汉黄芩素的抗肿瘤研究进展

<正>癌症是全世界最常见的死亡原因之一~([1]),发现新的抗肿瘤药物是当前医药研究的必要方向之一。近年来越来越多的国内外学者开始关注传统中药及其化学成分治疗肿瘤的效果及其作用机制的研究,黄芩的主要有效成分汉黄芩素便是其中之一。本文就近年来国内外学者对汉黄芩素的抗肿瘤作用研究进展进行综述如下。1汉黄芩素简介汉黄芩素是传统中草药黄芩的主要活性成分之一,是从黄芩根中分离的天然植物衍生的黄酮类化合物~([2])。其化学名称为5,7-二羟基-8-甲氧基     

TGF-β1诱导肝星状细胞活化调控肝癌的炎症和免疫反应

目的 通过TGF-β1诱导活化的肝星状细胞与肝癌细胞SMMC7721共培养,观察肝癌的炎症和免疫变化.方法 选取厦门大学附属福州第二医院体外培养人肝星状细胞LX-2,用10μg/L TGF-β1处理LX-224 h,取活化LX-2上清液共培养SMMC7721细胞12 h后,用Disitetide处理共培养细胞,流式细胞...     

汉黄芩素及其抑制物细胞周期蛋白依赖性激酶1对人脑胶质瘤干细胞作用机制的研究

目的研究汉黄芩素及其抑制剂细胞周期蛋白依赖性激酶1（CDK1）对人脑胶质瘤干细胞（BGSCs）的作用机制。方法使用不同浓度的汉黄芩素（1、10、1000μmol/L）对BGSCs进行浸染,并设空白对照组。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测汉黄芩素对BGSCs增殖的影响;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测CDK1 mRNA表达;同时检测脂质过氧化产物还原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量的变化。结果汉黄芩素对人BGSCs增殖具有明显的抑制作用,各剂量汉黄芩素组BGSCs增殖〔吸光度（A）值〕较空白对照组明显降低,随给药浓度增加,细胞生长抑制率（IR）较空白对照组逐渐增加,以汉黄芩素100μmol/L组作用更显著〔A值：0.18±0.02比0.67±0.03,IR：（64.43±0.04）%比0,均P＜0.05〕;各剂量汉黄芩素组CDK1 mRNA表达（A值）均较空白对照组有不同程度的提高,在10μmol/L、100μmol/L汉黄芩素组出现显著提高（0.378±0.061、0.733±0.081比0.125±0.019,均P＜0.05）;脂质过氧化产物GSH （mg/g）、SOD（U/g）和MDA（nmol/g）在各个剂量汉黄芩素组与空白对照组比较差异均无统计学意义（GSH：474.51±38.63、479.67±15.89、481.17±36.41比487.00±28.53,SOD：26.58±2.26、26.75±1.96、27.08±1.52比27.31±1.89,MDA：4.92±0.45、4.72±0.73、4.61±0.47比4.45±0.26,均P＞0.05）。结论 CDK1可能参与汉黄芩素抑制人BGSCs生长的作用机制,该作用与脂质过氧化产物无关。     

黄芩素对IL-1β诱导的软骨细胞炎症反应的影响

[目的]探讨黄芩素对白介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞炎症反应的影响.[方法]将软骨细胞分为正常组(加入不含任何刺激物的培养基),IL-1β组(10 ng/mL的IL-1β),黄芩素低、中、高剂量组(12.5,25,50 μmol/L 黄芩素+10 ng/mL的IL-1β).MTT法检测细胞活力,硝酸还原酶法测一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-γ(IFN-γ)及IL-6含量,western blot检测核因子-κB (NF-κB p65)及p38 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化水平.[结果]低、中、高剂量组黄芩素能显著提高软骨细胞活力(P<0.05).与正常组比较,IL-1β组中细胞活力降低(P<0.01),TNF-α,IFN-γ,IL-6及NO含量提高(P<0.01),p-NF-κB p65及p-p38 MAPK表达量上调(P<0.01);与IL-1β组比较,黄芩素低、中、高剂量组中细胞活力提高(P<0.01),TNF-α,IFN-γ,IL-6及NO含量降低(P<0.01),p-NF-κB p65/NF-κB p65及p-p38 MAPK/p38 MAPK值下调(P<0.01);与低剂量组比较,中、高剂量组中细胞活力提高(P<0.01),TNF-α,IFN-γ,IL-6及NO含量降低(P<0.01),p-NF-κB p65/NF-κB p65及p-p38 MAPK/p38 MAPK值下调(P<0.01);与中剂量组比较,高剂量组中细胞活力提高(P<0.01),TNF-α,IFN-γ,IL-6及NO含量降低(P<0.01),p-NF-κB p65及p-p38 MAPK表达量下调(P<0.01).[结论]黄芩素能通过阻断NF-κB及p38 MAPK信号通路进而抑制IL-1β诱导的软骨细胞炎症反应,为临床OA的治疗提供理论依据.     

