH方法检测脱落细胞hTERC基因的表达情况,其中行HPV检查65人,阳性39例,阴性26例。结果在CIN1、CIN2/3和宫颈癌患者宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达率分别是16.67%、51.16%和89.47%,CIN1、CIN2/3和宫颈癌与正常组比较,hTERC基因阳性率差异有统计学意义(P0.001),其中,各组间比较差异有统计学意义(P0.05)。在HPV感染的39例患者中,hTERC基因扩增比例58.97%(23/39),而26例HPV阴性的患者中,其扩增比例为23.08%(6/26),两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 hTERC基因的阳性率随宫颈病变级别增高而增加,对宫颈早期病变进展有预测意义。hTERC基因的扩增与HPV感染及宫颈病变程度相关,其扩增可能是HPV感染致端粒酶活性增加的早期事件。     

人染色体端粒酶基因的扩增率与宫颈癌前病变和宫颈癌的研究

目的:探讨人染色体端粒酶基因(hTERC)扩增率与宫颈癌前病变及宫颈癌的关系.方法:应用荧光原位杂交技术(FISH)检测宫颈上皮内瘤变(CIN)组108例(CIN Ⅰ 39例、CINⅡ37例、CINⅢ32例),宫颈癌组24例和正常对照组33例,共165例宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达情况.结果:CINⅡ、CINⅢ和...     

人端粒酶RNA基因检测在子宫颈病变筛查中的意义

目的 探讨人端粒酶RNA(hTERC)基因检测在宫颈病变筛查中的意义.方法 选择经宫颈液基细胞学检查为正常一高度鳞状上皮内瘤变(HSIL)的301例患者为研究对象,采用人乳头状瘤病毒(HPV)杂交捕获2代(HC2)方法检测其高危型HPV感染状况,病理学检查明确其病变性质,荧光原位杂交(visa)技术检测其hTERC基因异常扩增情况.以病理学结果为金标准,将FISH技术检测结果与液基细胞学和HC2方法检测结果进行比较.结果 301例患者中,宫颈液基细胞学检查为正常、不典型鳞状细胞(ASC)、低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)与HSIL细胞中,hTERC基因异常扩增率分别为3.0%(6/203)、21.2%(14/66)、44.4%(8/18)和92.9%(13/14),两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05～0.01).有病理检查结果的98例患者中,炎症或湿疣、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ和浸润癌患者的hTERC基因异常扩增率分别为4.4%(2/45)、20.0%(4/20)、6/8、86.7%(13/15)和100.0%(10/10),炎症或湿疣、CIN Ⅰ细胞中hTERC基因异常扩增率明显低于其他病变(P<0.01).23例高级别CIN(即CINⅡ～Ⅲ)患者中,FISH技术检测为hTERC基因异常扩增阳性19例(82.6%,19/23),液基细胞学检查为HSIL者仅4例(17.4%,4/23),FISH技术检测筛出高级别CIN的敏感度明显高于液基细胞学检查(P<0.01).高危型HPV DNA感染率,CIN Ⅰ患者为75.0%,高级别CIN和浸润癌患者均为100.0%.hTERC基因异常扩增检出高级别CIN和浸润癌的敏感度分别为82.6%和100.0%,分别与高危型HPV DNA检测检出高级别CIN和浸润癌的敏感度(均为100.0%)比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而特异度前者明显高于后者(分别为67.8%～73.5%和25.6%～27.7%,P<0.01).FISH技术检测结果显示,CIN Ⅰ细胞中hTERC基因异常扩增信号为2:3型者占84.9%,2:4型占15.1%,4:4型为0;CIN Ⅱ～Ⅲ细胞中异常扩增信号为2:3、2:4和4:4型者分别占44.6%、24.8%和17.8%,与CIN Ⅰ比较,2:3型比例明显下降(P<0.01),2:4型比例呈上升趋势(P>0.05),4:4型比例明显升高(P<0.01).结论 应用FISH技术检测hTERC基因异常扩增情况可辅助液基细胞学检查和HPV HC2方法诊断高级别CIN;且hTERC基因异常扩增信号为2:4和4:4型以上可能是进展为高级别CIN的预测指标.     

