犬快速肺静脉起搏心房颤动模型中基质金属蛋白酶在肺静脉肌袖表达的实验研究

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和组织型基质金属蛋白酶抑止因子-1（TIMP-1）在持续性房颤发生和维持中的作用。方法：30只犬随机分为对照组和房颤组，建立犬快速肺静脉起搏持续性心房颤动模型。取组织标本，用RT—PCR和Western印记法分别检测各组MMP-9和TLMP-1mRNA和蛋白的表达情况。结果：与对照组相比，房颤组肺静脉肌袖组织MMP-9mRNA与蛋白质水平均增高（P均〈O．05），TIMP-1mRNA与蛋白质表达水平均降低（P均〈O．05）。结论：MMP-9／TIMP-1平衡失调可能是房颤时肺静脉肌袖细胞外基质重构的因素之一，参与了房颤的发生和维持。     

MEBO对糖尿病溃疡大鼠创面组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2动态表达的影响

目的 探讨分析湿润烧伤膏（MEBO）对糖尿病溃疡大鼠创面组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）及基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）表达水平的影响。方法 从160只健康雄性SD大鼠中随机选取120只制备大鼠糖尿病模型,其余40只正常喂养;最终选取90只造模成功大鼠随机分为模型组、MEBO组与bFGF组,每组30只,与此同时随机选取未予特殊处理的30只大鼠作为空白组,所有大鼠均做全层皮肤缺损创面,空白组与模型组大鼠创面予以凡士林油纱换药处理、MEBO组大鼠创面予以MEBO药纱换药处理、bFGF组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子（rb-bFGF）药纱换药处理,对比观察各组大鼠干预第4、6、12天时创面愈合率以及MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2与胶原蛋白水平变化情况。结果 （1）干预第4、6、12天,模型组大鼠创面愈合率均明显低于其他各组（P均＜0.05）,空白组大鼠创面愈合率均明显高于其他各组（P均＜0.05）,而MEBO组与bFGF组间无明显差异（P均＞0.05）。（2）干预第4、6、12天,模型组大鼠创面组织中MMP-9及MMP-2 mRNA表达水平均明显高于其他各组（P均＜0.05）,TIMP-1及TIMP-2 mRNA表达水平均明显低于其他各组（P均＜0.05）;除干预第6天MEBO组大鼠创面组织中TIMP-1 mRNA表达水平明显高于bFGF组（P＜0.05）外,其余各时间点MEBO组与bFGF组大鼠创面组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2 mRNA表达水平均无明显差异（P均＞0.05）。（3）干预第4、6、12天,模型组大鼠创面组织中胶原蛋白水平明显低于其他各组（P均＜0.05）;除干预第4天MEBO组大鼠创面组织中胶原蛋白水平明显高于bFGF组（P＜0.05）外,其余各时间点MEBO组与bFGF组大鼠创面组织中胶原蛋白水平均无明显差异（P均＞0.05）。结论 MEBO可通过调控糖尿病溃疡大鼠创面组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平改善胶原蛋白过度降解,维持细胞外基质代谢平衡,进而促进创面愈合,调节MMP-9/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2的比例失衡可能是其促进糖尿病溃疡创面愈合的作用靶点。     

阿托伐他汀对心脏成纤维细胞MMP-9/TIMP-1表达的影响

目的：观察阿托伐他汀（atorvastatin）对心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶-9/组织型基质金属蛋白酶抑制因子-1（MMP-9/TIMP-1）表达的影响。方法：体外培养乳鼠心脏成纤维细胞（CF）,做细胞形态观察和心脏成纤维细胞标志性波形蛋白免疫荧光组化检测,明胶酶谱法测定MMP-9的活性,RT-PCR检测MMP-9和TIMP-1mRNA的表达。结果：AngⅡ增加MMP-9的活性及mRNA的表达（P〈0.05）,同时TIMP-1的mRNA表达减少（P〈0.05）,阿托伐他汀在某种程度上可逆转上述变化（P〈0.05）。结论：Aorvastatin通过对MMP-9/TIMP-1表达的影响作为预防和治疗房颤的重要机制之一。     

