生精细胞凋亡与电离辐射

哺乳动物睾丸精子发生过程中具有自发的生殖细胞死亡现象,这种死亡主要是通过细胞凋亡机制实现的。深入了解睾丸生精细胞凋亡规律,性激素和理化因素对其影响,以及与电离辐射的关系,对揭示生殖细胞凋亡的本质具有重要的生物学和遗传学意义。     

恐惧应激对大鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响

目的观察恐惧应激对大鼠睾丸组织中生殖细胞凋亡的影响。方法36只SD大鼠随机分为急性应激组、亚急性应激组、慢性应激组和对照组,建立大鼠恐惧应激模型,在观察不同时间后取材,RT-PCR法检测睾丸组织中caspase-3、bax和bcl-2 mRNA的表达并比较bax/bcl-2的比值,TUNEL法检测睾丸内精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞和精子细胞的凋亡情况。结果caspase-3mRNA的表达水平,急性应激组与其对照组比较无显著差异(3.85±0.84vs3.30±0.74,P>0.05),而亚急性应激组与其对照组比较(5.34±1.13vs3.67±0.34)、慢性应激组与其对照组比较(5.88±0.31vs4.08±0.60)均显著增高(P<0.05)。bax/bcl-2比值,急性应激组与其对照组比较无显著差异(1.61±1.01vs1.15±0.29,P>0.05),而亚急性应激组与其对照组比较(2.68±0.86vs1.60±0.42,P<0.05)、慢性应激组与其对照组比较(3.88±0.60vs2.99±0.76)均显著增高(P<0.001)。急性应激组生殖细胞凋亡指数与对照组比较无显著差异(3.75±0.50vs1.50±0.58,P>0.05),而亚急性应激组(10.50±1.29)和慢性应激组(21.50±1.73)与对照组相比较均显著增高(P<0.001)。结论长期恐惧应激可导致大鼠睾丸生精细胞发生凋亡,caspase-3、bax和bcl-2等参与了其凋亡过程。     

解脲支原体感染的精液中IL-6与生殖细胞凋亡的关系

目的:探讨解脲支原体(Mu)感染的精液中白细胞介素-6(IL-6)与生殖细胞凋亡的关系。方法:采用PCR检测精液中Mu。ELISA法检测IL-6,用瑞-姬染色和TUNEL检测凋亡的生殖细胞。结果:Mu感染组凋亡的生殖细胞体积缩小、核固缩、染色质密度增加,聚集在核膜周边呈半月形,进而形成凋亡小体,胞质有空泡。凋亡率为(16.5±4.6)%,明显高于正常对照组(4.8±1.8)%(P<0.01)。IL-6水平与生殖细胞凋亡率呈显著正相关(r=0.98)。结论:Mu感染能刺激睾丸生殖细胞产生IL-6而启动生殖细胞的凋亡,这对Mu感染引起男性不育的机制提供了客观的依据。     

存活素与辐射诱导的凋亡

存活素(survivin)是一种新发现的细胞内蛋白，属于抗细胞凋亡蛋白家族，在胚胎和各类肿瘤中均表达，但在除胸腺和睾丸以外的成人组织中未被发现。阐明存活素在细胞凋亡和增生中的分子机制及其作用，在抗癌治疗和抑制对机体有害的细胞凋亡方面具有重要意义。     

低剂量X射线照射选择性诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡的适应性反应

目的 研究低剂量X射线照射诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡的适应性反应。方法 昆明雄性小鼠接受诱导剂量(D1，75mGy)和攻击剂量(D2，1．0，2．0和3．0Gy)全身照射。通过不连续泛影葡胺密度梯度离心法分离小鼠睾丸组织不同种类生精细胞，流式细胞术(FCM)检测各类生精细胞凋亡。结果 当D2照射前6h给予D1预照射时明显减轻D2对睾丸精原细胞和精母细胞凋亡的损伤作用，而对精子细胞和精子影响不明显。当D1和D2间隔3，6，12和24h，发现D2剂量较小(1．0和2．0Gy)时，精原细胞和精母细胞的凋亡百分率减少出现较早、较明显，而且持续时间较长；反之，D2剂量较大(3．0Gy)时，精原细胞和精母细胞凋亡百分率变化不明显。结论 低剂量X射线照射可以选择性诱导小鼠睾丸精原细胞和精母细胞凋亡的适应性反应，并与D1和D2间隔时间及D2剂量有关。     

镉对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

 目的 探讨镉对睾丸结构和功能损害作用的分子机制,研究镉对生精细胞凋亡的影响.方法 选用2月龄Wistar雄性大鼠16只,均分为染镉组和对照组,分别自腹腔注射氯化镉(2 mg/kg)和等量生理盐水,7 d后采用原位缺口平移技术检测睾丸生精细胞凋亡数目的变化.结果 与对照组相比,染镉组大鼠睾丸生精细胞凋亡数目明显增多(P<0.01).结论 染镉后大鼠睾丸生精细胞凋亡明显增加,这种变化可能是镉影响睾丸结构和功能的分子机制之一.     

