丹参总酚酸与三七总皂苷合用4种丹酚酸成分在大鼠体内的药动学

 目的 建立丹参总酚酸与三七总皂苷合用(5∶1)灌胃给药后大鼠血浆中原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B含量的测定方法,并对其进行药动学研究。方法 采用HPLC-UV方法测定,色谱柱：Zorbax SB-C₁₈ column (4.6 mm×250 mm, 5 μm),流速：1 mL·min^-1,柱温：30 ℃,检测波长：280 nm,以乙腈和体积分数为0.026%的磷酸水溶液梯度洗脱,血浆样品以体积分数为10%的盐酸酸化,而后用乙酸乙酯萃取2次,并根据测定结果求算药动学参数。结果 4种成分的日内与日间RSD均小于15%,提取回收率均大于70%,线性关系良好。原儿茶醛在10.0 min 达峰,ρ_max为6.466 mg·L^-1,AUC_0-∞值为82.1 mg·min·L^-1,迷迭香酸在11.7 min达峰,ρ_max为10.50 mg·L^-1,AUC_0-∞值为564.8 mg·min·L^-1,紫草酸在20.8 min达峰,ρ_max为5.950 mg·L^-1,AUC_0-∞值为1 123 mg·min·L^-1,丹酚酸B在8.3 min达峰,ρ_max为48.12 mg·L^-1,AUC_0-∞值为4 026 mg·min·L^-1。结论 该法适用于原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B的血药浓度测定与药动学研究。     

丹参总丹酚酸与三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注及中性粒细胞呼吸爆发的影响

目的：研究丹参总丹酚酸、三七总皂苷及其不同比例配比对实验性大鼠脑缺血再灌注及多形核中型粒细胞呼吸爆发的影响，探讨其配伍意义及机制。方法：通过椎动脉及颈总动脉阻断的大鼠脑缺血再灌注模型研究丹参总丹酚酸、三七总皂苷及其不同配比对脑缺血的保护作用和对血清SOD、MDA含量的影响；通过化学发光法研究药物对趋化三肽激发的多形核中性粒细胞呼吸爆发的影响。结果：丹参总丹酚酸、三七总皂苷及其不同比例配比均能减少脑缺血梗死体积，降低血清MDA水平．抑制中性粒细胞呼吸爆发，且三七总皂苷及其高比例配方作用较优；丹参总丹酚酸不能提高血清SOD水平，可能通过其他途径实现抗氧化功能。结论：丹参总丹酚酸和三七总皂苷在脑缺血保护功效上有协同作用．且在后者比例较高时更为显著；这种保护作用与增强机体抗氧化能力及抑制缺血再灌注引起的多形核中性粒细胞呼吸爆发有关。     

三七总皂苷对大鼠海马神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用

目的观察三七总皂苷对大鼠海马神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用.方法建立缺氧/缺糖再给氧模型,模拟缺血再灌注损伤.流式细胞术检测凋亡细胞百分率,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率,同时,测定细胞乳酸脱氢酶(LDH)的漏出和一氧化氮(NO)的产生量.结果神经细胞缺氧/缺糖5h后再给氧可诱导神经细胞凋亡和细胞坏死,并显著增加LDH的漏出和NO的产生,并随再给氧时间的延长而增加.三七总皂苷能降低神经细胞凋亡及坏死的百分率,减少LDH的漏出和NO的过量产生,三七总皂苷的作用随剂量增加而增加.结论三七总皂苷具有拮抗海马神经细胞凋亡的作用,这种作用可能与降低或抑制一氧化氮合酶(NOS)活性,减少NO的过量产生有关.     

丹参多酚酸配伍三七总皂苷通过调节M1/M2型小胶质细胞极化对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

