金黄色葡萄球菌产肠毒素研究

目的了解食品从业人员中分离的金黄色葡萄球菌产生肠毒素的情况,为由此引起的食源性疾病防治提供科学依据。方法采集食品加工从业人员手部拭子进行金黄色葡萄球菌检测,对分离124株菌株采用ELISA方法进行肠毒素检测。结果 124株金黄色葡萄球菌中100株肠毒素检测为阳性,阳性率为80.64%。结论食品从业人员健康需要加强监管,防止食物在加工制作过程中被金黄色葡萄球菌的污染,以预防食物中毒的发生。     

PCR技术检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素B基因

目的：金黄色葡萄球菌B型肠毒素是污染食品引起食物中毒的主要原因之一，针对进出口食品卫生监测的需要，研究一种简便、快速、准确的实验方法。方法：利用聚合酶链反应技术(PCR)采用特异的模板探针引物进行杂交，最后通过电泳技术与阳性对照进行比对，来判断阴阳性结果。结果：本方法检出率高，每克样品中有有4个金黄色葡萄球菌即可检出，24h即可报告结果。结论：PCR方法检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素B基因快速、准确，检测周期短，既可提高检出率，又可节省检测时间。     

一起产A型肠毒素金黄色葡萄球菌引起食物中毒的分析

2005年4月，宁波市某校学生在学校小卖部就餐，发生一起食物中毒，4名学生向卫生监督部门投诉，经流行病学调查、临床症状和实验室检查，证实为一起产A型肠毒素金黄色葡萄球菌引起的食物中毒，现将结果报告如下。     

食物中毒和食品中金黄色葡萄球菌肠毒素基因分型研究

目的对食物中毒及食品样品中金黄色葡萄球菌进行肠毒素基因分型,比较两种分离株肠毒素基因分布及分型差异。方法用PCR法测定金黄色葡萄球菌肠毒素基因(SEA-SEJ)。结果 129株食品分离株中75株检出肠毒素基因(58.14%),78株食物中毒分离株中73株检出肠毒素基因(93.59%),食物中毒分离株肠毒素基因检出率明显高于食品分离株(P0.01),食品分离株中主要流行肠毒素基因为SEI(21.71%),食物中毒分离株中主要流行肠毒素基因为SEA(41.03%)。结论金黄色葡萄球菌食物中毒和食品分离株肠毒素基因的分型和分布上存在差异。     

从婴儿奶粉中快速检测产肠毒素金黄色葡萄球菌的研究

[目的]建立快速鉴定金黄色葡萄球菌和金黄色葡萄球菌肠毒素检测方法。[方法]采用VITEK32微生物分析仪和miniVIDAS全自动酶联免疫分析仪联合诊断系统检测从婴儿奶粉中分离出的1株菌。[结果]从奶粉中分离的菌鉴定为金黄色葡萄球菌,产肠毒素。[结论]联合系统能够快速鉴定金黄色葡萄球菌和检测金黄色葡萄球菌肠毒素的产生情况。     

食品中金黄色葡萄球菌的肠毒素检测及耐药性

目的了解食品中金黄色葡萄球菌对药物的敏感性及产肠毒素的情况,对食物中毒检测提供理论依据和指导临床用药。方法药物敏感性试验采用1997年美国NCCLS药敏试验(纸片法)方法进行,用反向被动乳胶凝集试验检测肠毒素。结果金黄色葡萄球菌除对万古霉素、替考拉宁敏感外,对其余10种存在不同程度的耐药;金黄色葡萄球菌产肠毒素总检出率为38%,其中A型为25%,C型为12.5%,其次为D型为5%,E型为2.5%,B型未检出。结论检测食物中毒及食品样品中的金黄色葡萄球菌时,应考虑肠毒素的检测;临床治疗金黄色葡萄球菌感染,应建立在体外药敏试验的基础上,有针对性地选择抗菌药物。     