荧光原位杂交技术检测宫颈上皮内瘤变和宫颈癌细胞hTERC基因扩增的研究

目的探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌细胞涂片内人类染色体端粒酶基因(hTERC)扩增情况及其临床意义。方法2007年12月至2008年12月收集济南军区总医院107例宫颈脱落上皮标本,包括对照组20例;研究组87例,其中27例CIN(Ⅰ级8例、Ⅱ~Ⅲ级19例)和45例宫颈鳞癌(原位癌7例、Ⅰ期14例、≥Ⅱ期24例),术后2年受访15例(宫颈电热圈环切术治疗后12例,宫颈癌术后3例)。应用双色间期荧光原位杂交(FISH)技术,检测上述标本的hTERC基因扩增情况,并与液基薄层细胞检测(TCT)和病理学对照。结果(1)由对照组得出正常值为≤6.0%,>6.0%即为阳性。(2)27例CIN:Ⅰ期出现hTERC基因扩增阳性细胞百分数为9.17±4.62,阳性率为50.0%(4/8);CINⅡ~Ⅲ期为16.00±14.44,阳性率为84.2%(16/19);原位癌为19.67±13.26,阳性率为85.7%(6/7)。CIN组、原位癌组和浸润型癌组hTERC基因扩增阳性细胞百分数均显著高于对照组(P<0.01);CINⅠ期组和Ⅱ~Ⅲ组、原位癌组、Ⅰ期宫颈浸润型鳞癌组和≥Ⅱ期组之间hTERC基因扩增阳性细胞百分率递次...     

FISH检测宫颈脱落细胞hTERC基因的表达及其临床意义

目的:探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)患者人类染色体末端酶(hTERC)基因的表达和临床意义。方法:收集2006年10月至2007年6月北京大学人民医院妇科122例宫颈脱落细胞标本,其中CIN患者66例、宫颈鳞癌(SCC)患者20例、正常细胞学妇女36例,用荧光原位杂交(FISH)方法检测脱落细胞hTERC基因。结果:在CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ和SCC患者宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达率分别是16.13%、48.57%和90%,CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组与正常组比较,hTERC基因阳性率差异有显著统计学意义(P<0.001),其中,CINⅠ与CINⅡ/Ⅲ、CINⅠ与SCC比较,CINⅡ/Ⅲ与SCC比较差异有统计学意义(P<0.05)。随着病变程度增加,hTERC基因表达率增加。hTERC基因检测CINⅡ/Ⅲ的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别是48.57%、92.53%、77.27%和77.5%。CIN和SCC组hTERC基因拷贝数明显增加,其中CIN患者平均拷贝数为2.8,SCC组平均拷贝数为3.2,hTERC基因的表达水平与宫颈病变的程度关系密切。结论:hTERC基因在CIN和SCC中表达异常,且随病变程度增加阳性表达率增加,可作为宫颈癌前病变进展的生物遗传学监测指标。     

宫颈病变中hTERC的表达

目的:探讨人类染色体端粒酶RNA(hTERC)在宫颈病变中的表达.方法:荧光原位杂交(FISH)法检测8例宫颈癌,28例CINⅢ,10例CINⅡ,6例CIN Ⅰ及25例慢性宫颈炎组织中hTERC的表达情况.结果:hTERC在慢性宫颈炎组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌中的阳性表达率分别为12.0%、16.7%、20.0%、71.4%和100.0%,与病变程度呈正相关(r=0.631,P<0.01),各组间差异有统计学意义(P<0.05).结论:hTERC的阳性表达率与宫颈病变程度密切相关,提示其在宫颈癌的发生发展中起着重要作用.     

