红景天甙对缺氧/缺糖损伤的SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响

目的:观察红景天甙对SH-SY5Y 细胞缺氧/缺糖损伤时细胞内[Ca²⁺]i、细胞凋亡率、细胞线粒体膜电位和活性的变化,探讨其对神经细胞线粒体膜电位的影响。方法:应用细胞培养,四唑盐比色实验( MTT )检测细胞线粒体活性,流式细胞术检测细胞内[Ca²⁺]i、细胞凋亡百分率和线粒体膜电位。结果: SH-SY5Y细胞缺氧/缺糖损伤2、4、6、12 h后,细胞内[Ca²⁺]i和细胞凋亡百分率明显高于对照组, 均有显著差异(P<0.01);细胞经缺氧/缺糖处理后,线粒体膜电位和活性明显低于对照组,2 h时分别为29.17%(P<0.01),38.80% (P<0.01), 12 h时分别为56.72%(P<0.01), 63.58% (P<0.01);红景天甙能显著降低细胞内[Ca²⁺]i,抑制细胞凋亡的发生,提高线粒体膜电位和活性,与缺氧/缺糖损伤组相比均有显著差异(P<0.05,P<0.01)。结论:红景天甙可抑制缺氧/缺糖损伤所致的线粒体膜电位和活性的降低,从而具有稳定线粒体膜电位的作用,抑制细胞凋亡的发生,这种作用可能与其能抑制神经细胞内钙超载有关。     

牛磺酸和锌对急性缺氧小鼠脑组织HIF-1α mRNA表达的影响

 目的：研究牛磺酸和锌对急性缺氧小鼠脑组织缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1 alpha，HIF-1α）mRNA表达的影响，探讨其对缺氧脑的保护作用机制。方法：复制小鼠急性缺氧模型，采用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法，研究用药后实验小鼠脑组织HIF-1α mRNA表达的变化。结果：正常对照组无HIF-1α mRNA表达，各组小鼠缺氧后脑组织HIF-1α mRNA表达明显高于对照组(P<0.05)；牛磺酸组和牛磺酸+硫酸锌组缺氧后小鼠脑组织HIF-1α mRNA增多最明显，与硫酸锌组有显著差异（P<0.05）；而用药的3组与生理盐水组相比，缺氧后小鼠脑组织HIF-1α mRNA的增多都有显著差异（P<0.05）。结论：急性缺氧时牛磺酸和锌能够增加脑组织HIF-1α mRNA的表达，这可能是其抗脑缺氧机制之一，而两者联合使用比单纯硫酸锌抗缺氧作用更明显。     

红景天苷通过PI(3)K/Akt激活HIF-1α表达抑制缺氧诱导的心肌细胞凋亡

目的:探讨红景天苷激活HIF-1α表达,抑制缺氧诱导的心肌细胞凋亡的可能的信号通路.方法:将原代培养的心肌细胞分为4组:正常对照组、缺氧组、缺氧 100 mg/L红景天苷组、缺氧 100 mg/L红景天苷 LY294002组.MTT法测定细胞存活率,Hoechst33258染色、DNA-ladder检测细胞凋亡,通过免疫荧光染色、Western blot检测细胞Akt、磷酸化Akt、HIF-1α的表达.结果:LY294002处理后,红景天苷对缺氧诱导的心肌细胞凋亡的保护作用被明显减弱,细胞存活率明显下降(P<0.01),细胞凋亡比率明显增加(P<0.01),琼脂糖凝胶电泳特异性"ladder"灰度明显加深,磷酸化Akt、HIF-1α2种蛋白表达水平明显降低.结论:红景天苷对缺氧诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用,其机制可能是通过PI(3)K/Akt信号通路激活HIF-1α的表达有关.     