[目的] 探究丹参多酚酸配伍三七总皂苷通过调节M1/M2型小胶质细胞极化对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响。[方法] 雄性Wistar大鼠60只，采用线栓法制作大脑中动脉阻塞模型，随机分为假手术组（Sham）、缺血再灌注组（I/R）、依达拉奉组（Eda，6 mg/kg）、丹参多酚酸组（SPA，21 mg/kg）、三七总皂苷组（PNS，100 mg/kg）、丹参多酚酸配伍三七总皂苷组（SPA+PNS，21 mg/kg+100 mg/kg），尾静脉注射给药，每日1次，Sham组与I/R注射等容积生理盐水，连续给药5 d后，观察大鼠脑血流变化、神经功能评分，组织形态学变化，Nissl染色及神经元核蛋白（NeuN）免疫荧光染色观察神经元损伤情况，CD16/Iba-1、CD206/Iba-1免疫荧光双染检测缺血半暗带M1型、M2型小胶质细胞表型情况，蛋白免疫印迹（Western-Blot）法检测M1型小胶质细胞标记物白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的蛋白表达及M2型小胶质细胞标记物CD206、转化生长因子-β（TGF-β）及白细胞介素-10（IL-10）的蛋白表达情况。[结果] 与I/R组比较，SPA组、PNS组、SPA+PNS组在脑血流、神经功能缺损、组织形态、神经元损伤情况均有不同程度改善，并促进M2型小胶质细胞CD206/Iba-1表达，上调CD206、TGF-β、IL-10的蛋白表达；抑制M1型小胶质细胞CD16/Iba-1表达，下调IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS的蛋白表达，且SPA+PNS组改善程度优于SPA组、PNS组。[结论] 丹参多酚酸、三七总皂苷及两者配伍可减轻大鼠脑缺血再灌注损伤，且配伍应用效果优于单独应用，其机制可能与促进小胶质细胞M1型极化向M2型转换有关。     

三七总皂苷对大鼠慢性高眼压视网膜损伤的保护作用

目的探讨三七总皂苷对实验性高眼压导致的大鼠视网膜神经节细胞层(RGCL)神经元损伤有无保护作用。方法健康SD大鼠42只,其中6只为正常对照组,6只为正常用药组(三七总皂苷200mg/kg),其余30只用Akira法,烙闭大鼠右眼上巩膜静脉,制作大鼠持续性高眼压模型后随机分为生理盐水组和量效关系组,分别予tPNS50mg/kg(A组),100mg/kg(B组),150mg/kg(C组)和200mg/kg(D组)治疗1个月。处死大鼠剥取视网膜做全层铺片,进行RGCL神经元计数分析。结果正常对照组大鼠双眼RGCL神经元计数比较差异无显著性意义(P>0.05),正常对照组与正常用药组比较差异无显著性(P>0.05),正常对照组与各浓度tPNS治疗组实验眼RGCL计数差异均有显著性(P<0.05),各浓度tPNS治疗组实验眼与其自身对照眼RGCL计数差异均有显著性(P<0.05),生理盐水组与C组实验眼RGCL计数差异有显著性(P<0.05)。结论单独使用tPNS对正常大鼠RGCL神经元计数无影响,tPNS对持续性高眼压大鼠RGCL神经元损伤有部分保护作用。RGCL中的大神经元对高眼压更敏感,与青光眼RGC丧失的模式相似。     

黄芪总皂苷和三七总皂苷配伍对小鼠实验性脑水肿的影响

目的：运用结扎颈总动脉和迷走神经法，制作脑缺血再灌注模型，观察黄芪总皂苷和三七总皂苷配伍对脑水肿的影响。方法：ip麻醉小鼠，颈正中切口，暴露并分离双侧颈总动脉和迷走神经。用小动脉夹闭双侧颈总动脉和迷走神经10min，打开动脉夹再灌注10min，如此重复3次制作脑缺血再灌注模型。分别采用均匀设计分组、2×2析因设计分组，探讨黄芪总皂苷和三七总皂苷配伍对脑水肿的影响。结果：TSA和TSP均具有不同程度抗实验性脑水肿形成的作用或趋势，配伍后作用更佳，黄芪总皂苷32mg／kg和三七总皂苷80mg／kg配伍应用，对脑水肿的抑制作用最好。2×2析因实验显示，在该剂量下两药配伍，可明显降低脑含水量，表现出相加的协同作用。结论：黄芪总皂苷和三七总皂苷配伍具有协同的抗脑水肿的作用。     

三七总皂苷对大鼠急性心肌梗死的保护作用

目的:通过观察三七总皂苷(Panax Notoginseng Saponin,PNS)对大鼠急性心肌梗塞(AMI)后血流动力学及血清酶的影响,探讨PNS对AMI大鼠保护作用及可能机制。方法:成年雄性SD大鼠40只随机分为4组:假手术组、急性心梗模型(AMI)组、三七总皂苷(PNS,20mg/kg)组、地尔硫卓组(22.5mg/kg)。采用麻醉开胸结扎冠状动脉左前降支造成AMI模型,观察AMI后各组大鼠血流动力学,左心室收缩峰压均值(mlVSP)、左心室舒张压均值(mlVDP)、左心室收缩压最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室舒张压最大下降速率(-dp/dtmax)、左心室开始收缩至达到室内压最大上升速率时间(t-dp/dtmax)及心电图、心律失常、血清游离脂肪酸(FFA)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)、以及血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、心梗面积的变化。结果:大鼠AMI后,mlVSP、±dp/dtma明显降低,mlVDP明显升高(P相似文献   