As2O3和／或TGF-β1诱导NB4细胞凋亡中P27^Kip1、cyclin E、内源性TGF-β1的变化及其意义

本研究探讨三氧化二砷（As2O3）和／或转化生长因子-β1（TGF-β1）作用于NB4细胞后的细胞凋亡情况、P27^Kip1、cyclin E及内源性TGF—β1 mRNA水平的变化及其意义。用MTT法检测As2O3对NB4细胞的细胞毒性及IC50用瑞氏-姬姆萨染色观察凋亡细胞形态学的变化,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,半定量RT—PCR检测P27^Kip1、cyclin E以及内源性TGF-β1的mRNA水平。结果表明：As2O3、TGF-β1均能明显抑制NB4细胞的生长,促进NB4细胞的凋亡;As2O3对NB4细胞的抑制及促凋亡作用均呈剂量-时间依赖关系,24小时的IC50约为12μmol／L,48小时的IC50约为5μmol／L,72小时的IC50约为3μmol／L。As2O3和／或TGF—β1均可使NB4细胞出现细胞周期阻滞,5μmol／L As2O3使NB4细胞阻滞在G2／M期,5ng／ml TGF-β1使NB4细胞阻滞在G1期,两者联合处理组主要使S期阻滞。As2O3、TGF-β1分别作用于NB4细胞时均可见P27^Kip1及内源性TGF-β1的mRNA表达上调,而cyclin E的mRNA表达下调;联合处理组结果显示TGF—β1可增强As2O3上述作用。结论：As2O3及TGF-β1均可诱导NB4细胞凋亡,引起细胞周期分布异常;As2O3及外源性TGF—β1可能通过上调内源性TGF-β1使P27^Kip1高表达以诱导细胞凋亡;TGF-β1可能直接抑制了cyclin E的表达,或者通过上调P27^Kip1的表达而反馈抑制cyclin E的活性,从而导致NB4细胞周期阻滞。     

汉黄芩素调节AMPK/SIRT1信号通路对骨质疏松大鼠骨折愈合的影响

目的 探究汉黄芩素（WOG）调节腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路对骨质疏松（osteoporosis,OP）大鼠骨折愈合的影响。方法 将60只SPF级SD雌性大鼠随机分为假手术组（Sham组）、骨质疏松性骨折（OPF）模型组（Model组）、低剂量WOG组（WOG-L组,50mg/kg）、高剂量WOG组（WOG-H组,100 mg/kg）和高剂量WOG+AMPK抑制剂Compound C组（WOG-H+CC组,100 mg/kg WOG+0.2 mg/kg Compound C）,每组12只。Model组、WOG-L组、WOG-H组、WOG-H+CC组采用双侧卵巢切除术与右侧股骨干骨折髓内固定术构建骨质疏松性骨折（OPF）大鼠模型。放射性检查评估骨折愈合情况。采用双能X线骨密度扫描仪检测大鼠股骨痂骨密度（BMD）。通过三点弯曲实验和压缩实验对大鼠股骨骨生物力学进行检测。比色法检测大鼠血清骨钙素（OC）、I型前胶原羧基端肽（PICP）水平。HE染色观察骨折处骨痂的病理学变化。Western blot法检测股骨组织中AMPK/SIRT1信号通路相关蛋...     