hTERC基因表达在宫颈病变诊治中的应用

目的：探讨宫颈脱落细胞中hTERC的基因表达在宫颈上皮内瘤样病变（CIN）诊断与治疗中的应用。方法：抽取行子宫颈癌筛查的724例妇女为研究对象,对其同步进行宫颈脱落细胞的液基细胞学检查、第二代杂交捕获技术（HC-Ⅱ）检测高危型HPV（HR-HPV）和荧光原位杂交（FISH）技术检测hTERC基因。对于细胞学为未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞（ASCUS）及以上病变,和（或）HR-HPV阳性者均行阴道镜下宫颈四象限多点活检进行病理诊断。结果：724例中经病理确定为CINⅠ,Ⅱ,Ⅲ及子宫颈癌者分别为251例（34.67%）、17例（2.35%）、48例（6.63%）和10例（1.38%）,宫颈脱落细胞hTERC的扩增率为11.05%。①724例HPV阳性率为39.64%;hTERC扩增在HPV阳性与阴性组分别为19.86%与5.26%（χ2=37.556,P ＜0.01）。②hTERC扩增在细胞学无宫颈上皮内瘤变（NILM）组为5.19%、ASCUS为10.23%、低度鳞状上皮内瘤样病变为（LSIL）11.84%、非典型鳞状上皮细胞－不除外高度鳞状上皮内瘤变（ASC-H）为21.43%、高度鳞状上皮内瘤样病变（HSIL）为73.17%、鳞状细胞癌（SCCA）为100.00%、非典型腺上皮细胞（AGC）为50.00%;hTERC在HSIL及以上病变中的扩增率明显高于LSIL及以下病变（χ2=186.755,P ＜0.01）。③在不同组织学结果中hTERC的扩增率分别为,NILM 3.70%、CINⅠ4.38%、CINⅡ47.06%、CINⅢ58.33%、浸润癌90.00%,hTERC在CINⅡ及以上级别病变中的扩增率明显高于CINⅠ和NILM者 （χ2=144.597,P ＜0.01）。结论：hTERC的扩增与宫颈细胞学和组织学异常密切相关,hTERC扩增与否有可能作为判断有无高度病变及估计预后的指标之一。     

TERC基因联合阴道镜及HPV检测在早期宫颈病变诊断中的应用

目的：探讨阴道镜、人端粒酶RNA组分（hTERC）基因扩增和人乳头瘤病毒（HPV）分型检测在早期宫颈病变诊断中的临床意义。方法：对经阴道镜初步诊断为宫颈病变的219例患者,应用荧光染色体原位杂交（FISH）技术检测hTERC基因扩增、表面等离子谐振技术（SPR）检测HPV感染情况,并进行统计学分析。结果：①阴道镜诊断宫颈CINⅠ级59例,CINⅡ级76例,CINⅢ级56例,宫颈癌28例,与组织学最终诊断相比较,两种方法有相关性（P＜0.05）。②hTERC基因在宫颈炎性病变、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈鳞癌中的阳性扩增率分别为7.9%,10.9%,44.6%,63.2%和82.6%,各组间比较差异有统计学意义（P＜0.000 1）。③132例进行HPV分型检测的患者中,高危亚型感染54例,低危亚型感染29例,阴性49例, HPV阳性患者的感染类型同宫颈上皮内瘤变等级有关（P=0.041 9）。④同时进行hTERC基因及HPV检测患者中,54例HPV高危亚型患者hTERC基因发生异常扩增者33例,29例低危亚型中发生异常扩增7例,组间比较差异有统计学意义（P＜0.01）。结论：阴道镜作为宫颈病变的初诊手段有一定的漏诊和过度诊断;HPV高危亚型感染可能是导致hTERC基因异常扩增的因素之一;hTERC基因扩增和HPV感染与宫颈高级别病变的进展密切相关,可能是导致宫颈癌发生的直接诱因;阴道镜、HPV和hTERC基因联合检查是判断早期宫颈病变进展并做出诊断的有效手段。     

人乳头瘤病毒生物状态和人端粒酶RNA组分基因扩增与宫颈病变的关系

目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)生物状态和人端粒酶RNA组分(hTERC)基因扩增与子宫颈病变之间的关系。方法:应用原位杂交(ISH)和荧光原位杂交(FISH)方法,分别检测114例宫颈石蜡包埋组织HPV生物状态及hTERC基因的异常扩增。结果:在非CIN、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌宫颈组织标本中hTERC基因表达率分别为2.78%、10.00%、50.00%、78.37%和86.67%,差异有统计学意义(χ2=55.56,P<0.001)。随着病变程度升高,HPV整合发生率逐渐升高(0.0%、10.00%、18.75%、72.97%、80.00%)。不同程度的宫颈病变HPV整合率有显著差异(χ2=52.49,P<0.001)。其中,非CIN组与CINⅢ、宫颈癌组之间差异有统计学意义,CINⅠ与CINⅢ、宫颈癌组之间差异有统计学意义,CINⅡ与CINⅢ、宫颈癌组之间差异有统计学意义。HPV DNA整合情况和hTERC基因扩增情况一致,用两种方法预测宫颈癌的效果一致。结论:HPV生物状态和TERC基因扩增与子宫颈病变的发生发展相关。HPV感染与HPV整合、端粒酶激活有时序性差异,但HPV整合和hTERC基因扩增的时序性和关联性有待进一步探讨。     