烫伤后金葡菌脓毒症大鼠Toll样受体2基因表达及其信号机制的研究

采用大鼠20％Ⅲ度烫伤合并金葡菌攻击所致脓毒症模型，观察Toll样受体2（TLR2）在主要器官中的变化特点及意义，初步探讨了信号通路抑制剂对TLR2及炎症介质表达的影响。68只大鼠随机分为正常对照组（n=6)，烫伤对照组（n=6),烫伤后金葡菌感染组（n=36),AG126拮抗组（n=10)和二硫氨基甲酸酞吡咯烷（PDTC）拮抗组（n=10)，检测动物肝、肾、肺组织中TLR2和TNF－α基因表达的变化。结果显示，汤伤合并金葡菌攻击后，动物肝，肾、肺组织中TLR2mRNA表达均迅速增高，分别于0．5－2h达峰值（P＜0．05－0．01），此后有所降低；PDTC干预可在一定程度上下调肾脏TLR2mRNA表达（P＜0．05），伤后0．5h和2h,AG126拮抗组动物肾脏和肝脏TLR2mRNA表达也明显受抑（P＜0．05），烫伤合并金葡菌感染后2h大鼠肝、肺、肾组织TNF－α基因表达显著升高（P＜0．05），PDTC和AG126则对此有抑制作用（P＜0．05），提示烫伤后金葡菌感染可促进体内TLR2基因表达，后者作为细菌致病因子跨膜信号转导的重要受体在烫伤脓毒症的发生，发展中可能具有一定作用。     

Bcl—2、Bax在肾癌中的表达

目的 检测Bcl-2、Bax基因在肾癌中的表达。方法 采用免疫组化法。结果 肾癌Bcl-2比正常肾组织阳性表达率高,Bax比正常肾组织低（P＜0．05）;Bcl-2、Bax表达在肾癌的细胞学分类、病理分级、临床分期无显著性差异（P＞0．05）;肾癌Bcl-2表达与Bax负相关（P＜0．05,γ＝－0．312）;单因素生存分析Bcl-2、Bax表达及肾癌的各细胞学分类生存率无差异（P＞0．05）,肾癌病理分级G1＋G2组比G3＋G4组生存率高（P＜0．05）,临床分期S1＋S2组比S3＋S4组高（P＜0．05）,Cox回归多因素生存只发现肾癌病理分级能单独作为反映肾癌预后因素的指标（P＜0．05）。结论 Bcl-2、Bax在肾癌的发生中并不能单独起主导作用,不能独立作为反映肾癌预后的指标,可能只是参与肾癌发生多种因素之一。     

基质金属蛋白酶-9在腰椎间盘髓核组织中的表达

目的 检测腰椎间盘髓核组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达，进一步阐明椎间盘退变的机制。方法 利用RT-PCR和Western-Blot技术，对20例正常腰椎间盘髓核、45例退变腰椎间盘髓核的MMP-9进行了检测。结果 正常腰椎间盘组髓核内有一定量的MMP-9表达，退变腰椎间盘组髓核MMP-9mRNA、蛋白质表达水平升高，分别是正常组的1．86和1．65倍，存在差异（P〈0．05）。结论 MMP-9与腰椎间盘髓核退变关系密切。     

uPA和MMP-9在胃癌组织中的表达及意义

目的研究胃癌组织中尿激酶型纤维蛋白溶解酶原激活剂（uPA）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达及与临床病理特征的关系,以及二者的关系。方法运用免疫组化SP法检测56例胃癌组织和56例正常胃黏膜组织中uPA和MMP-9的表达。结果胃癌组织中uPA和MMP-9的表达率分别为76．79％和80136％,高于正常黏膜中uPA和MMP-9的表达率（分别为46．43％和48．21％）,差异有统计学意义（P〈0．05）;uPA表达与MMP-9表达呈正相关（P〈0．05）。低分化癌中uPA及MMP-9的表达强于高分化癌,差异有统计学意义（P〈O．05）;有淋巴结转移组中uPA和MMP-9的表达强于无淋巴结转移组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论uPA和MMP-9的表达与胃癌的浸润及转移密切相关,uPA和MMP-9的表达具有协同性。二者的联合检测可作为判断胃癌发展及预后的分子指标。     