存活素与辐射诱导的凋亡

存活素(survivin)是一种新发现的细胞内蛋白,属于抗细胞凋亡蛋白家族,在胚胎和各类肿瘤中均表达,但在除胸腺和睾丸以外的成人组织中未被发现。阐明存活素在细胞凋亡和增生中的分子机制及其作用,在抗癌治疗和抑制对机体有害的细胞凋亡方面具有重要意义。     

低剂量辐射诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡的适应性反应

目的：研究低剂量辐射诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡的适应性反应。方法：应用原位末端标记（TUNEL）和常规HE染色法分别结合光镜定量地观察75mGyX射线照射诱导小鼠睾丸生精细胞在生精周期中凋亡的适应性反应。结果：当1．0、2．0或3．0Gy（攻击剂量，D2）X射线照射前6h给予75mGy（诱导剂量，D1）预照射时明显减轻D2对睾丸精原细胞和精母细胞的凋亡损伤作用，而对精子细胞影响不明显，当1．0、1．5、2．0、2．5、3．0Gy（D2）X射线照射前3、6、12、24h给予75mGy（D1）预照射时，发现当D2剂量较小（1．0、1．5、2．0Gy）时，精原细胞和精母细胞的凋亡百分率减少出现较早，较明显，而且持续时间较长；反之，当D2剂量较大（2．5和3．0Gy）时，精原细胞和精母细胞的凋亡百分率减少只有照后6h）出现，而且不显著。结论：低剂量电离辐射可以诱导精原细胞和精母细胞凋亡的适应性反应，并与D1和D2间隔时间及D2剂量有关。     

缺锌对大鼠睾丸细胞凋亡影响机制的研究

 目的 探讨缺锌对睾丸细胞凋亡影响的可能机制,研究其对睾丸一氧化氮合酶(NOS)活性和血清睾丸酮水平的影响.方法 选用2月龄Wistar雄性大鼠16只,均分为实验组和对照组,实验组和对照组分别喂养缺锌和常锌饲料,喂养4周后,采用原子吸收分光光度法测定血清锌含量;采用放射免疫分析法测定血清睾丸酮含量;采用NADPH-d组织化学显示睾丸细胞NOS活性;采用原位缺口平移法计数睾丸细胞凋亡数目的 变化.结果 缺锌大鼠血清锌较对照组明显降低(P<0.05);血清睾丸酮较对照组明显降低(P<0.01);睾丸间质细胞NOS阳性细胞数目(378.44±51.78No./10个曲细精管)较对照组(192.57±26.30No./10个曲细精管)明显增多(P<0.01),NOS活性反应强度明显增高;睾丸曲细精管生精细胞凋亡的数目(21.41±3.82 No./10个曲细精管)较对照组(6.94±12.44 No./10个曲细精管)明显增多.结论 锌是睾丸发育必需的营养素,缺锌可诱导睾丸生精细胞凋亡;缺锌大鼠睾丸酮水平降低,睾丸细胞NOS活性明显增强,这种变化可能是缺锌诱导睾丸细胞凋亡的重要机制.     

睾丸生殖细胞肿瘤42例的临床特征分析

目的　探讨睾丸生殖细胞肿瘤的临床特征。方法　回顾性分析收治的 42例睾丸生殖细胞肿瘤患者的临床资料。患者均行根治性睾丸切除术。转移可疑及非精原细胞瘤病人加行腹膜后淋巴结清除术。术后辅以化疗或放疗。结果　 3 9例获随访的患者中位随访时间为 9.4年。I期和II～III期患者无瘤生存率分别为 91.7%( 2 2 / 2 4)和 60 .0 %( 9/ 15 ) ;总生存率为 79.5 %( 3 1/ 3 9)。结论　早期睾丸生殖细胞肿瘤行根治性切除术后辅以适当化疗或放疗 ,预后良好 ;隐睾是睾丸肿瘤的高危因子 ,且成年后行睾丸固定术 ,对日后癌变保护作用有限 ;患侧睾丸肿瘤切除后 ,对侧睾丸也应加强监测和随访     

