53例慢性淋巴细胞白血病患者骨髓细胞形态学和免疫分型特点分析

【目的】探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者骨髄细胞形态学和免疫分型特点。【方法】选取2018年1月到2019年1月在本院接受治疗的慢性淋巴细胞白血病患者53例,对所有患者进行骨髓细胞形态学及免疫表型检测并对其结果进行分析。【结果】①53例患者共检出大小淋巴细胞混合型(LL/SL-MC)24例(45.28%),幼淋巴细胞混合型(CLL/PLL-MC型13例(24.53%),典型小淋巴细胞混合型(CLL-TSL)型7例(13.21%),不典型大淋巴细胞(CLL-ATLL)型、幼淋巴细胞性白血病(B-PLL)型及毛细胞型白血病(HCL)型均为3例(5.77%)。②骨髄增生度活跃36例(67.92%)、明显活跃8例(15.09%)、极度活跃9例(16.98%)。粒红比增高13例(24.53%)、正常15例(28.30%)、降低25例(47.17%)。巨核细胞计数增高2例(3.77%)、正常23例U 3.40%)、降低28例(52.83%)。③53例患者中CD19、CD20表达率最高,阳性率均为100%,其次表达为单核细胞人白细胞抗原-DR(HLA-DR)、CD22、CD5、CD23的阳性率,依次为96.22%、86.79%、84.91%、79.25%,FMC-7的阳性率为30.19%,CD38和CD3表达相对少见,阳性率仅分别为13.21%和3.77%。无一例患者表达CD7、CD10,阳性率为0。【结论】53例CLL患者骨髓以混合型居多;免疫表型以CD19、CD20表达率最高,其次分别表达为HLA-DR、CD22、CD5、CD23,均不表达CD7、CD10。     

慢性淋巴细胞白血病免疫表型及凋亡相关蛋白分析

目的 探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)免疫表型和凋亡相关蛋白表达特征及其临床意义.方法 应用CD45/SSC设门方案,通过三色流式细胞术对150例CLL患者、105例急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者骨髓或外周血进行免疫分型.结果 150例CLL患者均高表达CD19;HLA-DR、CD20、CD5、CD22、CD38、CD23阳性率依次为96.67％、95.33％、84.67％、86.67％、40.67％、60.66％;CD10、cCD79a、CD3、CD25、CD34、ZAP70、FMC7阳性率较低,依次为3.33％、15.33％、4.67％、1.33％、3.33％、11.43％、8.67％.其他抗体均无表达;与B-ALL患者相比,CLL患者CD5、CD20阳性率升高(P＜0.05),CD10、CD34、CD22、Ccd79a阳性率降低(P＜0.05),CD19、HLA-DR表达率无统计学差异(P＞0.05).CLL患者凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax阳性率分别为74.67％和7.33％.结论 CD5、CD20、CD19是CLL特异性免疫表型,ZAP70、CD38可作为预后判断指标,CLL细胞Bcl-2高表达、Bax低表达,在疾病发生、发展中意义重大.     

急慢性淋巴细胞白血病免疫表型分析

目的 探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞免疫表型差异。方法 应用ABCAP免疫组织化学方法，选用一系列的淋巴细胞相关抗原的单抗对169例初发ALL与38例CLL患者进行淋巴细胞表面抗原检测。结果 B-ALL患者白血病细胞的CDl9、HLA-DR阳性率较高，T-ALL患者的白血病细胞以CD7、CD5与CD3阳性率较高，CLL患者的白血病细胞除了以CDl9、CD20、CD22阳性率较高外，CD5也有明显表达。结论 对淋巴细胞白血病患者进行免疫表型分析，对于区别细胞类型，鉴别诊断有重要意义，为临床治疗提供依据。     

126例慢性淋巴细胞白血病免疫表型分析

目的分析慢性淋巴细胞白血病(CLL)的免疫表型特征。方法应用系列相关单克隆抗体通过三色/四色流式细胞术对126例CLL进行免疫表型分析。结果126例CLL中117例为B系来源(92.9%),9例为T系来源(7.1%)。117例B-CLL均表达CD19,其他B系抗原CD20、CD22、CD23阳性率分别为88.6%、66%、74.2%。无一例表达FMC7和CD10。所有B-CLL中CD5 B-CLL占79.1%,CD5-B-CLL占20.9%。45例B-CLL进行CD38及ZAP-70的检测。共14例CD38 ZAP-70 ,4例CD38 ZAP-70-,3例CD38-ZAP-70 ,24例CD38-ZAP-70-。CD38与ZAP-70的表达具有相关性(P<0.05)。9例T-CLL患者均为成熟T细胞表型,仅表达T系抗原,不表达任何B系抗原。结论了解CLL的免疫表型特点对此类疾病的诊断及治疗后微小残余病灶(MRD)的检测具有重要意义。而免疫表型与预后的关系需作进一步研究。     