原核pprI基因活体转染对系统性红斑狼疮小鼠氧化应激的影响

目的：通过检测耐辐射奇球菌pprI基因活体转染系统性红斑狼疮(SLE)小鼠的氧化应激和疾病活动性指标，探讨其对SLE小鼠氧化应激状态的影响。方法：62只纯品系B6-MRL-Faslpr-NJU雌性小鼠随机分成3组，未转染组(20只)，pEGFP-c1空载体转染组(20只)，pEGFP-c1-pprI转染组(22只)，纯品系C57BL/6健康小鼠作为健康对照组(20只)。应用活体电转染技术将pEGFP-c1空载体及pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转入SLE小鼠股前肌肉。Western blot鉴定转染后SLE小鼠外周血pEGFP-c1和pEGFP-c1-pprI融合基因表达。采用化学比色法检测各组小鼠外周血氧化应激标志物，ELISA法检测抗dsDNA抗体，免疫比浊法检测补体C4和C-反应蛋白。结果：①Western blot检测结果提示，质粒转染一周后均能在小鼠体内成功表达，且无毒副作用；②与未转染质粒和pEGFP-c1转染组SLE小鼠相比，pEGFP-c1-pprI转染组SLE小鼠GSH含量显著升高(P<0.01)，丙二醛(MDA)、蛋白质羰基(Carbonyls)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量显著降低(P<0.01)，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性明显升高(P<0.05)，血浆抗dsDNA抗体滴度和CRP含量显著降低(P<0.01),补体C4明显升高(P<0.05)，与健康组相比，各项指标差异无统计学意义(P>0.05)；③与未转染质粒和pEGFP-c1转染组SLE小鼠相比，pEGFP-c1-pprI转染组SLE小鼠淋巴细胞凋亡率和死亡率明显下降(P<0.01)，与健康小鼠相比，差异无统计学意义(P>0.05)。结论：耐辐射奇球菌pprI基因活体转染后能在SLE小鼠体内稳定表达且能调节体内的氧化应激状态，降低SLE小鼠的疾病活动度。     

海尔福防治慢性铝中毒小鼠作用机制的实验研究

目的探讨中药海尔福对慢性铝中毒小鼠防治作用机制。方法实验用30只昆明小白鼠,分模型组、海尔福治疗组、对照组,采用跳台法及避暗法检测各组小鼠学习记忆成绩,用HE染色观察小鼠脑皮层及海马神经元的变化,用免疫组织化学方法观察海尔福对各组小鼠脑皮层及海马结构区域NMDA受体亚单位NR2B蛋白表达的情况。结果模型组与对照组比较,学习记忆成绩明显下降(P<0.01);海尔福治疗组与模型组比较,学习记忆成绩明显提高(P<0.01);HE染色观察小鼠脑皮层及海马神经元在各组变化不明显。模型组与对照组比较,皮层和海马内NR2B的表达明显减少(P<0.01),海尔福治疗组小鼠脑内NR2B的表达程度明显增加(P<0.01)。结论海尔福可能通过NR2B蛋白表达的保护作用而发挥抗慢性铝中毒作用。     

应用rmIL-18 诱导肿瘤特异性CTL 治疗肝癌的实验研究

目的:研究rmIL-18 在体外培养系统(Coculture system in vitro,CCs)诱导肿瘤特异性细胞毒性T 淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)及在小鼠体内发挥的抗肝癌效果。方法:采用Stem SepTM 免疫磁性细胞分离方法分离培养小鼠脾脏NK 细胞、T 细胞及DCs,建立体外培养系统;采用不同途径,不同剂量CTL 免疫肝细胞癌荷瘤小鼠,研究CTL 对荷瘤小鼠肿瘤生长速度和生存时间的影响。结果:rmIL-18 能够在体外培养系统中诱导并促进CTL 介导的肿瘤特异性杀伤效应;CTL能够明显抑制荷肝癌小鼠的肿瘤生长速度(P<0.01)及明显延长荷瘤小鼠生存时间(P<0.01),并且这种作用随rmIL-18 浓度的增加而增强(P<0.01),且肿瘤内注射均优于腹腔内注射(P<0.01)。结论:rmIL-18 可以在体外诱导肿瘤特异性CTL 并在小鼠体内发挥抗肝癌作用。     