浓缩铀诱发PC12细胞的凋亡

细胞凋亡是一种正常生理条件下的程序性死亡和外来因素的细胞自杀过程 ,是细胞针对所处环境因素的特定改变所产生的应答 ,与细胞生长一样 ,在机体中承担着重要调节作用[1 ] 。大剂量照射产生细胞坏死 ,但是发生细胞凋亡的剂量远远低于细胞快速死亡所需的剂量。研究辐射诱发细胞凋亡的量效、时相关系以及阐明细胞凋亡和有关的影响因素具有极为重要临床应用意义[2 ] 。随着α辐射体在核燃料和工业、医疗等方面的应用[3] ,由放射性核素所产生的内照射危害已成为一个具有现实意义的重要课题。笔者研究了浓缩铀诱发神经元样细胞凋亡的时相关系。…     

睾丸生殖细胞肿瘤的MRI诊断

目的：探讨睾丸生殖细胞肿瘤的 MRI 表现,提高对该疾病的 MRI 诊断水平。方法回顾性分析经手术病理证实的25例睾丸生殖细胞肿瘤患者临床及 MRI 资料,所有病例均行 MRI 平扫,其中16例行动态 MRI 增强扫描。利用 MRI 对睾丸肿瘤的大小、形态、信号特点、毗邻关系、强化方式及肿瘤血管情况进行评估,并与病理对照。结果25例睾丸生殖细胞肿瘤中,精原细胞瘤10例,其中 T2 WI 呈均匀低信号8例,稍低信号2例,增强扫描轻度结节样强化5例,明显均匀强化2例,其中4例可见纤维间隔强化;卵黄囊瘤4例,T1 WI 呈等低信号,T2 WI 呈稍高信号,增强扫描后肿瘤呈渐进式强化;成熟型畸胎瘤、表皮样囊肿、混合性生殖细胞肿瘤各3例,T1 WI 呈混杂低信号,T2 WI 呈混杂高信号;胚胎性癌2例,T1 WI 呈等低信号,T2 WI 呈混杂低信号,其内可见出血信号,增强扫描呈分隔强化。结论MRI 对睾丸生殖细胞肿瘤诊断正确率较高,对其病理分型、分期及鉴别诊断具有重要价值。     

细胞凋亡与病毒性肝炎

所谓凋亡，是指细胞衰亡过程中一种不同干坏死的形态学变化特征，就其功能方面的变化，一般被称为程序化细胞死亡。并且认为该过程为细胞在基因引导下，经一系列精确调控，并按程序进行的“自杀”行为。由于其独特的死亡方式及其潜在的生物学意义，近已引起广泛关注。巨细胞调亡现象的认识起犯与发展总体而言，对细胞凋亡现象的认识经历了从形态学、生物化学到基因或分子三个发展阶段。虽然早在60年代就有人提出细胞凋亡这一概念，但直到70年代Kerr才在鼠肛门脉结扎实验中首次发现，肝实质细胞增生性病变退缩过程中，具有明呈异于坏死细胞…     

放射性核素235U诱发Molt-4细胞和Ana-1细胞凋亡

对放射性核素２３５Ｕ内照射诱发Ｍｏｌｔ－４和Ａｎａ－１细胞的死亡形式进行研究。方法通过形态学、琼脂糖电泳、ＭＴＴ和ＪＡＭ实验对核素诱发的细胞死亡进行了定性及定量分析。结果放射性核素２３５Ｕ诱发的细胞死亡具有典型的细胞凋亡形态学特征，且细胞凋亡的程度及ＤＮＡ链断裂量与２３５Ｕ作用的时间和内照射的累积吸收剂量有关。结论放射性核素２３５Ｕ内照射可诱发细胞凋亡。     

隐睾的手术时机

隐睾是指睾丸未能按照正常发育过程从腰部腹膜后下降至阴囊。凡双侧隐睾在内分泌治疗失败及一侧隐睾、滑动睾丸与异位睾丸者均应手术。隐睾症患儿2周岁时睾丸的曲细精管内在超微结构上可看到线粒体退化、胞浆内核糖核酸消失和精原细胞及支持细胞内胶原纤维增多，生殖细胞内开始出现空泡，这类变化在其3岁时更为明显，并有大量     

