内皮抑素及其基因治疗肿瘤的新进展

1971年Ｆｏｌｋｍａｎ教授首次提出“肿瘤的生长依赖于血管生成 ,新血管的形成是体积 >1～ 2ｍｍ3 实体瘤生长和癌细胞转移的前提条件”。从此抑制肿瘤血管的生成成为肿瘤治疗学研究的新热点。 1997年Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ[1] 首次从鼠的血管内皮细胞瘤 (Ｅｏｍａ)培养液中提取出内皮抑素———一种新的血管生成抑制因子。经过 5年的实验动物研究和Ⅰ期临床试验证明 :内皮抑素能有效抑制血管内皮的增殖 ,促使肿瘤细胞的凋亡 ,抑制肿瘤的生长和转移 ,具有很强的抗肿瘤特性 ,而且无耐药性和毒副作用[1] 。本文就内皮抑素及其基因治疗肿瘤的研究应…     

应用重组分泌型内皮抑素腺相关病毒治疗肾细胞癌

【目的】研究重组分泌型内皮抑素腺相关病毒（rAAV—Endostatin，rAAV—ES）的抗肿瘤血管生成及抑制肾细胞癌进展的作用。【方法】应用rAAV—ES转染肾癌细胞，ELISA法测定上清液中重组内皮抑素的浓度并检测其对血管内皮细胞趋化运动的抑制作用；建立裸鼠肿瘤模型，检测肾癌细胞被感染后的成瘤率及全身应用rAAV—ES后抑制肿瘤发展的作用及其毒副作用。【结果】RCC细胞感染rAAV—ES后上清液中重组内皮抑素浓度为52．67ng／ml，对血管内皮细胞趋化运动的抑制率为38．13％；转染rAAV—Es后的肾癌细胞成瘤率为对照组的60％，体内实验证实全身应用rAAV—ES后血清中内皮抑素长期高效表达，肿瘤生长速度减慢，瘤体微血管密度变低，心脑组织检查未见缺血和其他病理改变。【结论】rAAV—ES无毒副作用，可有效地抑制肿瘤的血管生成，从而抑制肾细胞癌的发生和发展。     

胶原ⅩⅧ/内皮抑素的结构和功能

内皮抑素是胶原ⅩⅧ的C末端降解片段，相对分子质量为20000，体内、体外实验表明内皮抑素能有效抑制血管内皮细胞增殖、迁移及新生血管形成，是一种特异性、目前为止作用最强的血管形成抑制剂。但其确切的抗血管形成的作用机制尚未阐明。现就胶原ⅩⅧ／内皮抑素结构和功能作一综述。     

血管内皮抑素对Lewis肺癌细胞的影响

目的评估血管内皮抑素对lewis肺癌的抗肿瘤作用。方法将lewis肺癌细胞系和荷lewis肺癌细胞的C57鼠分别进行不同剂量血管内皮抑素的药敏试验。结果血管内皮抑素可以诱导细胞凋亡，凋亡程度与内皮抑素剂量呈正相关。内皮抑素对鼠lewis肺癌有明显的抑瘤作用和抗肿瘤肺转移作用，也明显抑制血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）的表达，作用程度与内皮抑素剂量呈正相关。应用内皮抑素未观察到消化道反应等类似化疗的副作用，也未观察到其它严重不良反应。结论血管内皮抑素有抗肿瘤生长作用。     

转人内皮抑素基因双歧杆菌液抑制血管生长的实验观察

目的：研究转人内皮抑素基因双歧杆菌液对血管生长的抑制作用，并观察其对动物移植性肝癌Heps的抑瘤作用。方法：以小鼠移植性肝癌Heps建立肿瘤模型；分别进行灌胃和尾静脉注射给药，同时用转人内皮抑素基因双歧杆菌液做鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验，在解剖显微镜下计数血管条数，用图像分析仪定量分析血管密度。实验动物处死后，称瘤重并计算抑瘤率。结果：转基因双歧杆菌液高、中、低3个剂量组的抑瘤率分别为49.78%、45.81%和30.41%；普通双歧杆菌组抑瘤率为10.9%，尾静脉注射转基因双歧杆菌组抑瘤率为58.3%；CAM实验显示转基因双歧杆菌液可明显抑制血管的生成。结论：转基因双歧杆菌有良好的抑制血管生长和抑制肿瘤生长的作用，且其作用有量效关系。     

