RP-HPLC测定芫花中山柰酚-3-O-β-D-(6″-p- 香豆酰)-吡喃葡萄糖苷的含量

目的：对芫花中山柰酚-3-O-β-D-(6″-p-香豆酰)-吡喃葡萄糖苷（tiliroside）的含量进行测定。方法：采用反相高效液相色谱,ZORBAX XDB C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈(A)-0.1%醋酸水溶液(B),梯度洗脱,0～18 min A ：B 26∶74,18～33 mim A：B 80∶20;流速1.0 mL•min-1,检测波长310 nm,柱温25 ℃。结果：山柰酚-3-O-β-D-(6″-p-香豆酰)-吡喃葡萄糖苷在进样量0.1~5.0 μg与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9（n=6）。山柰酚-3-O-β-D-(6″-P-香豆酰)-吡喃葡萄糖苷的平均回收率101.50%,RSD 0.90%（n=6）。结论：该方法可准确地测定芫花中山柰酚-3-O-β-D-(6″-p-香豆酰)-吡喃葡萄糖苷,方法精密度高、简便、快速。     

HPLC测定仙鹤草中山奈酚-3-O-(6-p-香豆酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷含量

目的:建立高效液相色谱法测定仙鹤草药材中山奈酚-3-O-(6-p-香豆酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷含量的方法。方法:采用依利特ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.05%磷酸(30∶70),流速为1.0 mL·min-1,柱温为30℃;检测波长315 nm。结果:山奈酚-3-O-(6-p-香豆酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷的线性范围为1.272⁸.904μg·mL-1(r=0.9999);加样回收率为100.5%,RSD为1.94%。结论:该方法简便易行、准确、重复性好,为仙鹤草药材的质量控制提供了依据。     

HPLC-DAD同时测定洋甘菊中木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素-7-O-β-D葡萄糖苷的含量

目的建立同时测定洋甘菊中木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素7-O-β-D葡萄糖苷含量测定的HPLC方法。方法色谱柱:Agilent Zorbax SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸(34∶66);流速:1.0 ml/min;柱温25℃;进样量10μl;检测波长:350 nm。结果木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素-7-0-β-D葡萄糖苷的线性范围分别为5.11~409.00、12.56~1 005.00μg/ml,相关系数r>0.999 3,具有良好的线性。精密度、稳定性符合要求,木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素-7-0-β-D葡萄糖苷加样回收率分别为96.44%~103.55%、95.12%~101.52%,RSD均为0.03%。结论该方法简便、准确、重复性好,适用于洋甘菊中木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素7-O-β-D葡萄糖苷含量测定。     

RP-HPLC同时测定菝葜中山柰酚和槲皮素的含量

 目的建立一种RP-HPLC测定菝葜山柰酚和槲皮素含量的方法,并测定其不同产地的含量。方法采用LichrospherC₁₈柱,水-乙腈-磷酸-三乙胺(65∶35∶0.27∶0.45)作流动相,流速0.7 mL·min^-1,二级管阵列检测器(DVD),检测波长365 nm。结果槲皮素,山柰酚与相邻杂质能很好分离,其分离度分别为1.96和5.32,理论塔板数以槲皮素峰和山柰酚峰计算,分别为5 121和6 673;在5～100 mg·L^-1内峰面积与其浓度均呈良好的线性关系(r=0.999 4,0.999 6),样品回收率分别为97.58%和105.67%;两成分含量以湖南张家界的最高而湖北赤壁最低。结论该方法精密度、重现性和分离效果好,分析快速准确,适合于该药材及提取物中山柰酚和槲皮素含量的测定,不同产地两成分均存在一定的差别。     

大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的促智活性及其机制

目的 研究制首乌活性单体化合物大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(PMEG)的促智活性以及作用机制。方法 小鼠跳台实验以及胆碱酯酶活力测定。结果 igPMEG后,正常小鼠及东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠错误次数显著减少;离体实验和整体实验中PMEG对酶活力具可逆性抑制作用,体内外酶活力恢复50%所需时间分别为T1/2=115min,T1/2=165min。结论 PMEG能提高正常小鼠学习记忆功能,对东莨菪碱所致学习记忆障碍具防护作用;初步认为PMEG作用机制是对胆碱酯酶可逆性的抑制。     

