Wnt和Notch信号通路在肿瘤干细胞自我更新中的作用

肿瘤干细胞是一类能够导致肿瘤发生的具有自我更新能力的细胞，它与干细胞具有很多相似性，其中最重要的一点是自我更新能力。它们具有相似的自我更新调节通路，如：Wnt，Notch和Shh(Sonic hedgehog)。Wnt和Notch信号通路通过其受体和配体的相互作用在自我更新的增殖和分化中都起着重要的作用，两者均能促进干细胞增殖而抑制其分化，但各自侧重不同。此外，Wnt和Notch信号通路之间相互作用、协调共同完成干细胞的自我更新。对肿瘤干细胞的Wnt和Notch信号通路研究将为未来肿瘤的靶向治疗提供新的方向。     

骨髓间充质干细胞治疗慢性阻塞性肺疾病中的Wnt/β-catenin信号通路

背景:骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)治疗呼吸系统疾病具有广泛的应用前景,近年来研究显示Wnt/β-catenin信号通路在调控BMSCs定向分化及促进旁分泌方面起重要作用。目的:探讨激活Wnt/β-catenin信号通路对BMSCs移植治疗慢性阻塞性肺疾病的影响。方法:采用全骨髓贴壁法提取大鼠BMSCs,用Wnt3a慢病毒转染大鼠BMSCs。采用气管内注入脂多糖联合烟熏法构建慢性阻塞性肺疾病大鼠模型,造模完成后经尾静脉植入BMSCs、GFP-BMSCs、Wnt3a-BMSCs,模型组和正常对照组经尾静脉注入PBS,分别在第7,14,28天处死各组大鼠,苏木精-伊红染色观察肺组织病理改变,ELISA检测动脉血中白细胞介素10、肿瘤坏死因子α水平。结果与结论:(1)苏木精-伊红染色病理结果显示:3个BMSCs移植组较模型组病理改变明显改善,其中Wnt3a-BMSCs组改善相对明显;(2)在相同时间点,3个BMSCs移植组动脉血中肿瘤坏死因子α水平低于模型组(均P <0.05),其中BMSCs组、GF...     

5-FU通过靶向Wnt/β-catenin信号通路对结直肠癌干细胞活性的影响

目的 基于Wnt/β-catenin信号通路探讨5-氟尿嘧啶（5-FU）对结直肠癌干细胞（CRC-CSC）活性的影响。方法 流式细胞术分选CD133标记的CRC-CSC,以不同浓度5-FU(6.25、12.50、25.00μmol/L)处理细胞,对照组以等体积培养液处理。药物作用48 h后,CCK-8法检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞凋亡,平板克隆实验和球形成实验检测细胞克隆能力及悬浮球形成能力,蛋白免疫印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路表达。结果 与对照组比较,高剂量5-FU处理后CRC-CSC细胞增殖能力（24 h、48 h两组分别为0.31±0.03vs. 0.53±0.05;0.37±0.03 vs. 0.61±0.05）和迁移能力（24 h、48 h两组分别为9.63±0.72 vs. 38.69±0.88;16.21±1.17 vs.58.69±1.32）显著增加（P<0.05）,细胞凋亡率（24 h、48 h两组分别为46.91±0.94 vs. 18.46±0.88;55.22±1.24 vs. 28.42±1.18）显著降低（P&...     

