鼻内接种流感疫苗和霍乱毒素B亚单位预防流感病毒感染

霍乱毒素(CT)与某种无关的抗原同时接种时,不但是有效的肠道免疫原,而且还是刺激对无关抗原的IgA和IgG抗体应答的免疫调节剂。本文作者将CT或霍乱毒素B亚单位(CTB)与流感疫苗同时接种小鼠,观察小鼠的免疫应答及流感病毒感染情况。流感HA疫苗由流感病毒A/山形/120/86(H1N1)株和A/PR/8/34(H1N1)株制成。对6～8周龄的雌性BALB/c小鼠鼻腔、腹腔或皮下接种HA疫苗和CTB或CT。4周后测定血清中血凝抑制(HI)抗体和鼻腔内流感特异性和CTB特异性IgA抗体。     

霍乱毒素B亚单位与流感疫苗鼻内合种可增强保护性抗体应答

最近,作者证明霍乱毒素B亚单位(CTB)用作流感病毒血凝素(HA)疫苗鼻内免疫的佐剂颇为理想.疫苗与CTB合用鼻内接种1次就可诱导抵御病毒攻击所需的高水平鼻内和血清抗病毒抗体.作者又探讨了流感病毒A/PR/8/34(PR-8)HA疫苗与CTB诱导保护性抗体水平所要的剂量、抗体应答持续时间、交叉保护性抗体程度以及CTB增加保护性抗体应答的机理.     

流感HA和霍乱毒素B亚单位联合疫苗经鼻内、口腔或非肠胃途径免疫的比较

本文用不同剂量流感病毒A/PR/8/34HA疫苗和霍乱毒素B亚单位(CTB)联合免疫小鼠,比较了鼻内、非肠胃、腹腔或皮下接种小鼠4周后的抗体应答和用A/PR/8/34小鼠适应株鼻腔攻击3天后的保护作用的观察。作者首先检测呼吸道洗液和血清中抗PR8病毒IgA抗体,发现鼻内接种比其它途径产生较高水平的抗病毒IgA抗体。同时,分析呼吸道洗液和血清中抗PR8病毒IgG抗体,发现当CTB的剂量为0.1μg时,鼻内与非肠胃接种产生的IgG抗体水平相似;当     

药物赋形剂和吸收促进剂作为增强粘膜佐剂活性的免疫刺激物

霍乱毒素B亚单位(CTB)具有免疫佐剂作用,多种药物赋形剂和吸收促进剂[如牛磺胆酸(TC)、甘氨胆酸(GC)、双氢牛磺梭链孢酸(DHTF)、QuilA、甲基纤维素(MC)等]能进一步增强CTB的佐剂活性.将流感血凝素(HA)疫苗加CTB(0.2μg或2μg)、0.2μg CTB及赋形剂、2μg CTB及赋形剂或赋形剂悬于1.0μl的磷酸盐缓冲盐水中,分别接种于6周龄BALB/c雌性小鼠鼻腔内.免疫后4周,采集鼻腔洗液和血清,用ELISA测定抗HA和抗CTB抗体.     

对呼吸道合胞病毒亚单位疫苗局部免疫的体液、粘膜和细胞免疫应答

本文用霍乱毒素B链(CTB)作为佐剂在小鼠体内评价了呼吸道合胞病毒(RSV)融合(F)蛋白局部免疫作用.免疫4周龄CD1小鼠、每组4～6只,亚单位疫苗鼻内接种(inl)10μl(含F蛋白2μg和CTB5～10μg),肌肉接种(im)100μl(只含F蛋白2μg),在0和4周各免疫1次,活病毒疫苗inl 50μl[含5×10~5蚀斑形成单位(pfu)],只免疫1次.最后一次免疫后4周用RSV10~6pfu inl攻击,取攻击前的血清检测抗体,攻击后5天的鼻洗液(NW)和支气管肺泡灌洗液(BAL)滴定病毒效价和抗体.     