51例慢性淋巴细胞白血病的免疫表型及细胞遗传学特征研究

本研究探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）的免疫表型及细胞遗传学特征,为其诊断及治疗提供依据。采用一组系列相关单克隆抗体和三色流式细胞术对51例CLL患者进行免疫表型分析,并应用R显带技术对这51例患者的细胞遗传学异常进行了研究。结果表明：51例CLL患者中,CD19和CD23阳性率为96.1%,其后依次为CD5（94.1%）、CD20（82.4%）和CD22（78.4%）,CD38阳性率为23.5%。CD5和CD19共阳性者46例（90.2%）。51例患者的染色体异常检出率为35.3%（18/51）,共检出7种主要异常核型,其中＋12有3例,13q-有2例,其它主要异常有＋14、6q-、t（11;14）、t（14;18）和t（2;7）等。各抗原表达与染色体异常无显著性差异（p〉0.05）。结论：典型CLL免疫表型为CD5、CD19和CD23阳性;常规细胞遗传学（CC）检测CLL染色体异常阳性率偏低;免疫表型结合细胞遗传学异常对CLL诊断及预后有重要价值。     

典型与不典型免疫表型慢性淋巴细胞白血病的预后相关因素分析

目的 探讨典型免疫表型慢性淋巴细胞白血病(CLL)与不典型CLL在临床特征、Binet分期、淋巴细胞绝对计数(ALC)、ZAP-70蛋白表达、CD38表达、IgVH突变和遗传学特性等预后因素上的差异.方法 参照英国CLL临床指南诊断评分系统,77例患者中积分5分的有61例,为典型CLL,积分为4分或3分的有16例,为不典型CLL.采用多参数流式细胞术(FCM)对77例CLL患者的外周血或骨髓标本进行免疫表型检测,包括CD5、CD19、CD23、FMC7、slg(κ和λ)、CD20、CD79b,并检测预后相关因素ZAP-70和CD38的表达水平;采用多重RT-PCR检测IgVH基因突变状态;组合探针荧光原位杂交(FISH)技术检测分子遗传学异常.结果 典型CLL与不典型CLL两组患者在性别、年龄、IgVH基因突变率、ZAP70表达上的差异均无统计学意义(P值分别为0.398、0.189、0.268和0.131);不典型CLL组中ALC≥50×109/L、Binet B+C期和CD38 阳性率≥30%所占比例(分别为43.8%、87.5%、43.8%)明显高于典型CLL组(分别为16.4%、36.1%、16.4%)(P=0.026、P<0.01和P=0.026);典型与不典型CLL组的分子遗传学结果也有显著差异,典型CLL组中单独伴有del(13q14)异常的比例(26.8%)大于不典型组(7.6%),而del(17p13)或del(11q22)异常的比例(12.2%)小于不典型组(46.2%)(P=0.022).结论 典型免疫表型CLL与不典型CLL在Binet分期、ALC、CD38表达和遗传学特性上有显著差异.     

慢性淋巴细胞白血病CD5漏检临床案例分析及对策

目的分析不同荧光素标记抗体对慢性淋巴细胞白血病(CLL)B细胞表面CD5检测结果差异及其对临床诊断的影响。方法采用流式细胞仪检测3例CD5表达强度不同的慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者的免疫表型,采用SYSMEX XE2100全自动血液分析仪检测血常规;以1例急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者作为阴性对照。结果采用异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗体检测4例患者骨髓异常B淋巴细胞CD5表达,CD5阳性细胞未见独立成群,阳性细胞比例分别为47.1%、17.7%、6.7%和7.9%;以≥20%为标准,仅病例1阳性。以PE-Cy7荧光素标记抗体重新检测,病例1和2的CD5阳性细胞独立成群,病例3 CD5表达呈连续表达模式,阳性细胞比例分别上升至91.1%、70.3%和38.2%。而对照病例4(B-ALL患者)2次检测CD5比例均为阴性。病例1、2、3符合典型CLL免疫表型。结论 CLL患者B细胞表面常异常表达CD5,但其表达强度显著低于T细胞表面CD5表达。采用弱荧光素标记抗体检测B细胞表面CD5表达,会出现漏检进而影响临床诊断。对弱表达抗原选择合适的荧光素标记,并进行验证和比对确定其准确性,是正确提供疾病免疫表型的重要保障。     