TGF-β1对皮肤组织特异性Smad4基因敲除小鼠组织培养影响的研究

目的应用组织块培养的方法，观察TGF-β1及其受体抑制剂SB-431542对皮肤组织特异性Smad4基因敲除小鼠与野生型小鼠表皮细胞增殖的影响。方法皮肤组织特异性Smad4基因敲除小鼠与野生型小鼠，制成背部烫伤模型。伤后5d取创面边缘皮肤组织，剪成1mm×2mm皮块，行组织块培养。实验分为6组，分别是：（1）Smad4基因敲除组（A组）；（2）Smad4基因敲除＋SB431542组（B组）；（3）杂合子组（C组）；（4）杂合子＋SB431542组（D组）；（5）野生型组（E组）；（6）野生型＋SB431542组（F组）。B、D、F组加入5×10^-4 MSB431542，作用1h。各组均加入5ng／ml TGF-β1，于37℃，5％C02条件下培养。于培养的第0、8、16、24、32、40、48小时，加入10μM BrdU标记液，标记1h。10％中性甲醛固定。病理切片，免疫组化染色，计算BrdU阳性率。结果TGF-β1可以降低杂合子和野生型小鼠表皮细胞PCNA阳性率和BrdU掺入率，TGF-β1作用于野生型小鼠16h，表皮细胞BrdU掺入率即有明显降低，但对基因敲除组小鼠无该作用，在皮肤组织块培养条件下，预先应用受体抑制剂SB431542作用1h，则TGF-β1的这种作用不再存在。结论TGF-β1对表皮细胞生长具有抑制作用，其受体拮抗剂SB-431542能拮抗这种抑制作用。     

汉黄芩苷通过调控AKT信号通路促进肝癌细胞HepG2凋亡的研究

目的 探究汉黄芩苷(Wogonoside)对抑制肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响及其机制。方法 体外培养肝癌细胞HepG2,随机分为对照组、汉黄芩苷治疗组、AKT激动剂处理组。通过CCK-8实验检测不同浓度汉黄芩苷对细胞活力的影响,运用Western blot实验检测肝癌细胞内Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平及AKT蛋白磷酸化水平,通过流式细胞技术检测肝癌细胞凋亡程度。结果 与对照组比较,汉黄芩苷治疗组细胞增殖能力显著降低(P<0.05),且存在量效关系,凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax表达水平显著增加(P<0.05),而抗凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达水平以及AKT蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05),凋亡程度显著增加(P<0.05)。与汉黄芩苷治疗组相比,AKT激动剂处理组凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax表达水平显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著增加(P<0.05),凋亡程度显著降低(P<0.05)。结论 汉黄芩苷具有抑制肝癌HepG2细胞增殖并促进其凋亡的作用,其机制与调节AKT信号通路...     

阻塞性黄疸中肝脏TGF-β_1的表达及意义

目的：观察TGF-β1在阻塞性黄疸肝组织中的表达,并初步探讨其作用。方法：运用Wistar大鼠建立阻寨性黄疸模型,观察其肝脏病理变化及血清胆红素的变化;运用免疫组织化学方法检测肝脏组织中TCF-β1的表达;并运用原位末端标记方法检测肝细胞凋亡。结果：Wistar大鼠结扎胆总管后,胆红素急剧升高,术后1周可见肝脏表达TCF-β1,肝细胞出现大量的凋亡,纤维组织增生,术后2周TGF-β1表达及细胞凋亡达到高峰,纤维组织大量增生,术后3周纤维组织占据肝脏组织大部分,细胞凋亡相对减少,仍可见大量的TGF-β1表达。结论：在阻塞性黄疸中,肝脏表达大量的TGF-β1,与肝细胞凋亡、纤维化及机体免疫功能抑制密切相关。     

SOD、TGF-β1、Vasohibin-1在口腔鳞状细胞癌诊断及预后评估中的价值

目的 探讨超氧化物歧化酶(SOD)、转化生长因子(TGF-β1)联合血管生成抑制蛋白-1(VASH-1)检测在口腔鳞状细胞癌诊断、预后评估中的价值.方法 选取2015年5月至2018年5月本院收治的70例口腔黏膜鳞状细胞癌患者,取上述患者口腔鳞状细胞癌组织标本70份(观察组)及距离肿瘤2 cm的癌旁正常组织(对照组)....     