左旋龙脑对小鼠耐缺氧的影响

目的:研究左旋龙脑对小鼠的耐缺氧作用。方法:采用常压耐缺氧、断头张口呼吸、NaNO2中毒缺氧、氰化钾中毒缺氧、氯化镁所致心脏骤停缺氧等方法观察左旋龙脑抗缺氧作用。结果:除NaNO2中毒缺氧模型外,左旋龙脑对其余各种方法所致的缺氧模型均有显著的延长死亡时间作用。结论:左旋龙脑有显著的抗小鼠心肌、脑缺血缺氧作用。     

宫内缺氧对新生鼠顶叶皮质神经元内nNOS表达及对成年小鼠学习记忆能力的影响

目的探讨孕鼠宫内缺氧对生后小鼠发育时期顶叶皮质神经元内神经性一氧化氮合酶(nNOS)表达及对成年小鼠学习记忆能力的影响。方法用低张性缺氧模型致胎龄13d、15d、17d小鼠宫内缺氧,将新生后P1、P7、P14、P28、P90鼠脑组织作Nissl染色及nNOS免疫组织化学反应,观察顶叶皮质神经元数量、形态及nNOS神经元表达,P90小鼠行Morris水迷宫实验。结果与正常组比较,宫内缺氧组小鼠顶叶皮质神经元数量明显减少(P<0.05),顶叶皮质神经元内nNOS表达明显减弱(P1,P<0.01;P7,P<0.05;P14,P<0.05;P28,P<0.01;P90,P<0.01)。宫内缺氧组小鼠逃避潜伏期延长(1d、2d,P<0.05;3d、4d,P<0.01)及穿环次数明显减少(P<0.05)。结论宫内缺氧导致生后小鼠发育时期顶叶皮质神经元数量明显减少,顶叶皮质神经元内nNOS表达明显减弱;宫内缺氧引起成年小鼠学习记忆能力降低。     

汞吸入小鼠肠系膜微循环的改变

对汞蒸汽吸入小鼠及未吸汞正常小鼠的肠系膜微循环进行对照观察,结果发现汞吸入小鼠肠系膜微循环发生了改变。主要表现在吸汞小鼠微血管口径增粗,尤细静脉增粗明显(P<0.05),毛细血管增粗非常明显(P<0.01);血流变慢,呈粒流、粒线流的明显增多(P<0.01);微血管运动次数显著增加(P<0.01);血管张力减低(P<0.01);出血现象增多(P<0.01)。     

复方甘草液对小白鼠耐缺氧作用的研究

目的:观察复方甘草口服液对小白鼠的耐缺氧作用。方法:实验于2006-11/17-22在成都医学院科研中心实验室完成。①常压耐缺氧实验:昆明种小鼠20只单纯随机分为2组(n=10),对照组灌胃生理盐水0.01 ml/10 g;实验组灌胃复方甘草口服液0.1 ml/10 g,10 min后,将小鼠分别放人300 mL的磨口广口瓶内。以最后一次呼吸为指标,观察小鼠的存活时间。②小鼠耐缺氧实验:分组、给药同①,10 min后,放入水深20 cm,水温20.0±0.5℃的水池中游泳,观察小白鼠自放入水中至头部沉入水中10 s后不能浮出水面的时间。③对心肌缺氧的保护作用:分组、给药同①,10 min后,用乌拉坦1.2 g/kg腹腔注射麻醉,背部固定,分离气管,用线结扎,用心电仪观察心电。记下自结扎气管到心电消失的时间。每种方法都用秒表记录时间。结果:60只小鼠全部进入结果分析。①常压耐缺氧实验结果:复方甘草口服液组小鼠的存活时间长于对照组〔两组的存活时间分别为(61.54±5.93)和(52.05±20.21)min;t=5.483;p<0.01〕②负重游泳实验结果:复方甘草口服液组小鼠的存活时间长于对照组〔两组的存活时间分别为(61.54±5.93)和(52.05±20.21)min;t=5.483;p<0.01〕。③对心肌的保护作用实验结果:〔两组的存活时间分别为(7.76±2.23)和(5.94±2.30)min;t=2.555;p<0.01〕。结论:复方甘草口服液具有一定的耐缺氧作用。     