黄精多糖对缺氧复氧诱导H9c2心肌细胞损伤的保护作用

目的:探究黄精多糖(Polygonatum sibiricum polysaccharides,PSP)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia-reoxygenation,H/R)损伤的保护作用。方法:体外无菌培养H9c2心肌细胞,制备缺氧/复氧损伤模型。应用A0-EB和Hoechst33324染色法观察心肌细胞凋亡形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用MTT法检测心肌细胞存活率,Westen Blot法检测H9c2心肌细胞Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白表达。结果:缺氧/复氧模型组中H9c2细胞存活率明显降低,细胞核浓染致密、固缩,细胞凋亡率明显增加,Caspase-3的表达和Bax/Bcl-2比率显著上调;与模型组比较,黄精多糖1.0、1.5、2.0mg/ml药物组中细胞存活率均明显升高,细胞核淡染,轻微缩小,细胞凋亡率降低,Bax/Bcl-2比率明显下调,Caspase-3表达水平被显著抑制。结论:黄精多糖对H/R诱导的H9c2心肌细胞具有保护作用,其作用可能与抑制心肌细胞凋亡有关。     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤保护研究

目的：观察三七总皂苷（PNS）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用栓线阻断大鼠大脑中动脉血流制备脑缺血模型,进行神经病学体征观察,TTC染色测定缺血侧大脑脑梗死面积。另取大鼠分别测定颈总动脉血栓形成时间和血小板聚集率。结果：与模型组相比,脑梗死面积缩小,大鼠神经功能缺损症状得到不同程度的改善。与空白组相比,血栓形成时间延长,血小板聚集率下降。结论：三七总皂苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

三七总皂苷对H2O2诱导BMSCs 凋亡的保护作用及机制研究

目的：体外观察三七总皂苷（tPNS） 对过氧化氢（H2O2） 诱导的骨髓间充质干细胞（BMSCs） 凋亡的影响,并通过ERK1/2 通路初步探讨tPNS 的作用分子机制。方法：全骨髓贴壁法体外分离、培养SD 大鼠BMSCs。不同浓度tPNS （25、50、100 和200 μg/mL） 处理BMSCs 24 h 后,用500 μmol/L H2O2 孵育细胞24 h 诱导凋亡,后行MTT 实验检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期。100 μg/mL tPNS 预处理24 h 后,加ERK1/2 抑制剂PD98059（25 μmol/L） 1 h,后用500 μmol/L H2O2 孵育细胞24 h 诱导凋亡,用Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡率;Western Blot 检测细胞ERK1/2 及其蛋白磷酸化的表达。结果：与对照组比较,其他各组存活率均显著降低（P＜0.01）;与H2O2 组比较,100 μg/mL 和200 μg/mL tPNS 组均能显著提高BMSCs 的存活率（P＜0.01,P＜0.05）,其中100 μg/mL 效果更佳,所以采用最佳浓度组100 μg/mL tPNS 组进行后期研究。BMSCs 经tPNS干预24 h 后,100 μg/mL 和200 μg/mL tPNS 组细胞周期中G2+S 期细胞数的比例较H2O2组明显增加（P＜0.05）,其中100 μg/mLtPNS 组较200 μg/mL tPNS 组更多;其他浓度tPNS 组与H2O2 组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。与对照组比较,其他各组凋亡率均升高（P＜0.01）;与H2O2 组比较,tPNS 组能显著降低BMSCs 的凋亡率（P＜0.01）;与tPNS 组比较,tPNS+PD98059 组能显著升高BMSCs 的凋亡率（P＜0.05）。与对照组比较,H2O2 组、tPNS+PD98059 组能显著下调ERK1/2 蛋白的磷酸化表达（P＜0.01）;与H2O2 组比较,tPNS 组、tPNS+PD98059 组能显著上调ERK1/2 蛋白的磷酸化表达（P＜0.01）;tPNS 组与tPNS+PD98059 组之间并没有显著差异。结论：tPNS 对H2O2 诱导的BMSCs 凋亡有保护作用,其机制可能与促进ERK1/2 蛋白的磷酸化表达有关。     

三七皂苷类成分的蛋白质相互作用网络分析

三七皂苷类成分是三七发挥药效的活性部位,目前对其作用机制尚无系统的研究。该文构建了三七皂苷类成分的蛋白互作网络并对网络进行模块分析,通过模块的功能及包含的蛋白从分子水平上阐释三七皂苷类成分的作用机制。结果表明三七皂苷发挥药效主要与环磷酸腺苷代谢、血管伸缩、血液凝固、T细胞增殖与分化等生物过程相关。     

