克林霉素磷酸酯及其有关物质USP测定方法的优化研究

目的:通过优化的USP33版中HPLC方法研究与比较克林霉素磷酸酯及其有关物质测定结果。方法:采用HPLC法,C8色谱柱(5μm,4.6mm×250mm),柱温40℃;流动相采用pH=5.6的缓冲液-乙腈-甲醇的混合溶液梯度洗脱,流速1.2mL/min,检测波长214nm。结果:克林霉素磷酸酯主峰与其最邻近的有关物质,以及各有关物质得到很好的分离;主成分克林霉素磷酸酯在浓度1.41～2.09mg/mL范围内与峰面积响应值呈良好线性关系,平均回收率为98.26%;主要有关物质在下述浓度范围与峰面积响应值线性关系良好;林可霉素0.71～32.95μg/mL,平均回收率为91.73%;林可霉素磷酸酯0.92～33.12μg/mL,平均回收率为92.88%;克林霉素B磷酸酯0.80～64.72μg/mL,平均回收率为98.04%;克林霉素1.11～32.91μg/mL,平均回收率为97.50%。结论:优化后的方法比USP33版中的方法分离能力更强,基线较为平稳,更能准确测定克林霉素磷酸酯及有关物质的量。     

HPLC法测定维格列汀片中的有关物质

目的:建立测定维格列汀片中有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Xterra MS C_(18),流动相为[磷酸盐缓冲液-水-乙腈-甲醇(400∶600∶15∶15,V/V/V/V)]-[磷酸盐缓冲液-乙腈-甲醇(400∶450∶150,V/V/V)](梯度洗脱),流速为1.2mL/min,检测波长为210 nm,柱温为35℃,进样量为10μL。结果:杂质A、B、C、D检测质量浓度线性范围分别为18.80~188.0μg/mL(r=0.999 5)、22.64~226.4μg/mL(r=0.999 6)、21.74~217.4μg/mL(r=0.999 7)、19.12~191.2μg/mL(r=0.999 8);检测限分别为4.18、2.68、1.12、1.34μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3%;加样回收率分别为97.9%~103.1%(RSD=2.01%,n=9)、98.8%~104.1%(RSD=1.93%,n=9)、98.0%~103.6%(RSD=1.81%,n=9)、100.8%~104.1%(RSD=0.98%,n=9)。结论:该方法操作简单、结果准确,可用于维格列汀片中有关物质的测定。     

HPLC测定盐酸克林霉素原料和制剂的有关物质

摘要：目的 建立盐酸克林霉素有关物质HPLC测定方法,并比较国产盐酸克林霉素杂质含量的差异。方法 采用CAPCELL PAK C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.5)为流动相A,以乙腈为流动相B,按线性梯度洗脱,柱温为30℃,检测波长为210nm,流速1.0mL/min,测定9批盐酸克林霉素原料及75批制剂中的杂质含量。结果 3种已知杂质[林可霉素、克林霉素B(RRT 0.80)、7-差向克林霉素(RRT 0.89)]和其余未知杂质及克林霉素峰间的分离度大于1.5。林可霉素校正因子为0.68,采用外标法计算含量。国内仅1个生产企业不同批次的盐酸克林霉素胶囊杂质水平差异较小,其余生产企业杂质水平批间差异均较大。结论 本方法灵敏度高,分离效果好,能同时测定盐酸克林霉素原料及制剂的杂质。     

HPLC法测定克林霉素磷酸酯阴道片含量

目的建立用反相高效液相色谱法测定克林霉素磷酸酯阴道片中克林霉素的含量。方法采用C18柱,流动相为磷酸二氢钾(KH2PO40.1mol.L-1,用磷酸调pH2.5)-乙腈(75∶25),检测波长210nm,流速1.0mL.min-1。结果本法测定克林霉素线性范围为0.06~0.36mg.mL-1,浓度与吸收度呈良好的线性关系r=0.9999;平均回收率为99.23%,RSD=1.10%。结论该法简单、准确,重现性好。可用于控制克林霉素磷酸酯阴道片中克林霉素的含量。     