清心胶囊对病毒性心肌炎不同分期Th细胞分化的影响

目的:观察病毒性心肌炎(VMC)不同分期Th细胞分化的变化以及清心胶囊对这一环节的干预作用。方法:复制VMC急性期和恢复期BALB/c小鼠模型,给予清心较囊治疗后,采用光镜和透射电镜观察心肌病理改变,ELISA法检测血清IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平。结果:无论急性期还是恢复期,经清心胶囊治疗后,VMC小鼠心肌病变均明显减轻;VMC小鼠血清中IL-2、IFN-γ水平显著降低(P<0.01,P<0.05),IL-10或IL-4水平显著升高(P<0.05),与正常组比较无显著差异(P>0.05)。结论:清心胶囊能够通过抑制Th1应答,促进Th2应答从而恢复Th1/Th2细胞平衡。     

IL-23 在变应性鼻炎小鼠模型中的作用及机制的研究

目的:探讨IL-23 在变应性鼻炎小鼠模型中的作用及机制的研究。方法:应用卵清蛋白(OVA)致敏建立小鼠变应性鼻炎模型,给予抗IL-23p19 单克隆抗体干预,计量抗原激发后小鼠搔鼻数量。应用HE 染色方法检测IL-23 对小鼠鼻黏膜炎症影响,应用ELISA 法检测小鼠灌洗液中IL-4、IFN-β及IL-17A 含量。应用PCR 方法检测鼻黏膜中FOXP3 的含量。结果:治疗后抗IL-23p19 抗体组小鼠搔鼻症状相对于抗体对照组明显减轻(P<0.05),与PBS 组比较,OVA 组小鼠鼻黏膜炎症细胞浸润明显(P<0.01),鼻腔灌洗液中嗜酸性粒细胞数明显升高(P<0.05);抗IL-23p19 抗体治疗后,小鼠鼻黏膜炎症细胞浸润显著降低(P<0.05),鼻腔灌洗液中嗜酸性粒细胞数明显降低(P<0.05);抗IL-23p19 抗体治疗后,IL-4 及IL-17A 含量较IgG 抗体对照组降低(P<0.05),IFN-β含量不变(P>0.05)。抗IL-23p19 抗体治疗后,FOXP3 含量较IgG 抗体对照组增高(P<0.05)。结论:抗IL-23p19 抗体可有效治疗小鼠变应性鼻炎,其机制可能是抑制Th17 细胞的增殖并且促进调节性T 细胞的功能。     

急性缺氧小鼠海马CAl区NOS活力和nNOS蛋白表达的时程变化

目的:观察急性缺氧小鼠海马CAl区一氧化氮合酶(NOS)和神经元型一氧化氮合酶(nNOS) 阳性神经元的时程变化,探讨NO在脑缺氧中的作用并为抗脑缺氧提供依据。方法:复制小鼠急性缺氧模型,采用NADPH-d组织化学和nNOS免疫组织化学方法,研究急性缺氧后不同时程点小鼠海马CAl区NADPH-d 和nNOS阳性神经元数量的变化。结果:与正常对照组相比较,急性缺氧后0.5h组小鼠海马CAl区NADPH-d 和nNOS阳性神经元的数量无明显变化,差异无显著性(P>0.05),3h、6h和12h组逐渐增多并于12h升高达到最高峰,差异有显著性(P<0.05),而于24h后开始降低,48h恢复正常。结论:急性缺氧后早期海马CAl区NOS和nNOS水平明显增多,NO在缺氧所致早期脑损伤中起重要作用。     