甲型流感减毒活疫苗感染儿童的分泌性和全身性免疫应答

作者用 ELISA 检测 A/Alaska/77(H3N2)或 A/Hong Kong/77(H1N1)冷适应重组株病毒感染的儿童血清和鼻洗液中的抗甲型流感病毒纯化血凝素(HA)的同型特异性抗体,结果表明,接种疫苗前儿童的血清和鼻洗液中均未测到 HA 抗体。17名儿童接种后全部有血清 IgG HA 抗体应答,16人有 IgM抗体应答。血清 IgG 抗体在4～6周达高峰。而 IgM 抗体在2周时达高峰,4～7周下降。     

含纯化的重组H3血凝素的甲型流感疫苗能诱导健康成人产生保护性免疫应答

本文对含甲型流感A/北京/32/92(H3N2)病毒纯化的重组血凝素(rHAo)疫苗的安全性、免疫原性和保护效力进行了评估。作者将127名18～45岁的健康志愿者随机分成5组,分别肌肉接种15μgrHAo疫苗、15μg含铝的rHAo疫苗、90μgrHAo疫苗、市售三价流感灭活疫苗或生理盐水安慰剂,接种量为o.5ml。分别于当年接种时、接种后3周及次年流感流行期结束2周后采血,检测抗甲型流感(H3N2)病毒血凝抑制(HAI)抗体、血凝素(HA)特异性IgG抗体及中和抗体。所有受试者在接种后6天内每天观察局部和全身副反应,若在冬季流感流行季节出现流感样症状,则应进行鼻咽拭子病毒培养。     

天然和重组霍乱毒素B亚单位作为鼻内接种刺激因子的比较

霍乱毒素(CT)与抗原同时口服或鼻内接种时可增强抗原特异性粘膜免疫应答。因此,CT及其B亚单位(CTB)作为粘膜疫苗的潜在佐剂具有重要意义。CT全毒素的毒性限制了它的使用。因此,CTB作为粘膜疫苗的成分显得更有前景。作者比较了鼻内接种卵白蛋白(OVA)与天然CTB或重组CTB(rCTB)的混合物或共价结合物的效果。     

免疫活性肽FR48217对流感灭活疫苗免疫接种应答的增强作用

细菌细胞壁中的大分子肽聚糖是最有效的免疫刺激剂.FK156是从肽聚糖中分离出来的,它的衍生FR48217(FR)也显示出免疫刺激作用.作者用流感灭活疫苗与/不与FR合用接种小鼠,并在小鼠接种疫苗后28天用流感病毒A/PR/8/34进行攻击,通过检测血清和肺泡灌洗液中的流感病毒特异性IgA和IgG抗体滴度及肺泡灌洗液中的干扰素(IFN)活性,来研究FR增强免疫应答的机理.     

人对流感活疫苗和灭活疫苗的抗体应答和细胞毒性T淋巴细胞应答

本文分析了36名志愿者接种流感减毒活疫苗、全病毒灭活疫苗及表面抗原疫苗后的抗体应答及HLA-限制性病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答。血凝素(HA)抗体的测定采用空斑中和(PN)试验、单向辐射状溶血(SRH)试验及HI试验3种不同方法;     

脂质体的粘膜免疫佐剂活性

本文报告了小鼠鼻腔接种流感亚单位疫苗时脂质体的免疫佐剂活性.作者将流感亚单位疫苗掺入脂质体,采用鼻腔单剂接种或两剂接种(间隔4天)两种方案免疫Balb/c 小鼠.接种后,采集血清、肺及呼吸道粘膜洗液样品,用ELISA方法检测血清抗原持异性抗体(IgG和IgM)及粘膜分泌性IgA     

超声粉碎抗原免疫预防鼠幽门螺杆菌感染的研究

目的研究幽门螺杆菌超声粉碎抗原与霍乱毒素B亚单位组成的口服疫苗预防HP感染的作用,探讨其保护性免疫应答机制。方法用HP超声粉碎抗原2mg加CTB10μg作为免疫预防组,另设单纯HP超声粉碎抗原组、单纯CTB组和PBS组为对照组。免疫4周后以活菌攻击,观察各组小鼠的免疫保护率。攻击前后测定血清中IgA、IgG1和IgG2a抗体的变化,小鼠胃黏膜分泌性IgA抗体变化情况。结果免疫预防组小鼠免疫保护率为73.33%,而对照组全部感染HP(P<0.001);攻击前免疫预防组小鼠IgA、IgG1和IgG2a抗体均轻度升高,攻击后IgA、IgG1和IgG2a抗体进一步升高,以IgG2a抗体增高更为明显,IgG1/IgG2a比值从0.67下降至0.59。结论HP超声粉碎抗原加CTB可预防HP感染,并诱导出以Th1反应为主的保护性免疫应答。     

