B7-1共刺激分子表达对Lewis肺癌肿瘤增殖和凋亡的影响

目的了解共刺激分子B7 1的表达水平对Lewis肺癌增殖和凋亡的影响。方法 18只Lewis肺癌小鼠分为对照组、空载体组和B7 1组。治疗 2周后 ,检测肿瘤组织中B7 1分子的表达率、凋亡指数 (AI)和外周血、脾中的CD8+ 细胞的百分比。结果对照组肿瘤细胞的B7 1的表达率为 (8.8± 0 .9) % ,空载体组的表达率为 (8.4± 0 .8) % ,两组表达水平相近 (P >0 .0 5 ) ;B7 1组的表达率为 (4 6 .6± 5 .7) % ,同时其凋亡指数为 (5 .3± 1.0 ) % ,均较对照组高 (P <0 .0 5 )。B7 1组外周血和脾脏中CD8+ 细胞的百分比分别为 (15 .4± 3.2 ) %和 (4 1.8± 2 1.8) % ,均较对照组和空载体组高 (P <0 .0 5 ) ,第 8、14d的抑瘤率分别为 34.6 %、87.0 %。结论提高肿瘤细胞表面共刺激分子的表达 ,有助于增加肿瘤的免疫原性 ,引起凋亡 ,从而抑制肿瘤生长     

hCAP-18/LL-37基因转染对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:观察人源抗菌肽hCAP-18/LL-37基因转染对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用,探讨其抗肿瘤的可能机制。方法:将含hCAP-18/LL-37的真核表达质粒瞬时转染Lewis肺癌细胞,同时设正常对照组、转染空载体组和转染重组基因组,MTT比色检测Lewis肺癌细胞转染后48和72 h的增殖活性,流式细胞术和荧光染色检测细胞凋亡。免疫细胞化学染色检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果：转染重组基因组Lewis细胞增殖受到明显抑制,与转染空载体组比较,转染后48和72 h的抑制率分别为3.51%和17.65%;流式细胞术检测转染重组基因组凋亡率为7.4%,正常对照组凋亡率为4.4%,转染空载体组凋亡率为5.2%;免疫细胞化学染色,转染重
组基因组Lewis细胞Bax蛋白表达增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);Bcl-2蛋白表达减少,但与对照组比较差异无显著性(P<0.05)。结论：hCAP-18/LL-37基因瞬时转染Le
wis肺癌细胞,可抑制肿瘤细胞生长、调控凋亡相关基因Bax、 Bcl-2表达,诱导肿瘤细胞凋亡。     

塞来昔布对Lewis肺癌的抑制作用

目的:观察选择性COX-2抑制剂塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖和Lewis肺癌移植瘤生长的抑制作用,探讨其作用机制.方法:应用不同浓度塞来昔布与Lewis肺癌细胞共培养,以MTT比色法检测细胞增殖,ELISA法检测细胞上清液VEGF浓度,流式细胞术检测细胞凋亡情况.20只C57BL/6小鼠进行Lewis肺癌移植瘤实验,随机分为加药组(每天给以含塞来昔布1 mg/g的食物)和对照组(普通食物),电镜观察药物作用24 h后Lewis肺癌移植瘤细胞的超微结构改变;免疫组化检测移植瘤VEGF和COX-2的表达.结果:塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖有抑制作用,效应呈剂量(120、50、12.5、3.1、0 μmol/L)和时间(24、48、72 h)依赖性.50 μmol/L塞来昔布组细胞凋亡率为(14.93±0.79)%,明显高于对照组的(4.73±0.83)%(P<0.001).药物组移植瘤质量为(1.37±1.04) g,明显低于对照组的(3.49±1.75) g (P<0.01),抑瘤率为60.1%.电镜观察Lewis肺癌组织,药物组出现较多有凋亡特征的细胞.免疫组化结果显示塞来昔布对肿瘤组织的VEGF表达有明显抑制作用.结论:塞来昔布可在体内及体外抑制Lewis肺癌细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤血管生成是其可能的作用机制.     