宣肺解热口服液药理作用研究

目的:探讨宣肺解热口服液解热、抗炎、调节免疫药理作用,为临床治疗感染性疾病提供理论依据。方法:采用伤寒菌苗耳缘静脉注射于大白兔产生发热动物模型,观察宣肺解热口服液的解热作用;采用0.6%HAC对小鼠腹腔注射所致毛细血管通透性增高的动物模型,观察宣肺解热口服液的抗炎作用;采用小鼠尾静脉注射墨汁的方法,观察宣肺解热口服液调节免疫功能作用。结果:宣肺解热口服液对伤寒菌苗所致发热兔有明显的解热作用(P<0.05、P<0.01、P<0.001),尤以中剂量(17.85g生药/kg)为优(P<0.01),解热效果明显优于抗病毒颗粒(P<0.05);对0.6%HAC所致小鼠腹…     

shRNA沉默 ROCK1和ROCK2 表达对缺氧诱导的大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的: 探讨Rho相关的卷曲蛋白激酶(ROCK1)和ROCK2在缺氧诱导的大鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法: 原代培养大鼠心肌细胞,并用抗α-横纹肌肌动蛋白免疫组化法进行鉴定。将ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA瞬时转染细胞,48 h后给予缺氧6 h处理。实验分为5组:(1)空白对照组;(2)缺氧组;(3)缺氧+阴性对照shRNA组;(4)缺氧+ROCK1-shRNA组;(5)缺氧+ROCK2-shRNA组。用倒置显微镜观察心肌细胞搏动频率与节律;用全自动生化分析仪测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量;用MTT检测细胞存活率;用流式细胞仪检测细胞凋亡率;用Western blotting检测ROCK1和ROCK2的表达,并检测caspase-3和p-PI3K的表达情况。结果: 鉴定证实大鼠心肌细胞原代培养成功。缺氧损伤后心肌细胞搏动频率较对照组明显减慢,搏动幅度减弱,节律不规整(P<0.01),而ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA的转染能抑制缺氧导致的这一作用(P<0.05或P<0.01)。全自动生化分析仪检测发现,缺氧能导致细胞培养液LDH含量升高(P<0.01),而ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA的转染能抑制缺氧导致的这一作用(P<0.01)。MTT检测发现,缺氧能导致心肌细胞存活率降低(P<0.05),而ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA的转染能抑制缺氧导致的这一作用(P<0.05)。流式细胞仪检测发现,缺氧能导致心肌细胞凋亡率升高(P<0.01),而ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA的转染能抑制缺氧导致的这一作用(P<0.05或P<0.01)。Western blotting检测发现,ROCK1-shRNA的转染能降低ROCK1的表达(P<0.05), ROCK2-shRNA的转染能降低ROCK2的表达(P<0.01);缺氧能导致caspase-3表达升高(P<0.05)、p-PI3K表达降低(P<0.01),ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA的转染能抑制缺氧导致的这一作用(P<0.05或P<0.01)。结论: ROCK1和ROCK2表达下调能抑制缺氧损伤导致的大鼠心肌细胞凋亡,其机制与抑制caspase-3活化和增强p-PI3K的表达有关。     

几种具有抗疲劳、抗缺氧作用的藏药植物资源

由于藏民族主要生活在高海拔地区,因此在藏药中有许多著名的抗疲劳、抗缺氧药用植物资源,如红景天、沙棘等。本文整理了沙棘、冬虫夏草、蕨麻和红景天等几种(类)具有抗疲劳、抗缺氧作用藏药植物资源及其目前有关这些植物资源的开发利用研究状况,以期为开发运动员专用保健饮料和保健食品提供参考。     

姜黄素对东莨菪碱所致小鼠记忆功能障碍的影响(英文)

目的：探讨中药单体姜黄素对东莨菪碱致小鼠记忆障碍的影响及其可能的机制。方法：用东莨菪碱建立昆明小鼠记忆获得性障碍模型,通过跳台和水迷宫实验观察姜黄素对小鼠学习记忆能力的影响,同时测定其脑组织中乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽过氧化物酶和丙二醛的活性。结果：姜黄素可以减少东莨菪碱所致的记忆获得性障碍小鼠跳台回避反应的错误次数（P<0.05）,延长其逃避潜伏期（P<0.05）,也可以缩短记忆获得障碍小鼠水迷宫中寻找平台的潜伏期（P<0.05）,撤去平台后可以延长小鼠在原平台象限的停留时间（P<0.05）。姜黄素可以降低小鼠脑乙酰胆碱酯酶活性（P<0.01）、提高抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶活性（P<0.01）、降低脂质过氧化产物丙二醛含量（P<0.01）。结论：姜黄素对记忆获得性障碍有明显的改善作用,其机制可能与影响中枢胆碱能系统、抗氧化损伤有关。     

