Toll样受体4与心血管疾病

Toll样受体4(TLR-4)作为人类发现的第一个TLR相关蛋白,是介导脂多糖应答的主要受体,能够识别特定类型微生物的保守分子成分,激活天然免疫以及帮助机体建立获得性免疫。近年来研究发现,TLR-4与心血管疾病的发生、发展密切相关。氧化应激和炎性反应渗透在心血管疾病中心肌与血管的损伤各个环节,而TLR-4在其中发挥着十分重要的作用。     

TLR4信号通路与炎性反应

Toll样受体(TLR)是一类天然免疫受体,最早发现其与果蝇胚胎背、腹侧的发育有关。随着研究的深入,哺乳动物体内也发现有类似同源性受体,并统一称TLR家族。TLR的分布十分广泛,可以识别某些病原体或其产物所共有的特定结构。TLR4是介导内毒素/脂多糖应答的主要受体,而TLR4/CD14信号通路是介导内毒素诱导的炎性反应的重要通路。营养性肥胖、动脉粥样硬化、心肌梗死、哮喘等所引起的非细菌性炎性反应也与TLR4相关。本文就TLR4信号通路与炎性反应的研究进展进行综述。     

Toll样受体通过炎性反应和免疫反应介导心肌纤维化的研究进展

Toll样受体(TLRs)是一类介导固有免疫反应,具有Ⅰ型跨膜蛋白并能识别大量外源性配体的重要受体。TLRs不仅能够抵抗病原微生物的入侵,而且在心肌缺血再灌注性损伤、动脉粥样硬化、高血压等非感染性损伤介导的心肌纤维化过程中发挥着十分重要的作用。文章从免疫反应及炎性反应角度出发,就国内外有关TLRs尤其是TLR4在心肌纤维化中可能作用机制研究进展做一综述,希望能进一步阐明心肌纤维化潜在的发生机制,同时也期许为心肌纤维化的防治提供新的视角。     

Toll样受体在介导危重型手足口病炎性反应中的作用

【摘要】 目的 研究Toll样受体在介导危重型手足口病（HFMD）炎性反应中的作用。方法 选择2016年07月~2017年03月收治的47例危重型手足口病患儿（危重型组）为研究对象,另选取同期感染科收治30例普通型HFMD作为疾病对照组,门诊健康体检30例儿童为健康对照组,采集外周静脉血,分离单个核细胞（PBMCs）,测定TLR2、3、4、7、8、9水平及血清TNF α、IFN γ、IL 6水平。结果 三组受试者PBMCs中TLR3、TLR4、TLR7和TLR8 mRNA表达水平差异有统计学意义（P<005）,TLR2和TLR9 mRNA表达水平差异无统计学意义（P＞005）。其中危重型手足口病组PBMCs中TLR3、TLR4、TLR7和TLR8 mRNA表达水平显著高于其他两组,健康对照组最低（P<005）。三组受试者血清中TNF α、IFN γ、IL 6表达水平有显著性差异;危重型手足口病患儿血清中TNF α、IFN γ、IL 6表达水平显著高于其他两组,健康对照组最低（P<005）。Pearson相关性分析显示,PBMCs中TLR3、TLR4、TLR7和TLR8 mRNA水平与血清中TNF α、IFN γ、IL 6水平呈正相关（P<005）。结论 危重型手足口病TLR3、TLR4、TLR7和TLR8表达明显增高,进而激活相关信号通路,介导机体的炎性反应。     

氧化低密度脂蛋白诱导小鼠心脏内皮细胞炎性反应中Toll样受体2的表达

目的 研究氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导小鼠心脏内皮细胞炎性反应中Toll样受体（TLR）2的表达.方法 分离小鼠心脏内皮细胞,对照组给予DMEM培养,干预组分别给予不同浓度的ox-LDL（20,40 μg/mL）作用细胞24 h,采用Western blot法检测细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、TLR2的表达,利用ELISA方法检测炎症因子白细胞介素（IL）-6、IL-8的变化.结果 与对照组相比,ox-LDL干预组TLR2蛋白表达减少（P＜ 0.01）,ICAM-1蛋白表达增多（P＜ 0.01）,IL-6和IL-8表达明显增加（P＜0.05）;与低浓度组比较,高低浓度组ICAM-1、IL-6和IL-8表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 ox-LDL可以诱导小鼠心脏内皮细胞的炎性反应,同时可能抑制了TLR2受体的表达.     