TGF-β1/Smad4在乳腺癌细胞中的表达及意义

目的:探讨TGF-β1/Smad4信号通路与乳腺癌发生发展的关系。方法:采用荧光定量PCR技术、免疫组织化学技术对30例乳腺癌临床标本及恶性程度不同的乳腺癌细胞株中TGF-β1及Smad4的表达情况进行检测。结果:TGF-β1和Smad4mRNA表达及蛋白表达随着乳腺癌细胞恶性程度增加而逐步下降。结论:TGF-β1/Smad4信号通路参与了乳腺癌的发生、发展过程,TGF-β1/Smad4信号通路可能在乳腺癌演变中起抑制作用,与乳腺癌的恶性程度呈负相关。     

汉防己甲素干预K562细胞mdr1基因表达的研究

目的 观察汉防己甲素(TTD)对阿霉素诱导的K562细胞mdr1基因表达的影响,并初步探讨其机制.方法 采用MTT法观察TTD对K562细胞的毒性作用,以0.6μg/ml阿霉素单独作用或0.6μg/ml阿霉素联合不同浓度的TTD(0.5、1.0、2.0μg/ml)作用于K562细胞,用RT-PCR法检测mdr1 mRNA、NF-kB mRNA水平,用流式细胞术检测P-gP的表达情况,用胞内罗丹明123(Rho123)积聚试验检测P-gP的功能.结果 空白对照K562细胞未见明显mdr1 mRNA及P-gP表达(水平分别为0.171±0.012、7.85±0.15),细胞内Rho123平均荧光强度(反映P-gP功能)为711.9±63.6,NF-kBmRNA水平为0.783±0.090;0.6μg/ml阿霉素作用24 h后mdr1 mRNA、P-gP、NF-kB mRNA表达上调为0.428±0.012、73.68±1.84、1.075±0.047,细胞内Rho123平均荧光强度下降为347.8±60.6(P值均＜0.05);2.0μg/ml TTD预作用24 h再与0.6 μg/ml阿霉素联合作用24 h能显著抑制阿霉素诱导的mdr1 mRNA、P-gp表达及功能、NF-kB mRNA的上调(分别为0.148±0.006、7.18 ±0.38、799.7±45.8、0.627±0.098)(P＜0.05),而0.5、1.0μg/TTD无明显影响.结论 TTD以浓度依赖性的方式干预阿霉素诱导的mdr1 mRNA、P-gp表达和P-gp功能的上调,其机制可能与TTD抑制了阿霉素诱导的NF-kB的表达有关.     

膀胱移行细胞癌患者血清、尿液TGF-β1水平测定及临床意义

目的：探讨膀胱移行细胞癌患者TGF-β1水平测定及其临床意义。方法：采用酶联免疫吸附法检测膀胱癌患者血清、尿液中TGF-β1浓度。结果：膀胱癌患者血清TGF-β1水平显著高于正常对照，随病理分期、分级提高和肿瘤进展，膀胱癌患者血清TGF-β1水平呈下降趋势。患者尿液TGF-β1浓度显著低于正常对照，不同病理分期、分级之间差异无显著性。结论：血清TGF-β1水平增高可能是膀胱癌患者免疫功能受损的原因；尿液TGF-β1浓度降低可能导致肿瘤细胞增殖加速，成为膀胱癌复发的危险因素。     

膀胱移行细胞肿瘤组织中p21、Rb及TGF-β1的表达及其意义

膀胱移行细胞肿瘤是泌尿系统常见的肿瘤.本文检测p21、Rb及TGF-β1蛋白在膀胱移行细胞肿瘤组织中的表达,以探讨其在肿瘤发生、发展中的作用及其与肿瘤生物学行为的关系.     

全膝关节置换术对晚期KOA患者IL-1β、SOD及TGF-β1水平的影响

目的 分析膝关节置换术对晚期膝关节骨性关节炎（KOA）患者白细胞介素-1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶（SOD）、转移生长因子-β1(TGF-β1)水平的影响。方法 选取2018年3月至2021年3月于大连市友谊医院进行KOA治疗的154例患者,根据治疗方法将其分为对照组（75例,常规治疗）和研究组（79例,全膝关节置换术）。观察两组治疗后3个月的治疗优良率;随访治疗前、治疗后3个月的疼痛视觉模拟评分法（VAS）评分、膝关节评分（HSS）和膝关节活动度;治疗前、治疗后3个月的血清中IL-1β、SOD、TGF-β1以及并发症。结果 研究组治疗总有效率为92.40%,高于对照组的49.33%,差异有统计学意义（P<0.05）。研究组VAS评分低于对照组,膝关节活动度以及HSS评分高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。研究组血清SOD、TGF-β1高于对照组,血清IL-1β低于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。两组并发症发生率比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 全膝关节置换术能改善晚期KOA患者膝功能及活动度,促进骨损伤修复,减轻疼痛症状...     