速冻食品中金黄色葡萄球菌肠毒素的调查研究

本实验采用国标方法对5个不同品种的速冻食品共115件进行了金黄色葡萄球菌定量分离检测，并对阳性菌株应用仪器法进行肠毒素测定，结果金葡菌总阳性检出率为21．74％，产毒率100％。并对不同污染情况进行分析，提示应加强对食品中金葡菌肠毒素检测。     

金黄色葡萄球菌食品和病人分离株肠毒素基因和耐药性比较

目的：对金黄色葡萄球菌食品（不含生牛奶）分离株和病人分离株的肠毒素基因进行分型和耐药性检测,比较两种分离菌株的肠毒素基因分布和耐药性差异。方法：用国标方法分离鉴定金黄色葡萄球菌,VITEK32生化验证,PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素基因（肠毒素SEA-SEJ基因）,VITEK32测定分离菌株抗生素的耐药性。结果：从病人分离的80株金黄色葡萄球菌检测到9种基因。肠毒素基因携带率为85.0%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占76.3%,含传统肠毒素基因（SEA-SEE）的菌株占43.8%,有新发现肠毒素基因（SEG-SEJ）的菌株占71.3%。从食品中分离的51株金黄色葡萄球菌检测到7种肠毒素基因。肠毒素基因携带率为68.7%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占21.6%。有SEA基因的占27.5%,含其它传统的毒素基因类型（SEB-SEE）基因的菌株占23.5%,携带新发现的毒素基因SEG、SEH、SEI的菌株只占9.8%。金黄色葡萄球菌病人分离株与食品分离株的耐药谱和耐药率有较大差异。结论：金黄色葡萄球菌食品分离株和病人分离株的肠毒素基因分布不同,其耐药性有明显区别。     

金黄色葡萄球菌肠毒素实验分析

金黄色葡萄球菌在自然界中广泛存在,空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都能分离到。健康人的咽喉、鼻腔、皮肤、头发等也常带有产肠毒素的金黄色葡萄球菌菌株,因此,食品受其污染的机会很多。金黄色葡萄球菌肠毒素引发的食物中毒问题是个世界性卫生问题,在美国由其引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33％,加拿大则更多,占45％。我国每年发生的此类中毒事件全国各地都有报道。     

金黄色葡萄球菌肠毒素D产毒基因的序列分析

目的：构建金黄色葡萄球菌肠素D（SED）毒力蛋白基因重组表达质粒。方法 根据SED已知序列，设计合成一对引物，用PCR方法从金黄色葡萄球毒力质粒上扩增出基因片段，克隆到原核表达质粒PET32中，转化大肠埃希菌JM109感受态细胞，经酶切和PCR鉴定，然后进行测序。结果 PCR扩增产物大小为317bp；重组质粒经双酶切和PCR鉴定表明已正确重组，测序结果与已知序列基本吻合，结论 国内首次克隆了金黄色葡萄球菌肠毒素D产毒基因，为下一步研究发病机制奠定基础。     

两种金黄色葡萄球菌产肠毒素差异的Meta分析

[目的]分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA ）和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（ methieillin sensitive Staphylococcus aureus, MSSA ）之间产生肠毒素的差异,为评价MRSA、MSSA与金黄色葡萄球菌食物中毒之间的关系提供参考依据。[方法]采用Meta分析方法对国内外1990-2008年发表的有关MRSA和MSSA产毒株率比较的文献进行汇总、归纳和统计分析。[结果]共检索到7篇文献,合并总RR值为2．18,95％可信区间为1．58～2．99。MRSA中的产毒株率是MSSA的2．18倍。[结论]MRSA产生肠毒素的概率远大于MSSA。     

120株金黄色葡萄球菌产肠毒素的分析与研究

目的通过对日常食品中分离的金黄色葡萄球菌产肠毒素情况的研究,为今后金黄色葡萄球菌食品中毒的预防和控制提供依据。方法采用GB 4789.10—2010附录B葡萄球菌肠毒素检验方法对120株金黄色葡萄球菌进行检测。结果 120株金黄色葡萄球菌检出产肠毒素55株,阳性率为45.8%,产生2种或2种以上肠毒素的菌株有38株,占69.1%,产肠毒素的菌株中产肠毒素SEA的有41株,占74.5%。动物源性食品、豆制品,冷冻饮品、糕点和茶制品分离株的肠毒素阳性率分别为62.5%、5.9%、22.2%、12.5%和16.7%,不同来源分离株产肠毒素阳性率差异有统计学意义(χ~2=28.3,P0.05)。结论动物源性食品产肠毒素是此次5类食品中最高的,需要特别注意并预防该类食品因肠毒素引起的食物中毒,同时本研究对临床给药治疗也具有重要的指导意义。     

