维吾尔族妇女子宫颈鳞癌FHIT基因启动子甲基化检测

目的:分析FHIT基因启动子区甲基化与维吾尔族妇女子宫颈鳞癌发病之间的相关性。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)对45例维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织及34例正常维吾尔族妇女子宫颈组织进行甲基化检测。结果:34例正常子宫颈组织有2例甲基化,甲基化率为5.88%;45例子宫颈鳞癌组织中共有15例发生FHIT基因启动子区甲基化,甲基化率为33.33%。结论:FHIT基因启动子区甲基化与维吾尔族妇女子宫颈癌发病具有相关性。     

DNA损伤修复基因MGMT在肿瘤发生与预后中的作用

通过对DNA损伤修复基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）基因的遗传多态性、高甲基化及蛋白表达与肿瘤发生和预后关系的探讨,反映MGMT基因在肿瘤遗传学研究中的重要性。     

维吾尔族妇女宫颈鳞癌rassfla基因甲基化检测

在我国,宫颈癌患病率居妇科恶性肿瘤第1位,且出现了宫颈癌年轻病例逐年增加的趋势.王直茹等报道,新疆维吾尔族妇女宫颈癌患病率高达117.51/10万,显著高于汉族(21/10万)与其他民族^[1].rassfla(Ras association domainfam-ily1A)为新发现的RAS相关结构域家族rassfl基因的转录本a,是已经肯定的抑癌基因,它的启动子异常高甲基化已在至少20多种人体恶性实体肿瘤中被发现^[2].为了解维吾尔族宫颈鳞癌中rassfla基因启动子区甲基化率情况,我们进行了研究.结果报告如下.     

燃煤污染型砷中毒人群MGMT基因甲基化、转录及表达的研究

目的了解O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶基因(MGMT基因)启动子区甲基化、转录及表达以及DNA甲基转移酶1(DNMT1)的转录及表达与砷中毒的关系。方法采集68例燃煤污染型砷中毒(以下简称砷中毒)患者(轻度24例、中度28例、重度16例)及23例非病区居民外周血。用甲基化特异性PCR法(MSP)检测MGMT基因启动子区甲基化,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测MGMT及DNMT1 mRNA的水平。利用自愿手术治疗的砷中毒患者皮肤组织标本(61例,其中34例为一般病变,21例为癌前病变,6例为癌变)和对照皮肤组织标本(15例),以免疫组织化学(IHC)法检测砷中毒患者及对照皮肤组织中MGMT及DNMT1蛋白的表达。结果 MGMT基因启动子区甲基化阳性率与砷中毒程度有关(χ2=13.739,P0.01)。砷中毒组MGMT mRNA表达水平与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);MGMT基因启动子区甲基化患者和非甲基化患者之间MGMT mRNA和DNMT1 mRNA表达差异无统计学意义(P0.05)。但轻、中度患者DNMT1 mRNA表达明显低于对照组(P0.01);癌前病变组和癌变组皮肤组织中MGMT蛋白表达明显低于对照组(P0.01),与皮肤损害程度有关(rs=-0.446,P0.01);MGMT基因启动子区甲基化患者MGMT蛋白表达明显低于非甲基化组(P0.05)。砷中毒组皮肤组织中DNMT1蛋白表达强于对照组(P0.01),并与皮肤损害程度有关(rs=0.740,P0.01);且MGMT基因启动子区甲基化患者组织中DNMT1蛋白表达明显高于非甲基化组(P0.05)。结论 MGMT基因启动子区高甲基化抑制了燃煤污染型砷中毒患者皮肤组织中MGMT蛋白的表达,且DNMT1蛋白的高表达参与了此抑制过程。     

卵巢癌组织中MGMT表达意义

目的探讨6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）在卵巢癌中的表达及临床意义.方法应用免疫组化（SP）法对60例卵巢癌及癌旁正常组织中MGMT的表达进行检测.结果60例卵巢癌组织中MGMT的表达率为46.7%,癌旁正常组织MGMT的表达率为100%（P＜0.05）.MGMT的表达与卵巢癌的组织学类型和临床分期无关（P＞0.05）,但与卵巢癌的病理分级有关（P＜0.05）.结论卵巢癌组织中存在MGMT的表达缺失,MGMT的功能失活可能是卵巢癌发生的重要机制之一.     