不同产地岗梅根茎中赪酮甾醇3-O-β-D 葡萄糖苷的含量测定

目的 建立岗梅根、茎中赪酮甾醇3-O-β-D 葡萄糖苷的含量测定方法,比较不同产地岗梅根、茎中赪酮甾醇3-O-β-D 葡萄糖苷的含量.方法 采用高效液相色谱法.色谱柱为Kromasil C18 柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(95∶5),流速为1.0 mL/min,柱温25 ℃.蒸发光散射检测器参数:漂移管温度为90 ℃,氮气流速为1 L/min.结果 赪酮甾醇3-O-β-D 葡萄糖苷在0.250～3.992 μg 范围内呈良好的线性关系(r ＝0.999 5),平均回收率为98.2%,RSD＝2.0%(n ＝6).岗梅根中含量在0.114～0.303 mg/g 之间,岗梅茎中含量在0.061～0.224 mg/g 之间.结论 本方法简单快捷、准确可靠,可用于岗梅药材的质量控制.岗梅根中赪酮甾醇3-O-β-D 葡萄糖苷含量比岗梅茎高.     

RP-HPLC法测定土牛膝中齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量

目的:建立土牛膝药材中齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量测定方法。方法:采用RP-HPLC法,色谱柱为Hibar C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.4%磷酸(34∶66),流速:1.0 mL·min-1,检测波长:203 nm,柱温:35℃。结果:齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷在0.1426-2.851μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为102.4%(n=6),RSD%为1.7%。结论:本方法简便、准确、重复性良好,可用于土牛膝中齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量测定。     

20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-20(S)-原人参二醇对抗肝癌药物的增敏作用研究

目的探讨20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-20(S)-原人参二醇(人参皂苷IH901)与医学上常用抗肝癌药物环磷酰胺(CTX)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(cDDP)单独用药及联合用药体外抗肝癌细胞Bel-7402、SMMC-7721的活性。方法应用MTT法检测人参皂苷IH901、CTX、5-FU、cDDP分别在不同质量浓度下单独及联合用药对肝癌细胞的增殖抑制率,并根据金氏公式计算其协同指数(Q值),进而评价两药联用的增敏效果。结果 IH901与CTX联合用药后对Bel-7402、SMMC-7721抑制作用明显增强,且二者合用具有协同作用;而IH901与5-FU联合用药后对2种细胞仅相加效果;IH901与cDDP联合用药,对Bel-7402仍然是相加的效果,对SMMC-7721则是具有轻微的协同效果。结论人参皂苷IH901可增强CTX对肝癌细胞增殖的抑制作用,具有化疗协同效果,且具有一定的广谱性,可能成为一种潜在的抗肝癌药物。     

红花药材中6-羟基山柰酚-3-O-葡萄糖苷的TLC鉴别

红花为中医传统的活血化瘀药,具有活血通经,散瘀止痛的功效[1 ] 。研究表明,其活血化瘀的主要有效成分集中在红花黄色素和黄酮类化合物等[2 ,3 ]部分。在鉴别方面,《中国药典》2 0 0 0年一部收载的红花项下主要采用了粉末显微特征鉴别、以红花对照药材为对照的TLC鉴别。Hattori等在1 992年首次报道了从红花中提取分离得到新的黄酮成分6 羟基山柰酚3 O 葡萄糖苷[4] 。后来我们也从红花中分离提取得到了6 羟基山柰酚3 O 葡萄糖苷,....     

HPLC法测定蒙药玉簪花中山奈酚葡萄糖苷的含量

目的建立蒙药玉簪花中山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Phenomenex Luna C18(250mm×4.6mm,5μm),以体积分数为0.5%的磷酸水溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,检测波长为364nm。结果山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖苷质量在0.113～2.260μg内呈良好线性关系,相关系数为1,平均回收率为101.1%(RSD=2.58%,n=6)。结论玉簪花中山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量为0.2mg/g(0.02%),该方法简便、准确、重现性好,可用于蒙药玉簪花中山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定。     

紫芫花化学成分研究

 目的 研究瑞香科植物紫芫花(Daphne genkwa Sieb.et Zucc.)干燥花蕾的化学成分。方法 对紫芫花的体积分数95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位采用硅胶、凝胶Sephadex LH-20等色谱手段进行化学成分的分离纯化,通过理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果 分离得到12个化合物,鉴定了其中10个化合物,分别为芹菜素(apigenin, 1)、芫花素(genkwanin, 2)、刺槐素(4′-O-methylapigenin, 3)、椴苷[kaempferol,3-O-β-D-(6-O-trans-p-coumaroyl)- glucopyranoside,4]、对羟基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde, 5)、对羟基桂皮酸甲酯(trans-p-hydroxy cinnamic methyl ester, 6)、对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid, 7)、对羟基桂皮酸(p-hydroxy cinnamic acid, 8)、苄基葡萄糖苷（benzyl-glucopyranoside, 9）和苯乙基葡萄糖苷（phenylethyl-glucopyranoside,10）。结论 化合物5~10为首次从该植物中分离得到。     