脊髓Toll样受体4在慢性瘙痒中的作用研究

目的研究脊髓Toll样受体4(TLR4)在重复使用噁唑酮引起的慢性瘙痒中的作用。方法选择雄性昆明小鼠152只,先随机分为3组:对照组、丙酮溶媒组和噁唑酮组,每组40只,每组再分为首次刺激前、激发0、4、9、11d5个亚组,按模型制作方法在相应时间点涂抹相应试剂,记录激发后30min行为学后处死小鼠,取脊髓颈膨大采用Western blot法检测TLR4表达水平。在确定噁唑酮致慢性瘙痒后9d小鼠脊髓TLR4表达水平接近高峰的基础上,为研究腹腔注射表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的作用,小鼠随机分为4组(n=8),丙酮溶媒组(A组)、丙酮溶媒+EGCG组(A+E组),噁唑酮组(O组)和噁唑酮+EGCG组(O+E组)。各组在第9天激发后8h开始腹腔注射EGCG(40mg/kg)或生理盐水,每8小时1次直到第11天激发前,共计6次,最后一次给药后立即激发,观察激发后30min内行为学改变,之后处死小鼠采用Western blot法检测颈段脊髓TLR4表达。结果噁唑酮组在激发后各时间点搔抓行为明显多于对照组和丙酮溶媒组(P<0.05),且脊髓TLR4表达水平与搔抓行为呈正相关(r=0.947)。结论腹腔注射EGCG可以减少脊髓TLR4表达水平与搔抓行为。脊髓TLR4参与重复使用噁唑酮引起的慢性瘙痒过程。     

创伤后急性肺损伤患者Toll样受体4的变化及临床意义

目的初步探讨Toll样受体4(TLR4)在创伤后急性肺损伤(ALI)发病机制中的作用及临床意义。方法将48例创伤后ALI患者(ALI组)分为多器官功能障碍综合征(MODS)亚组(27例)和非MODS亚组(21例),再根据随访结果分为存活亚组(35例)和死亡亚组(13例);另选择12名健康体格检查者作为对照组。应用反转录-聚合酶链反应及流式细胞术检测对照组及ALI组确诊当天及确诊后第3、7天的外周血单核细胞TLR4 mRNA及蛋白表达,于确诊当天采用酶联免疫吸附试验检测ALI组血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-I、IL-6水平,并进行肺损伤评分和急性生理和慢性健康评分(APACHEⅡ评分)。结果对照组的外周血单核细胞TLR4 mRNA及蛋白表达均显著低于ALI组各时间点(P值分别<0.01或0.05)。ALI组确诊第3天的外周血单核细胞TLR4 mRNA及蛋白表达均显著高于确诊当天(P值均<0.05);确诊第7天的TLR4 mRNA及蛋白表达有下降趋势,但与确诊当天及确诊第3天的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。MODS亚组各时间点外周血单核细胞TLR4 mRNA及蛋白表达均显著低于非MODS亚组(P值均<0.05),死亡亚组各时间点TLR4 mRNA及蛋白表达均显著低于存活亚组(P值均<0.05)。ALI患者确诊当天外周血单核细胞TLR4蛋白表达与血清IL-1及TNF-α水平、肺损伤评分、氧合指数呈正相关(r值分别为0.348 1、0.407 2、0.291 0、0.423 7,P值均<0.05)。结论 TLR4可能参与创伤后ALI的发生、发展,且对这类患者的病情发展及转归有一定的预测作用。     

Toll样受体4与脑缺血耐受

近来研究表明,炎症免疫反应是脑缺血再灌注损伤的重要机制.然而,抗炎治疗在临床试验中并没有取得预期的效果.随着对脑缺血疾病研究的深入,脑缺血耐受(brain ischemic tolerance, BIT)现象倍受关注.     

Toll样受体4在支气管哮喘中的研究进展

支气管哮喘（bronchial asthma）发病率呈上升趋势,其发病机制未完全清楚.Toll样受体4（Toll like receptors 4,TLR4）是天然免疫受体TLRs家族的成员,在气道平滑肌细胞（airway smooth muscle cells,ASMCs）中表达,通过促进多种细胞因子和炎症因子的释放,参与哮喘调控.笔者就TLR4在哮喘中的研究进展做简要综述.     