263例慢性淋巴细胞白血病临床与实验室检查分析

目的 探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)的临床和主要实验室检查特点.方法 回顾性分析263例CLL患者的临床及实验室检查资料.结果 患者中位发病年龄为60岁,男女比例为2.17:1.35.4%的患者因查体或其他疾病检查发现,多处于疾病早期.乏力倦怠和淋巴结肿大是患者就诊最常见的原因,后者也是最常见的体征(54.8%).CLL患者常合并感染、结缔组织病和继发肿瘤,但发生自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的概率较小,为1.5%.初诊患者外周血白细胞多在(10～100)×109/L,97.1%的患者淋巴细胞比例在0.50以上.骨髓增生活跃,99.4%的患者骨髓淋巴细胞比例在0.300以上.骨髓病理检查以弥漫性浸润为主(72.2%).细胞免疫表型CD5阳性细胞率为85.1%,CD25阳性细胞率为78.9%.CLL患者常合并免疫球蛋白降低,以IgM降低最常见.常规染色体检查不易发现异常.结论CLL多发于老年人,男性多见,临床特征和免疫表型有一定特点.     

异常免疫表型模式在急性髓系白血病微小残留检测中的应用

目的用多参数流式细胞术区分急性髓性白血病细胞与正常骨髓原始细胞免疫表型,建立急性髓系白血病细胞异常免疫表型模式和流式细胞术检测急性白血病微小残留病的方法。方法选择正常骨髓标本和急性髓性白血病患者骨髓标本,用流式细胞术分析髓系原始细胞免疫表型特征。并将标记抗原用于分析初发白血病细胞免疫表型,以寻找急性髓系白血病细胞异常免疫表型模式和确定用于微小残留病检测的抗体组合,更好地提示患者复发情况。并将流式细胞术结果、骨髓细胞形态学结果和PCR融合基因检测结果进行比较。结果分析20例非恶性血液系统恶性疾病患者的骨髓标本中髓系原始细胞的免疫表型,CD117阳性髓系原始细胞占2.51%±0.84%,CD34阳性髓系原始细胞占1.21%±0.83%,均有特定免疫表型特征。检测346例非早幼粒细胞白血病的急性髓性白血病患者免疫表型特征,异常免疫表型有314例,占90.80%,其中跨系表达抗原主要包括CD7(31.21%)、CD56(23.70%)、CD19(13.87%),跨阶段共表达的抗原包括CD34/CD64(2.89%)、CD14/CD117(1.16%),抗原表达强度变化或抗原缺失主要包括原始粒细胞不表达HLA-DR(4.62%)、CD13(7.51%)或CD33(12.14%),以及单核细胞不表达CD14(5.20%)。早幼粒细胞白血病患者31例,有异常免疫表型的仅占16.7%,低于非早幼粒细胞白血病的急性髓性白血病。根据白血病异常免疫表型模式,与PCR结果符合度高,能很好地提示白血病进展。结论急性髓性白血病细胞具有明显不同于正常来源原始细胞的异常免疫表型特征,适合采用流式细胞术进行微小残留病检测,并能反映体内白血病细胞负荷和病情变化。     

56例慢性淋巴细胞白血病免疫表型和遗传学特点分析

目的探讨慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)免疫分型和细胞遗传学特点。方法 56例CLL患者采用多参数流式细胞术进行免疫分型,采用荧光原位杂交技术行细胞遗传学特点分析。结果 56例CLL患者成熟B细胞相关抗原CD5、CD19、CD20、CD22及CD23高表达,T系相关抗原CD3、CD4、CD8低表达,早期造血标志人白细胞DR抗原(HLA-DR)和CD38阳性率分别为100.0%和32.1%,ZAP-70和FMC7阳性率分别为19.6%和8.9%;在Binet分期中,B期和C期CD38阳性抗原表达(41.1%,36.0%)明显高于A期(14.3%)(P0.05);56例CLL患者中,38例至少有1种遗传学异常,12例有2种及2种以上遗传学异常;发现4种遗传学异常,依次为13q14基因缺失(42.8%)、+12(21.4%)、17p13基因缺失(12.5%)、atm基因缺失(10.7%),其中2例有2条染色体缺失(nulll3q14),异常细胞率分别为56.3%、69.3%;CD38≥30%组+12异常率(38.9%)和atm基因缺失发生率(27.8%)均明显高于CD3830%组(13.2%,2.6%)(P0.05);细胞遗传学异常在性别、年龄、Binet分期、血清乳酸脱氢酶水平和ZAP-70表达水平上差异均无统计学意义(P0.05)。结论 CLL免疫表型主要表达CD5、CD19、CD20、CD23;荧光原位杂交技术是一种检测CLL患者细胞遗传异常快速、准确和敏感的方法。     