芫花枝条木脂素化学成分研究

目的：研究芫花枝条中木脂素类化学成分。方法：采用硅胶、凝胶、反相硅胶、制备薄层色谱等方法对芫花枝条中的木脂素类成分进行分离纯化,通过谱学分析技术进行化合物结构鉴定。结果：分离鉴定了8个木脂素类化合物,分别鉴定为：芝麻脂素（1）、紫丁香树脂酚（2）、落叶松脂醇（3）、左旋松脂醇（4）、荛花酚（5）、salicifoliol（6）、vladinol D（7）、异落叶松脂醇（8）。结论：化合物8为首次从芫花枝条中分离得到,化合物1、5、6、7为首次从瑞香科植物中分离得到。     

Antitumor Activity of Total Flavonoids from Daphne genkwa in Colorectal Cancer

Daphne genkwa Sieb.et Zucc. is a well‐known medicinal plant. This study was designed to investigate the anticancer effects of total flavonoids in D. genkwa (TFDG) in vitro and in vivo. HT‐29 and SW‐480 human colorectal cancer cells were cultured to investigate the anticancer activity of TFDG. In addition, the Apc^Min/+ mouse model was applied in the in vivo experiment. Results of the cell experiment revealed that TFDG possessed significant inhibitory effects on HT‐29 and SW‐480 human colorectal cancer cells (both p < 0.01). Furthermore, our in vivo data showed that after treatment with TFDG, there was a significant increase in life span (both p < 0.01) and tumor numbers were reduced in the colon (both p < 0.01), which was supported by the data of tumor distribution, body weight changes and organ index. Our results also indicated that expressions of interleukin (IL)‐1α, IL‐1β, IL‐6, granulocyte colony‐stimulating factor and granulocyte‐macrophage colony‐stimulating factor in gut tissue were downregulated by treatments of TFDG, and immunity cytokine secretions in the serum were regulated after oral administration of TFDG. Taken together, these findings suggested that TFDG has a potential clinical utility in colorectal cancer therapeutics, and TFDG's action is likely linked to its ability to regulate immune function and inhibit the production of inflammatory cytokines. Copyright © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.     

芫花根质量标准研究

目的建立芫花根中芫花酯甲的定性鉴别和定量分析方法。方法采用薄层色谱法对芫花根中芜花酯甲进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定芫花酯甲的含量。色谱条件：KromasilC18色谱柱（4．6mm×250mm,5μm）;流动相为甲醇-水（85：15）,流速1．0mL／min;柱温40℃;检测波长为238nm;记录时间40min。结果芫花根中芫花酯甲的薄层色谱鉴别特征明显、专属性强;含量测定线性范围为0．047-0．282btg（r=0．9996）;平均回收率为99．2％,RSD=2．00％（n=6）。结论该方法操作简便,结果准确,能够对芜花根中的芜花酯甲进行定性鉴别和定量分析,提高了该药材的质量控制水平。     

芫花对P-糖蛋白底物罗丹明123肠内转运和吸收的影响

 目的 研究芫花水煎液对P-糖蛋白(P-gp)的底物罗丹明123(R123)在空肠内转运和吸收的影响,探讨芫花对肠黏膜P-gp的调控作用。方法 大鼠分组制模,利用体外扩散池法(Ussing chamber)评价芫花对R123和荧光素钠(CF)经空肠黏膜透过性的影响;利用在体实验测定R123和CF在血浆中药物浓度的变化和各种药动学参数。结果 一方面,0.5 g·mL-1的芫花水煎液降低了R123分泌方向的转运,同时提高了吸收方向的转运,而且对CF吸收和分泌方向的转运都有抑制作用;另一方面,在体实验芫花组R123的生物利用度和曲线下面积都显著大于对照组,CF则与对照组无明显差异。结论 实验表明,芫花某些化学成分抑制P-gp,另一些成分可能使细胞之间紧密连接加强,引起旁细胞途径药物CF渗透的降低。因此芫花是肠黏膜P-gp的一种抑制剂,但是哪种化学成分发挥作用有待于进一步研究。     