Wnt/β-catenin信号通路在牙损伤修复中的作用

目的 通过构建牙本质-牙髓损伤小鼠模型,探讨Wnt/β-catenin信号在其修复中的作用。方法 选择雌性昆明小鼠40只,鼠龄6～8周,体质量18～22 g。将其随机分为Control组、Model组、Li Cl组和DKK1组,每组10只。Control组常规饲养至实验结束,Model组、LiCl组和DKK1组均建立牙本质-牙髓损伤模型并通过牙周膜分别注射0.9%氯化钠溶液（生理盐水）、LiCl（激活Wnt/β-catenin信号通路）和DKK1（抑制Wnt/β-catenin信号通路）干预。损伤后7 d处死小鼠,通过苏木精-伊红（HE）染色,从形态学上观察牙损伤后的情况;Western blot和实时定量聚合酶链式反应（PCR）分别检测Wnt10a、胞内-β连锁蛋白（β-catenin）、支架蛋白Axin2及牙本质涎磷蛋白（DSPP）的mRNA和蛋白水平改变。结果实验成功构建了牙本质-牙髓损伤小鼠模型。使用LiCl和DKK1进行干预,HE染色结果显示LiCl组损伤部位得到良好的修复,Model组的牙本质、牙髓损伤修复不明显,DKK1组的损伤部位则几乎未修复。Western blot和...     

人血管周围干细胞成骨分化及Wnt/β-catenin信号通路的调控

背景：血管周围干细胞来源于成体脂肪组织,获取容易且干细胞比较均质,具有较强的增殖和多向分化潜能。目的：通过体外、体内实验探讨人血管周围干细胞的成骨分化能力,以及Wnt/β-catenin信号通路的调控作用。方法：抽脂来源的人脂肪组织,经荧光激活细胞分选法提取血管周围干细胞,第1代血管周围干细胞进行成骨诱导分化,分为空白对照组、成骨诱导组及Wnt信号通路抑制组,成骨诱导第5天行碱性磷酸酶染色,第10天行茜素红染色,第7天通过Western blot检测Runt相关转录因子2蛋白表达。制备血管周围干细胞复合纳米羟基磷灰石/聚乳酸-羟基乙酸共聚物支架材料,通过无胸腺小鼠胫骨单皮质缺损模型,研究血管周围干细胞在体内的骨修复效果。结果与结论：(1)每100 m L脂肪中含有基质血管成分细胞为(1.82±0.32)×10⁷,活细胞占(82.72±5.37)%,经荧光激活细胞分选法分选,血管外膜细胞(CD34⁺、CD45^-、CD146^-)比例为(17.66±1.05)%、血管外周细胞(CD146⁺     

Wnt/β-catenin基因修饰神经干细胞移植治疗阿尔茨海默病的探索

老年性痴呆,又称阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD),是发生在老年期及老年前期的一种慢性进行性发展的致死性中枢神经系统神经退行性疾病.随着寿命的延长,AD的患病年龄越来越年轻化,发病率及病死率越来越高.本文结合国内外较新的研究成果,提出了Wnt/β-catenin修饰神经干细胞移植治疗AD的新理念和策略,最终目标是为了改善老年人的身心健康.     

紫杉醇联合顺铂通过Wnt/β-catenin信号通路抑制鼻咽癌肿瘤干细胞增殖并促进其凋亡北大核心

背景:肿瘤干细胞具有自我更新和分化成新肿瘤的能力,会导致肿瘤放化疗不敏感,是肿瘤发生和复发的根源。目的:探索紫杉醇联合顺铂对鼻咽癌干细胞增殖和凋亡的影响并探索其作用的信号通路。方法:免疫磁珠的方法分离培养鼻咽癌干细胞,紫杉醇和顺铂处理细胞,Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-3、活化的caspase-3、Bcl-2和β-catenin及下游原癌基因c-myc的表达,用RNA干扰技术敲降β-catenin表达或者使用抑制剂XAV939抑制Wnt/β-catenin通路活性,MTT法检测细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果与结论:(1)紫杉醇或顺铂均会抑制鼻咽癌干细胞的增殖,促进其凋亡,并且凋亡标志蛋白活化caspase-3表达上升,凋亡抑制蛋白Bcl-2表达下降,联合用药具有协同作用,(2)紫杉醇或顺铂均会抑制Wnt/β-catenin通路的活性及下游靶基因c-myc的表达,抑制Wnt/β-catenin通路活性抑制鼻咽癌干细胞的增殖,促进其凋亡。(3)结果表明,紫杉醇和顺铂可能是通过Wnt/β-catenin信号通路调控鼻咽癌干细胞的增殖和凋亡。     