用呼吸道合胞病毒亚单位疫苗粘膜免疫接种小鼠

作者评价了用纯化的呼吸道合胞病毒（RSV）融合(F）蛋白和霍乱毒素（CT）佐剂疫苗粘膜免疫接种小鼠的保护效力。 取4周龄小鼠进行实验。用于鼻内接种的10μl疫苗中含CT2.5μg、F蛋白3μg;肌肉接种的0.1ml明矾疫苗中含F蛋白3μg,用PBS作安慰剂。活病毒疫苗为2.5μl中含2×10~6空斑形成单位（PFU）病毒。在0和4周各免疫1次,8周时用RSV Long株5×10~6PFU攻击。病毒攻击后4天杀死小鼠,取血清,用酶免疫试验测定抗F蛋白和CT的IgG抗体,并作微量中和试验。无菌取鼻洗液,一部分立刻用HEp-2细胞滴定病毒滴度,一部分测定IgA。 动物共分9组,每组6只。实验结果表明,鼻内接种活RSV组血清中有高滴度抗F特异IgG具有强的中和力,鼻洗液中有IgA,病毒攻击后,所有小鼠均未检出病毒。鼻内和肌肉同时接种PBS组,无抗体产生,不能阻止病毒复制,鼻内病毒滴度为log_210.1±0.2PFU。鼻内或肌肉接种F蛋白组,鼻洗液中均无IgA,不能阻止病毒复制,但后者有血清抗体。鼻内和肌肉同时接种F蛋白组亦有高滴度血清抗体但无鼻洗液IgA,病毒复制力比PBS组低。鼻内单独接种CT组,虽无抗F抗体,但能轻度抑制病毒复制,鼻洗液中病毒滴度为log_26.8±2.2 PFU,每只小鼠皆查到病毒说明与免疫接种无关。鼻内接种F+CT组,血清中有高滴度F和CT特异性IgG并     

口服连接于霍乱毒素A2/B亚单位的细菌蛋白抗原后的血清与唾液抗体应答持久性

作者通过采用将编码粘膜免疫原的基因融合到霍乱毒素(CT)A2亚单位基因(A2亚单位与一种有效免疫增强因子CTB亚单位相连)的方法开发了一种适合口服免疫的方案.用于评估的基于非毒性CTA2/B构建体的口服免疫原来自于变异链球菌AgⅠ/Ⅱ粘附素的唾液结合区(SBR).SBR与CTA2/B相连构成SBR-CT~(△Al).口服接种证实这种抗原有免疫原性,可诱生高水平的抗AgⅠ/Ⅱ分泌性IgA(S-IgA)及血清IgG抗体.作者对小鼠口服SBR-CT~(△Al)抗原后产生的抗AgⅠ/Ⅱ粘附素抗体应答进行了评估.第1组5只小鼠,口服3剂100μgSBR-CT~△Al及μg完整CT(作为佐剂);第2组3只小鼠,仅口服3剂SBR-CT~△Al;第3组6只小鼠,口服缓冲液作为对照.于末次免疫后11个月收集唾液和血清标本,并用100μgSBR-CT~(△Al)胃内加强接种所有小鼠,同时给予第1组小鼠及半数对照组小鼠CT佐剂5μg.于加强免疫后7天收集血清和唾液标本,用ELISA测定抗体应答.     