Lewis全细胞肿瘤疫苗防治C57BL/6小鼠Lewis肺癌的实验研究

目的探讨Lewis全细胞肿瘤疫苗对小鼠Lewis肺癌的防治作用。方法用Lewis全肿瘤疫苗免疫C57小鼠4次,其中首次免疫用含弗氏佐剂油剂疫苗,第4次免疫的同时在小鼠右腋下接种Lewis肺癌细胞,定期观察小鼠成瘤情况及小鼠免疫状态变化。用流式细胞术检测疫苗组和对照组小鼠外周血CD4 T细胞,CD8 T细胞及CD19 B细胞百分比,以及CD4/CD8的变化。结果疫苗组与对照组小鼠成瘤率、成瘤时间、肿瘤大小差异均无显著性;疫苗组与对照组相比,其外周血CD4 、CD8 T淋巴细胞亚群的百分比差异无显著性,CD4/CD8比值的差异也无显著性,疫苗组外周血CD19 B淋巴细胞百分比略高于对照组,差异有显著性(P=0.014)。结论用Lewis肿瘤全细胞疫苗不能提高C57BL/6小鼠的T淋巴细胞免疫功能,可以提高其B淋巴细胞免疫,但不能使小鼠获得有效的免疫保护。     

人凋亡诱导因子C-末端截短体AIFΔ1-480的表达对MCF-7细胞的影响

目的观察人亡诱导因子(AIF)C-末端端截短体AIFΔ1-480重组基因表达对MCF-7细胞生物学行为的影响。方法利用脂质体将重组质粒PcDNA3.0-FDT-AIFΔ1-480瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞,通过Western blot、流式细胞术、MTT、集落形成试验、线粒体膜电位测定等方法,检测目的基因在细胞中的表达及其对转染细胞凋亡相关分子cytC表达的变化及细胞增殖、凋亡等的影响。结果重组质粒PcDNA3.0-FDT-AIFΔ1-480转染肿瘤细胞后AIF蛋白表达明显增加;重组质粒能明显抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖;上调细胞色素C的表达;减低线粒体膜电位,正常细胞、空载体组和重组质粒的线粒体膜电位(Δψ)分别为4.69±1.07、3.86±1.52和1.51±0.79 mV,重组质粒组与对照组相比,线粒体膜电位明显下降(P<0.05);并诱导细胞凋亡,正常细胞组、脂质体组、PcDNA3.0组、重组质粒组细胞凋亡率分别为:(9.2±5.1)%、(15.4±4.5)%、(20.5±3.9)%、(32.2±6.0)%,重组质粒组与对照组相比,细胞凋亡明显增加(P<0.05)。结论人AIF C-末端端截短体可通过诱导cytC从线粒体中释放促进MCF-7细胞凋亡。     

人γδT细胞、CD3AK细胞和NK细胞对裸鼠移植人结肠癌的抑制作用及对肿瘤细胞凋亡的影响

目的 探讨人γδT细胞、CD3AK细胞和NK细胞对裸鼠移植人结肠癌的抑制作用及对肿瘤细胞凋亡的影响.方法 将人结肠癌细胞株(SW-116)接种于BALC /c裸鼠皮下,建立结肠癌裸鼠模型,随机分为4组,每组6只.设定建立模型为第1天,分别于第1天、第4天、第7天每组给予相应的治疗.A组:尾静脉注射RPMI 1640培养液;B组:注射NK细胞+γδT细胞;C组:注射NK细胞+CD3AK细胞;D组:注射NK细胞+CD3AK细胞+γδT细胞.并于第10天处死裸鼠,测量肿瘤体积,用Tunel法检测肿瘤细胞凋亡率.结果 24只裸鼠接种5×106结肠癌细胞后第4天,在接种部位均有肿瘤形成,皮下结节最大径为2～3 mm,成瘤率为100%.治疗组肿瘤体积增加小于对照组,第1次治疗后10天时测A、B、C、D组平均肿瘤体积分别为(86.78±7.19)、(52.80±5.59)、(54.05±6.53)、(43.16±7.40)mm3,各治疗组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),B、C组组间无显著差异(P>0.05),D组与B、C组相比有显著差异(P<0.05).Tunel检测结果显示,与对照组相比,治疗组肿瘤细胞的凋亡率升高(P<0.05),以D组为甚.结论 人的γδT细胞、CD3AK细胞和NK细胞能不同程度延缓裸鼠移植的人结肠癌瘤体生长,免疫治疗能提高肿瘤细胞的凋亡率.     