HPLC法测定复方苯妥英钠凝胶剂中克林霉素磷酸酯的含量

目的:建立HPLC法测定复方苯妥英钠凝胶剂中克林霉素磷酸酯的含量。方法:采用ZORBAX SB-C18色谱柱(250mm×46 mm,5μm);流动相为0.1 mol·L-1的磷酸二氢钾(用磷酸调p H 2.5)-乙腈(75∶25);流速0.8 ml·min-1;检测波长210 nm;柱温:25℃;进样量10μl。结果:克林霉素磷酸酯在3.00~18.00μg范围内线性关系良好(r=0.999 5);平均回收率为101.11%(RSD=0.34%,n=6)。结论:本方法简单,灵敏,重复性好,可用于复方苯妥英钠凝胶剂中克林霉素磷酸酯的含量测定。     

HPLC法同时测定复方甲硝唑克林霉素乳膏中4种成分的含量

目的:建立同时测定复方甲硝唑克林霉素乳膏中甲硝唑、盐酸克林霉素、螺内酯、维生素B_6含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C_(18),流动相为乙腈-[0.68%磷酸氢二钾溶液(含1%三乙胺)](梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为25℃,进样量为20μL。结果:甲硝唑、盐酸克林霉素、螺内酯、维生素B_6检测质量浓度线性范围分别为20.0～120.0μg/mL(r=0.999 9)、10.0～60.0μg/mL(r=0.999 1)、4.0～24.0μg/mL(r=0.999 4)、10.0～60.0μg/mL(r=0.999 4);定量限分别为13.06、7.36、2.43、6.42μg/mL,检测限分别为4.18、1.82、0.76、1.79μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;回收率分别为98.97%～100.91%(RSD=0.79%,n=9)、99.02%～101.80%(RSD=1.03%,n=9)、98.18%～101.05%(RSD=1.01%,n=9)、98.75%～101.36%(RSD=0.87%,n=9)。结论:该方法简便、快速、结果准确,可用于复方甲硝唑克林霉素乳膏中甲硝唑、盐酸克林霉素、螺内酯、维生素B_6含量的同时测定。     

HPLC法测定克林霉素磷酸酯及其有关物质的方法学研究

目的:建立克林霉素磷酸酯及其有关物质含量的测定方法并进行方法学研究。方法:采用HPLC法,色谱柱为Li-chrospher C_(18)柱(250mm×46mm,5μm);柱温:25℃;流动相为0.1mol·L~(-1)的磷酸二氢钾缓冲液(用40％氢氧化钾溶液调节pH=5.6)-乙腈(76:24);流速:1.2mL·min~(-1);检测波长:210nm。结果:与BP1998和EP1997相比,表克林霉素-2-磷酸酯及其另一未知杂质和克林霉素磷酸酯得到很好分离;线性范围;克林霉素-2-磷酸酯在0.1～5.0mg·mL~(-1)呈良好线性,r=0.9996;克林霉素B-2-磷酸酯在0.0013～0.13mg·mL~(-1)呈良好线性,r=0.9981;表克林霉素-2-磷酸酯在0.0014～0.14mg·mL~(-1)呈良好线性,r=0.9972;克林霉素在0.0011～0.11mg·mL~(-1)呈良好线性,r=0.9983;最低检测限为0.1μg;最低定量限为0.33μg。结论:本法比英国药典和欧洲药典更能准确地测定克林霉素磷酸酯及其有关物质含量。     