芫花根乙醇提取物的抗炎活性

目的 阐明芫花根乙醇提取物(EERD)的抗炎活性。方法 EERD对急性炎症的抑制作用采用组胺诱导的小鼠毛细血管通透性增加、角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀以及小鼠网状内皮系统(RES)对异物的吞噬作用进行分析。对慢性炎症的抑制作用以福氏完全佐剂诱导的多发性关节炎和棉球诱导的大鼠肉芽肿进行分析。结果 EERD在剂量为40mg／kg时能明显地抑制小鼠毛细血管通透性增加和抑制大鼠足肿胀；在剂量为30mg／kg时对RES的吞噬能力有提升作用、对大鼠肉芽肿和多发性关节炎表现出显著抑制作用。EERD也能抑制丙二醛(MDA)、前列腺素E2(PGE2)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF—α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的形成，增强超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活力并钝化诱导型氮氧化物合酶(iNOS)的活性。结论 EERD的抗炎活性主要是通过抑制脂质过氧化反应和炎症介质的释放、增强SOD和CAT的活力、钝化iNOS的活性以及提升RES的吞噬作用实现的。     

Isolation of flavonoids, a biscoumarin and an amide from the flower buds of Daphne genkwa and the evaluation of their anti-complement activity

As part of an ongoing study aimed at identifying the anti-complement active compound from the flower buds of Daphne genkwa, ten flavonoids, one biscoumarin and one amide were isolated. Their structures were identified from spectroscopic and physicochemical data as genkwanin 5-O-beta-d-primveroside (1), apigenin 7-O-beta-d-glucuronide (2), genkwanin 5-O-beta-d-glucopyranoside (3), apigenin 5-O-beta-d-glucopyranoside (4), genkwanin (5), apigenin (6), luteolin 7-methyl ether (7), luteolin (8), daphnoretin (9), velutin (10), 7-methoxyacacetin (11) and aurantiamide acetate (12). Among them, compounds 9, 10 and 12 were isolated from this plant for the first time. The anti-complement activity of these compounds was tested against the classical pathway of the complement system. Among the compounds, daphnoretin (9) exhibited significant anti-complement activity with an IC(50) value of 11.4 microm, whereas the other compounds were not active in the assay.     

芫花不同药用部位芫花素和芫花酯甲含量比较

目的比较芫花根、叶、花蕾中芜花素和芫花酯甲含量差异,为该植物资源的可持续发展提供试验数据。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Kromasil C18柱（4．6mm×250mm,5μm）,芫花素流动相为甲醇-水-冰醋酸（65：35：0．5）,流速0．8mL／min,柱温为40℃,检测波长338nm;芜花酯甲流动相为甲醇-水（82：18）,柱温为40℃,流速1．0mL／min,检测波长233nm。结果芫花素在3个部位中的含量从高到低依次为：花蕾（0．30％）、叶（0．038％）,根申未检测到该成分;芫花酯甲在3个部位中的含量从高到低依次为：叶（0．028％）、根（0．025％）、花蕾（0．0039％）。结论以叶代根、花蕾提取芫花酯甲,可以拓宽药源,实现植物资源的可持续发展。     

芫花根乙醇提取物的镇痛活性

目的阐明芫花根乙醇提取物(EERD)的镇痛活性及其可能的机制。方法通过研究EERD对佐剂性关节炎(AA)大鼠的痛觉反应和足肿胀的影响;对AA大鼠炎性组织中前列腺素E2(PGE2)和白细胞介素-1β(IL-1β)的形成及SOD和过氧化氢酶(CAT)的活性的影响;血清和脑组织中NO和诱导型NO合酶(iNOS)水平的影响以及对AA大鼠c-Fos蛋白表达的影响来评价EERD的镇痛活性。结果EERD能明显减轻AA大鼠的痛觉反应和抑制足肿胀,能显著抑制炎症组织中PGE2和IL-1β的形成并提高SOD和CAT的活性,能明显降低AA大鼠脑组织中iNOS的活性从而降低NO的水平。EERD可显著抑制AA大鼠脊髓c-Fos蛋白的表达。结论EERD具有显著的镇痛作用,其镇痛机制可能是通过抑制PGE2和IL-1β的形成、降低脑组织iNOS的活性从而减少NO的生成,以及增强SOD和CAT的活性以抑制脂质过氧化反应来实现的。