调控骨髓间充质干细胞成骨分化的Wnt/β-catenin信号通路及相关因素

背景:骨髓间充质干细胞诱导成骨而抑制成脂分化是骨质疏松症防治的关键,也是骨组织修复工程种子细胞的来源,Wnt信号通路对骨形成起着重要作用.目的:综述Wnt/β-catenin信号通路调控骨髓间充质干细胞成骨分化的相关因素及分子机制.方法:应用计算机检索CNKI、PubMed及万方医学数据库建库至2020年2月发表的相关...     

Wnt/β-catenin信号通路在实验性大鼠肝癌形成过程中的作用

目的:探讨Wnt/β-catenin信号转导通路与肿瘤发生的关系,为肝癌的防治提供新的思路。方法:选取Wnt/β-catenin信号转导通路中上下游关键因子wnt1、β-catenin、APC、cyclinD1以及c-myc等,应用RT-PCR法观察它们在正常肝脏,不典型增生肝脏和肝癌组织中的转录水平。用免疫组化染色法研究β-catenin、APC和cyclinD1等3个因子有无表达。结果:在正常肝脏中,用RT-PCR未检测到wnt1、cyc-linD1以及c-myc的mRNA转录,免疫组化染色也只观察到β-catenin在细胞膜处有比较弱的表达。诱癌14周后,在发生不典型增生的肝组织中,检测到β-catenin、APC和cyclinD13个基因的转录。通过免疫组化染色也观察到β-catenin蛋白在胞质中的积累,APC和cyclinD1在部分细胞中出现表达。诱癌16周后,在肝癌组织中,除wnt1mRNA外,其他几个因子的mRNA都有转录,免疫组化也印证了上述各个发生转录的因子在蛋白水平都有不同程度的表达。结论:Wnt/β-catenin信号转导通路在大鼠的肝癌形成过程中被激活,其可能是实验性肝癌发生的原因之一。     

乳腺癌不同分子亚型中Wnt/β-catenin信号传导通路的异常表达

目的检测Wnt信号通路的关键组分β-catenin蛋白在管腔A、管腔B、HER-2过表达、基底细胞样及未分类型(基底细胞样及未分类型统称为三阴型)乳腺癌中的表达及细胞内定位,及其与乳腺癌临床病理参数的关系。方法采用免疫组化Eli Vison两步法检测58例乳腺癌中β-catenin蛋白表达及细胞内定位。结果 (1)管腔A、管腔B、HER-2过表达、基底细胞样及未分类型乳腺癌中β-catenin胞质异常表达阳性率分别为21.1%、50%、60%、100%及60%(三阴型84.6%),差异有显著性(P<0.01)。β-catenin高胞质表达与基底细胞样及三阴型乳腺癌相关(P<0.05)。(2)β-catenin胞质异常表达与组织学分级相关(P<0.01),与淋巴结转移、肿瘤大小、患者年龄无关;与E-cadherin膜表达缺失、Ki-67及CK5/6表达呈正相关(P<0.05),与ER及PR表达呈负相关(P<0.01)。结论乳腺癌中Wnt信号通路的异常与组织学分级、Ki-67及CK5/6表达呈正相关,与ER、PR表达呈负相关。基底细胞样及三阴型分子亚型有更高频率的Wnt信号异常。β-catenin有可能成为基底细胞样及三阴型乳腺癌的治疗靶点。     