38例慢性淋巴细胞白血病免疫表型分析

目的探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）的免疫表型特点与Moreau积分系统、临床分期的关系。方法应用三色流式细胞术对38例初诊CLL患者进行免疫表型分析，并与临床常用的CLL免疫表型积分系统及临床分期进行比较。结果38例CLL患者均表达CD19、HLA—DR，患者中CD5、CD20、CD22、CD23、FMC7、CD11C、K轻链、λ轻链阳性表达率分别为86．8％、97．3％、97．3％、97．3％、34．2％、26．3％、52．6％、26．3％。CD38阳性表达率为15．8％，无一例表达CD10。相关CD抗原表达与临床分期无明显相关性（P〉0．05）。按照Moreau积分系统分析显示38例患者中31例积分≤3分。结论流式免疫分析可为CLL的诊断提供有力依据，但与Moreau积分系统相比，本组患者呈现非典型的免疫表型。     

5例急性巨核细胞白血病患者免疫表型结果分析

目的通过对急性巨核细胞白血病患者白血病细胞免疫表型进行检测来分析各种血细胞表面分化抗原(CD)在急性巨核细胞白血病诊断及鉴别诊断当中的作用。方法应用BD公司流式细胞仪及其配套检测试剂盒检测5例急性巨核细胞白血病患者血细胞CD。结果所有患者均表达CD41和CD42,阳性率100%;淋系抗原均为阴性;CD13阳性者有4例,阳性率80%;CD33阳性者3例,阳性率60%;表达CD14和CD15者各1例,阳性率各占20%。结论检测结果显示CD41和CD42在急性巨核细胞白血病诊断及鉴别诊断中具有重要的价值,同时也再次验证了急性巨核细胞白血病患者血细胞存在有"系列非专一性"的特点。     

71例急性早幼粒细胞白血病患者白血病细胞免疫表型分析

本研究通过回顾性分析急性早幼粒细胞白血病(APL)患者骨髓异常早幼粒细胞的免疫表型及患者初诊资料,探讨其免疫表型特点及其意义。利用常规6色免疫分型方法对71例APL患者的白血病细胞进行免疫表型分析。结果发现:MPO、CD33和CD13在所有患者的APL细胞中都有较强表达,其平均阳性细胞比例达到88%以上。CD117的阳性表达率为50.7%,其平均阳性细胞比例为52.5%。约10%患者的白血病细胞表达CD15,但大部分病例的阳性细胞率都集中在20%-40%的弱表达范围内,其平均阳性细胞比例为42.5%。少数患者的异常细胞表达CD34和HLA-DR,且表达强度较弱。约25%患者的APL细胞跨系表达了CD2、CD56,大部分也都集中于20%-60%的低表达范围内,其平均阳性细胞比例分别为39.3%和42.3%。由此认为,APL的典型免疫表型为MPO+CD13+CD33+CD117±CD15±CD34-HLA-DR-。CD2和CD56在CD34+或HLA-DR+组(包括CD34+HLA-DR+、CD34+HLA-DR-和CD34-HLA-DR+)的阳性比例明显高于CD34-和HLA-DR-组。初诊患者外周血白细胞计数、血小板计数、外周血中异常早幼粒细胞比例及CD13的阳性比例在CD15<10%、10%20%3组均出现显著的统计学差异。结论:APL患者的异常早幼粒细胞的免疫表型具有独特的特征,多色流式细胞术检测可辅助APL的快速诊断,对分析白血病细胞的来源和判断患者预后亦可能有着重要意义。     

流式细胞术在159例急性白血病免疫分型中的应用

目的探讨急性白血病免疫分型的特点及其临床意义。方法利用CD45／SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析。结果（1）在119例AML患者中髓系相关抗原CD13（91．59％）、CD117（86．97％）和CD33（84．03％）阳性表达率最高,还有14．28％的AML患者伴有淋系抗原的表达,主要为CD7（14．28％）和CD19（1．68％）。29例出ALL患者,CD19和HLA-DR全部阳性（100％）,其次为cD34（92．03％）、CD22（62．07％）。11例T-ALL患者,CD7表达的阳性率最高（100％）,CD3（72．73％）和032（63．64％）次之。（2）AML患者中,除大多数AML-M3患者CD34和HLA-DR为阴性表达外,其他亚型患者CD13、CD117、CD33、CD34和HIA-DR均为高表达。结论在流式细胞仪上采用CD45／SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术分析,使得免疫分型的结果更为可靠。     