金黄色葡萄球菌及其肠毒素研究进展

本文对金黄色葡萄球菌及其肠毒素的检测方法及其发展趋势进行了综述。金黄色葡萄球菌在分型方面一般不作血清学分型 ,而噬菌体分型 ,辨别力强 ,重复性好 ,在实验室里得到广泛的应用 ,但是分子生物学分型技术性强、需要特殊设备 ,所以不能普及。金黄色葡萄球菌快速检测方法的应用将大大缩短检测时间 ,而金黄色葡萄球菌肠毒素检测的应用将有利于食物中毒的快速、灵敏的诊断。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的出现 ,萌生了我们进行金黄色葡萄球菌疫苗的研究     

烧伤脓毒症患者金黄色葡萄球菌B型肠毒素检测

目的 建立一种敏感、快速的酶联免疫测定方法,用于定量检测烧伤脓毒症患者金黄色葡萄球菌B型肠毒素的含量.方法 采用生物索-链霉素系统放大的双抗体夹心酶联免疫吸附方法,以兔抗葡萄球菌肠毒素B(SEB)多克隆抗体做为包被抗体,以生物素标记的抗SEB单克隆抗体作为第2抗体进行测定.结果 在0.078～10.000μg/L的浓度范围内,SEB标准品浓度与吸光度值线性关系良好,相关系数为r=0.9876;重度烧伤患者血清中SEB水平明显高于对照组及轻度烧伤组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 双抗体夹心ELISA法检测SEB,灵敏性达0.078 μg/L,可用于临床烧伤患者血清中的SEB监测.     

PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素A、E基因

目的 建立一种用PCR快速敏感地检测金黄色葡萄球菌肠毒素A、E的方法.方法 根据genebank报道的编码金黄色葡萄球菌肠毒素A、E的基因序列,设计一对特异性引物来扩增靶基因片段,长度为327 bp,通过对金黄色葡萄球菌产肠毒素A、E菌株和14株非金黄色葡萄球菌产肠毒素A、E菌株进行检测,评价该方法的特异性;对金黄色葡萄球菌产肠毒素E菌株做系列10倍稀释,进行PCR检测,对其敏感性进行分析;PCR扩增产物进行电泳和测序鉴定.结果 金黄色葡萄球菌肠毒素A、E菌株出现PCR扩增反应,14株非金黄色葡萄球菌产肠毒素A、E菌株没有出现PCR扩增反应,通过测序分析证实了PCR产物的特异性;PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素E基因的检测下限为120 cfu/ml.结论 建立了一个快速、特异、敏感的金黄色葡萄球菌肠毒素A、E基因的PCR检测方法,可用于金黄色葡萄球菌肠毒素的临床诊断和食品安全监测.     