三七总皂苷对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-13及其抑制因子-1表达的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶(MMP)-13、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP)-1表达的影响,探讨PNS抗肝纤维化作用的可能机制.方法:将大鼠随机分成正常组、模型组、PNS低、中、高剂量(50,100,200 mg·kg-1)组和秋水仙碱(Col,0.1mg·kg-1)组.除正常组外其余各组采用CCl4皮下注射的方法诱导肝纤维化大鼠模型,每周2次,连续18周.于造模第9周起,给药组分别灌胃相应的受试药物,正常组和模型组灌胃等容量的生理盐水,疗程10周.实验结束后,计算肝脏、脾脏指数;比色法测定血清中ALT,AST含量;同时取固定部位肝脏组织,HE染色观察肝组织病理学改变,免疫组化技术测定肝组织中MMP-13,TIMP-1蛋白的表达,RT-PCR技术测定MMP-13,TIMP-1mRNA的表达.结果:与模型组相比,三七总皂苷(100,200 mg·kg-1)不仅可减轻大鼠肝纤维化程度,降低肝脏、脾脏指数及血清ALT,AST的含量,还可显著升高肝纤维化大鼠肝脏MMP-13的表达,降低TIMP-1的表达.结论:三七总皂苷对大鼠肝纤维化具有一定的保护作用,其机制可能与上调MMP-13,抑制TIMP-1的表达,促进胶原降解有关.     

三七皂苷对神经系统疾病药理作用机制研究进展

通过综述三七皂苷,包括三七总皂苷、三七三醇皂苷、三七二醇皂苷、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Re和三七皂苷R₁对神经系统疾病(阿尔茨海默病、帕金森病、缺血性脑中风和抑郁症)的药理作用,对比分析三七皂苷对神经系统疾病的药理作用研究热点及潜在优势(如类雌激素作用),为进一步的药理研究提供参考,也为临床上对神经系统疾病的治疗、药物的研究开发提供新的思路。     

Panaxatriol saponins extracted from Panax notoginseng induces thioredoxin-1 and prevents 1-methyl-4-phenylpyridinium ion-induced neurotoxicity

Aim of the study

Thioredoxin-1 has various biologic activities, including the control of redox balance and the inhibition of apoptosis. The current study was designed to examine the effects of panaxatriol saponins (PTS) extracted from Panax notoginseng on thioredoxin-1 expression and 1-methyl-4-phenylpyridinium ion-induced injury.

Materials and methods

Using PC12 cells and Kunming mice, we test thioredoxin-1 expression after PTS treatment by Western blot. The protective effect of PTS against 1-methyl-4-phenylpyridinium ion-induced injury was assessed by MTT assay and LDH release assay.

Results

PTS induced thioredoxin-1 expression in vitro and in vivo, and attenuated 1-methyl-4-phenylpyridinium ion-induced cell death of PC12 cells.

Conclusions

PTS is a new inducer of thioredoxin-1 and has a possible potential as a therapeutic agent for neurodegenerative diseases including Parkinson's disease.     

三七总皂苷肠溶微囊的制备及体外释放度

目的:探讨三七总皂苷(PNS)肠溶微囊的制备方法,并对其进行体外释放度研究。方法:以聚丙烯酸树脂Ⅱ为囊材,采用溶剂-非溶剂法制备PNS肠溶微囊,并考察其包封率、载药量及其体外释放性能。结果:3批PNS肠溶微囊的包封率分别为90.85%,90.15%,89.06%;载药量分别为26.05%,25.04%,25.16%;R1,Rg1,Rb1在人工胃液中释放量<10%,人工肠液中45 min累积释放率分别达到86.08%,88.76%,84.98%。结论:溶剂-非溶剂法制备PNS肠溶微囊方法简单,体外释放符合药典对肠溶制剂的要求。     