Toll样受体4在脓毒症中的研究进展

脓毒症是宿主对感染的反应失调而导致的器官功能障碍综合征,具有高发病率和高死亡率的特征,是重症监护病房患者的主要致死原因之一。Toll样受体4(TLR4)识别脂多糖后,可与MD-2和CD14形成复合物,启动MyD88和TRIF依赖型信号通路,激活宿主的天然免疫,加重脓毒症的发生发展。在此篇综述中,我们总结了TLR4的信号通路及其基因多态性在脓毒症中的研究;并介绍了以TLR4信号通路为靶点治疗脓毒症的相关药物的研究进展,以进一步理解TLR4在脓毒症中的作用,为脓毒症的靶向治疗提供理论依据。     

乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响

目的：观察乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响，从而进一步了解乌司他丁抑制炎症反应的作用机制。方法：创伤失血性休克患者60例随机分为对照组（n=30）和乌司他丁组（n=30），乌司他丁组在麻醉诱导后切皮前静注乌司他丁30万U，对照组采用等量生理盐水。于麻醉诱导后切皮前。切皮后2h、4h。术后第1天、第2天、第3天采集动脉血。以流式细胞仪检测TLR4的表达变化。用ELISA试剂盒检测血浆TNF-α和IL-6浓度。结果：两组各时点CD14^＋单核细胞表面TLR4表达以及TNF-α、IL-6均较麻醉诱导后切皮前增加（P〈0．05）；乌司他丁组各指标值均较对照组上升幅度低（P〈0．05）。结论：乌司他丁可有效抑制单核细胞表面TLR4的表达，抑制炎症因子的释放，对创伤失血性休克患者有一定的保护作用。     

乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响

目的:观察乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响,从而进一步了解乌司他丁抑制炎症反应的作用机制。方法:创伤失血性休克患者60例随机分为对照组(n=30)和乌司他丁组(n=30),乌司他丁组在麻醉诱导后切皮前静注乌司他丁30万U,对照组采用等量生理盐水。于麻醉诱导后切皮前,切皮后2h、4h,术后第1天、第2天、第3天采集动脉血,以流式细胞仪检测TLR4的表达变化,用ELISA试剂盒检测血浆TNF-α和IL-6浓度。结果:两组各时点CD14+单核细胞表面TLR4表达以及TNF-α、IL-6均较麻醉诱导后切皮前增加(P<0.05);乌司他丁组各指标值均较对照组上升幅度低(P<0.05)。结论:乌司他丁可有效抑制单核细胞表面TLR4的表达,抑制炎症因子的释放,对创伤失血性休克患者有一定的保护作用。     

Toll样受体4及下游炎性介质的检测在医院获得性肺炎中的临床应用

目的 分析Toll样受体4（TRL4）及下游炎性介质的检测在医院获得性肺炎（hospital acquired pneumonia,HAP）中的临床价值。方法 30例HAP患者按照数字表法随机分为干预组和实验组,另选取15例健康体检者作为对照组。3组患者均采集静脉血,其中干预组血样中加入TRL4 mAb 20μg,测定各患者外周血炎性因子水平,并提取外周血核细胞中总RNA,检测TLR4 mRNA的表达,同时进行基因测序,分析确定基因型。结果 干预组和实验组各炎性因子水平组间比较差异无统计学意义,但均显著高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。3组患者阳性表达率和相对表达量差异有统计学意义（P<0.05）。干预组阳性表达率和相对表达量均明显高于实验组和对照组,实验组也明显高于对照组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。TLR-4阳性率与TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10等下游炎性因子浓度水平均呈正相关,决定系数分别为0.732、0.714、0.695、0.753,具有显著相关性（P=0.000）。结论 医院获得性肺炎患者外周血中TRL4与下游炎性介质水平具呈正相关,且TRL4阳性率和炎性介质水平均高于健康人群,对医院获得性肺炎发病机制的进一步研究具有重要意义。     

湖北人群Toll样受体4基因多态性研究

目的 研究湖北人群Toll样受体4(TLR4)Asp299Gly和Thr399Ile基因多态性分布特征。方法 采用等位基因特异性聚合酶链反应(ASPCR)-限制酶片断长度多态性(RFLP)检测TLR4 Asp299Gly和Thr399 Ile基因多态性。结果 在所有的253例中国湖北人群样本中，没有检测到TLR4 Asp299Gly和Thr399Ile基因多态性存在。结论 TLR4基因多态性在不同地区和人群发生的频率是不同的，与白种人相比，中国湖北人群的TLR4Asp299G1y和Thr399Ile的基因多态性非常罕见。     

钟样受体4信号通路与非感染性炎症疾病的关系

钟样受体4(TLR4)是钟样受体家族的成员之一,能识别宿主源性激动剂,在固有免疫和后天免疫中发挥重要作用。近来有研究发现损伤组织释放的自身成分能激活TLR4引起炎性反应,但TLR4信号通路在非感染性炎症发生、发展中的具体作用仍不清楚,如缺血/再灌注、创伤、组织修复与重构和自身免疫疾病等。该文就TLR4信号通路与非感染性炎症性疾病的关系予以综述。     

