胶原蛋白-几丁聚糖三维骨架构建组织工程血管的可行性

目的 研究胶原蛋白——几丁聚糖构建的三维支架在血管组织工程研究中的可行性。方法 以Ⅰ型胶原蛋白和几丁聚糖为生物材料，体外预构具有三维结构的支架，观察支架的空间立体结构；将培养的种子细胞（人平滑肌细胞和纤维细胞）种植于支架，观察材料与细胞的生物相容性和抗收缩性，并测定材料中DNA含量和胶原蛋白含量。结果 应用相分离技术制备的支架，具有均匀的三维结构和丰富的交通孔，种植种子细胞后可以形成良好的细胞黏附和生长，且选用的支架材料可以抵抗细胞收缩引起的材料变形；培养2、4、6周的材料中，DNA含量和胶原蛋白含量随培养时间延长而明显增加。结论构建的胶原蛋白——几丁聚糖三维支架具有结构均匀、细胞生物相容性好的特点，并具有一定的物理强度，可以应用于血管组织工程研究。     

可降解胶原蛋白-几丁聚糖三维骨架构建的实验研究

目的　研究以胶原蛋白几丁聚糖构建应用于血管组织工程学研究的可降解三维支架。方法　以不同配比Ⅰ型胶原蛋白和几丁聚糖为生物材料,体外预构具有三维结构的支架,观察各自的空间立体结构;通过动物皮下埋植降解和体外胰蛋白酶、溶菌酶和胶原酶溶液直接酶解,观察不同配比材料的降解特性及生物相容性。结果　构建的三维支架孔径均匀,生物相容性好。不同材料配比直接影响支架形态,几丁聚糖可以影响胶原酶对支架的降解,同时几丁聚糖掺入增加后也可减少体内降解。结论　构建的胶原蛋白几丁聚糖三维支架具有结构均匀、生物相容性好的特点,可以应用于血管组织工程研究。     

应用高浓度Ⅱ型胶原蛋白构建组织工程软骨支架

目的构建有利于种子细胞黏附、增殖和分化的软骨组织工程海绵支架。方法依据天然软骨主要成分,提取透明软骨Ⅱ型胶原蛋白,将提取的胶原蛋白通过高速离心进行浓缩,真空冷冻干燥制得海绵支架材料,应用化学交联剂EDC/NHS进行化学交联,对支架采用组织化学染色、体外降解实验、扫描电镜和接种细胞静态培养的方法进行相关检测。结果支架具有良好的孔隙结构,孔径40～130μm,孔隙率在90%以上,细胞在支架上增殖、分化良好。结论构建的高浓度Ⅱ型胶原蛋白海绵支架具有良好的生物相容性,有较好的应用前景。     

体外评估硫酸肝素-胶原蛋白生物支架与嗅鞘细胞生物相容性的研究

背景：中风和神经系统的外伤和卒中可导致神经功能缺损,同时伴随轴突受损,形成胶质瘢痕、空腔和裂隙。嗅鞘细胞作为自体移植最佳的候选细胞,可以分泌神经营养因子促进轴突的生长。并且生物支架具有多孔的三维立体结构,能够运载细胞填充和桥连这些空隙。因此移植支架联合种子细胞是一种修复神经组织重要的策略。 方法：硫酸肝素-胶原蛋白生物支架经过一系列的程序而制作成功。将硫酸肝素-胶原蛋白生物支架与嗅鞘细胞在体外共培养,在第1、3、5和7天时用MTT法检测细胞活性。数据分析采用重复测量设计的方差分析,当P < 0.05时被认为具有显著性差异。之后将嗅鞘细胞用CFSE标记,通过流式细胞仪检测标记率为99.8%。用CFSE标记后的嗅鞘细胞以适宜的浓度种植于支架上。细胞在支架上的粘附和生长可以通过荧光显微镜和扫描电镜直接追踪和观察。 结果：硫酸肝素-胶原蛋白生物支架具有稳定的三维立体结构,对于嗅鞘细胞无毒性（F= 0.14,P= 0.9330）。除此之外,细胞及其轴突也能够在该支架中很好的黏附和生长。 结论：本实验表明硫酸肝素-胶原蛋白生物支架与嗅鞘细胞在体外具有很好的生物相容性。因此,硫酸肝素-胶原蛋白生物支架可能可以作为一种载体,种植嗅鞘细胞后应用于神经组织工程。     