绞股蓝总皂甙对小鼠四氯化碳肝损伤肝组织一氧化氮和谷胱甘肽的影响

目的观察绞股蓝总皂甙（Gypenosides,GPs）对肝损伤小鼠肝组织一氧化氮（NO）和谷胱甘肽（Glu-tathione,GSH）含量的影响。方法给四氯化碳（CCl4）诱导的三组慢性肝损害小鼠灌喂不同剂量的GPs（0、75、150mg／kg）,观察和比较各组小鼠肝功能（血清ALT活性和白蛋白含量）的变化,并测定肝组织NO和GSH的含量。结果肝损伤对照组（即0mg／kgGPs组）NO（80．0±19．0μg／g湿肝）明显高于正常对照组（43．1±18．9μg／g湿肝）（P＜0．05）;GSH（0．48±0.25mg／g湿肝）较正常对照组（0．79±0.19mg／g湿肝）明显降低（P＜0．05）。用GPs75mg／kg和150mg／kg灌胃治疗肝损伤小鼠3周,均能降低肝组织NO含量和增加GSH含量,其中75mg／kg组肝组织NO为68．4±23．7μg湿肝,GSH为0．54±0.34μg／g湿肝;150mg／kg组肝组织NO为52．3±12.7μg／g湿肝,GSH为0．62±0.30mg／g湿肝。150mg／kg组与肝损伤对照组比较,肝组织NO和GSH均有显著性差异（P＜0．05）。同时,小鼠血清白蛋白含量及A／G比值均较肝损伤对照组升高,ALT活性降性,并与GPs剂量的增加相关。结论GPs在保护小鼠CCl4肝损伤的同时能降低肝组织NO含量和升高肝组织GSH水平。     

右美托咪啶对肾脏缺血再灌注损伤大鼠肾组织血红素氧合酶-1表达的影响

目的评价右美托咪啶对肾脏缺血再灌注损伤大鼠肾组织血红素氧合酶-1表达的影响。方法健康Wistar大鼠36只,雌雄不限,体重300～350g,随机分为3组：假手术组（S组）、肾脏缺血再灌注组（IR组）和右美托咪啶组（D组）,各12只。采用动脉压夹夹闭双侧肾动脉60min、恢复灌注4h建立大鼠肾脏缺血再灌注模型。D组于夹闭双侧肾动脉前10rain尾静脉注射右美托咪啶3μg／kg：IR组于夹闭双侧肾动脉前10rain尾静脉注射等容量生理盐水;S组不夹闭双侧肾动脉,分离肾动脉后尾静脉注射等容量生理盐水。术后再灌注4h时处死大鼠取肾组织,采用PCR技术检测血红素氧合酶-1mRNA的表达,Western blot法测定血红素氧合酶-1（HO-1）蛋白水平,光镜下观察肾组织病理学结果。结果与S组比较,IR组和D组肾组织血红素氧合酶-1mRNA和HO-1蛋白的表达上调（P〈0．05）;与IR组比较,D组肾组织血红素氧合酶-1mRNA和HO-1蛋白的表达上调（P〈0．05）,肾组织病理学损伤减轻。结论右美托咪啶减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤与其上调肾组织血红素氧合酶-1的表达有关。     

MMPs/TIMPs系统在小鼠急性放射性肺损伤中的表达

目的 通过检测基质金属蛋白酶（MMPs）和基质金属蛋白酶组织抑制物（TIMPs）在单次大剂量胸部照射小鼠肺组织中的表达,探讨全肺照射诱导的MMPs/TIMPs系统表达紊乱在放射性肺损伤发生与发展中的作用。方法 实验组小鼠在出生后8周时给予单次胸部照射12 Gy,对照组小鼠给予假照射。在照射后4和8周时处死小鼠,收集肺组织标本,测定肺组织中MMP-2、MMP-9、MMP-3、MMP-13、TIMP-1、TIMP-2和TIMP-3蛋白的表达。结果 照射后4和8周时,实验组小鼠肺组织中MMP-2表达水平分别为对照组的1.7和1.9倍,MMP-9表达水平分别为对照组的2.7和2.6倍,而MMP-3、MMP-13、TIMP-1、TIMP-2、和TIMP-3的表达水平与对照组比较无显著改变。结论 辐射诱导小鼠肺组织中MMP-2和MMP-9的表达增加,可能加剧了急性放射性肺损伤。     