HPLC法测定注射用泮托拉唑钠中的有关物质

目的:建立测定注射用泮托拉唑钠中有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil Hypersil ODS,流动相为0.01 mol/L磷酸氢二钾溶液(调节pH为7.0)-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为290 nm,柱温为40℃,进样量为20μL。结果:杂质A、B、C+E、D检测质量浓度线性范围分别为0.416 8~1.042 0μg/mL(r=0.999 8)、0.195 0~0.487 5μg/mL(r=0.999 9)、0.389 0~0.972 5μg/mL(r=0.999 8)、0.198 6~0.496 5μg/mL(r=0.999 8);定量限分别为0.834、0.780、1.556、0.794ng/mL,检测限分别为0.417、0.390、0.778、0.397 ng/mL;精密度试验的RSD<1.0%,重复性试验中总杂质峰面积的RSD<1.0%;回收率分别为98.81%~102.49%(RSD=1.18%,n=9)、95.31%~98.44%(RSD=0.91%,n=9)、96.88%~98.44%(RSD=0.52%,n=9)、97.87%~101.28%(RSD=1.05%,n=9)。结论:该方法简便、准确,可用于注射用泮托拉唑钠中有关物质的测定。     

高效液相色谱法测定克林霉素磷酸酯片的含量

目的建立克林霉素磷酸酯片的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂,磷酸盐缓冲液-乙腈(73∶27)为流动相,检测波长为210 nm,用外标法计算克林霉素磷酸酯片的含量。结果含量测定在0.060~0.60 mg·m L-1(R2=0.997 9)浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98.98%(RSD=0.46%)。结论该方法简便、准确,重复性好、灵敏度高,适用于克林霉素磷酸酯片含量的测定。     

HPLC法测定盐酸氯卡色林原料药中的有关物质

目的:建立测定盐酸氯卡色林原料药中有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Welch ultimate XBODS,流动相为磷酸二氢钠溶液(pH为6.5)-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为220 nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果:杂质1、2、3检测质量浓度线性范围分别为0.075 60~7.560μg/mL(r=0.999 9)、0.081 40~8.140μg/mL(r=0.999 9)、0.099 24~9.924μg/mL(r=0.999 9);定量限分别为0.075 60、0.081 40、0.099 25μg/mL,检测限分别为0.022 68、0.024 42、0.02977μg/mL;精密度试验的RSD<2.0%,稳定性、重复性试验只检出杂质1,RSD<2.0%;回收率分别为98.53%~102.45%(RSD=1.06%,n=9)、98.26%~101.64%(RSD=1.03%,n=9)、100.08%~102.10%(RSD=0.70%,n=9)。结论:该方法灵敏、快速、准确、可靠,可用于盐酸氯卡色林原料药中有关物质的测定。     

RP-HPLC法测定单硝酸异山梨酯鼻腔喷雾剂的含量和有关物质

目的:建立测定单硝酸异山梨酯鼻腔喷雾剂含量及有关物质的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Di-amonsil C18柱,流动相为甲醇-水(30∶70),流速为1.0mL·min-1,检测波长为210nm,进样量为20μL;峰面积定量采用外标法。结果:单硝酸异山梨酯回归方程为Y=7892.7X+2980.7(r=0.9999),检测浓度在5～150μg·mL-1范围内与峰面积积分值线性关系良好;最低检出浓度为20ng·mL-1;高、中、低浓度日内、日间精密度的RSD在0.31%～0.93%之间;重复性试验RSD=0.69%(n=9);样品的平均回收率为101.02%(RSD=1.12%,n=9)。结论:该法准确、可靠、重复性好,可用于单硝酸异山梨酯鼻腔喷雾剂的含量及有关物质的测定。     

盐酸林可霉素甘油涂剂的制备及含量测定

目的:制备治疗口腔黏膜溃疡的盐酸林可霉素甘油涂剂,并建立其含量测定方法。方法:以盐酸林可霉素、盐酸达克罗宁为主药制备涂剂;采用高效液相色谱法测定其中2种主药的含量。结果:盐酸林可霉素、盐酸达克罗宁的线性范围分别为20～200(r=0.9998)、10～100μg·mL-1(r=0.9999);平均回收率分别为99.61%、99.28%(n=5),RSD分别为0.439%、0.818%。结论:该制剂制备及含量测定方法简便、可行。     