内皮抑素的低分子肝素修饰及对兔角膜新生血管的抑制作用

目的探讨利用低分子肝素对内皮抑素进行结构修饰,并评价其对角膜新生血管(corneal neovas-cularization,CNV)的抑制作用。方法采用化学方法用低分子肝素修饰内皮抑素,碱烧伤法建立兔角膜新生血管模型,分别在球结膜下注射低分子肝素化内皮抑素(Ⅰ组)、内皮抑素(Ⅱ组)和生理盐水(对照组),观察新生血管的生长情况。结果成功的利用低分子肝素对内皮抑素进行了结构修饰,动物实验表明Ⅰ组新生血管的长度、面积、数量、VEGF的表达均明显低于其它两组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低分子肝素化内皮抑素可有效抑制角膜新生血管的生长,效果优于内皮抑素。     

内皮抑素在膀胱癌中的研究进展

随着肿瘤血管依赖学说的提出,发现了血管生成抑制物内皮抑素。近年来随着研究的深入,对内皮抑素的认识也逐渐增多,有些研究取得了重大成果。该文综述了内皮抑素的发现及其结构、其发挥抑制血管生成作用的机制、在膀胱癌中的表达情况、重组内皮抑素的构建及其在膀胱癌细胞水平、动物模型水平上的研究。深入了解内皮抑素对膀胱癌的作用及机制,为临床应用奠定基础,期待内皮抑素能在膀胱癌等肿瘤的治疗中发挥重要作用。     

肿瘤血管生成抑制因子治疗肺癌的现状与思考

肿瘤的生长、浸润和转移与新生血管密切相关。实体肿瘤形成后 ,即进入无血管的浸润前期 ,此时肿瘤细胞主要靠弥散供给营养 ,它的结节直径一般小于 2～ 3ｍｍ ,细胞数在 10 7以内。而体积增大超过2～ 3ｍｍ的肿瘤不仅需要新生血管维持营养供给和排泄代谢产物 ,还需要其提供有利于转移的通道。抑制新生血管的生成可使肿瘤进入休眠状态并诱导凋亡。血管抑素 (ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ)和内皮抑素 (ｅｎｄｏ ｓｔａｔｉｎ)是 1994、1997年相继发现的血管生成抑制因子〔1,2〕,短短几年来对它们的研究取得了飞速的发展。血管抑素和内皮抑素有望成为…     

异常的血管新生在糖尿病肾病中的研究进展

异常的血管新生是指在原有血管的基础上形成新生血管的过程,依赖于促血管生成因子和抑制血管生成因子之间的调控失衡,其参与糖尿病肾病的病理过程,如肾小球肥大、肾小球毛细血管基底膜增厚、毛细血管通透性增加。实验证明血管内皮生长因子及内皮抑素对异常血管新生的发展起着重要的作用。现介绍近年来异常的血管新生与糖尿病肾病的研究的进展。     

内皮抑素与肺发育关系的研究进展

微血管和肺泡的发育在肺发育过程中起着重要作用,而微血管的发育受生长调节因子血管内皮生长因子和内皮抑素的调节。内皮抑素是一种内源性的血管生成抑制因子,抑制新生血管的生成,影响肺发育的成熟,与某些肺疾病的发生密切相关。现就内皮抑素的作用机制,对肺发育及肺疾病的影响及其临床应用前景予以综述。     

内皮抑素联合介入治疗肝癌中血管生成的研究

目的 探讨内皮抑素联合介入治疗肝癌中血管生成的研究。方法 2009年8月～2011年8月,27例肝癌患者中15例多次行单纯肝动脉化疗栓塞（TACE）,12例内皮抑素联合TACE,在手术切除后的病理标本中的采用免疫组化方法分析两组血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况和平均微血管密度（MVD）值的差异。结果 单纯组VEGF的表达明显高于内皮抑素组（P〈0．05）;单纯组MVD值显著高于内皮抑素组（P〈0．05）。结论 内皮抑素联合TACE能够抑制肿瘤血管的生成,减少肿瘤增长及转移的机会,值得临床进一步的研究与推广。     