人子宫颈癌异常表达程序性死亡配体-1并促CD4+T和CD8+T细胞凋亡

目的:探讨程序性死亡配体-1(Programmed death ligand-1,PD-L1)在人子宫颈癌的表达及其与肿瘤内CD4+T和CD8+T细胞浸润的相关性,体外实验观察重组人PD-L1蛋白对宫颈癌患者外周血T细胞凋亡的影响。方法:采用免疫组化SP法检测PD-L1在10例正常人宫颈组织和67例宫颈癌组织中的表达以及死亡受体-1(Programmed death receptor-1,PD-1)在宫颈癌内浸润淋巴细胞的表达;TUNEL法检测肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡;免疫荧光分析宫颈癌内浸润的CD4+T和CD8+T淋巴细胞数量;流式细胞术分析PD-L1促进宫颈癌患者外周血活化CD4+T和CD8+T细胞凋亡情况。结果:正常子宫颈上皮不表达PD-L1;宫颈癌PD-L1的表达率为70%(47/67)。部分宫颈癌内浸润的淋巴细胞表达PD-1,且淋巴细胞存在凋亡现象。PD-L1阳性宫颈癌肿瘤内浸润的CD8+T细胞数量明显减少(P<0.05)。体外实验发现PD-L1与健康人或宫颈癌患者外周血活化T细胞混合培养48 h后,T细胞凋亡率明显高于空白组,2组平均凋亡率分别为(32.8±1.4)%、(38.3±1.5)%(P<0.05)和(27.7±1.3)%、(30.9±1.9)%(P<0.05);抗PD-1抗体使PD-L1诱导的T细胞凋亡率下降,分别为(29.8±1.6)%和(31.6±1.4)%(P>0.05)。PD-L1对人外周血活化CD4+T和CD8+T细胞均有促凋亡作用。结论:人子宫颈癌异常表达PD-L1与肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡及CD8+T细胞数量减少有关。PD-L1经PD-1促进活化的CD4+T和CD8+T细胞凋亡。     

仙鱼汤对小鼠Lewis肺癌的作用研究

[目的]探讨具有健脾清肺、化痰祛瘀作用的中药复方仙鱼汤对小鼠Lewis肺癌生长的抑制作用及其相关的分子机制.[方法]将50只Lewis肺癌荷瘤小鼠分为仙鱼汤高、中、低剂量组(剂量分别为1.747、0.874、0.437 g·kg-1·d-1),环磷酰胺(CTX)组(剂量为20 mg·kg-1·d-1),荷瘤模型组;计算各组小鼠平均瘤体质量及抑瘤率;制备单细胞悬液,采用流式细胞仪检测各组小鼠Lewis肺癌细胞周期、细胞凋亡率;采用免疫组化法检测各组Lewis肺癌小鼠的bcl-2基因的表达.[结果]仙鱼汤高、中、低剂量组及CTX组瘤体质量均低于模型组,肿瘤细胞凋亡率均高于模型组(P＜0.05或P＜0.01),仙鱼汤各组随着药物剂量的增大,抑瘤率和肿瘤细胞凋亡率逐渐增加.仙鱼汤高、中、低剂量组及CTX组处于S期的细胞比例均低于模型组(P＜0.05或P＜0.01),呈现明显的G0/G1期阻滞现象.仙鱼汤各剂量组bcl-2染色强度指数显著低于模型组(P＜0.01).[结论]仙鱼汤具有抑制小鼠Lewis肺癌生长的作用,其机理可能与通过降低bcl-2表达从而促进肿瘤细胞凋亡有关.     