金黄色葡萄球菌肠毒素A、B、C、E快速分型检测

目的建立能在同一PCR反应条件下同时检测SEA、SEB、SEC、SEE的PCR快速检测方法,以用于金黄色葡萄球菌引起的食源性疾病的快速诊断。方法根据Gen Bank公布的SEA、SEB、SEC、SEE基因的保守序列,利用Vector NTI suite 8软件设计SEA/SEE、SEB/SEC通用PCR引物来特异性扩增相应的基因片段,通过优化反应条件,建立在同一PCR反应条件下同时检测SEs各型的PCR检测方法,同时进行常见食源性致病菌的特异性分析及灵敏度分析,扩增产物进行测序鉴定。结果金黄色葡萄球菌肠毒素SEA、SEE引物扩增后电泳片段位于目的片段330 bp处,SEB、SEC片段位于目的片段258 bp处,SEA、SEB、SEC和SEE基因PCR产物的电泳片段位于目的片段的579、602、601和125 bp处,结果均显示引物扩增和PCR扩增产物均有预期大小的目的 DNA片段。本方法中的基因引物的PCR扩增金黄色葡萄球菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、痢疾志贺菌、大肠杆菌O157:H 7、副溶血性弧菌、奇异变形杆菌、福氏志贺菌、肠毒素型大肠埃希菌、肠侵袭型大肠埃希菌、肠致病型大肠埃希菌、肠出血型大肠埃希菌均未出现预期大小的目的条带。本方法敏感性达80~100 CFU/m L。结论本检测方法所建立的PCR可用于金黄色葡萄球菌肠毒素A、B、C、E型别食物中毒的快速诊断和分型检测。     

金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分型和分布

目的：建立金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测方法。初步研究生牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分布状况。方法：应用PCR扩增经分离鉴定的金黄色葡萄球菌肠毒素基因SEA-SEJ，电泳检测扩增结果。结果：建立了金黄色葡萄球菌肠毒素基因PCR检测方法。从生牛奶中分离的29株金黄色葡萄球菌检测到SEA-SED和SEG-SEJ基因，没有检测到SEE基因。毒素基因携带率为65．5％，同时携带2种及以上毒素基因的菌株占37．9％。有SEA基因的占51．7％。含其它传统的毒素基因类型SEB、SEC、SED和SEE基因的菌株只占17．2％，携带新发现的毒素基因SEG、SEH、SEI和SEJ的菌株占41．4％。结论：建立的PCR检测金黄色葡萄球菌的肠毒素基因的方法可用于金黄色葡萄球菌肠毒素基因分型和分布的研究。研究表明，生牛奶中分离的金黄色葡萄球菌带毒率高，而且携带新发现的肠毒素基因的较多。     

金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因及耐药性研究

目的了解2015年2月-2017年9月上海市金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因分布规律及耐药情况。方法采用酶联免疫法(ELISA)检测金黄色葡萄球菌的5种毒力基因sea~see,同时用CLSI推荐的微量肉汤稀释法进行药敏试验,定量测定最低抑菌浓度(MIC)。结果 106株金黄色葡萄球菌食品分离株中有68株检出肠毒素基因,肠毒素基因携带率为64.2%,同时携带2种毒素基因的菌株占7.4%(5/68)。微量肉汤稀释法检出91株金黄色葡萄球菌耐药株,76.9%(70/91)为2重以上的多重耐药菌,呈现21种耐药表型谱,耐药性最强的菌株对6种抗生素产生耐药性。结论上海地区金黄色葡萄球菌食品分离株产肠毒素能力较强且多重耐药性严重,应加强食源性金黄色葡萄球菌的监测,为临床合理使用抗生素和开展食品安全风险评估提供科学依据。     

食品中金黄色葡萄球菌污染状况及其肠毒素基因分析

目的了解南平市食品中金黄色葡萄球菌污染状况及该菌携带肠毒素的基因分型,为食源性疾病的防控提供依据。方法共采集8大类食物样品共454份,依据GB 4789.10-2010对样品进行金黄色葡萄球菌培养、分离和鉴定,用Real-time PCR法检测菌株携带肠毒素SEA-SEE情况。结果454份样品中检出金黄色葡萄球菌38株(8.4%),其中肉与肉制品和速冻米面制品的检出率13.3%,其次是餐饮食品(9.3%)、自制饮料和食用冰(8.8%)、冷冻饮品(3.3%),婴幼儿食品、乳及乳制品和膨化食品均未检出。38株金黄色葡萄球菌中,产肠毒素阳性8株(21.1%),主要携带SEA、SEB和SED。结论南平市部分食品受一定程度金黄色葡萄球菌的污染,肉与肉制品和速冻米面制品的污染情况较严重,控制生肉制品类的污染,特别应防止其交叉污染,可有效控制该菌引起食物中毒的发生,但更应重视的直接入口食品的污染。