动脉粥样硬化斑块内新生血管与斑块稳定性之间的关系研究

目的研究内皮抑素对动脉粥样硬化斑块稳定性的影响,评价斑块内新生血管与斑块稳定性之间的关系.方法成年雄性Wistar大鼠建立动脉粥样硬化模型,随机分为两组,分别给予内皮抑素和生理盐水处理,8周后将大鼠处死,测量血脂水平,取主动脉石蜡包埋切片,HE染色,测量斑块面积及内膜中膜面积比;免疫组织化学检测,鼠单克隆抗体CD31培养以计数新生血管数目.结果各模型组血脂水平差异无显著性(P＞0.05),均显著高于空白对照组(P＜0.05);内皮抑素组内膜面积/中膜面积显著低于模型对照组(P＜0.05);内皮抑素组稳定性斑块比例大于模型对照组(P＜0.05),新生血管计数内皮抑素组少于模型对照组(P＜0.05).结论内皮抑素能抑制斑块内新生血管生长,抑制斑块进展,增加斑块稳定性.     

恩度治疗非小细胞肺癌患者的心脏毒性研究进展

重组人血管内皮抑素-恩度(Rh-endostatin,Endostar)是世界上首例血管内皮抑制素抗癌药物,国内外的I~Ⅲ期临床试验证实对于中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者,恩度联合化疗可以改善其近期疗效、生活质量、总生存率以及中位肿瘤进展时间,在2006年的中国版《非小细胞肺癌临床实践指南》中恩度首次被推荐用于中晚期NSCLC患者的联合化疗。但作为其主要不良反应的心脏毒性已成为临床中限制其运用的重要因素。因此,有必要对恩度的心脏毒性进行进探讨和评价。本文就恩度在NSCLC患者联合化疗中的心脏毒性研究近况做一综述。     

基因转染内皮抑素与阿霉素协同作用对小鼠肝癌细胞的影响

目的 探讨内皮抑素作为一种抑制血管生成的蛋白,能否与阿霉素协同作用治疗肝细胞癌(HCC).方法 构建内皮抑素表达质粒和在BALB/c裸鼠皮下建立HepG2人肝细胞肝癌动物模型,用阿霉素和生长抑素表达质粒基因转染治疗.结果 构建的内皮抑素表达质粒在体内、外均可稳定表达.内皮抑素蛋白与阿霉素协同抑制肿瘤和血管内皮细胞的增殖.内皮抑素基因治疗及阿霉素均可抑制裸鼠皮下肿瘤的生长及新生血管的生成,并且呈现协同作用.内皮抑素基因转染下调了缺氧诱导因子(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达,而阿霉素仅能下调VEGF的表达.内皮抑素及阿霉素协同下调VEGF的表达.结论 内皮抑素及阿霉素联合作用对抑制HCC治疗有确切效果,内皮抑素可提高阿霉素对肝癌细胞生长的抑制.     

重组人内皮抑素诱导人脐带静脉血管内皮细胞凋亡

目的观察人内皮抑素重组蛋白对人脐带静脉血管内皮细胞增殖的影响。方法采用细胞凋亡的荧光检测法检测对内皮细胞凋亡的影响。MTT法观察不同浓度的重组人内皮抑素对人脐带静脉血管内皮细胞（ECV304）增殖的抑制作用。结果重组人内皮抑素具有明显的抑制内皮细胞增殖的作用，ED50=550ng／ml，随重组蛋白浓度的增加抑制作用更为明显。结论重组人内皮抑素对细胞增殖的抑制与其浓度呈正相关，存在剂量效应关系；内皮抑素抗血管生成的机制与其抑制内皮细胞增殖、诱导内皮细胞凋亡有关。     

内皮抑素在高氧肺损伤中的研究

随着氧疗的广泛应用,所致的肺损伤不容小觑.微血管在肺发育及损伤修复过程中起着重要作用,而微血管的形成受生长调节因子、血管内皮生长因子和内皮抑素的调节.内皮抑素是一种内源性的血管生成抑制因子,抑制新生血管的生成,影响肺发育成熟,与某些肺疾病的发生密切相关.现就内皮抑素的作用机制,在高氧肺损伤中的变化及其临床应用前景作一综述.     