天南星药材的鉴别及黄酮含量测定方法研究

目的:建立天南星药材的鉴别方法及黄酮含量测定方法。方法:以夏佛托苷和异夏佛托苷为标准品,采用薄层色谱(TLC)法鉴别天南星药材;采用高效液相色谱法测定天南星中黄酮的含量。结果:TLC中,供试品在与标准品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。夏佛托苷和异夏佛托苷分别在7.925～126.8μg·mL-(1r=0.9999)、3.996～63.94μg·mL-(1r=0.9997)浓度范围与各自峰面积积分值之间呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.40%(RSD=2.10%,n=9)、99.52%(RSD=2.42%,n=9)。结论:本方法操作简便、准确性高、重复性好,可作为天南星药材质量评价的方法。     

HPLC法同时测定炙甘草汤中甘草苷、甘草素、异甘草素的含量

目的:建立同时测定炙甘草汤中甘草苷、甘草素、异甘草素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Waters Sunfire C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%冰醋酸(50:50,V/V),检测波长为278nm,流速为1.0mL·min-1。结果:甘草苷、甘草素、异甘草素的检测浓度分别在1.2～24.0、64.0～1280.0、50.0～1000.0μg·mL-1范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.9998、0.9999、0.9999);三者平均加样回收率分别为100.38%、99.45%、97.46%,RSD分别为0.45%、0.53%、0.96%(n=6)。结论:该方法准确、可靠,可为炙甘草汤的质量控制提供检测依据。     

HPLC法同时测定小儿伪麻美芬滴剂中盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬的含量

目的:建立以高效液相色谱(HPLC)法同时测定小儿伪麻美芬滴剂中盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬含量的方法。方法μL:。色结谱果柱:为盐A酸gi伪len麻tC黄18碱,流、氢动相溴为酸甲右醇美-沙水芬-检三乙测胺浓(度56的0线∶43性0∶范10围,p分H别3.0为),7检.34测～波73长.4为μg2·0m9Lnm-(1,流r=速0为.9909.69,mnL=·m5)in、-21.,5进5～样25量.5为μg1·0mL-(1r=0.9999,n=5),平均回收率分别为99.1%(RSD=0.76%,n=9)、98.0%(RSD=0.87%,n=9)。结论:本方法结果准确,重复性好,可用于该制剂的质量控制。     

HPLC法测定异丙托溴铵原料药中的有关物质

目的:建立测定异丙托溴铵原料药中有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为SHISEIDO C18,流动相为磷酸盐溶液(含0.1 mol/L磷酸二氢钠和0.01 mol/L四丙基氯化铵,pH 5.5)-甲醇(87∶13,V/V),流速为1 ml/min,检测波长为220nm,柱温为40Ⅴ,进样量为5μl。结果:异丙托溴铵和杂质B、C、D、E检测质量浓度分别在6.24⁶2.4、4.2562.4、4.25⁵3.1、4.5953.1、4.59⁵7.4、10.3557.4、10.35¹29.4、4.00129.4、4.00⁵0.01μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 6、0.999 0、0.999 8、0.999 7、0.999 7);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<10%;杂质B、C、D、E平均加样加收率分别为103.8%、104.3%、101.6%、104.4%,RSD分别为3.8%、2.2%、1.8%、3.5%(n=9)。结论:该方法准确、简便、快速,可用于异丙托溴铵原料药中有关物质的测定。     

反相高效液相色谱法测定注射用埃索美拉唑钠有关物质

目的建立RP-HPLC法测定注射用埃索美拉唑钠的有关物质。方法采用Inerstil ODS-3色谱柱（150mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-磷酸盐缓冲液（pH=7.4）-硫酸氢四丁基铵溶液（26：69：5）为流动相,柱温30℃,流速1.0 m L·min-1,检测波长为280 nm。结果主成分与各杂质之间良好分离,杂质A、B溶液冷藏避光24 h稳定,杂质C不稳定。奥美拉唑浓度在0.063 3-2.110 8μg·mL^-1（r=1.000）、杂质A浓度在0.146 5-1.953 8μg·mL^-1（r=1.000）、杂质B浓度在0.158 7-1.983 5μg·mL^-1（r=0.999 9）、杂质C浓度在0.057 6-3.838 8μg·mL^-1（r=0.999 6）与峰面积呈良好的线性关系。3种杂质的平均回收率均在91%-105%,RSD均〈5%,均符合要求。结论本方法可用于注射用埃索美拉唑钠的质量控制。     