TLR4及TAK1表达与急性脑梗死炎性反应机制相关性研究

目的:探讨急性脑梗死患者外周血中Toll样受体4(TLR4)及转化生长因子激活激酶1(TAK1)表达的变化及其与炎性反应机制的相关性。方法:对50例急性脑梗死患者进行临床特征分析、外周血白细胞计数、CRP水平、NIHSS评分、脑梗死灶容积计算及血清TLR4及TAK1的含量检测,分析梗死灶容积与上述指标的相关性。结果:急性脑梗死患者血糖水平、CRP水平、白细胞计数、NIHSS评分、梗死灶容积均较健康对照组高,差异比较均有统计学意义(P<0.05);急性脑梗死整个发病过程中血清中TLR4与TAK1含量均较健康对照组高,以疾病发病高峰期最明显;脑梗死灶容积与糖尿病史、CRP水平、白细胞计数及NIHSS评分有相关性,其中TLR4与脑梗死灶容积有独立相关性。结论:TLR4及TAK1可能主要是通过介导炎性反应在脑梗死中发挥作用,其中TLR4与脑梗死容积有独立相关性,可作为脑梗死的治疗靶点。     

Toll样受体4与移植器官缺血/再灌注损伤

Toll样受体4(TLR4)是抵御病原体入侵和有害刺激的重要天然免疫受体之一。TLR4除了参与病原微生物触发的炎性反应外,还能识别缺血/再灌注损伤后释放的内源性配体,如热休克蛋白、高迁移率族蛋白B1等,经TLR4/髓样分化因子88等信号途径诱导多种炎性细胞因子的产生,参与移植器官缺血/再灌注损伤的炎性反应。实验表明,负性调节TLR4信号对移植器官缺血/再灌注损伤具有明显的保护作用。因此,针对TLR4信号的调节在移植器官保护方面具有一定的临床应用前景。     

抑制 Toll样受体4表达对巨噬细胞极性转化的影响

目的：通过观察CLI－095对巨噬细胞表型的影响,探讨Toll样受体4（ TLR4）在巨噬细胞极性转化中的作用。方法以体外培养的小鼠骨髓来源巨噬细胞为研究对象,按数字表法随机分为3组,对照组（常规培养小鼠源性骨髓巨噬细胞48 h,不给予任何药物处理）、模型组（常规培养细胞24 h,换液后加入终浓度为1．0×105 U／L的γ干扰素和5 mg／L脂多糖干预24 h）、处理组（先给予1 mg／L的CLI－095孵育细胞24 h,换液后加入终浓度为1．0×105 U／L的γ干扰素和5 mg／L脂多糖干预24 h）。应用实时荧光定量聚合酶链反应检测TLR4 mRNA的表达;应用流式细胞术检测膜分子CD16／32、CD206的表达;用酶联免疫吸附法检测白细胞介素－10（IL－10）和IL－12的分泌。结果模型组较对照组CD16／32、IL－12明显升高,CD206明显降低,符合M1型巨噬细胞特性。处理组与模型组比较,TLR4 mRNA表达降低,提示TLR4受到抑制,CD16／32和IL－12表达下降,CD206和IL－10明显上升,差异有统计学意义（P＜0．05）,符合M2型巨噬细胞极性特点。结论 TLR4在巨噬细胞极性转化中起着重要的作用,抑制TLR4表达可诱导炎症性巨噬细胞向抗炎性M2型转化。     

TLR4基因多态性与刨伤后脓毒血症相关性研究

目的探讨我国浙江汉族人群Toll样受体4（TLR4）基因（Asp299Gly和Thr3991le）多态性与创伤后脓毒血症的关系。方法在50例创伤后脓毒血症患者和100例正常对照者中,采用等位基因特异性聚合酶链反应一限制性片段长度多态性方法（ASPCR—RLFP）检测TLR4Asp299Gly和Thr3991le基因多态性,分析TLR4基因多态性与创伤后脓毒血症的相关性。结果在所有的研究对象中均未发现TLR4Asp299Gly和Thr3991le基因突变。结论浙江汉族人群TLR4Asp299Gly和Thr3991le基因多态性与创伤后脓毒血症易感性可能无相关性。     

Toll样受体4基因多态性与2型糖尿病的研究进展

2型糖尿病(T2DM)是一种多基因遗传病,多种基因和环境因素共同参与T2DM的发病。免疫在胰岛素作用、血糖稳态和T2DM中发挥重要作用。固有免疫反应是连接外界环境与机体相互作用的重要系统,固有免疫相关炎性途径的基因突变可能影响到T2DM危险因素的代谢表型,参与疾病的发病。Toll样受体4(TLR4)是固有免疫系统的核心介质,在T2DM中起着重要的作用。TLR4基因Asp299Gly及Thr399Ile的突变,可影响TLR4蛋白的结构,引起感染风险增加的同时也会降低慢性炎症相关疾病(如T2DM)的患病风险。