腹腔注射环磷酰胺对小鼠精子凋亡的影响

目的观察腹腔注射环磷酰胺对小鼠精液常规和精子凋亡的影响。方法将20只雄性昆明小鼠随机分为对照组和实验组,按60 mg/kg体重给对照组小鼠腹腔注射NS,60 mg/kg体重给实验组小鼠腹腔注射环磷酰胺,每天1次,连续5 d,常规饲养观察34 d,然后对小鼠睾丸进行病理切片观察病理形态变化,对小鼠精子进行精液常规分析,对精子行FITC-AV/PI染色后用流式细胞仪检测精子凋亡率。结果实验组小鼠睾丸生精细胞、间质细胞和部分支持细胞明显变性,对照组与实验组精子密度分别为（5.20±1.34）×106/ml、（1.73±0.03）×106/ml,精子活力分别为（14.49±0.30）%、（6.64±1.88）%,精子成活率分别为（68.39±15.13）%、（39.96±4.89）%,精子凋亡率分别为8.38±0.45、14.84±1.22,两组比较有显著差异（P〈0.05）。结论腹腔注射环磷酰胺可使小鼠睾丸生精功能降低,精子凋亡增加,造成小鼠少弱精症。     

不同辐射体核素诱发生殖细胞各发育期突变效应比较研究

目的探讨了α辐射体^235U、β辐射体^147Pm和γ辐射体^134Cs诱发生殖细胞各发育期突变效应比较研究。方法观察在不同辐射体核素作用下，在睾丸的滞留方程、诱发生殖细胞各发育期的精原细胞和初级精母细胞染色体畸变以及精子畸形发生。比较3种辐射体核素在每cGy累积吸收剂量水平诱发的生殖细胞各发育期的突变效应值。结果拟合了α、β和γ3种核素在睾丸中的滞留分数方程，观察到^235U的半滞留期为197d；^147Pm为76d；^134Cs为5．1d。并给出了3种辐射体核素在每cGy累积吸收剂量水平诱发各发育期生殖细胞的突变效应比较值：精原细胞是α：β：γ=29：4：1；初级精母细胞为22：4：1；而对精子为α：β：γ=28：3：1。结论^235U，^147Pm和^134Cs均能诱发各发育期生殖细胞突变效应，但诱发各发育期生殖细胞的突变效应比较值^235U最为严重，^147Pm次之，^134Cs诱发的程度最轻。     

放射性核素147Pm诱发Molt-4细胞和Ana-1细胞凋亡

对放射性核素１４７Ｐｍ内照射诱发Ｍｏｌｔ－４细胞和Ａｎａ－１细胞的死亡形式进行研究。方法通过形态学变化、琼脂糖电泳、ＭＴＴ和ＪＡＭ实验对核素诱发的细胞死亡形式进行了定性及定量分析。结果表明放射性核素１４７Ｐｍ诱发的细胞死亡具有典型的细胞凋亡形态学特征，且细胞凋亡的程度及ＤＮＡ链断裂量与１４７Ｐｍ作用的时间和内照射的累积吸收剂量有关。结论放射性核素１４７Ｐｍ内照射可诱发细胞凋亡。     

白藜芦醇的辐射防护及其分子机理的研究

目的 研究白藜芦醇（RES）对受照射小鼠的辐射防护作用及其分子作用机理。方法 采用^60Coγ射线照射小鼠模型，观察小鼠30d存活和残废动物存活时间。用原位末端标记法观察受照射小鼠脾细胞凋亡，流式细胞仪检测脾细胞凋亡率和凋亡相关蛋白的表达水平，同时检测脾细胞内凋亡相关酶活性大小。结果 照射前给予RES能明显提高受照射小鼠的存活率，延长死亡动物存活时间。RES能明显抑制受照射小鼠脾细胞凋亡，提高Bcl-2表达水平，对于Fas表达无明显影响，同时脾细胞内的Caspase-3和Caspase-8活性明显升高。结论 RES具有明显的辐射防护途径，其作用机理与抑制加速器射敏感细胞的细胞凋亡有关。     

细胞凋亡的研究进展：回顾1998

细胞凋亡是当前生物医学热门课题之一，近年有相当令人兴奋的发展。现已明确，细胞凋亡的发生主要是胞内一系列凋亡蛋白酶激活的级联反应和细胞表面的死亡受体接受相应外部信号发生调节的结果。本文介绍了１９９８年国外有关细胞讯的研究的主要进展，包括凋亡蛋白酶的作用及其激活、Ｂｃｌ－２家族的作用、死亡受体及其信号转导和与细胞凋亡有关的射分子生物学研究概况。