HPLC双波长切换法同时测定复方唑克搽剂中甲硝唑和盐酸克林霉素的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定复方唑克搽剂中甲硝唑和盐酸克林霉素的含量.方法：采用Thermo Syncronics C18（250 mm×4.6 mm,5 μm） 色谱柱;流动相为0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液（用25%氢氧化钾调节pH至7.5）-乙腈（55：45）;流速为1.0 ml·min-1;柱温为30℃;波长切换,0～5 min在230 nm波长下测定甲硝唑含量,5～10 min在210 nm波长下测定盐酸克林霉素含量.结果：甲硝唑在198.50～1 389.50 μg·ml-1（r=0.999 9）,盐酸克林霉素在102.74～719.18 μg· ml-1（r=0.999 9）的浓度范围内呈良好的线性关系;甲硝唑的平均加样回收率为98.09%,RSD为0.37%（n=9）,盐酸克林霉素的平均加样回收率为98.05%,RSD为0.60%（n=9）.结论：该方法简便、准确,结果稳定,可为复方唑克搽剂的质量评价提供依据.     

HPLC测定三黄汤中4种成分含量

目的 建立高效液相色谱法测定三黄汤中4种重要活性成分（绿原酸、盐酸药根碱、盐酸小檗碱和盐酸巴马汀）的含量。方法 采用Agilent C18色谱柱（4.6 mm×200 mm,5 μm）,流动相为1%醋酸甲醇溶液-1%醋酸溶液梯度洗脱;检测波长：329 nm;流速：1.0 mL·min^-1。结果 绿原酸、盐酸药根碱、盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的线性范围分别为0.5-4.0 μg·mL^-1（r=0.999 1）,0.5-4.0 μg·mL^-1（r=0.999 7）,0.5-12.0 μg·mL^-1（r=0.999 3）,0.3-4.0 μg·mL^-1（r=0.999 9）。平均回收率分别为99.0%（RSD=1.13%）,99.3%（RSD=1.20%）,99.0%（RSD=0.27%）,99.8%（RSD=0.88%）。日内、日间RSD均〈2%。结论 本方法准确、灵敏、重复性好,可同时测定三黄汤中4种重要化学成分的含量。     

磺胺嘧啶麻黄碱滴鼻液定性定量方法研究

目的研究磺胺嘧啶麻黄碱滴鼻液的定性定量方法。方法采用化学反应法及HPLC法定性定量鉴别处方中的磺胺嘧啶及盐酸麻黄碱。采用HPLC法测定磺胺嘧啶及盐酸麻黄碱的含量,色谱柱为Hibar RP-18endcapped(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为磷酸盐缓冲液(p H值为3.0±0.1)-乙腈(90∶10),流速1.0m L?min-1,检测波长210 nm。结果化学反应和HPLC法均能定性鉴别磺胺嘧啶及盐酸麻黄碱。磺胺嘧啶和盐酸麻黄碱分离良好;进样浓度分别为99.96²99.88μg?m L-1(r=0.999 8,n=5)和19.86299.88μg?m L-1(r=0.999 8,n=5)和19.86⁵9.58μg?m L-1(r=0.999 9,n=5)与峰面积呈良好的线性关系。磺胺嘧啶和盐酸麻黄碱的平均回收率在98.0%59.58μg?m L-1(r=0.999 9,n=5)与峰面积呈良好的线性关系。磺胺嘧啶和盐酸麻黄碱的平均回收率在98.0%¹00%,RSD均<1.2%(n=3)。结论本方法简便、快速、准确,重复性好,可用于磺胺嘧啶麻黄碱滴鼻液的质量控制。