pEGFP-N1-UCH-L1重组质粒的构建

目的 构建pEGFP-N1-UCH-L1重组质粒,并进行鉴定。方法提取Wistar乳鼠大脑组织总RNA,逆转录合成cDNA,经PCR扩增UCH-L1基因,定向克隆至载体pEGFP-N1,构建重组质粒,经测序进行鉴定。结果 UCH-L1基因重组质粒经测序鉴定证明构建正确。结论成功构建了UCH-L1基因重组质粒,可用于神经细胞转染,进行后续研究。     

甲型H1N1流感肺炎的影像学表现

甲型H1N1流感是新发呼吸道传染病,肺炎是其主要并发症.本文介绍了甲型H1N1流感肺炎的病理、临床、影像检查策略、影像学表现和演变以及鉴别诊断.     

8-Br-cAMP对THP1细胞中ABCA1及单核细胞趋化因子的影响

 目的 以THP1细胞株为靶点,研究8-Br-cAMP对ABCA1、MCP-1基因mRNA和蛋白质表达及IL-1β蛋白质的影响,阐明ABCA1基因在AS及泡沫细胞形成中新的可能机制.方法 复苏培养THP1细胞株,加入8-Br-cAMP(0.5 mmol/L)刺激3、6、12、24 h,荧光定量RT-PCR和Western蛋白印迹法及ELISA法检测ABCA1、MCP-1及IL-1βmRNA和蛋白表达量;用ABCA1的反义寡核苷酸(100 nmol/L)转染THP1细胞,给予上述8-Br-cAMP的刺激,同样的方法观察上述指标的改变.结果 予8-Br-cAMP刺激后,THP1细胞中ABCA1、MCP-1的mRNA和蛋白质水平及IL-1β蛋白质水平均增高;给予反义寡核苷酸转染后,8-Br-cAMP刺激后3、6 h ABCA1、MCP-1mRNA的表达降低,12、24 h ABCA1、MCP-1及IL-1β蛋白质的表达水平降低.结论 在8-Br-cAMP刺激下,THP1细胞中ABCA1可增加炎症因子表达,参与AS的发生.     

Theory of 1/T1 and 1/T2 NMRD profiles of solutions of magnetic nanoparticles

Organically coated iron oxide crystallites with diameters of 5–50 nm (“nanoparticles”) are potential magnetic resonance imaging contrast agents. 1/T₁ and 1/T₂ of solvent water protons are increased dramatically by magnetic interactions in the “outer sphere” environment of the nanoparticles; subsequent diffusive mixing distributes this relaxation throughout the solvent. Published theory, valid for the solute magnetic energy small compared with thermal energy, is applicable to small magnetic solutes (e.g., gadolinium and manganese diethylenetriaminopentaacetic acid, and nitroxide free radicals) at generally accessible fields (≤ 50 T). It fails for nanoparticles at fields above ?0.05 T, i.e., at most imaging fields. The authors have reformulated outer sphere relaxation theory to incorporate progressive magnetic saturation of solute nanoparticles and, in addition, indicate how to use empirical magnetization data for realistic particles when their magnetic properties are not ideal. It is important to handle the effects of rapid thermally induced reorientation of the magnetization of the nanoparticles (their “superparamagnetism”) effectively, including their sensitivity to particle size. The theoretical results are presented as the magnetic field dependence (NMRD profiles) of 1/T₁ and 1/T₂, normalized to Fe content, for three sizes of particles, and then compared with the limited data extant for well-characterized material.     