重组人内皮抑素在酵母中的表达及对人肺腺癌Astc-a-1细胞生长的抑制

目的在一种高效外源基因表达系统———毕赤酵母系统表达重组人内皮抑素,评价纯化的内皮抑素对人肺腺癌Astc-a-1细胞生长抑制的作用,为临床研究做进一步的探讨。方法和结果在酵母系统成功表达了重组人内皮抑素(re-combinant human endostatin),经肝素亲和层析得到了较高纯度的内皮抑素,经过筛选的人内皮抑素能够有效抑制ECV-304细胞的增殖,并与对照组有非常显著性差异(P<0.01);动物实验表明其能够有效抑制裸鼠肺腺癌Astc-a-1细胞的生长,统计学分析有非常显著性差异(P<0.01)。结论酵母系统内能够大量表达具有生物学活性的重组人内皮抑素,能在人体外有效抑制裸鼠肺腺癌Astc-a-1的生长,对其应用于临床具有重要意义。     

转染内皮抑素基因对血管内皮细胞增殖的影响

目的通过接种转染携带小鼠内皮抑素基因的腺病毒到人血管内皮细胞(ECV304),观察内皮抑素基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响。方法分对照Ⅰ组(磷酸盐缓冲液)、对照Ⅱ组(携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒)和实验组(携带小鼠内皮抑素基因的腺病毒),用二苯基四氮唑溴盐法(MTT法)测定各孔的光吸收值,计算细胞增殖抑制率。结果各组的细胞增殖抑制率分别为7%(对照Ⅰ组)、6%(对照Ⅱ组)和78%(实验组)。结论证实腺病毒携带的内皮抑素基因可以抑制人血管内皮细胞系的增殖,为进一步研究内皮抑素基因治疗提供实验基础。     

十全大补汤对小鼠原发性肝癌的生长及血管生成的影响

目的：研究十全大补汤对小鼠原发性肝癌生长以及其血管生成的影响。方法通过小鼠肝癌细胞CT-26接种小鼠,构建荷兰裸鼠原发性肝肿瘤模型,随机分为对照组和研究组,其中对照组给予生理盐水治疗,研究组给予十全大补汤治疗。治疗10 d后取小鼠血液分析其中小鼠血清中血管内皮生长因子、血管抑素和内皮抑素水平,并测量2组小鼠的肿瘤大小和质量,免疫组织化检测转移瘤微血管密度及细胞增殖。结果与对照组相比,研究组小鼠血清中血管内皮生长因子表达降低（P<0.05）,血管抑素和内皮抑素表达上调（P<0.05）,肿瘤组织Ki 67明显降低（P<0.05）,转移瘤微血管密度明显降低（P<0.05）,并且研究组小鼠的肿瘤质量和尺寸均小于对照组（P<0.05）。结论十全大补汤能够抑制小鼠原发性肝癌肿瘤的生长,扰乱小鼠血清内血管内皮生长因子、血管抑素和内皮抑素的表达水平,抑制肿瘤血管的生成,对原发性肝癌小鼠的治疗具有一定的临床价值。     

内皮抑素联合TACE治疗原发性肝癌的应用前景

原发性肝癌TACE后残存癌细胞血管内皮生长因子的表达能刺激新生血管的生长,有助于残存癌细胞的存活,并可能在TACE术后残癌组织血供重建中起重要的作用;内皮抑素可以特异性作用于新生血管的内皮细胞,抑制内皮细胞的迁移、诱导其凋亡而抑制肿瘤新生血管形成和肿瘤生长;内皮抑素联合TACE治疗原发性肝癌将有一个良好的临床应用前景。