糖尿病溃疡中Wnt/β-catenin信号通路表达的变化

目的:观察糖尿病(DM)溃疡中Wnt/β-catenin信号通路表达的变化,探讨该信号通路在糖尿病难愈性溃疡中的作用。方法:雌性Wistar大鼠采用高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素液腹腔注射法制备糖尿病模型。分别取正常对照组与DM组制作溃疡模型。观察创面造模后第3天、第7天和第14天对照组及DM组创面愈合情况的变化,并采用HE染色法检测创面组织形态结构的变化,采用ELISA法和RT-PCR法检测创面组织中β-catenin、GSK-3β和Rspo-3蛋白及mRNA的变化。结果:DM组大鼠的创面愈合率明显低于对照组(P0.05),且与对照组相比,其创面组织中含有较少的炎性细胞、纤维母细胞及新生毛细血管。DM组大鼠创面组织中β-catenin和Rspo-3蛋白及mRNA的表达水平均低于对照组,GSK-3β蛋白及mRNA的表达水平均高于对照组(P0.05)。结论:Wnt/β-catenin通路的下调有可能导致了糖尿病溃疡的难愈,而该通路的下调可能源自于Rspo-3蛋白表达的下降。     

Wnt/β-catenin信号通路相关的牙缺失基因遗传学研究进展

牙缺失是口腔临床最常见的先天性颅面发育异常疾病,由遗传因素或(和)环境因素导致。牙齿发育受多条信号通路调控,其相关基因发生变异可导致牙齿发育异常。其中,Wnt/β-catenin信号通路相关基因缺陷是造成先天性牙缺失的重要原因之一。本文就近年来导致牙缺失的Wnt/β-catenin信号通路关键基因的分子遗传学研究进行综...     

Chir99021调控Wnt/β-catenin 信号通路抑制大鼠牙髓干细胞成骨诱导分化的机制

目的 探讨Chir99021对大鼠牙髓干细胞(DPSCs)成骨诱导分化的影响及机制。方法 原代分离大鼠DPSCs,利用荧光免疫法进行验证。设置不同浓度的Chir99021,通过CCK-8检测细胞增殖情况挑选最适浓度。利用茜素红染色验证细胞成骨诱导分化。最后通过Real-time PCR、Western blotting检测成骨诱导分化相关基因与蛋白无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)、无翅型MMTV整合位点家族成员3A(Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)、轴抑制蛋白2抗体(Axin2)、骨钙素(OCN)、牙本质基质蛋白1(DMP1)的mRNA和蛋白表达情况。结果 牙本质涎磷蛋白(DSPP)和干细胞标记物波形蛋白(vimentin)阳性表达,说明大鼠DPSCs分离成功。大鼠DPSCs成骨诱导后钙沉积物显著上升,加入糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的小分子抑制剂Chir99021后钙沉积物明显减少。大鼠DPSCs成骨诱导分化后Wnt1、Wnt3a、β-catenin、Axin2、OCN和DMP1表达明显上升,而加入Chir99021后Wnt1、Wnt3a、β-ca...     

Wnt/β-catenin信号转导通路在子宫间叶性肿瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨子宫间叶性肿瘤组织中Wnt1、β-连环蛋白（β-catenin）、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)及Slug的表达,并分析其临床意义。方法 回顾性分析唐山市妇幼保健院2016年6月至2021年6月接受手术治疗的50例子宫平滑肌瘤、50例富于细胞性平滑肌瘤、30例子宫肉瘤患者的临床资料,分别记为对照组、富于细胞性平滑肌瘤组、子宫肉瘤组。取手术切除存档的石蜡标本采用免疫组化法检测Wnt1、β-catenin、GSK-3β及Slug表达。结果 富于细胞性平滑肌瘤组、子宫肉瘤组Wnt1、β-catenin、GSK-3β、Slug蛋白阳性表达率均高于对照组（P<0.05）,且子宫肉瘤组均高于富于细胞性平滑肌瘤组（P<0.05）,子宫肉瘤组中子宫平滑肌肉瘤瘤体组织均高于子宫内膜间质肉瘤（P<0.05）,子宫肉瘤组未分化和低级别子宫内膜间质肉瘤瘤体组织均高于高级别子宫内膜间质肉瘤（P<0.05）,且未分化均高于低级别患者（P<0.05）。结论 子宫肉瘤和富于细胞性平滑肌瘤瘤体组织Wnt1、β-catenin、GSK-3β、Slug蛋白表达均较子宫平滑肌瘤增...     