用加入脂质体的病毒亚单位疫苗肺部免疫雌鼠后能诱导泌尿生殖道产生分泌型IgA应答

作者将流感病毒血凝素(HA)亚单位疫苗〔由甲型流感病毒NIB26(H3N2)制备〕与脂质体(蛋黄卵磷脂:胆固醇:三十二烷磷酸盐=4:5:1)混合,经下呼吸道免疫雌性小鼠,能诱导泌尿生殖道产生分泌型IgA抗体。 实验分4组进行。每组5只8～10周龄的雌性Balb/c小鼠。第1组于麻醉状态下鼻腔滴注50μl脂质体疫苗(全呼吸道免疫);第2组于未麻醉状态下鼻腔滴入20μl脂质体疫苗(上呼吸道免疫);第3组于麻醉状态下作气管切口,直接将50μl脂质体疫苗注入肺中;第4组肌肉注射或口服50μl疫苗作为对照组。肌肉或鼻腔接种的HA抗原均为5μg,脂质体剂量为1mg。免疫后4周,收集支气管洗液。连续三天以PBS冲洗阴道,收集洗液,合并每只小鼠的冲洗物。最后一次冲洗后,处死小鼠采血。用ELISA检测血清中抗HA特异性     

甲型流感减毒或灭活疫苗免疫儿童后长期全身性和分泌性抗体应答的比较

作者用两种方法筛选血清甲型流感H3N2和H1N1病毒抗体均为阴性的儿童,分为3组,分别鼻内接种减毒活疫苗H3N2A/华盛顿/897/80和H1N1A/加利福尼亚/10/78及肌肉接种全病毒灭活疫苗H3N2A/曼谷,?1/79.3种疫苗均接种1剂.于接种前及接     

在瑞典志愿者中评价口服霍乱B亚单位/全细胞菌苗的不同免疫程序

作者报道在非霍乱流行区瑞典志愿者中进行口服霍乱B亚单位/全细胞(B-WC)菌苗的研究。该菌苗每剂含1.0mg纯化霍乱毒素B亚单位和1×10~(11)个死菌(含有稻叶、小川血清型及古典和E1Tor生物型霍乱弧菌株)。抗霍乱毒素的IgA和IgG抗体应答用ELISA法测定,抗菌抗体用微量杀弧菌法测定,抗毒素滴度提高2倍以上或杀弧菌抗体滴度提高4倍以上判为血清阳转。 第一项研究是比较口服B-WC菌苗2剂与3剂后的抗体应答。口服2剂及3剂后分别有97％和100％的志愿者IgA抗毒素滴度提高2倍以上,平均滴度分别增加20倍和     

儿童每年鼻内接种三价冷适应流感活疫苗对抗体应答的影响

三价冷适应流感活疫苗 ( CAIV- T)可能列为每年接种的疫苗。有关对重复接种CAIV- T免疫应答的报道较少 ,为了确定反复接种 CAIV- T疫苗的免疫应答 ,并与接种第 1针疫苗后的抗体应答进行比较。作者采用多中心、前瞻性随机、双盲对照方法 ,对2 0 3名健康儿童中 1 36名儿童 ,连续 4年鼻内接种 CAIV- T,然后在第 1、2、4年采血。第4年对以前未免疫过的 1 56名同龄儿童 ,免疫 1针 CAIV- T。用血凝抑制法检测 3种流感病毒株抗体。　　结果显示 :接种后 1年 99%的人产生甲型流感 ( H3N2 )病毒抗体 ,98%产生乙型流感病毒抗体 ,75%产生甲…     

大肠杆菌LTB加痕量LT用作鼻腔接种流感疫苗的佐剂

本文讨论了大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)加痕量全毒素(LT)是否可作为鼻腔接种流感疫苗的有效佐剂.Balb/c小鼠鼻腔接种1.5μg流感血凝素(HA)灭活疫苗(以流感病毒明PR8株制备),分不加佐剂组、加2μg LTB组、加痕量LT组和同时加2μg LTB及痕量LT组(2～20ng),免疫后用ELISA方法检测小鼠的IgA和IgG抗体.结果发现,前三组诱导了临界水平的抗-HA IgG抗体应答,而最后一组诱导了较高水平的抗-HA IgG抗体应答.     

对婴儿接种冷重组流感疫苗的评价

本研究旨在评价冷重组甲型流感/朝鲜(CR-59,H3N2)疫苗对婴儿在安全性和抗原性,并确定抗相应的甲型流感病毒的母体抗体是否抑制疫苗的感染性,同时还测定了疫苗病毒鼻内接种引起50%婴儿感染所需的剂量.给24名5～13月龄的婴儿鼻内接种甲