运动性低血色素形成中大鼠十二指肠铁吸收蛋白HCP1、DMT1及FPN1表达的动态变化

目的:研究运动性低血色素形成中大鼠十二指肠铁转运蛋白血红素转运蛋白1(heme carrier protein 1,HCP1)、二价金属离子转运体1(divalent metal transporter1,DMT1)及膜铁转运蛋白1(ferroportin1,FPN1)表达的动态变化,探讨运动性低血色素的发生机制。方法:36只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和运动组。运动组大鼠进行为期5周、6 d/周、坡度为0、速度30 m/min的递增负荷跑台训练。前2周每天训练1次,时间从1 min开始,每次递增2 min。从第3周开始,每天训练2次。分别于运动第3、4、5周末取材,采用血细胞自动分析仪测定血红蛋白(Hb)含量;Western Blot检测十二指肠上皮细胞HCP1、DMT1及FPN1表达。结果:(1)长时间大强度运动后大鼠Hb含量逐渐降低。运动组3周末Hb与其对照组相比有下降趋势,4周和5周末显著低于其对照组(P<0.05,P<0.01)。(2)运动组大鼠3周末小肠上皮细胞HCP1、DMT1及FPN1表达均显著高于其对照组(P<0.01),4周末与其对照组相比均无显著差异(P>0.05),5周末均显著低于对照组(P<0.01)。结论:大强度运动开始阶段,机体通过增加肠铁吸收维持运动机体对铁的需求,随运动时间延长,机体肠铁吸收能力降低,这是引发运动性低血色素的重要原因之一。     

甲型H1N1流感合并肺炎的影像表现

目的 探讨甲型H1N1流感合并肺炎的影像表现.方法 分析确诊的甲型H1N1流感合并肺炎患者51例,均摄床旁X线胸片,44例同期行胸部CT检查.按肺内病变程度将所有患者分为轻度、中度、重度3型.结果 轻度患者4例,表现为肺内局限片状阴影;中度33例,肺内片状阴影超过2个肺野,其中双侧病变30例,单侧病变3例;重度14例,肺内广泛分布片状及磨玻璃密度阴影,可以合并间质改变,其中2例合并感染,成人呼吸窘迫综合征(ARDS)6例,并发皮下气肿1例.结论 甲型H1N1流感合并肺炎以片状影及磨玻璃密度阴影为主,可见间质病变,合并感染后影像表现多样,部分患者可进展为ARDS.     

Biodistribution and human dosimetry of enantiomer-1 of the synthetic leucine analog anti-1-amino-2-fluorocyclopentyl-1-carboxylic acid

Introduction

The enantiomerically enriched (ee=90%, enantiomer 1) synthetic amino acid (R,S)-anti-1-amino-2-fluorocyclopentyl-1-carboxylic acid (anti-2-[¹⁸F]FACPC-1) accumulates in malignant cells by elevated transport through the sodium-independent system-l (leucine preferring) amino acid transporter. The purpose of this study was to evaluate in vivo uptake and single-dose toxicity of anti-2-[¹⁸F]FACPC-1 in animals as well as the individual organ and whole-body dose in humans.

Methods

A DU145 xenograft rodent model was used to measure anti-2-[¹⁸F]FACPC-1 uptake at 15, 30 and 60 min post-injection. Animals were sacrificed and organs harvested to measure the percent injected activity per organ and to calculate residence time. Anti-2-[¹⁸F]FACPC-1 toxicity was assessed using a single microdose (37–74 MBq/kg) in nonhuman primates. Their vital signs were monitored for 2 h post-injection for drug-related effects. Human biodistribution studies were collected by sequential whole-body PET/CT scans on six healthy volunteers (three male and three female) for 120 min following a single 247±61 MBq bolus injection of anti-2-[¹⁸F]FACPC-1. Estimates of radiation dose from anti-2-[¹⁸F]FACPC-1 to the human body were calculated using recommendations of the MIRD committee and MIRDOSE 3.0 software.

Results

High anti-2-[¹⁸F]FACPC-1 residence time was observed in the pancreas of the rodent model compared to the human data. No abnormal treatment-related observations were made in the nonhuman primate toxicity studies. Human venous blood showed no metabolites of anti-2-[¹⁸F]FACPC-1 in the first 60 min post-injection. All volunteers showed initially high uptake in the kidneys followed by a rapid washout phase. The estimated effective dose equivalent was 0.0196 mSv/MBq.

Conclusion

Anti-2-[¹⁸F]FACPC-1 showed low background uptake in the brain, thoracic and abdominal cavities of humans, suggesting a possible use for detecting malignant tissues in these regions.