肿瘤干细胞的研究进展

目前肿瘤干细胞的研究已经成为研究的热点,很多实验证实它的存在,并从实体瘤中成功地分离出肿瘤干细胞。随着肿瘤干细胞起源研究的不断深入,对肿瘤发生、发展过程的认识提高到了一个新的水平,将对肿瘤的诊断和治疗以及预后判断产生深远影响,为肿瘤患者带来希望。     

中药独活激活Wnt/β-catenin信号通路对骨质疏松大鼠的作用

目的探讨中药独活对去卵巢所致骨质疏松SD大鼠的作用及其可能机制。方法将50只SD大鼠,体重200～250 g,随机分为假手术组、模型组、独活低剂量组(0.9 g/kg)、独活高剂量组(1.8 g/kg)、阳性药组(200 mg/kg依普黄酮),每组10只。利用双侧卵巢切除法制备大鼠骨质疏松模型,手术模型制备成功后,连续灌胃给药60d。测定股骨密度、骨灰重/干重百分比;测定大鼠血清骨钙素(OC)、骨碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、血清钙、无机磷的水平。免疫组化法测定股骨中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(RANKL)蛋白表达;Western blot法检测大鼠骨组织中β-catenin、p-β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达。结果独活高剂量和阳性药均能够增加大鼠股骨密度、骨灰重/干重,降低BGP、ALP及TRAP的水平,并增加血清钙的水平,对无机磷的表达无显著性影响,增加骨组织中OPG蛋白表达水平,降低RANKL蛋白表达水平,增加β-catenin、p-GSK-3β蛋白表达水平,降低p-β-catenin、GSK-3β蛋白表达。结论独活高剂量(1.8 mg/kg)对去卵巢导致的骨质疏松大鼠的治疗作用,与激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨形成相关。     

NM23基因相关信号通路在肿瘤转移中作用机制的研究进展

浸润和转移是恶性肿瘤的重要特征,也给肿瘤的治疗带来困难,是预后不良的重要因素.转移抑制因子23(non-metastasis,NM23)基因是最早发现的抗肿瘤转移基因之一.现在已经发现NM23是一个基因家族,包括NM23-H1、NM23-H2等重要的基因家族成员.研究表明NM23基因表达与实体瘤转移抑制有关,在很多实体瘤中可以作为进展和预后的分子标记.随着对NM23基因调控肿瘤转移的分子机制的研究的进一步开展,已经发现了一些NM23肿瘤转移抑制通路上下游的相关调控分子,为进一步的信号通路研究创造了条件.本文概述了近年来对NM23基因转移抑制通路研究的新近展,提出了以后可能的研究方向和需要解决的关键问题.     

肿瘤干细胞的研究进展

背景：肿瘤干细胞具有高度增殖和分化能力,但又不同于普通干细胞,此类干细胞还具有发展成为肿瘤的特性,因此备受学者们关注。 目的：综述近几年来肿瘤干细胞的特性以及与干细胞和肿瘤的关系及其临床意义。 方法：应用计算机检索2000-01/2010-11 PubMed数据库、中国期刊全文数据库、万方数据库相关肿瘤干细胞的文章,中文检索词为“肿瘤干细胞”,英文检索词为“tumor stem cell”。共检索到文献89篇,最终纳入符合标准的30篇文献。 结果与结论：目前国内肿瘤干细胞还处于基础研究阶段,国外肿瘤干细胞在实验研究方面已经取得了一定的进展,而且也在临床应用研究方面有一定的突破。普遍认为肿瘤组织中存在肿瘤干细胞,肿瘤干细胞对肿瘤的发生发展和肿瘤治疗都有重要的作用,对肿瘤干细胞治疗肿瘤的临床应用前景也非常乐观,但肿瘤干细胞特征以及与成体干细胞关系仍处于初步研究阶段。