Role of Cervical Mucus in Human Infertility

The physiological role of cervical mucus in enhancing spermatozoal penetration at mid-cycle has been established. However, the involvement of cervical mucus in primary infertility is still controversial. Although immunological reactions against spermatozoa in the female have been offered to account for the immobilization of spermatozoa--an observation termed 'hostility' of the mucus--this is not always demonstrable. In addition, there are a number of microbial antigens that are similar to spermatozoal antigens. Antibodies to these antigens are found in the serum of the majority of females and males whose infertility is considered to be immunopathological in origin. There are also naturally-occurring antispermatozoal antibodies in both females and males that in some cases may contribute to immunological infertility. The overall spectrum of 'hostile' mucus reactions becomes more complex when we consider the biochemical structure of cervical mucus and its possible interaction with spermatozoa. This spermatozoa: mucus interaction may involve the transfer of spermatozoal components to 'hostile' mucus that should normally be transferred to the zona pellucida of the ova. In addition, there are also pH changes in some 'hostile' mucus that lead to spermatozoal immobilization. In contrast to the above, the cause of infertility in some cases is the inability of spermatozoa to survive in normal mid-cycle mucus. It is evident therefore that an understanding of the complex nature of 'hostile' cervical mucus will lead to a more objective approach in the treatment of infertility.     

子宫颈癌p53抑癌基因突变与病毒感染的研究

采用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）、多重引物ＰＣＲ和巢式引物ＰＣＲ，对同一宫颈癌组织中ｐ５３基因（第６～８外显子）突变以及人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）和人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染进行相关性研究。并与正常宫颈组织进行对照。结果：３８例宫颈癌组中，２例有ｐ５３第７外显子突变。其中１例伴有ＨＰＶ１６感染，２例伴有ＨＣＭＶ感染。宫颈癌组ＨＰＶＩ６、１８ＤＮＡ的阳性率为６３．２％（２４／３８），ＨＣＭＶＤＮＡ为８４．２％（３２／３８）。２１例对照组中，ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ和ＨＣＭＶＤＮＡ的阳性率分别为４．８％和３８．１％（Ｐ＜０．００５）。ＨＰＶ１６、１８阳性的子宫颈癌中，８７．５％伴有ＨＣＭＶ感染。对照组中，无一例同时检测出ＨＰＶ１６、１８和ＨＣＭＶ者。提示：宫颈癌组织中，ｐ５３基因突变并不常见，其突变与ＨＰＶ１６、１８感染无显著关系。宫颈癌与ＨＰＶ１６、１８关系密切，ＨＣＭＶ可能与ＨＰＶ协同作用，导致宫颈癌的发生。     

阴道微生物与人乳头瘤病毒感染及宫颈上皮内肿瘤相关性研究进展

人乳头瘤病毒（HPV）感染是宫颈癌前病变或宫颈癌发生的必要条件,阴道微生物多样性的改变可能是造成HPV持续感染继而发生宫颈病变的伴随因素。正常女性阴道微生物多样性较低,仅由少数几种乳酸杆菌（Lactobacillus）构成主要菌群。随着对细菌16SrRNA基因高通量测序技术的应用,越来越多的研究证实阴道菌群中非乳酸杆菌属微生物的多样性增加与HPV感染及宫颈病变存在密切联系。标志性的阴道微生物可能通过多种分子机制与宿主细胞及HPV相互作用,导致阴道局部免疫抑制、慢性炎症的状态,从而造成HPV持续感染及宫颈病变。重建阴道微生态平衡状态尤其是乳酸杆菌为主的阴道菌群是未来HPV感染及相关宫颈病变治疗的新途径。本文就阴道微生物多样性改变与HPV感染及宫颈病变发生的研究观点进行总结归纳。     