黄芪总苷和三七总皂苷配伍对脑缺血再灌注后MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的:研究黄芪总苷(AST)和三七总皂苷(PNS)配伍对小鼠脑缺血再灌注后脑组织基质金属蛋白酶-9(matrix met-alloproteinase-9,MMP-9)与组织基质金属蛋白酶抑制物-1(tissue inhibitor of meta11oproteinase-1,TIMP-1)表达的影响,探讨其抗缺血性脑损伤的保护机制。方法:C57BL/6N小鼠随机分成假手术组、模型组、AST和PNS配伍高、中、低剂量组、AST单用组、PNS单用组及依达拉奉组,连续给药4 d后结扎双侧颈总动脉20 min,再灌注24 h,建立脑缺血再灌注模型,用HE染色检测海马区病理形态,用Western-blot法检测MMP-9与TIMP-1蛋白在脑组织的表达。结果:各药物组神经元存活率显著高于模型组(P0.01),以配伍中剂量组作用显著,析因分析表明AST(110 mg.kg-1)与PNS(115 mg.kg-1)配伍具有协同的交互作用(P0.01)。各药物组脑组织MMP-9蛋白表达显著低于模型组(P0.01或P0.05),而TIMP-1的表达显著高于模型组(P0.05或P0.01),且以配伍中剂量组作用显著,两药配伍均具有叠加的交互作用(P0.05)。结论:AST110 mg.kg-1与PNS 115 mg.kg-1配伍具有协同抗脑缺血再灌注损伤的作用,其机制可能与调节缺血脑组织MMP-9,TIMP-1的蛋白表达有关。     

三七炮制品化学成分研究

为了研究三七炮制品的化学成分,采用大孔吸附树脂柱色谱、硅胶柱色谱、RP-C₁₈柱色谱、制备HPLC等分离纯化方法,从三七炮制品的70%乙醇提取物中分离得到23个单体化合物。应用理化测定和波谱(MS,NMR)分析等方法鉴定各化合物的结构,其分别鉴定为6'-O-乙酰人参皂苷Rh₁(1),人参皂苷Rk₃(2),人参皂苷Rh₄ (3),20S-人参皂苷Rg₃(4),人参皂苷Rk₁(5),20R-人参皂苷Rg₃(6),人参皂苷Rg₅ (7),人参皂苷F₂ (8),20S-人参皂苷Rh₁(9),20R-人参皂苷Rh₁(10),绞股蓝皂苷ⅩⅦ(11),三七皂苷Fa(12),人参皂苷Ra₃(13),人参皂苷Rg₁ (14),人参皂苷Re(15),三七皂苷R₂(16),20R-人参皂苷Rg₂(17),三七皂苷R₁ (18),人参皂苷Rd(19),人参皂苷Rb₁ (20),三七皂苷D(21),三七皂苷R₄(22)和人参皂苷Rb₂(23)。化合物 1 为首次从三七中分离得到,化合物 4, 6, 8和11 为首次从三七炮制品中分离得到。根据三七炮制前后样品的指纹图谱分析比对,推测了在炮制过程中三七中人参三醇类和人参二醇类化合物可能的变化途径。结果显示,三七中的三萜皂苷主要发生了糖基水解反应和脱水反应。     

三七营养生理与施肥的研究现状与展望

三七是驰名中外的名贵中药材,已有400多年的栽培历史.作者综述了三七适宜的土壤环境条件,矿质营养对三七生长的营养效应及其三七生长发育习性和养分需求规律,以及施肥措施对三七生长发育、产量和品质的影响.在此基础上,进一步分析了三七平衡施肥研究上还存在的问题,并提出今后应着重开展三七矿质营养机制、植株营养诊断方法、种植地土壤分等定级、专用肥开发、施肥与抗病性和测土配方施肥等方面研究.     

云南地区三七和草果上真菌污染的初步分析

目的:了解云南地区主产的中药材三七和草果上污染真菌的主要类群,分析这2种常用药材上潜在的真菌毒素污染的可能性。方法:采集来源于云南不同地区市售的三七、草果药材,使用稀释平板法分离药材表面真菌,依据形态学特征结合分子生物学方法对主要分离菌株进行鉴定。结果:三七污染真菌以淡紫拟青霉和橘青霉为优势菌;草果污染菌中的优势菌为淡紫拟青霉和黄曲霉。结论:根据三七和草果上污染菌的情况,在云南地区三七存在橘青霉毒素污染的风险,草果存在黄曲霉毒素污染的风险。     

EST-SSR标记对三七选育品系的研究

目的:通过对不同三七选育品系的遗传变异和遗传分化程度进行分析比较,为三七的品种选育提供理论依据.方法:利用自行设计和他人开发的17对EST-SSR引物,对来自4个不同区域的17份三七选育品系进行遗传多样性及遗传分化分析.结果:在17份三七选育品系中一共扩增出136个多态位点,平均多态信息量PIC值为0.78,Nei's基因多样性H0.139,Shannon多样性指数I0.208.选育品系间的遗传分化系数为0.382,遗传相似度和聚类分析的结果表明17份三七选育品系和屏边三七被划分为4个大类群,其中17份三七选育品系被分为3个类群,屏边三七单独在一个类群.结论:通过集团选择后,从相同栽培居群内筛选出的不同品系存在一定程度的遗传分化,可以用EST-SSR标记来检测集团选择的结果.