甲醛对小鼠脏器MGMT的影响

目的　研究甲醛对小鼠脏器O6 -甲基鸟嘌呤 -DNA甲基转移酶 (MGMT )表达的影响。方法　选择健康昆明小鼠 40只 ,随机分为 4组 :甲醛低剂量组 (2 5mg/m3)、中剂量组 (5mg/m3)、高剂量组 (10mg/m3)、对照组 (无甲醛暴露 ) ,每组 10只。除阴性对照组外 ,其余 3组每日吸入甲醛 1次 ,每次 4h ,连续 9周。应用链霉亲和素生物素-过氧化物酶 (SABC)免疫组化法对小鼠脑、肺、肝及肾组织中MGMT进行检测。结果　 3个染毒组小鼠肝和肺组织中MGMT表达降低 ,与对照组比较具有显著性差异 (P <0 0 5或P <0 0 1) ;脑和肾组织MGMT表达各组之间无显著性差异 (P >0 0 5)。结论　甲醛对小鼠肝和肺组织MGMT表达可能具有抑制作用     

脑膜瘤组织中MGMT甲基化状态及其对脑膜瘤细胞生长与转移的影响

目的:探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在脑膜瘤组织中的甲基化状态及其对人脑膜瘤细胞系IOMM-Lee细胞生长和转移的作用。方法:收集本院34例脑膜瘤患者的标本,甲基化特异的PCR(MSP)法检测脑膜瘤组织和正常脑组织中MGMT甲基化水平,免疫组织化学染色检测脑膜瘤组织和正常脑组织中MGMT表达。将培养...     

铀矿工GSTP1基因多态与MGMT基因和p16基因甲基化的关系

目的探讨氡职业暴露人群谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1)基因多态与痰细胞6-氧-甲基嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)和p16基因甲基化的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)确定70例氡职业暴露人群GSTP1的基因型;用聚合酶链反应-甲基化特异性法(MSP)确定痰细胞中MGMT和p16基因的甲基化与非甲基化状态。结果在70名铀矿工中,GSTP1基因A105G位点的纯合子(Ile/Ile)42例,杂合子(Ile/Val)25例和纯合子(Val/Val)3例。MGMT、p16基因甲基化率和总甲基化率分别为14.2%、8.6%和18.6%。与携带Ile/Ile人群相比,携带异常等位基因(Ile/Val与Val/Val)的人群MGMT基因甲基化和总甲基化率增加[P=0.037,OR=4.8,95%CI(1.1~21.0);P=0.016,OR=5.1,95%CI(1.4~19.6)];p16基因甲基化率差异无统计学意义[P=0.057,OR=4.6,95%CI(0.8~29.2)]。结论GSTP1(A105G)基因多态性与氡致MGMT基因甲基化和总甲基化的易感性有关。     

甲醛对小鼠胸腺、脾、睾丸组织MGMT的影响

目的　研究甲醛对小鼠淋巴及睾丸组织O6-甲基鸟嘌呤 -DNA甲基转移酶 (MGMT)表达的影响。　方法选择健康雄性昆明小鼠 40只 ,随机分为 4组 :甲醛低剂量组 ( 2 .5mg/m3 )、中剂量组 ( 5mg/m3 )、高剂量组 ( 10mg/m3 )、对照组 (无甲醛暴露 ) ,每组 10只。除阴性对照组外 ,其余 3组每日吸入甲醛 1次 ,每次 4h ,连续 9周。应用链霉亲和素生物素—过氧化物酶 (SABC)免疫组化法对小鼠胸腺、脾及睾丸组织中MGMT进行检测。　结果　高剂量染毒组小鼠胸腺、脾和睾丸组织中MGMT表达降低 ,与对照组比较差异具有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。　结论　甲醛对小鼠淋巴和睾丸组织MGMT表达可能具有抑制作用。     