TGF-β1对脐血体外扩增中造血祖细胞生物学特性影响

为了了解TGF-β1对扩增中脐血(UCB)造血祖细胞(HPC)增殖和分化等生物学特性的影响，探讨利用其进行UCB-HPC体外扩增的可行性，在含有若干细胞因子的UCB CD133^ 细胞体外扩增体系中加入不同浓度的TGF-β1，对扩增细胞的有核细胞(NC)数、免疫表型、细胞周期、祖细胞集落及粘附分子表达等进行了动态观察。结果显示，TGF-β1各组NC总数及其扩增倍数均低于对照组，且呈明显的剂量负相关性。扩增中TGF-β1各组的CD34^ 、CD133^ 、CD34^ CD38^-细胞的比例、细胞总数及其扩增倍数均明显高于对照组。在扩增早期，TGF—β1各组的CFU—GM，CFU—mix和HPP-CFC集落的产率均高于对照组。高浓度TGF—β1组的S期细胞比例明显减少，而G1／G0期的细胞明显增加。对粘附分子表达的检测表明，TGF—β1能够上调CD49d，CD11a和CD54的表达；TGF-β1各组表达CD49d，CD11a和CD54细胞的比例明显高于对照组，而表达这些粘附分子的CD34^ 细胞的比例也明显高于对照组。结论：适当剂量的TGF-β1能够促进CD133^ 细胞的扩增，延缓和减少扩增中HPC的过度分化，提高扩增细胞中造血祖细胞的含量，同时还能上调扩增细胞的部分粘附分子的表达，从而提高扩增细胞的植入能力，对提高UCB体外扩增的质量具有重要意义。     

转化生长因子-β1(TGF-β1)与肺纤维化研究的进展

转化生长因子-β1（Transformating Growth Factorbetal，TGF-β1）是一种多功能的细胞因子，是由2条分子量为11Kd有112个氨基酸构成的单链通过二硫键结合而成的分子量为25Kd的多肽。它在细胞的生长、分化、免疫调节、调节细胞外基质（Extracellular matrix，ECM）合成及损伤后的修复方面发挥着重要的作用。在哺乳动物中。TGF—β家族有3个亚型TGF—β1、TGF-β2、TGF—β3，它们通过与相应的受体结合而发挥生物作用。活化的TGF—β过度表达对肺、     

细胞凋亡及Bax、TGF-β在小儿血管瘤不同时期的表达

目的：探讨细胞凋亡及Bax、TGF-β在小儿增生期与退化期血管瘤中的表达。方法：用免疫组化法测定小儿增生期及退化期血管瘤中Bax、TGF-β的表达。结果：Bax在增生期和退化期血管瘤的阳性表达率为43、75％和88、89％；，I℃F—p在增生期和退化期血管瘤的阳性表达率为43.75％和83.33％。两组比较差异均有显性。结论：Bax、TGF-β可能是引起血管瘤退化的重要因素之一。     

VEGF及TGF-β1水平变化在哮喘患儿中的意义

目的:检测哮喘患儿血清VEGF与TGF-β1水平的动态变化,探讨其相关性及在支气管哮喘发病中的作用.方法:选取2009年1月至2010年9月住院或门诊治疗的哮喘及肺炎患儿,分为哮喘组(30例)及肺炎组(30例),并选取同时期30例健康儿童作为对照组,哮喘患儿运用布地奈德治疗7 d,检测各组血清VEGF及TGF-β1水平及动态变化进行统计分析.结果:哮喘组血清VEGF水平(374.7±208.6)pg/mL明显高于对照组及肺炎组,经过布地奈德治疗,VEGF水平出现明显下降241.7 ±107.6,与治疗前比较具有明显差异(P<0.01).哮喘组血清TGF-β1水平(5 510.7± 1 906.6)pg/mL明显高于对照组及肺炎组,经过布地奈德治疗,VEGF水平出现明显下降(3 998.5 ±107.6),与治疗前比较具有明显差异(P<0.01).哮喘患儿VEGF与TGF-β1水平存在直线相关,呈正相关.结论:哮喘患儿血清VEGF及TGF-β1水平明显增高,两者呈正相关,糖皮质激素吸入对哮喘患儿血清VEGF及TGF-β1表达有抑制作用.