急性双表型白血病细胞形态学和免疫表型的研究

目的探讨骨髓细胞免疫表型在急性双表型白血病中的诊断价值及其与骨髓细胞形态学的比对研究。方法对190例急性白血病患者采用流式细胞仪四色免疫荧光直接标记技术检测细胞免疫表型,通过骨髓细胞形态学分型进行分析。采用流式细胞术四色免疫荧光直接标记技术与CD45/SSC设门分析技术检测11例双表型急性白血病患者,根据欧洲白血病免疫分类协作组(EGIL)积分标准进行免疫学分型。结果 190例急性白血病中被免疫分型诊断为急性髓系白血病88例(占46.3%),急性淋系白血病88例(占46.3%),未分化白血病3例(占1.6%),与骨髓细胞形态学和组织化学诊断具有高符合率。190例急性白血病中被免疫分型诊断为急性双表型白血病11例(占5.8%),其中髓系与B系共表达的抗原7例(占3.7%),均共同表达cCD79a和cMPO,胞膜抗原CD19和CD10表达量较高;髓系与T系共表达的抗原3例(占1.6%),均共同表达cCD3和cMPO,胞膜抗原CD5和CD7表达量较高;髓系、B系与T系均表达的抗原1例(占0.5%)。此外,急性双表型白血病患者高表达CD34胞膜抗原(占81.8%),提示预后不良。结论急性双表型白血病发病率较低,骨髓细胞免疫表型对诊断及鉴别双表型急性白血病有特异性,以髓系和B系抗原共表达为主。采用骨髓细胞形态学和流式细胞术联合检测急性双表型白血病可提高诊断准确性,能有效地指导临床制订治疗方案和进行预后判断。     

急性髓系白血病患者131例免疫表型与预后的相关性分析

目的 探讨急性髓系白血病(AML)免疫表型与预后的相关性.方法 采用多色流式细胞术对131例AML患者进行检测,分析其免疫表型与患者年龄、初诊时WBC、PLT和Hb的关系,及其对完全缓解率(CR)的影响.结果 AML患者中髓系抗原表达阳性率最高的是CD13、CD33和髓过氧化物酶(MPO),急性早幼粒细胞白血病(M3)亚型中CD34和HLA-DR表达率较低,淋巴细胞抗原CD19和CD7表达最常见,阳性率分别为15.4%和14.6%.CD7阳性组患者的年龄明显高于阴性组患者年龄(t=-2.27,P＜0.05),CD14阳性组患者的初诊WBC计数明显高于阴性组(Z=-2.284,P＜0.05).131例AML患者的总CR率为56.5%,CD34阳性组(82例)的CR率为45.1%,CD34阴性组(49例)的CR率为75.6%,两组间差异有统计学意义(x2=11.524,P＜0.05).CD34和HLA-DR双阳性组(74例)的CR率为41.9%,单阳性组(38例)CR率为78.9%,双阴性组(19例)CR率为68.4%,3组问差异有统计学意义(Z=-3.492,P＜0.01).CD7、CD19、CD13、CD33、CD38、CD15、CD64、CD14及MPO等抗原表达阳性组和阴性组间CR率的差异无统计学意义(P均＞0.05).多因素回归分析显示,患者年龄大于60岁、初诊时WBC大于50×109/L、PLT大于30×109/L、Hb小于60 g/L以及CD34阳性是低CR率的独立风险因素.结论 AML患者年龄,初诊时WBC、PLT和Hb计数以及CD34表达与CR率有关,免疫表型的检测对于判断AML预后有一定价值,有助于指导临床治疗和判断预后.     

72例老年急性白血病免疫表型分析

目的探讨老年急性白血病流式细胞术免疫分型的特点及临床意义。方法回顾性分析2010年1月～2015年3月,利用三色法流式分析法检测76例老年性白血病的免疫表型及其特点。结果①AML中最主要表达的抗原是MPO,CD13和CD33,表达率分别为98.2％,98.2％和7.2％。47.3％有淋系抗原表达,其中CD7(19.3％),CD56(26.3％)最为常见。②老年B-ALL中,CD19的表达阳性率最高为100％,其次是cCD79a,CD10和CD20,表达阳性率分别为88.9％,46.2％和66.7%。纯B系抗原表达者77.8%,伴T系抗原表达者22.3%,髓系相关抗原CD13,CD33的表达阳性率分别为33.4%和22.3%。③所有老年T-ALL中均表达CD3与CD7,CD5(+)细胞占66.7%,干祖细胞CD34,HLA-DR阳性率分别为33.3％和0％。结论流式细胞术免疫表型分析是一种简便、快速 、准确的检测技术手段,结合传统的检测手段,有助于老年白血病的精确诊断。