维吾尔族宫颈鳞癌C/EBPα基因甲基化意义

目的 探讨维吾尔族宫颈鳞癌C/EBPα基因(CCAAT/enhancer-binding proteinαgene)启动子区甲基化的意义.方法 收集19例维吾尔族宫颈鳞癌组织和17例宫颈正常组织,提取基因组DNA,用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术(MALDI-TOF)检测C/EBPα基因启动子区CpG岛甲基化状态.结果(1)C/EBPα基因启动子区CpG岛甲基化程度在19例维吾尔族宫颈鳞癌病例组与17例对照组中各为(0.137 1±0.088 36)与(0.115 6±0.087 28),差异有统计学意义(Z=-2.840,P=0.005);(2)维吾尔族宫颈鳞癌病例组C/EBPα基因启动子区CpG₁、CpG₅和CpG₁4.15甲基化程度各为(0.095 9±0.053 16)、(0.072 1±0.025 07)和(0.261 3±0.050 83),明显高于对照组的(0.068 1±0.076 09)、(0.044 7±0.026 25)和(0.191 7±0.070 69),差异有统计学意义(P<0.05);(3)患者年龄、高危型人类乳头瘤病毒16(HPV16)感染与C/EBPα基因启动子区CpG岛高甲基化状态无关(P>0.05).结论 C/EBPα基因启动子区CpG岛、尤其是CpG₁、CpG₅和CpG₁4.15的高甲基化状态可能导致该基因沉默,从而促进维吾尔族宫颈鳞癌的发生发展.     

IFITM1蛋白在新疆维吾尔族妇女子宫颈癌mRNA的表达水平

目的:研究IFITM1蛋白在新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义。方法:应用实时定量逆转录PCR方法检测15例维吾尔族妇女子宫颈鳞癌及其癌旁子宫颈正常组织中IFITM1基因mRNA表达水平。结果:15例子宫颈癌组织中IFITM1的mRNA表达丰度为(64.79±42.71)%,正常宫颈组织中IFIM1的mRNA的表达丰度为(128.29±88.77)%,正常宫颈组织表达丰度显著高于子宫颈癌组织(t=-2.497,P=0.09)。新疆维吾尔族妇女慢性子宫颈炎与子宫颈鳞癌组织中IFITM1基因mRNA的表达具有统计学差异(P<0.05)。结论:IFITM1蛋白与新疆维吾尔族妇女的子宫颈鳞癌有着密切的关系,该基因可能是一种潜在的抑制子宫颈鳞癌发生的基因。     

MGMT基因多态性与食管癌易感性关系

目的 探讨山西省长治地区食管癌患者O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因多态性与食管癌易感性的关系,及其与环境因素在食管癌发生中的交互作用。方法 采用1:1配对的病例对照研究,对201对研究对象进行食管癌相关危险因素的问卷调查,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对MGMT多态性基因型进行检测。结果 携带MGMT基因杂合型和突变型者发生食管癌的风险增高,χ2=9.80,P<0.01,OR值分别为1.33(95%CI=1.01~2.07)和1.47(95%CI=1.03~2.54);MGMT易感基因型与腌制食品对食管癌的发生存在交互作用(S=1.77,API=0.25),而与吸烟、饮酒、精神刺激、食管癌家族史之间没有交互作用。结论 MGMT突变基因型是长治地区食管癌高发的易感基因型,且与腌制食品存在协同作用。     

Smac和Livin的表达与宫颈癌的发生发展相关性分析

目的 探讨凋亡相关蛋白Smac、Livin在宫颈癌组织中的表达及临床意义.方法 选取2014年3月至2015年3月汕头市中心医院妇产科宫颈鳞状细胞癌24例(宫颈癌组),宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ 15例(CIN Ⅰ组),CIN Ⅱ13例(CIN Ⅱ组),CIN Ⅲ13例(CIN Ⅲ组),正常宫颈组织15例作为正常对照(对照组),采用免疫组化法检测各组的Smac和Livin表达情况.结果 宫颈癌组Smac阳性比例为83.33％,明显高于对照组,差异比较有统计学意义(x2=25.658,P＜0.05);宫颈癌组、CIN Ⅱ组和CIN Ⅲ组Smac阳性比例比较差异无统计学意义(x2=2.204,P＞0.05);宫颈癌组、CIN Ⅱ组和CIN Ⅲ组Livin阳性比例分别为79.17％、76.92％和84.62％,明显高于对照组(x2值分别为19.420、17.279、14.412,均P＜0.05);CIN Ⅰ组与对照组Smac和Livin阳性比例比较差异无统计学意义(x2值分别为0.536、0.000,均P＞0.05);CIN Ⅰ组Smac和Livin阳性比例明显低于CINⅡ组、CINⅢ组和宫颈癌组(x2值分别为20.843、22.611,均P＜0.05);低分化患者Smac阳性比例为42.86％,明显低于高中分化患者(x2=11.657,P＜0.05);宫颈鳞状细胞癌中Smac和Livin的表达呈正相关(r=0.872,P＜0.05).结论 Smac和Livin在宫颈鳞状细胞癌的发生发展中起协同作用.     