益气养阴方对Lewis肺癌移植模型小鼠免疫重塑相关因子表达的影响

目的观察益气养阴方对Lewis肺癌移植模型小鼠免疫重塑相关因子表达的影响。方法30只近交系C57BL/6纯系小鼠行Lewis肺癌细胞移植造模后随机分为三组:模型组、中药组及西药组,每组10只。模型组仅造模;中药组造模后予灌胃益气养阴方悬液(含生药2g/mL),1天1次,每次0.4mL;西药组将Nivolumab按照0.273mg/10g溶于0.2mL生理盐水中腹腔注射,每2周1次;各组均常规喂食。造模后第2天开始给药,给药3周。第7天开始观察记录各组小鼠瘤体大小(每3天测1次瘤体大小)。观察期满后各组小鼠断颈处死,留取各组小鼠肿瘤组织,ELISA法测定肿瘤组织匀浆白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)、转录因子p3(Foxp3)含量,流式细胞仪检测小鼠外周血CD4+CD25+Treg细胞比例。结果中药组及西药组肿瘤体积增长均减慢,两组抑瘤率比较(23.07%比37.55%),差异无统计学意义(P0.05);与模型组比较,中药组及西药组肿瘤组织IL-10含量(1915.79±114.13)pg/mL、(1712.71±157.25)pg/mL比(2257.78±63.00)pg/mL;TGF-β含量(99.59±18.64)pg/mL、(66.83±9.75)pg/mL比(142.33±8.16)pg/mL;Foxp3表达(0.83±0.11)、(0.35±0.09)比(0.98±0.08),均明显下降(P均0.05);与中药组比较,西药组肿瘤组织IL-10含量(1712.71±157.25)pg/mL比(1915.79±114.13)pg/mL,TGF-β含量(66.83±9.75)pg/mL比(99.59±18.64)pg/mL,Foxp3表达(0.35±0.09)比(0.83±0.11),均明显降低(P均0.05);与模型组比较,中药组及西药组小鼠外周血CD4+CD25+Treg细胞比例(1.07±0.12)%、(0.50±0.26)%比(1.17±0.38)%,明显降低(P0.05),西药组小鼠外周血CD4+CD25+Treg细胞比例(0.50±0.26)%较中药组(1.07±0.12)%降低更明显(P0.05)。结论益气养阴方可抑制Lewis肺癌移植模型小鼠肿瘤生长,其机制可能与降低肿瘤组织Foxp3表达,减少CD4+CD25+Treg细胞分化,降低IL-10、TGF-β表达,改善细胞免疫抑制状态相关。     

慢性乙型肝炎患者外周血IL-7与细胞免疫的关系

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血IL-7含量与T淋巴细胞亚群、调节性T细胞百分比的关系,探究IL-7对慢性乙型肝炎细胞免疫作用的影响。方法慢性乙型肝炎患者组、慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带组、健康对照组,采用ELISA法检测受试者外周血IL-7含量,流式细胞仪技术检测外周血T淋巴细胞亚群和CD4+CD25+调节性T细胞百分比。结果 CHB组、HBV携带组、健康对照组外周血IL-7含量分别为(1.68±0.58)ng/mL、(3.83±0.62)ng/mL和(6.25±0.32)ng/mL,3组间存在显著性差异(P0.05);CHB组、HBV携带组、健康对照组外周血T细胞亚群CD4+T淋巴细胞分别为(31.3±3.3)%、(38.1±6.8)%、(43.2±9.4)%,CD8+T淋巴细胞分别为(24.8±5.2)%、(28.1±3.4)%、(30.5±8.6)%;CD4+CD25+调节性T细胞分别为(10.9±1.3)%、(7.4±1.0)%、(4.2±1.1)%。CHB组外周血IL-7明显低于HBV携带组及健康对照组,且与CD4+T细胞百分比呈负相关(r1=-0.58,P0.05),与CD8+T细胞百分比呈正相关(r2=0.63,P0.05),与CD4+CD25+调节性T细胞百分比呈负相关(r3=-0.43,P0.05)。结论 CHB患者外周血IL-7负调控调节性T细胞,对CD8+T细胞的细胞免疫有促进作用。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。