不孕与宫颈人乳头瘤病毒感染的关系研究

目的:调查不孕患者宫颈人乳头瘤病毒(HPV)的感染率及亚型分布。方法:采用快速导流杂交法对217例输卵管不孕患者和174例非输卵管不孕患者进行21种HPV亚型检测。结果:391例不孕患者的HPV阳性率为17.90%,其中输卵管不孕患者的HPV阳性率为20.28%,非输卵管不孕患者的HPV阳性率为14.94%,两组差异无统计学意义(χ2=1.869,P0.05)。HPV阳性的不孕患者中HPV高危型占82.86%,高危型中检出率最高的是HPV 58,其次是HPV 52。输卵管不孕组和非输卵管不孕组HPV感染均以高危型为主,两组间HPV高危型感染率差异无统计学意义(χ2=1.343,P0.05)。结论:HPV高危型感染可能是女性不孕症的危险因素之一,且HPV阳性不孕患者中绝大部分为HPV高危型。     

不同亚型HPV感染情况及与CIN的关系研究

目的:探讨不同亚型HPV感染情况及与宫颈上皮内瘤变(CIN)的关系。方法:回顾性分析我院就诊的8640例行HPV检测的临床资料,统计不同亚型HPV感染情况及与不同级别CIN患者之间的关系,以及常见亚型HPV致病力的差异。结果:①HPV阳性1873例(21.7%),多重感染453例(5.24%),单一亚型感染1420例(16.44%),HPV检出频次2417次,检出频次最高的6种高危亚型分别为:HPV16(25.90%),HPV58(11.92%),HPV52(10.22%),HPV33(6.99%),HPV53(6.54%)和HPV18(5.63%)。372例CIN患者中有273例HPV阳性,其中检出频次最高的几个亚型:HPV16(57.51%),HPV18(16.48%),HPV58(13.92%),HPV52(9.16%),HPV33(8.79%)和HPV31(4.40%)。②检出频次较高的6种HPV亚型中,HPV52亚型发病年龄最低。③HPV16、HPV18亚型发生高级别CIN的风险较其他亚型更高(OR=24.056,OR=27.474);单一感染时,HPV16亚型感染导致CIN的发生率比HPV18亚型的高,且差异有高度统计学意义(P=0.003)。HPV58亚型感染导致CIN的发生率较HPV52亚型的高,且差异有高度统计学意义(P=0.003)。结论:CIN患者中感染HPV的常见亚型依次为:HPV16、18、58、52、33、31。HPV52亚型发病年龄低,致病力弱。在单一感染中HPV16亚型的致病力较HPV18亚型强,HPV58亚型的致病力较HPV52亚型强。     

人乳头瘤病毒16/18型与宫颈癌

人乳头瘤病毒（HPV）16/18型和宫颈癌的关系密切,在宫颈癌发生发展中起重要作用。HPV16最易导致宫颈鳞癌,HPV18最易导致宫颈腺癌。HPV16/18致癌机制主要是通过病毒基因组中致癌蛋白E6,E7与抑癌基因p53和pRb结合,E6抑制p53的活性,E7灭活Rb基因的活性,致肿瘤发生。常用的HPV检测方法有原位杂交法（ISH）、第二代杂交捕获试验（HCⅡ）、聚合酶链反应（PCR）等。针对HPV16/18的预防和治疗性疫苗成为研究热点。综述HPV16/18型和宫颈癌关系研究进展。     

宫颈癌变进展中人乳头瘤病毒甲基化的研究

高危型人乳头瘤病毒（HPV）持续感染是宫颈癌发生的直接原因,然而HPV感染后多数可被宿主免疫机制清除,只在部分病例中HPV感染持续存在并与宿主细胞DNA整合,导致宿主细胞癌变。HPV表观遗传学的改变在病毒整合及致宿主细胞癌变中起一定作用。对目前有关HPV表观遗传学特点在影响HPV自身表达和宫颈病变进展中作用的文献加以综述,了解HPV DNA甲基化状态在宫颈癌发生、发展中的作用。HPV基因表观遗传学状态有可能成为临床诊断和判断预后的分子标记物。