人参固本口服液的药理实验研究

人参固本口服液系人参固本丸改变剂型 ,具有吸收快 ,便于服用之优点。为验证其药理药效 ,对新老两种剂型进行了主要药效学对比实验 ,结果显示 :人参固本丸及口服液对小鼠均有明显的抗疲劳、耐缺氧作用 ,可提高小鼠腹腔内巨噬细胞的吞噬功能 ;对阴虚模型动物滋阴补肾及抗氧化作用实验表明 :二者对阴虚小鼠的甲状腺、胸腺、肾上腺均有增加趋势 ,尤其胸腺明显增大 ,说明二者均有滋阴补肾 ,改善因肾虚所致内分泌腺体萎缩 ,使失调的功能恢复至生理平衡状态 ,提高机体免疫功能的作用 ,并可使小鼠血液及胸腺组织中SOD活力显著提高 ,使血浆及脑组织中MDA含量明显下降 ,说明二者均能起到较强的清除自由基和抗脂质过氧化作用     

NKT细胞在MRSA感染性肺炎中作用的初步研究北大核心CSCD

目的:初步探讨NKT细胞在耐甲氧西林金葡菌(MRSA)感染性肺炎模型中的作用。方法:MRSA经鼻黏膜感染C57BL/6野生型(WT)小鼠和CD1d^(-/-)小鼠。观察小鼠生存率,检测肺组织中细菌载量,ELISA检测肺组织中细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-17、IL-6含量,流式细胞术检测肺组织中CD3^(+)CD8^(+)T细胞、NK细胞和NKT细胞百分比。结果:MRSA致死剂量感染5 d,WT小鼠生存率显著低于CD1d^(-/-)小鼠(46.2%vs 90.0%,P<0.05)。感染12~48 h,WT小鼠肺组织中细菌载量显著高于CD1d^(-/-)小鼠(P<0.01);WT小鼠肺组织中TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-17含量较CD1d^(-/-)小鼠明显增高(P<0.01)。MRSA感染24 h,WT小鼠肺组织中NKT细胞、NK细胞百分比显著高于CD1d^(-/-)小鼠(P<0.01),而CD3^(+)CD8^(+)T细胞百分比低于CD1d^(-/-)小鼠(P<0.01)。结论:在MRSA肺炎中,NKT细胞被激活,从而加重肺部炎症反应,降低生存率,减缓细菌清除。     

二苯乙烯苷对MPTP诱导的帕金森病小鼠模型黑质多巴胺转运体的影响

目的:研究2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4’-tetrahydroxystibene-2-o-β-D-gluco-side,TSG)对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠黑质多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)表达的影响。方法:将1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)注入小鼠腹腔制作PD模型,然后采用爬杆实验和悬挂实验检测小鼠的行为学变化,免疫荧光组织化学法观察黑质DAT阳性神经元数目。结果:行为学检测结果表明:模型组小鼠较正常对照组爬杆时间延长,悬挂能力下降(P<0.01),而TSG干预后可有效缩短小鼠的爬杆时间,并提高其悬挂能力(P<0.05,P<0.01)。免疫荧光结果显示:模型组小鼠黑质DAT阳性神经元的数目明显少于正常对照组(P<0.01),而TSG干预后,小鼠DAT阳性神经元数目的减少降低(P<0.05,P<0.01)。结论:TSG可改善PD小鼠的行为学、提高黑质DAT阳性神经元的存活数目,表明TSG对黑质多巴胺能神经元有一定的保护作用。