利用脱细胞血管基质体外构建小口径组织工程血管

目的 探讨利用犬的间充质干细胞诱导分化种子细胞,以异种脱细胞血管基质为基础体外构建小口径血管移植物.方法 采用密度梯度离心和贴壁培养的方法从犬骨髓中分离出间充质干细胞并体外培养,诱导分化成内皮样细胞和平滑肌样细胞;采用非离子型去垢剂和胰蛋白酶去除猪颈动脉血管壁结构细胞,对脱细胞基质进行组织学、力学检测及孔隙率评估.在生物反应器内采用旋转种植的方法将犬骨髓间充质干细胞诱导的内皮样细胞种植到脱细胞基质上,体外构建小口径组织工程血管.结果 犬的骨髓间充质干细胞体外能够定向诱导分化为平滑肌样细胞和内皮样细胞,可以作为血管组织工程的种子细胞.经过脱细胞处理后,光镜和电镜观察证实血管壁的细胞成分完全去除.具有良好的孔径和孔隙率.支架在生物力学、孔隙率等方面符合构建组织工程血管支架的要求.在生物反应器内剪切力条件下可以初步构建出组织工程血管.结论 小口径血管移植物可以将间充质干细胞诱导种子细胞,以异种脱细胞血管支架作为基质,在搏动性生物反应器内培养的方法进行构建.     

软骨组织工程支架材料的研究进展

软骨组织工程支架材料作为软骨组织工程技术的基本构架,其设计对软骨组织损伤修复成功与否至关重要,理想的软骨支架可以引导并促进新生软骨组织的形成,目前研究的众多支架材料中各有其优缺点.本文对近年来软骨组织工程支架材料做一综述. 1 理想的组织工程支架材料的作用及要求 理想组织工程支架材料应具有促进种子细胞生长、黏附、增殖、分化和代谢作用,并且应可以承载、协调生物活性因子和细胞之间的相互作用,影响细胞表面受体的表达和细胞的分化,为组织构建提供一个适宜三维空间结构.除了应符合一般生物医学材料的要求外,还应具备(1)良好的生物相容性;(2)材料降解速度需与种植入的细胞组织再生速率相匹配;(3)良好三维空间结构及容积稳定性,利于大量种子细胞的的生长、代谢及功能的发挥;(4)具有可塑性和一定的机械强度;(5)具有关节软骨的分层结构.     

异种生物骨衍生材料与大鼠骨髓基质细胞黏附的体外实验研究

目的:探寻良好的骨组织工程支架材料.方法:以新西兰大白兔的四肢长骨制备一种生物骨衍生材料,将此材料与大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)联合培养,通过光镜及电镜对联合培养过程进行动态观察. 结果:生物骨衍生材料具有三维立体多孔隙结构,并有良好的生物相容性和材料-细胞界面.结论:异种生物骨衍生材料是一种有临床应用前景,适用于组织工程骨构建的支架材料.     

聚乳酸人工神经支架的构建

目的用聚乳酸构建一种具有纵行排列管径的三维立体神经组织工程支架,并观察体外培养的雪旺细胞在支架上的生长情况.方法用组织块培养法获得新生SD大鼠坐骨神经的雪旺细胞,利用反复贴壁法纯化雪旺细胞.将消旋聚乳酸R206采用热致相分离法制备成三维立体支架,并涂俯50μg/ml浓度的纤维粘连蛋白,把雪旺细胞种植到该支架材料上培养2周,扫描电镜观察.结果构建的支架材料为白色、泡沫状,具有管状定向排列的立体结构,直径60～100μm,孔积率为91%,重均分子量330×103.体外培养的雪旺细胞成功种植在该支架上,在材料的深处有细胞生长.结论用热致相分离法制备的聚乳酸三维立体支架有良好的立体构型,类似天然周围神经结构.该支架有较好的生物相容性,雪旺细胞可以在支架上生长.     

构建组织工程血管的支架材料和种子细胞研究进展

国内外学者已对用于构建组织工程血管的支架材料和种子细胞进行了较多的研究,以期研制出能代替自体血管用于临床的血管移植物,它应具备良好的生物相容性、适应性重塑和生长的潜能。虽然组织工程研究已开展30多年并取得一定成果,但是仍有许多问题亟待解决。如何研制出理想的支架材料和选择合适的种子细胞有待进一步研究。综述近年用于构建组织工程血管的支架材料和种子细胞的研究进展。     

类人胶原蛋白在骨组织再生修复中的应用进展

随着骨退行性疾病发病率的升高,在骨再生修复中对于生物相容性良好的人造骨的应用需求也迅速增加。胶原蛋白作为支架材料为组织工程种子细胞的生长和增殖提供了生长环境,然而,胶原蛋白在骨再生修复中的应用还存在许多缺陷,经过改良后获得的类人胶原蛋白克服了胶原蛋白产生免疫反应、病毒传播风险等缺点,因其具有良好的生物相容性、水溶性、可加工性、低免疫原性、无病毒传播风险等,逐渐成为骨再生修复的理想生物支架材料之一,为组织工程新型支架材料的研究和开发提供了新方法、新方向。