FHIT基因与宫颈癌研究的新进展

脆性组氨酸三联体基因定位于人3号染色体短臂(3p14.2)上,许多研究表明其表达改变与人类多种肿瘤疾病关系密切。其失活机制主要表现为启动子区域CPG岛甲基化、缺失及异常转录,其抑癌作用可能与细胞凋亡、细胞周期阻滞二腺苷三磷酸水解酶等有关。脆性组氨酸三联体基因在宫颈癌早期即有频繁缺失和异常表达,提示该基因在宫颈癌的发生发展中起关键作用。该文重点综述有关脆性组氨酸三联体基因的分子生物学研究新进展以及在宫颈癌诊治方面的意义。     

TM与VEGF在宫颈鳞癌组织中的表达和意义

目的 了解血栓调节蛋白与血管内皮生长因子在宫颈鳞癌组织中的表达情况及其与病变的临床分期、组织学分级和淋巴结转移等方面的关系,并分析血管内皮生长因子与血栓调节蛋白的相关性.方法 采用免疫组织化学方法分别检测血栓调节蛋白与血管内皮生长因子在34例宫颈鳞癌、34例宫颈上皮内瘤变、8例慢性宫颈炎组织中的表达,并进行分析.结果 血栓调节蛋白在宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变、宫颈炎组织中的表达阳性率分别为17.65%、50%、62.5%,在宫颈上皮内瘤变Ⅲ级、Ⅱ级、Ⅰ级组织中的表达阳性率分别为23.5%、70%、85.7%,均呈逐渐升高趋势,且有显著性差异(P＜0.05),而在宫颈鳞癌组,血栓调节蛋白的表达与临床分期、组织学分级和淋巴结转移无关(P＞0.05).血管内皮生长因子在宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变、宫颈炎组织中的表达阳性率逐渐降低,分别为70.6%、44%、25%,有显著性差异(P＜0.05),血管内皮生长因子的表达与宫颈鳞癌临床分期、组织学分级和淋巴结转移以及宫颈上皮内瘤变分级无关(P＞0.05).血栓调节蛋白与血管内皮生长因子在宫颈鳞癌中的表达亦无明显相关性(P＞0.05).结论 血栓调节蛋白与血管内皮生长因子均可能作为宫颈鳞癌的肿瘤标志物,对肿瘤的发生分别起抑制和促进作用,在宫颈鳞癌的筛查中,血栓调节蛋白较血管内皮生长因子更有临床意义.     

LRP1B在宫颈鳞癌中的表达与意义

目的 探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白1B (LRP1B)在宫颈鳞癌中的表达与意义.方法 选用原位杂交的检测方法,用LRP1B寡核苷酸探针对20例正常的宫颈组织和40例宫颈鳞癌组织标本中LRP1B mRNA表达进行测定,用HPV16/18探针对40例宫颈鳞癌标本组织进行检测.结果 在40例宫颈鳞癌标本中,有22例呈现LRP1BmRNA低表达,在20例正常宫颈组织中,仅有3例呈现低表达,癌症组的阴性表达率明显低于正常组织,且两组之间的差异具有统计学意义(χ2=5.28,P<0.05).宫颈鳞癌组中,LRP1B阴性者的HPV16/18阳性率明显高于LRP1B阳性者,差异有统计学意义(χ2=5.56,P<0.05).在40例宫颈鳞癌标本中,LRP1BmRNA的表达与患者的年龄、临床分期、肿瘤分化程度均无关(χ2值分别为0.22、4.65、0.90,均P<0.05);但在发生浸润至浆膜层和淋巴结转移的标本中呈现低表达,差异有统计学意义(χ2值分别为4.85、6.15,均P<0.05).结论 LRP1B在宫颈鳞癌组织中呈低表达与HPV16/18感染很可能作为协同因子参与宫颈癌的发生,并且LRP1B与宫颈鳞癌发病和转移有较密切的关系.